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Virus que atacan la vid
Sebastián Gómez Talquenca
EEA Mendoza INTA
Argentina
Degeneración Infecciosa a
„1968 Enrollamiento b
„1995 GLRaVGLRaV-1,
1 GLRaVGLRaV-3,
3 ArMV
ArMV, RpRSV
„1955
a
Vega
g & Alcalde (
(1955)
) IDIA 85:3-21
b Nadal (1968) Virus de la vid
c Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33
c
`
1999 PID FONCyT
`
`
`
Esquema
Esq
ema de certificación sanitaria
Programa de investigación como soporte
2004 PN INTA
`
`
`
Identificación de especies presentes en el país
Caracterización molecular
Desarrollo de métodos de diagnóstico
Degeneración
infecciosa
(1955)
a
` Grapevine Fanleaf
Virus (1966)
`
`
a
b
c
Arabis Mosaic Virus (1995) b
Raspberry Ringspot Virus “g” strain (1995)
c
Vega
g & Alcalde (
(1955)
) IDIA 85:3-21
Feldman (1966) RIA III(5):33-46
Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33
Enrollamiento (1968)
`
`
`
`
`
`
`
`
a
Grapevine Leafroll associated virus 1 (1995)
GLRaV-2 (2003) b
GLRaV-3 (1995) a
GLRaV-5 (2008) c
GLRaV-6 (2006) d
GLRaV-9 (2011) e
GLRaV-De (2011) e
GVA (1995) a
a
Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33
b Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG p
c Gómez Talquencaet al(2009) Virus Genes,
d Gómez Talquenca et al (2006) XV Meeting ICVG
e Gómez Talquenca (2012) Tesis Doctoral
Ocurrencia de enfermedades virales
`
Relevamientos
`
`
`
`
Dirigidos
Aleatorios
Zonales
Programa de certificación
Country
GLRaV-1
GLRaV-2
GLRaV-3
Reference
Brasil
6.9%
0%
14.7%
(Fajardo et al., 2002)
Chil
Chile
4 08%
4.08%
14 84%
14.84%
6 17%
6.17%
(Fi
(Fiore
et al.
l 2008)
Croatia
24.3%
N/D*
72.3%
(Poljuha et al., 2004)
Czech Republic
28.2%
0.9%
2.7%
(Kominek, 2006)
Egypt
1,8%
1,4%
55,9%
(Ahmed et al., 2004)
Italy
24.4%
6.9%
27%
(Zorloni et al., 2004)
Syria
47 3%
47.3%
9 0%
9.0%
23 9%
23.9%
(Mslmanieh et al.,
al 2006)
Tunez
9.1%
6.3%
76.3%
(Mahfoudhi et al., 2008)
Turkey
8.4%
2.4%
5.8%
(Akbas et al., 2007)
USA
2.6%
0.3%
6.3%
(Martin et al., 2005)
Ocurrencia en Argentina
1995
ELISA
2000/10
2003
2009/10
2011
Indexing
RT-PCR
ELISA
ELISA
36%
63%
35%
97%
NT
93%
NT
NT
NT
NT
NT
NT
NT
Zona Sur
Zona Norte
Infectado
23%
33%
GFLV
19%
11%
ArMV
15%
0%
RpRSV
18%
0%
GLRaV-1
28%
9%
0%
10%
0%
3%
GLRaV-2
NT
NT
0%
25%
1%
12%
GLRaV 3
GLRaV-3
5%
14%
0%
38%
6%
88%
GLRaV 4-9
NT
NT
NT
¿33%?
NT
12%
GVA
33%
4%
0%
NT
NT
NT
RSPaV
NT
NT
64%
NT
NT
NT
36%
Incompatibilidad de injerto
`
a
GLRaV-2 (2003)
a
Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG
Nota
ota a los
os viveristas
e stas vitícolas
t co as O
ONIVINS:
S
…. Se ha identificado en algunos clones la presencia de GLRaVo cual
cua no
o se ttraduce
aduce e
en e
el viñedo
edo francés
a cés de ninguna
gu a
2,, lo
manifestación grave, a la excepción de la incompatibilidad de injerto
sobre Kober 5BB…….
……Dado q
que la Unión Europea
p no tiene una p
posición en p
particular
frente a este virus…. Se recomienda que los clones involucrados
sean reservados para ventas en el territorio nacional…..
