Document related concepts
Transcript
XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico OBTENCIÓN DE PLANTAS TRANSFORMANTES DE Arabidopsis thaliana CON LA ATLEA-1-GUS Marjurith Jodany Quiñonez González 1. Asesor Gerardo Acosta García& 1 Universidad de Colima, [email protected]. [email protected] & Instituto Tecnológico de Celaya PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA El agua es un elemento indispensable para el crecimiento y desarrollo de una planta, pero en los últimos años, la falta de agua debido a la sequía ha adquirido una gran importancia, pues ocasiona daños irreversibles en las plantas. El estrés hídrico incluye dos tipos de estrés contrapuestos: por déficit o por exceso de agua en el suelo. Un término empleado comúnmente es sequía, el cual denota en muchos casos una interacción entre baja disponibilidad hídrica en el ambiente y una alta temperatura. Es por ello que se le ha prestado una especial atención a las proteínas LEA (Late Embryogenesis Abundant) ya que se ha reportado que están asociadas con la tolerancia al estrés abiótico; inicialmente se reportó su acumulación en las semillas, pero ahora ya han sido encontradas en otros tejidos, cuando la planta es sometida a un estrés. En nuestro grupo se identificó al gen AtLEA-2, involucrado en la tolerancia a estrés hídrico. Sin embargo, poco se sabe sobre donde se expresa, por lo que resulta de gran interés dilucidar su patrón de expresión. METODOLOGIA Se realizó extracción de ADN genómico por el método fenol-cloroformo, y se corrió en gel de agarosa 1.2%. Una vez realizada la extracción de ADN se realizó un análisis de PCR, para amplificar la región promotora y codificante del gen AtLEA2, posteriormente se ligó en el vector pDONRTM221 que acepta productos de PCR. Después se realizará una reacción de recombinación utilizando un vector aceptor el cual tiene el gen reportero GUS (AtLEA-2-GUS). Se transformarán células de E. coli con la construcción. Se realizará extracción de ADN plasmídico y se transformarán plantas de Arabidopsis thaliana por medio del método de infiltración floral usando Agrobacterium tumefaciens. CONCLUSIONES Se amplificó por medio de PCR la región intergénica 5’ y parte de la región codificante del gen AtLEA-2. El fragmento amplificado en el vector aceptor de productos de PCR. En el congreso se presentaran avances de la generación de plantas transformantes, AtLEA-2-GUS. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014
