Download Descargar archivo adjunto file_download

Genética y Biotecnología
6 BTO Q
Ejercitación de Tecnología del ADN recombinante
1. Indica si las siguientes afirmaciones son verdaderas o falsas. Justifica tus respuestas.
1. Las enzimas de restricción son exonucleasas que cortan ADN y ARN
2. Las enzimas de restricción rompen la doble hélice del ADN en lugares específicos.
3. Los fragmentos de ADN pueden ser incorporados a plásmidos o virus que actúen como vectores.
4. Las enzimas de restricción ofrecen la posibilidad de segmentar el ADN en trozos y luego ordenarlos en
forma secuencial.
5. Escherichia coli es la única bacteria que produce enzimas de restricción.
6. Las bacterias producen enzimas de restricción para degradar el material genético extraño que entre en
la célula.
7.
Todos los fragmentos de restricción generados con la misma enzima tienen el mismo tamaño
2) Redactá un párrafo donde queden correctamente relacionado cada uno de los siguientes grupos de
términos
a) sonda-Southern-electroforesis-ADN
b) Biblioteca genómica-vector-bacterias-clones
c) PCR- ciclos-amplificación-in vitro-polimerasa
3. Responde
a) ¿Cómo es que la rápida reproducción bacteriana las hace ser una buena opción para clonar un gen ajeno?
b) ¿Qué es un plásmido? ¿Qué características debe reunir para funcionar como vector? Esquematizalo ¿A
qué se llama plásmido recombinante? ¿Cómo se logra?
c) Al hacer ADN recombinante, ¿Cuál es el beneficio de usar una enzima de restricción que corte el ADN
dejando extremos pegajosos?
d) Explica la siguientes frase “Los mapas de sitios de restricción para diferentes enzimas de restricción es una
característica exclusiva de cada ADN"
4. A. De la siguiente lista de materiales subraya las que se necesitan para realizar una PCR e indica la función
de cada componente:
Sonda
buffer
ligasa
dNTPs
Magnesio enzima de restricción
ADN molde
Taq polimerasa
bacterias
Primer forward
primer reverse
plásmido
termociclador
B. Observa detenidamente el siguiente esquema e identifica las moléculas y/o pasos indicados con las letras:
h
b
c
d
a
i
ee
f
g
a…………………………… b. ………………………………………..c…………………………………….
d…………………………………e…………………………………………..f………………………………
g………………………………………………..h………………………………………i………………………
Si la secuencia a amplificar es de 760 Kb, esquematiza un gel dónde se compruebe que la PCR salió como se
esperaba. (Indica en el, los polos positivos, negativos, marcadores de peso molecular, controles negativo y
positivo)
5. La siguiente autorradiografía muestra los resultados de un análisis de huella dactilar de ADN, con una
sonda de locus único, aplicado a un varón, una mujer y sus cuatro hijos/as. ¿Cuál de los hijos/as es el que con
menor probabilidad desciende de esta pareja?
6. La figura muestra los resultados del análisis de huella dactilar de ADN, con una sonda de locus único, para
un varón y sus cuatro hijos/as. ¿Qué calle contiene el ADN del padre?
7. Esta figura muestra la parte significativa de la autorradiografía de un análisis, con sonda de locus único, de
varias muestras de ADN procedentes de la investigación de una violación. Las muestras de ADN se cargaron
en las calles del gel de este modo:
1.
2.
3.
4.
5.
Muestra de sangre de la víctima.
Muestra de sangre del acusado.
Marcadores de tamaño de ADN.
Fracción femenina de la muestra vaginal de la víctima.
Fracción masculina de la muestra vaginal de la víctima.
Si Ud. fuera el analista de ADN, debería sacar como conclusión:
a.
b.
c.
d.
e.
El sospechoso es culpable
EL sospechoso podría ser culpable, pero deben usarse mas sondas
La muestra vaginal procede de una víctima errónea.
El sospechoso queda excluido como origen del ADN presente en la prueba del delito.
Ninguna de estas
8. Un fragmento de ADN fue incubado por separado con una enzima de restricción 1 y 2 y luego con ambas.
Se lo sometió una electroforesis en gel de agarosa obteniéndose las siguientes bandas:
Enzima 1:
1 banda de 45 Kb y una banda de 15 Kb
Enzima 2:
1 banda de 43 Kb, 1 de 10 Kb y 1 7 Kb
Enzima1/ 2: 1 banda de 35 Kb, 1 de 10 Kb, 1 de 8 Kb y 1 de 7 Kb
a) EL siguiente esquema representa el mapa de restricción de un fragmento de ADN lineal: coloca el
tamaño de cada fragmento
1
2
b)
2
Cuál de los siguientes corridas electroforéticas representa este mapa. justifica
1
4
A
2
3
4
B
1
4
2
3
4