ONIVINS, Le Progres Agricole et Viticole 119, nº8
º
`
Clones involucrados
`
Cabernet Franc 312, 326, 330, 331
Sauvignon Blanc 316, 317
Cinsaut 104, 255, 257, 321
Niellucio 902, 904
`
C. Sauvignon
g
191, 336, 340, 341, 337
`
`
`
Ocurrencia en Argentina
Clone
GLRaV-11
GLRaV
ELISA
samples
tested
(no.)
ELISA
positive
GLRaV-22
GLRaV
RT-PCR
Pos.
Neg.
ELISA
positive
GLRaV-33
GLRaV
RT-PCR
Pos.
Neg.
ELISA
positive
RT-PCR
Pos.
Neg.
CS 337 – La
L
Consulta
180
-
0%
-
2/2
2
1.1%
2/2
2/2
-
0%
-
2/2
SB 317 - Agrelo
164
-
0%
-
2/2
7
4.3%
3/3
2/2
1
0.6%
1/1
2/2
CF 326 – La
Consulta
180
-
0%
-
2/2
8
4 4%
4.4%
3/3
2/2
3
1 7%
1.7%
3/3
2/2
SB 316 – Agrelo
185
5
2.7%
3/3
2/2
24
13.0%
3/3
2/2
7
5.2%
3/3
2/2
CS 341 - Agrelo
175
-
0%
-
2/2
45
25.7%
3/3
2/2
-
0%
-
2/2
CS 337
33 - Barrancas
180
-
0%
-
2/2
123
68 3%
68.3%
3/3
2/2
3
1 %
1.7%
3/3
2/2
CS BS – Luján de
Cuyo
108
2
1.8%
2/2
2/2
11
10.2%
3/3
2/2
0
0%
-
2/2
T l
Total
1 172
1,172
7
0 6%
0.6%
220
18.77
%
14
1 2%
1.2%
Decaimiento del Syrah
Los virus son la respuesta a todo lo raro!!!
´
Distribution of Rupestris stem-pitting-associated virus variants in two Australian vineyards showing different
symptoms. Habili et al (2006)
´
Workshop Syrah Decline Davis 2007
«
Patológico (virus, viroides, fitoplasmas, hongos de madera), genético, ambiental, manejo…
´
Deep sequencing
D
i analysis
l i off RNAs
RNA from
f
a grapevine
i showing
h i Syrah
S h decline
d li symptoms reveals
l a multiple
l i l virus
i
infection that includes a novel virus. Al Rwahnih.et al (2009)
´
Congreso de Virus de Vid Dijon 2009:
«
«
«
Viral sanitary status and genetic diversity of Rupestris stem pitting associated virus in French Syrah clones exhibiting
various susceptibility levels to decline. Beuve et al (2009)
Preliminary investigations on a Syrah decline in Central Italy. Bianco et al (2009)
Syrah decline: no evidence for viroid etiology. Renault-Spilmont et al (2009)
´
G
Genomic
i study
t d and
d detection
d t ti off a new variant
i t off grapevine
i rupestris
t i stem
t
pitting
itti associated
i t d virus
i
iin declining
d li i
California Pinot noir grapevines. Lima et al (2009)
´
First report of grapevine virus sequences highly similar to grapevine syrah virus-1 from Washington Vineyards.
Mekuria & Naidu (2010)
´
Rugose wood-associated viruses do not appear to be involved in Shiraz (Syrah) decline in South Africa.
Goszczynski (2010)
Dispersión de virus en Argentina
Los virus se transmiten por
` Injerto
I j t
` Material
de propagación (mugrón)
` Vectores (específicos)
( p
)
Degeneración infecciosa
`
`
Nepovirus Æ Nematodos
Grapevine Fanleaf Virus
`
`
Arabis Mosaic Virus
Raspbery Ringspot Virus
`
Nepovirus Europeos y Americanos
`
Xiphinema index
`
`
`
Xiphinema spp
Longidorus spp
No son vectores
`
Meloidogyne spp.
