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1) Un fragmento de ADN fue incubado por separado con una enzima de restricción 1 y 2 y luego con ambas. Se
lo sometió una electroforesis en gel de agarosa obteniéndose las siguientes bandas:
Enzima 1:
1 banda de 45 Kb y una banda de 15 Kb
Enzima 2:
1 banda de 43 Kb, 1 de 10 Kb y 1 7 Kb
Enzima1/ 2: 1 banda de 35 Kb, 1 de 10 Kb, 1 de 8 Kb y 1 de 7 Kb
a) EL siguiente esquema representa el mapa de restricción de un fragmento de ADN lineal: coloca el tamaño
de cada fragmento
2
b)
1
2
Cuál de los siguientes corridas electroforéticas representa este mapa. justifica
1
4
A
2
3
4
B
1
4
2
3
4
2) Ordenar la secuencia de hechos que se emplean en la tecnología del ADN recombinante
_____Transferencia del vector con el ADN de interés (vector recombinante) a una célula en donde se
replique, proceso llamado “transformación” de la célula huésped.
_____Generación de un fragmento o fragmentos de ADN que han de utilizarse o manipularse.
_____Selección de aquellas células que llevan las moléculas de ADN recombinante deseado, y su
replicación como clones.
______Empalme de los fragmentos de ADN formando una molécula compuesta, ADN recombinante,
que puede actuar como vector, o ser incorporado en un vector para su posterior transmisión.
b. Explica cómo se realiza un plásmido recombinante y porqué es importante que los plásmido lleven genes
de resistencia a antibióticos
3) Responde:
a) ¿Cómo es que la rápida reproducción bacteriana las hace ser una buena opción para clonar un gen ajeno?
b) ¿Qué es un plásmido? ¿Qué características debe reunir para funcionar como vector? Esquematizalo ¿A qué
se llama plásmido recombinante? ¿Cómo se logra?
c) Al hacer ADN recombinante, ¿Cuál es el beneficio de usar una enzima de restricción que corte el ADN
dejando extremos pegajosos?
d) Explica la siguientes frase “Los mapas de sitios de restricción para diferentes enzimas de restricción es una
característica exclusiva de cada ADN"
4)
Indica si las siguientes afirmaciones son verdaderas o falsas. Justifica tus respuestas.
a.
b.
c.
d.
Las enzimas de restricción son exonucleasas que cortan ADN y ARN
Las enzimas de restricción rompen la doble hélice del ADN en lugares específicos.
Los fragmentos de ADN pueden ser incorporados a plásmidos o virus que actúen como vectores.
Las enzimas de restricción ofrecen la posibilidad de segmentar el ADN en trozos y luego ordenarlos en
forma secuencial.
e. Escherichia coli es la única bacteria que produce enzimas de restricción.
f. Las bacterias producen enzimas de restricción para degradar el material genético extraño que entre en
la célula.
g. Todos los fragmentos de restricción generados con la misma enzima tienen el mismo tamaño