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GLUCOSA - PAP Catálogo Presentación Método enzimáticoGOD-PAP 112060 / 112070 1 x 1000 mL / 4 x 100 mL Cálculo: Método Muestra La Glucosa de la muestra es oxidada por la enzima glucosa oxidasa (GOD) a ácido glucónico y peróxido de hidrógeno, el cual, en presencia de peroxidasa (POD) reacciona con fenol y 4 aminofenazona para formar un complejo de quinoneimina. La intensidad del color formado, es proporcional a la concentración de glucosa en la muestra. Suero, Plasma (EDTA, citrato, heparina u oxalato). Los glóbulos rojos deben ser separados en un período máximo de 20-30 minutos. Estabilidad: 8 horas a temperatura ambiente, 24 horas refrigerada. Principio de la reacción Linealidad Metodología de análisis El test es lineal hasta concentraciones de 400 mg/dl. Si la concentración de glucosa es superior, diluír la muestra con suero fisiológico. Repetir el ensayo y multiplicar por el factor de dilución. LECTURA PASO ÓPTICO TEMPERATURA MEDICIÓN Valores de Referencia GOD Glucosa + O2 + H2O ⎯→ Ac. Glucónico + H2O2 POD H2O2 + 4 -AF + Fenol ⎯⎯→ Quin.+ 4 H2O 500 - (Hg 546) nm 1 cm 25 o 37 ºC Contra blanco reactivo Composición de los reactivos 1.- Reactivo Tampón / Enzima líquido : Tampón Fosfato (pH 7,5) Glucosa oxidasa >15 Peroxidasa > 1,5 Mutarotasa > 2,0 4-aminofenazona 0,25 Fenol 0,75 Estabilizadores 2.- Estándar de Glucosa 100 Las cubetas y el reactivo deben llevarse a temperatura ambiente antes de comenzar el test. KU/L KU/L KU/L mmol/l mmol/l mg/dl A (muestra) Glucosa = 100 x ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ (mg/dl) A (estándar) Pipetear Muestra / estándar Reactivo 1 Blanco Muestra / reactivo estándar ---- 10 µl 1000 µl 1000 µl Suero / Plasma: 75 - 116 mg/dl Se recomienda que cada laboratorio establezca sus límites de referencia. Nota • • Muestras ictéricas o lipémicas pueden requerir un blanco de corrección, usando el mismo volumen de muestra con 1 ml de suero fisiológico, en vez de reactivo enzimático. Este test no es influenciado por ácido úrico,ác. ascórbico, glutatión, anticoagulantes, creatinina en concentraciones fisiológicas Preparación de los reactivos Mezclar e incubar por 15 minutos a 25 ºC o 10 Los Reactivos 1 y 2 están listos para su uso y son estables hasta la fecha de expiración del kit, almacenado en refrigeración. Estabilidad: El Reactivo 1 es estable hasta 4 semanas almacenado a 18-22 ºC. minutos a 37 ºC y medir la absorbancia de la Literatura muestra y el estándar contra blanco reactivo. • • Barmham, D. y Trinder, P.,:Analyst 97 (1972) 142-145. Teuscher,A y Richterich, P.,:Schweitz med. Wschr. 101 (1971), 345 y 390. Inmunodiagnóstico
