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La reprogramación de la microspora por estrés in vitro y el inicio y progresión de la embriogénesis implica biosíntesis y acumulación de auxina, su acción y transporte H. Rodríguez-Sanz1, M.T. Solís1, M.F. López2, A. Gómez-Cadenas2, M.C. Risueño1, P.S. Testillano1 1 Grupo de Biotecnología del Polen de Plantas Cultivadas, Centro de Investigaciones Biológicas, CIB-CSIC, Ramiro de Maeztu 9, 28040 Madrid 2 Dep. CC Agrarias y del Medio Natural, Univ.Jaume I, Campus Riu Sec, Castellón. E-mail: [email protected] Es ampliamente conocido el papel de las auxinas en numerosos procesos de desarrollo incluyendo la formación del embrión, sin embargo no hay prácticamente información sobre su función y dinámica en la embriogénesis de microsporas in vitro. En este trabajo se han analizado los cambios en la concentración de auxina endógena y su acumulación celular, la expresión de TAA1 y NIT2 que codifican enzimas de dos vías biosintéticas de auxina, la expresión del transportador de auxina PIN1 y los efectos de la inhibición del transporte y la acción de auxina con N-1-naftilftalámico ácido (NPA) y α(p-clorofenoxi) ácido isobutírico (PCIB) respectivamente durante la embriogénesis de microsporas de Brassica napus, sistema in vitro que se desarrolla en un medio de cultivo sin auxina ni reguladores de crecimiento exógenos. Los resultados muestran el incremento y acumulación de auxina tras la reprogramación e inicio de embriogénesis, desde las primeras divisiones, así como su aumento con el desarrollo del embrión. Los patrones de expresión de los genes de biosíntesis de auxina TAA1 y NIT2 y del transportador PIN1 muestran un perfil similar, induciéndose desde las primeras etapas y aumentando progresivamente. La distribución de auxina en el embrión es uniforme en las primeras etapas, mientras que en los embriones corazón y torpedo se acumula en las regiones apical y basal. Los tratamientos con NPA y PCIB inhiben el desarrollo y reducen drásticamente la producción de embriones, indicando que el transporte polar y la acción de la auxina son necesarios para la formación de los embriones derivados de microsporas. Estos hallazgos indican que la biosíntesis y acumulación de auxina endógena, su acción y transporte polar son necesarios para la reprogramación de microsporas inducida por el estrés, el inicio y la progresión de la embriogénesis. Rodríguez-Sanz et al. 2015. Plant Cell Phys. Advance Access published April 22. DOI: 10.1093/pcp/pcv058. Financiado con proyectos BFU2011-23752 y AGL2014-52028-R (MINECO, FEDER).