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ACTIVIDAD ENZIMÁTICA: CATALASA Y PTIALINA
INTRODUCCIÓN
La catalasa es una enzima presente en todos los tejidos y que descompone el peróxido
de hidrógeno (H2O2 ) que es tóxico.
2 H2O2 2 H2O + O2
La ptialina es una enzima, presente en la saliva, que hidroliza el almidón
OBJETIVOS
1.- Observar la acción de la ptialina presente en la saliva y de la catalasa
2.- Observar la acción de los ácidos, las bases y la temperatura en la acción enzimática
PROCEDIMIENTOS
Ptialina (1ª parte)
1.- Extrae saliva en un vaso precipitados
2.- Numera cuatro tubos de ensayo y vierte aproxidamente 1ml de saliva en cada uno de
ellos, mantén los tubos a una temperatura entre 35 y 40ºC (baño termorregulado)
3.- En el tubo 2 añade 1 ml de ácido clorhídrico (20%)
4.- En el tubo 3 añade 1 ml de sosa (20%)
5.- Añade a los 4 tubos 3 ml de solución de almidón
6.- El tubo 4 manténlo en hielo o agua fría
7.- Coloca los tubos 1, 2 y 3 en la cámara de cultivo o estufa a 38ºC durante media hora.
Catalasa
1.- Corta en pequeños trozos, cuanto más pequeños mejor muestras de tejidos (hígado,
patata, etc ...). Coloca algunos fragmentos de cada muestra en diferentes tubos de
ensayo.
2.- En un tubo añade fragmentos de todas las muestras
3.- Añade agua hasta cubrir sobradamente la muestra en cada uno de los tubos.
4.- Calienta y mantén 5 minutos en ebullición el tubo que contiene todas las muestras.
5.- Añade a todos los tubos 2 ml de agua oxigenada (10 vol%)
6.- Anota en qué tubos se produce efervescencia
Ptialina (2ª parte)
1.- Distribuye la mitad del volumen de los tubos 1, 2, 3 y 4, en los tubos etiquetados
como 5, 6, 7 y 8
2.- Añade a los tubos 1, 2, 3 y 4 unas gotas de Lugol (presencia de almidón) y anota el
resultado en la tabla
3.- Realiza la prueba del Fehling (presencia de azúcares reductores) a las muestras que
contienen los tubos 5, 6, 7 y 8.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
Tubos 1 y 5
Tubos 2 y 6
Tubos 3 y 7
Tubos 4 y 8
Saliva+Almidón Saliva+Almidón Saliva+Almidón Saliva+Almidón
+ClH
+NaOH
- Tª ºC
Lugol
Fehling