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Virus que atacan la vid Sebastián Gómez Talquenca EEA Mendoza INTA Argentina Degeneración Infecciosa a 1968 Enrollamiento b 1995 GLRaVGLRaV-1, 1 GLRaVGLRaV-3, 3 ArMV ArMV, RpRSV 1955 a Vega g & Alcalde ( (1955) ) IDIA 85:3-21 b Nadal (1968) Virus de la vid c Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33 c ` 1999 PID FONCyT ` ` ` Esquema Esq ema de certificación sanitaria Programa de investigación como soporte 2004 PN INTA ` ` ` Identificación de especies presentes en el país Caracterización molecular Desarrollo de métodos de diagnóstico Degeneración infecciosa (1955) a ` Grapevine Fanleaf Virus (1966) ` ` a b c Arabis Mosaic Virus (1995) b Raspberry Ringspot Virus “g” strain (1995) c Vega g & Alcalde ( (1955) ) IDIA 85:3-21 Feldman (1966) RIA III(5):33-46 Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33 Enrollamiento (1968) ` ` ` ` ` ` ` ` a Grapevine Leafroll associated virus 1 (1995) GLRaV-2 (2003) b GLRaV-3 (1995) a GLRaV-5 (2008) c GLRaV-6 (2006) d GLRaV-9 (2011) e GLRaV-De (2011) e GVA (1995) a a Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33 b Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG p c Gómez Talquencaet al(2009) Virus Genes, d Gómez Talquenca et al (2006) XV Meeting ICVG e Gómez Talquenca (2012) Tesis Doctoral Ocurrencia de enfermedades virales ` Relevamientos ` ` ` ` Dirigidos Aleatorios Zonales Programa de certificación Country GLRaV-1 GLRaV-2 GLRaV-3 Reference Brasil 6.9% 0% 14.7% (Fajardo et al., 2002) Chil Chile 4 08% 4.08% 14 84% 14.84% 6 17% 6.17% (Fi (Fiore et al. l 2008) Croatia 24.3% N/D* 72.3% (Poljuha et al., 2004) Czech Republic 28.2% 0.9% 2.7% (Kominek, 2006) Egypt 1,8% 1,4% 55,9% (Ahmed et al., 2004) Italy 24.4% 6.9% 27% (Zorloni et al., 2004) Syria 47 3% 47.3% 9 0% 9.0% 23 9% 23.9% (Mslmanieh et al., al 2006) Tunez 9.1% 6.3% 76.3% (Mahfoudhi et al., 2008) Turkey 8.4% 2.4% 5.8% (Akbas et al., 2007) USA 2.6% 0.3% 6.3% (Martin et al., 2005) Ocurrencia en Argentina 1995 ELISA 2000/10 2003 2009/10 2011 Indexing RT-PCR ELISA ELISA 36% 63% 35% 97% NT 93% NT NT NT NT NT NT NT Zona Sur Zona Norte Infectado 23% 33% GFLV 19% 11% ArMV 15% 0% RpRSV 18% 0% GLRaV-1 28% 9% 0% 10% 0% 3% GLRaV-2 NT NT 0% 25% 1% 12% GLRaV 3 GLRaV-3 5% 14% 0% 38% 6% 88% GLRaV 4-9 NT NT NT ¿33%? NT 12% GVA 33% 4% 0% NT NT NT RSPaV NT NT 64% NT NT NT 36% Incompatibilidad de injerto ` a GLRaV-2 (2003) a Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG Nota ota a los os viveristas e stas vitícolas t co as O ONIVINS: S …. Se ha identificado en algunos clones la presencia de GLRaVo cual cua no o se ttraduce aduce e en e el viñedo edo francés a cés de ninguna gu a 2,, lo manifestación grave, a la excepción de la incompatibilidad de injerto sobre Kober 5BB……. ……Dado q que la Unión Europea p no tiene una p posición en p particular frente a este virus…. Se recomienda que los clones involucrados sean reservados para ventas en el territorio nacional….. ONIVINS, Le