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ACIDO URICO
abc
Método Enzimático Colorimétrico
MANUAL
PARA SU USO
Para el análisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en
suero y plasma. Este producto es adecuado para su uso
Manual.
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca.
Ejecutar las precauciones normales requeridas para el
manejo de reactivos de laboratorio.
No. Cat.
La solución 1 contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión
o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En
caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con
abundante agua. En caso de contacto con los ojos o
ingestión, buscar atención médica inmediatamente.
UA 230
6 x 15 ml
UA 233
10 x 50 ml
UA 232
5 x 100 ml
1. Tampón
2. Reactivo Enzima
Patrón
1. Tampón
2. Reactivo Enzima
Patrón
1. Tampón
2. Reactivo Enzima
Patrón
1 x100 ml
6 x 15 ml
1 x 5 ml
10 x 50 ml
10 x 50 ml
1 x 5 ml
5 x100 ml
5 x100 ml
1 x 5 ml
METODO COLORIMETRICO(1)
El ácido úrico se convierte, catalizado por la uricasa, en
alantoina y peróxido de hidrógeno. El peróxido de
hidrógeno formado, catalizado por la peroxidasa, oxida el
ácido 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico y la
4-aminofenazona para dar un compuesto de
quinoneimina rojo-violeta.
El Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las
cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos.
Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con
grandes volúmenes de agua para evitar la formación de
ácidos. Las superficies metálicas expuestas, deberán
limpiarse con hidróxido de sodio al 10%.
Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se
desean.
Los reactivos deben ser utilizados sólo para los
propósitos indicados por personal adecuado
cualificado de laboratorio bajo condiciones
apropiadas de laboratorio.
PRINCIPIO
uricasa
Ac. úrico + O2 + 2H2O ──> alantoina + CO2 + H2O2
2H2O2 + Ac. 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico
+ 4-Amino-fenazona
peroxidasa
───> N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-pbenzoquinoneimina
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado, o EDTA-Plasma y orina.
Diluir la orina 1+10 con agua destilada.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
Concentraciones en la prueba
1. Tampón
Tampón hepes
Acido 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico
2. Reactivo Enzima
4-aminofenazona
Peroxidasa
Uricasa
3. Patrón
50 mmol/l, pH 7,0
4 mmol/l
0,25 mmol/l
≥ 1000 U/l
≥ 200 U/l
595 Τmol/l (10 mg/dl)
ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
1. Tampón
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de
o
caducidad cuando se conserva entre +2 y +8 C.
2. Reactivo Enzima
UA 230
Reconstituir un frasco de Reactivo Enzima 2 con 15
ml de Tampón 1. Estable durante 21 días entre +2 y
o
o
+8 C ó 5 días entre +15 y +25 C, protegido de la luz.
UA 233, UA 232
Reconstituir el contenido de un frasco de Reactivo
Enzima 2 con un pequeño volumen de Tampón 1 y
transferir el contenido entero a la botella 1,
enjuagando varias veces el frasco 2. Estable durante
21 días entre +2 y +8oC ó 5 días entre +15 y +25oC,
protegido de la luz.
Patrón
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de
caducidad cuando se conserva entre +2 y +8oC.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Tampón
Reactivo Enzima
Patrón
MATERIALES NECESARIOS PERO NO
SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN
1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
MANUAL - ACIDO URICO - UA230
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PROCEDIMIENTO
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medida:
520 nm; Hg 546 nm
1 cm de espesor
20-25oC/37oC
frente a reactivo blanco
(sólo se requiere un
blanco de reactivo por serie)
Pipetear en tubos de ensayo:
Blanco de
Reactivo (Τl)
Muestra (Τl)
Patrón (Τl)
1000
20
1000
20
1000
Muestra
Patrón
Reactivo
Mezclar, incubar durante 15 min entre 20 y 25oC ó
5 min a 37oC. Medir la absorbancia de la muestra
(Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al blanco de reactivo
durante los siguientes 30 min.
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE ACIDO
URICO
Utilizando un patrón:
Suero o plasma
Amuestra
Concentr. de Acido úrico =
Concentr. de Acido úrico =
595 x
10 x
(Τmol/l)
Apatrón
Amuestra
(mg/dl)
Apatrón
INTERFERENCIA
Las concentraciones de Hemoglobina hasta 100 mg/dl y
de Bilirrubina hasta 20 mg/dl no afectan al análisis. Si no
se pueden llevar las mediciones a 520 nm o Hg 546 nm,
utilizar el patrón suministrado.
VALORES NORMALES
Suero2:
Hombre
Mujer
Orina3:
202 - 416
3,4 - 7,0
Τmol/l
mg/dl
142 - 339
2,4 - 5,7
Τmol/l
mg/dl
1,5 - 4,5
250 - 750
mmol/24 hrs.
mg/24 hrs.
Se recomienda que cada laboratorio establezca su
propio rango de referencia que refleje la edad, sexo,
dieta y localidad geográfica de la población.
LINEALIDAD
El método es lineal hasta 1189 Τmol/l ó 20 mg/dl.
Para concentraciones superiores diluir la muestra 1+1
con NaCl al 9% y repetir la prueba. Multiplicar el
resultado por 2.
REFERENCIAS
1. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem.
(1980) 26/2, 227-231 .
2. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98,
380.
3. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986)
24, 863.
Orina
Amuestra
Concentr. de Acido úrico =
Concentr. de Acido úrico =
6545 x
110 x
(Τmol/l)
Apatrón
Amuestra
(mg/dl)
Apatrón
Utilizando un factor:
Concentración de ácido úrico
(mg/dl)
(Τmol/l)
Longitud de
onda
Suero/
Plasma
Orina
Suero/
Plasma
Orina
520 nm
2026
22306
34,1
375
Hg 546 nm
3112
34202
52,3
575
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2
y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos
niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los
valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y
su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes
pasos:
1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara
2. Comprobar que todo material está limpio.
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reacción
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente
de los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44
28 94422413.
RANDOX Laboratories Ltd., Ardmore, Diamond Road, Crumlin, Co. Antrim, United Kingdom, BT29 4QY
Tel:CRUMLIN (028)94422413 Fax.No.INT.44 (028)94452912 UK (028)94452912
Email: [email protected] Website: www.randox.com
Revisado 12/02/04bf
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