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Vector de clonación wikipedia , lookup

Plásmido wikipedia , lookup

ADN ligasa wikipedia , lookup

Southern blot wikipedia , lookup

Clonación de genes wikipedia , lookup

Transcript
Genética y Biotecnología
6 BTO Q
Ejercitación de Tecnología del ADN recombinante
1) La siguiente autorradiografía muestra los resultados de un análisis de huella de ADN, con una sonda
de locus único, aplicado a un varón, una mujer y sus cuatro hijos/as. ¿Cuál de los hijos/as es el
que con menor probabilidad desciende de esta pareja?
2) La figura muestra los resultados del análisis de huella de ADN, con una sonda de locus único, para un
varón y sus cuatro hijos/as. ¿Qué calle contiene el ADN del padre?
3) Esta figura muestra la parte significativa de la autorradiografía de un análisis, con sonda de locus
único, de varias muestras de ADN procedentes de la investigación de una violación. Las muestras de
ADN se cargaron en las calles del gel de este modo:
1.
2.
3.
4.
5.
Muestra de sangre de la víctima.
Muestra de sangre del acusado.
Marcadores de tamaño de ADN.
Fracción femenina de la muestra vaginal de la víctima.
Fracción masculina de la muestra vaginal de la víctima.
Si Ud. fuera el analista de ADN, debería sacar como conclusión:
a.
b.
c.
d.
e.
El sospechoso es culpable
EL sospechoso podría ser culpable, pero deben usarse mas sondas
La muestra vaginal procede de una víctima errónea.
El sospechoso queda excluido como origen del ADN presente en la prueba del delito.
Ninguna de estas
4) Un fragmento de ADN fue incubado por separado con una enzima de restricción 1 y 2 y luego con ambas.
Se lo sometió una electroforesis en gel de agarosa obteniéndose las siguientes bandas:
Enzima 1:
1 banda de 45 Kb y una banda de 15 Kb
Enzima 2:
1 banda de 43 Kb, 1 de 10 Kb y 1 7 Kb
Enzima1/ 2: 1 banda de 35 Kb, 1 de 10 Kb, 1 de 8 Kb y 1 de 7 Kb
a) EL siguiente esquema representa el mapa de restricción de un fragmento de ADN lineal: coloca el
tamaño de cada fragmento
1
2
b)
2
Cuál de los siguientes corridas electroforéticas representa este mapa. justifica
1
4
A
2
3
4
B
1
4
2
3
4
5) a. Ordenar la secuencia de hechos que se emplean en la tecnología del ADN recombinante
_____Transferencia del vector con el ADN de interés (vector recombinante) a una célula en donde se
replique, proceso llamado “transformación” de la célula huésped.
_____Generación de un fragmento o fragmentos de ADN que han de utilizarse o manipularse.
_____Selección de aquellas células que llevan las moléculas de ADN recombinante deseado, y su
replicación como clones.
______Empalme de los fragmentos de ADN formando una molécula compuesta, ADN recombinante,
que puede actuar como vector, o ser incorporado en un vector para su posterior transmisión.
b. Explica cómo se realiza un plásmido recombinante y porqué es importante que los plásmido lleven
genes de resistencia a antibióticos
6) Responde:
a) ¿Cómo es que la rápida reproducción bacteriana las hace ser una buena opción para clonar un gen ajeno?
b) ¿Qué es un plásmido? ¿Qué características debe reunir para funcionar como vector? Esquematizalo ¿A
qué se llama plásmido recombinante? ¿Cómo se logra?
c) Al hacer ADN recombinante, ¿Cuál es el beneficio de usar una enzima de restricción que corte el ADN
dejando extremos pegajosos?
d) Explica la siguientes frase “Los mapas de sitios de restricción para diferentes enzimas de restricción es una
característica exclusiva de cada ADN"