Factores que afectan la dispersión
`
`
`
`
`
`
`
Presencia de plantas infectadas
Dispersión del nematodo
Biología
g del nematodo
Tipo de suelo / riego
Persistencia en raíces guachas
Tratamientos químicos
Portainjertos tolerantes
Enrollado
`
Familia Closteroviridae
Ampelovirus:
Cochinilla
harinosa
Closterovirus:
Pulgones
Crinivirus: Mosca Blanca
Vectores GLRaV-3
Planococcus ficus
` P. citri
` Pseudococcus
P d
longispinus
l i i
` Ps. viburni
` Ps.
Ps calceolariae
` Ps. maritimus
` Heliococcus boemicus
` Phenacoccus aceris
` Pulvinaria vitis
`
Transmisión en Argentina
`
`
Grapevine leafroll virus 3
Planococcus ficus
Dispersión por cochinillas
Dispersión por material de propagación
Métodos de diagnóstico
`
Bioquímicos
`
Basados en proteínas
`
`
Basados en ácidos nucléicos
`
`
ELISA
PCR (RT)
Bi ló i
Biológicos
`
Indexage
Investigación Desarrollo Servicios
Degeneración
Infecciosa
ELISA
Indexing
ELISA
Enrollado
RT-PCR,
ELISA
Indexing
g
ELISA
Madera
M
d
Rugosa
RT-PCR
Indexing
RT-PCR
Enfermedades
E
Emergentes
t
RT-PCR
RT
PCR
Indexing
Control
`
Una planta a campo no puede ser curada
`
`
No hay fuente natural de resistencia a virus
`
`
Mecanismos de defensa de la planta actúan en los momentos
iniciales de la infección
Imposibilidad de resistencia por cruzamientos
Reticencia a uso de transgénicos
Control
`
Evitar que el virus ingrese al cuartel
`
`
Material de propagación
Evitar que el virus se disperse en el cuartel
`
Control de vectores
`
`
Nemátodes
Cochinillas harinosas
Material de propagación
`
Resolución 742/2001 SAGPyA
`
`
Normativa para viveros de vid
Dos categorías de material de propagación
`
`
Estándar
Certificado
Material estándar
`
`
`
Selección masal
Trazabilidad mínima
Ausencia de síntomas en los p
planteles de pplantas madres
Material certificado
`
`
`
Selección clonal
Trazabilidad máxima
Análisis exahustivo de enfermedades
Esquema nacional de certificación
Cabeza de clon
Testeo ELISA
Recuperación:
Termoterapia
Microinjerto
Eliminación
del sistema
Indexage Biológico
Indexage por injerto leñoso
Indexaje por injerto herbaceo
Clon certificado
Selección sanitaria
Prospección de viñedos
Observación de síntomas
2011
Análisis ELISA
2012
Indexage leñoso a campo
1º Año
2º Año
3º Año
2013
Indexage leñoso en túnel
24 meses
Indexage herbáceo
2014
3 meses
2015
Certificación
Planta certificada
Plantel de madres de certificadas
Plantel de premultiplicación
Colección fundadora
Planta original
Incidencia de costos
Implantación/Ha
$70.000
Plantas (2.200/Ha)
$4,00
$8,00
$8.800 $17.600
12%
25%
Incidencia
Impacto en el costo
$70.000
$4,80
$10.560
15%
3-5%
3
5%
$9,60
$21.120
30%
Incidencia de costos
Rendimiento/Ha
200qq
160qq
200qq
P i //qq
Precio
$1 80
$1,80
$1 80
$1,80
$1 20
$1,20
$/Ha
$
$36.000 $
$
$28.800
Disminución
Impacto
p
en el costo
$24.000
$
20%
33%
3-5%
Material Certificado
`
Malbec
`
`
`
`
Malbec INTA 02
Malbec INTA 09
Malbec INTA 12
Malbec INTA 27
`
Syrah
`
`
`
Syrah
y
INTA 84
Syrah INTA 89
Syrah INTA 100
Otras variedades
Chardonnay
` Barbera
Torrontés Riojano
j
` Bonarda
` Tempranillo
` Portainjertos
`
`
Grupo de investigación
`
`
`
Carlos de Borbón
Melisa Lanza Volpe
S. Gómez Talquenca
`
`
`
`
A.Soto
D.Lijavetzky
C.Muñoz
L.Martinez
• Financiación
FONCyT
y
INTA
CONICET