Progres Agricole et Viticole 119, nº8 º ` Clones involucrados ` Cabernet Franc 312, 326, 330, 331 Sauvignon Blanc 316, 317 Cinsaut 104, 255, 257, 321 Niellucio 902, 904 ` C. Sauvignon g 191, 336, 340, 341, 337 ` ` ` Ocurrencia en Argentina Clone GLRaV-11 GLRaV ELISA samples tested (no.) ELISA positive GLRaV-22 GLRaV RT-PCR Pos. Neg. ELISA positive GLRaV-33 GLRaV RT-PCR Pos. Neg. ELISA positive RT-PCR Pos. Neg. CS 337 – La L Consulta 180 - 0% - 2/2 2 1.1% 2/2 2/2 - 0% - 2/2 SB 317 - Agrelo 164 - 0% - 2/2 7 4.3% 3/3 2/2 1 0.6% 1/1 2/2 CF 326 – La Consulta 180 - 0% - 2/2 8 4 4% 4.4% 3/3 2/2 3 1 7% 1.7% 3/3 2/2 SB 316 – Agrelo 185 5 2.7% 3/3 2/2 24 13.0% 3/3 2/2 7 5.2% 3/3 2/2 CS 341 - Agrelo 175 - 0% - 2/2 45 25.7% 3/3 2/2 - 0% - 2/2 CS 337 33 - Barrancas 180 - 0% - 2/2 123 68 3% 68.3% 3/3 2/2 3 1 % 1.7% 3/3 2/2 CS BS – Luján de Cuyo 108 2 1.8% 2/2 2/2 11 10.2% 3/3 2/2 0 0% - 2/2 T l Total 1 172 1,172 7 0 6% 0.6% 220 18.77 % 14 1 2% 1.2% Decaimiento del Syrah Los virus son la respuesta a todo lo raro!!! ´ Distribution of Rupestris stem-pitting-associated virus variants in two Australian vineyards showing different symptoms. Habili et al (2006) ´ Workshop Syrah Decline Davis 2007 « Patológico (virus, viroides, fitoplasmas, hongos de madera), genético, ambiental, manejo… ´ Deep sequencing D i analysis l i off RNAs RNA from f a grapevine i showing h i Syrah S h decline d li symptoms reveals l a multiple l i l virus i infection that includes a novel virus. Al Rwahnih.et al (2009) ´ Congreso de Virus de Vid Dijon 2009: « « « Viral sanitary status and genetic diversity of Rupestris stem pitting associated virus in French Syrah clones exhibiting various susceptibility levels to decline. Beuve et al (2009) Preliminary investigations on a Syrah decline in Central Italy. Bianco et al (2009) Syrah decline: no evidence for viroid etiology. Renault-Spilmont et al (2009) ´ G Genomic i study t d and d detection d t ti off a new variant i t off grapevine i rupestris t i stem t pitting itti associated i t d virus i iin declining d li i California Pinot noir grapevines. Lima et al (2009) ´ First report of grapevine virus sequences highly similar to grapevine syrah virus-1 from Washington Vineyards. Mekuria & Naidu (2010) ´ Rugose wood-associated viruses do not appear to be involved in Shiraz (Syrah) decline in South Africa. Goszczynski (2010) Dispersión de virus en Argentina Los virus se transmiten por ` Injerto I j t ` Material de propagación (mugrón) ` Vectores (específicos) ( p ) Degeneración infecciosa ` ` Nepovirus Æ Nematodos Grapevine Fanleaf Virus ` ` Arabis Mosaic Virus Raspbery Ringspot Virus ` Nepovirus Europeos y Americanos ` Xiphinema index ` ` ` Xiphinema spp Longidorus spp No son vectores ` Meloidogyne spp. Factores que afectan la dispersión ` ` ` ` ` ` ` Presencia de plantas infectadas Dispersión del nematodo Biología g del nematodo Tipo de suelo / riego Persistencia en raíces guachas Tratamientos químicos Portainjertos tolerantes Enrollado ` Familia Closteroviridae Ampelovirus: Cochinilla harinosa Closterovirus: Pulgones Crinivirus: Mosca Blanca Vectores GLRaV-3 Planococcus ficus ` P. citri ` Pseudococcus P d longispinus l i i ` Ps. viburni ` Ps. Ps calceolariae ` Ps. maritimus ` Heliococcus boemicus ` Phenacoccus aceris ` Pulvinaria vitis ` Transmisión en Argentina ` ` Grapevine leafroll virus 3 Planococcus ficus Dispersión por cochinillas Dispersión por material de propagación Métodos de diagnóstico ` Bioquímicos ` Basados en proteínas ` ` Basados en ácidos nucléicos ` ` ELISA PCR (RT) Bi ló i Biológicos ` Indexage Investigación Desarrollo Servicios Degeneración Infecciosa ELISA Indexing ELISA Enrollado RT-PCR, ELISA Indexing g ELISA Madera M d Rugosa RT-PCR Indexing RT-PCR Enfermedades E Emergentes t RT-PCR RT PCR Indexing Control ` Una planta a campo no puede ser curada ` ` No hay fuente natural de resistencia a virus ` ` Mecanismos de defensa de la planta actúan en los momentos iniciales de la infección Imposibilidad de resistencia por cruzamientos Reticencia a uso de transgénicos Control ` Evitar que el virus ingrese al cuartel ` ` Material de propagación Evitar que el virus se disperse en el cuartel ` Control de vectores ` ` Nemátodes Cochinillas harinosas Material de propagación ` Resolución 742/2001 SAGPyA ` ` Normativa para viveros de vid Dos categorías de material de propagación ` ` Estándar Certificado Material estándar ` ` ` Selección masal Trazabilidad mínima Ausencia de síntomas en los p planteles de pplantas madres Material certificado ` ` ` Selección clonal Trazabilidad máxima Análisis exahustivo de enfermedades Esquema nacional de certificación Cabeza de clon Testeo ELISA Recuperación: Termoterapia Microinjerto Eliminación del sistema Indexage Biológico Indexage por injerto leñoso Indexaje por injerto herbaceo Clon certificado Selección sanitaria Prospección de viñedos Observación de síntomas 2011 Análisis ELISA 2012 Indexage leñoso a campo 1º Año 2º Año 3º Año 2013 Indexage leñoso en túnel 24 meses Indexage herbáceo 2014 3 meses 2015 Certificación Planta certificada Plantel de madres de certificadas Plantel de premultiplicación Colección fundadora Planta original Incidencia de costos Implantación/Ha $70.000 Plantas (2.200/Ha) $4,00 $8,00 $8.800 $17.600 12% 25% Incidencia Impacto en el costo $70.000 $4,80 $10.560 15% 3-5% 3 5% $9,60 $21.120 30% Incidencia de costos Rendimiento/Ha 200qq 160qq 200qq P i //qq Precio $1 80 $1,80 $1 80 $1,80 $1 20 $1,20 $/Ha $ $36.000 $ $ $28.800 Disminución Impacto p en el costo $24.000 $ 20% 33% 3-5% Material Certificado ` Malbec ` ` ` ` Malbec INTA 02 Malbec INTA 09 Malbec INTA 12 Malbec INTA 27 ` Syrah ` ` ` Syrah y INTA 84 Syrah INTA 89 Syrah INTA 100 Otras variedades Chardonnay ` Barbera Torrontés Riojano j ` Bonarda ` Tempranillo ` Portainjertos ` ` Grupo de investigación ` ` ` Carlos de Borbón Melisa Lanza Volpe S. Gómez Talquenca ` ` ` ` A.Soto D.Lijavetzky C.Muñoz L.Martinez • Financiación FONCyT y INTA CONICET