Download REACCIÓN DE SELIWANOFF El reactivo de Selivafoff esta formado

REACCIÓN DE SELIWANOFF
El reactivo de Selivafoff esta formado por 0.05 g de resolcinol en 100 ml de ácido clorhídrico
diluido (1:29). Esta reacción es positiva con las cetosas y negativa con las aldosas si se siguen las
siguientes precauciones: 1) La aldosa no debe estar presente en un concentración superior al 2 %.
3) La concentración del HCl no debe exceder del 12 %. 3) La reacción no debe estar en ebullición
más de 20 a 30 segundos.
Técnica. A cada tubo agregar:
Tubo 1: 1 ml de reactivo de Seliwanoff, gotas de solución de sacarosa
Tubo 2: 1 ml de reactivo de Seliwanoff, gotas de solución de glucosa
Tubo 3: 1 ml de reactivo de Seliwanoff, gotas de solución de extracto de uva
Calentar con precaución los tres tubos en baño maría a ebullición (Tomar en cuenta precaución 3)
1. ¿Qué cambios observa en cada tubo de reacción?
2. ¿A que conclusión llega sobre los resultados?
Parte Experimental: Disacáridos
Considerando la estructura química de los disacáridos, explique cómo es de esperar que den las
siguientes reacciones para la maltosa, lactosa y sacarosa:
1) Reacción de Molish
2) Reacción de Fehling
3) Reacción de Trommer
4) Reaccion de Seliwanoff
Reacción de hidrólisis. Al ser lo disacáridos glúcosidos por excelencia, pueden ser hidrolizados,
descomponiéndose en los monosacáridos que los forman fijando una molécula de agua a nivel del
enlace o-glucosídico. La hidrólisis de los disacáridos se realiza fácilmente en medio ácido o
mediante hidrólisis enzimática.
Hidrólisis de la sacarosa: Inversión de la sacarosa
Procedimiento:
 Medir 2 a 5 ml de una solución de sacarosa al 2% y añadir 3 a 5 gotas de HCl
concentrado.
 Llevar a BM de agua hierviente por 20 a 30 min
 Neutralizar con NaOH al 40%, en presencia de papel de tornasol
 Sobre el hidrolizado practicar la reacción de Brown, Trommer.
1. ¿Qué cambios observa en el tubo de reacción?
2. Explique y compare los resultados obtenidos en la práctica de la clase anterior cuando se
trabajo con extracto de solución de remolacha, y solución de sacarosa sin hidrolizar.
LABORATORIO 2: Segunda parte
POLISACÁRIDOS
Los homopolisacáridos están formados por la unión de un gran número de unidades de
monosacáridos, se diferencian de los oligosacáridos por que poseen un número de monómeros
superior a 10. La unión entre monómeros es tambien O-glucosídica por perdida de una molécula
de agua. Responden a la formula general (C6H10O5)n.
Los homopolisacáridos que más abundantes en la naturaleza son el glucógeno, almidón y la
celulosa.
Parte Experimental: Polisacáridos
Reacción general de los almidones
1. Preparación de solución de almidón: Aproximadamente a 30 ml de agua hirviendo
añadir 0.5 g de almidón suspendido en agua fría, lentamente y agitando con una varilla de
vidrio, dejar hirviendo por 1 min aproximadamente. Se obtiene un líquido claro, que
cuando enfría adquiere una viscosidad acentuada.
Si se obtiene extracto de papa preparar una solución y practicar la siguiente prueba
2. Prueba del Iodo: Medir 0.1 ml de la solución de almidón preparado, agregar 2 ml de
agua destilada - Tubo 1
Medir 0.2 ml de la solución de extracto de papa, agregar 2 ml de agua destilada –Tubo 2
Agregar a ambos tubos 1 a 2 gotas de lugol (Solución de Iodo en IK, sol alcohólica)



¿Qué cambios observa en el tubo de reacción?
Calentar en BM hirviente con precaución (No demasiado para evitar la volatización del Iodo)
Enfriar ¿Qué observa y por que se produce dichos cambios? ¿Justifique porque?
Hidrólisis del almidón
Los enlaces O-glucosídicos del almidón; tanto de la amilosa como de la amilopectina, pueden ser
hidrolizados por hidrólisis ácida e hidrólisis enzimática.
Los productos de la hidrólisis del almidón son las dextrinas y maltosa, que son productos de su
hidrólisis parcial.
Hidrólisis enzimática. Las alfa-amilasas (ptialina-amilasa salival- y la amilasa pancreática)
rompen las moléculas de amilopectina o de la amilasa en unidades de menor peso molecular, las
que se denominan dextrinas.
Según el grado de hidrólisis se pueden identificar por la prueba del Iodo, las amilodextrinas, que
dan color azul con el Iodo; las etridextrinas, que color rojo o amarillo. Cuando la reacción al
yodo es negativa, se denominan acrodextrinas.
Procedimiento
La enzima que se utilizara para este ensayo será la ptialina o amilasa salival
1. Preparación Solución de amilasa salival. Tomar un volumen de 50 ml de agua a
temperatura de 40 a 50 ºC, tomar volúmenes de 10 a 15 ml y enjuagar la boca y verter el
producto a un frasco de boca ancha, repetir el procedimiento hasta agotar el agua,
obteniéndose así una solución de la enzima requerida.
2. En 1 tubo de ensayo medir 4 ml de solución de almidón (sustrato) y añadir 1 ml de solución
de alfa amilasa. Incubar a 37ºC.
3. Tomar muestras a diferentes tiempos y realizar la prueba del yodo: Primero a los 5 minutos,
10, 15, 20 minutos.
Observar y anotar los fenómenos que se producen durante el ensayo.
¿Qué sucede en cada una de las pruebas con yodo?
¿Que tipo de dextrina esta presente en cada tubo de reacción y porque
¿Por qué se observa una desaparición gradual del color inicial de la reacción- azul-?
Justificar.
Preguntas generales
1.
2.
3.
4.
5.
¿Que se entiende por Sacarosa invertida?
¿Cual es la enzima que hidroliza la sacarosa? Escriba las reacciones correspondientes
¿Cuál es la función del glucógeno?
¿Qué diferencias existe glucógeno, almidón y celulosa?
¿Qué es el almidón soluble? ¿Cómo se lo obtiene? (No confundir con la solución de
almidón)
6. ¿Explique, por qué la solución de almidón da un color azul con el lugol?
7. Si se practicara la reacción de Fehling en el hidrolizado de almidón, es de esperar que de
positiva la reacción? Explique por qué?.
8. ¿En que consiste la sacarificación del almidón?
9. Cuando se realiza la hidrólisis ácida del almidón, se llega a obtener glucosa como
producto, junto con la maltosa y dextrinas. Cuando se realiza la hidrólisis enzimática, se
llega hasta maltosa y dextrina. Explique por qué?
10. ¿Que tipo de azúcares son la maltosa y dextrinas y que aplicaciones industriales y
alimentarias tienen? Indicar 2 de cada una