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CK-MB (NAC-act.)
Método UV
MANUAL
RX MONZA
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar
las precauciones normales requeridas para el manejo de
reactivos de laboratorio.
PARA SU USO
Para el análisis cuantitativo in vitro de CK-MB en suero y plasma.
Este producto es adecuado para su utilización de forma manual y
en el analizador RX monza.
La solución R1a contiene Azida Sódicas. Evitar su ingestión o el
contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de
contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.
En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención
médica inmediatamente.
No. Cat.
CK 1296
R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa 1 x 70 ml
19 x 2.5 ml R1b. Enzima/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo
19 x 2.5 ml
CONTROL
1 x 2 ml
Las azidas sódicas reaccionan con el plomo y cobre de las
cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se
eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua
para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas
expuestas, deberán limpiarse con hidróxido sódico al 10%.
CK 1553
5 x 20 ml
Atención: Suero de Control
El material de origen humano del que se deriva este producto ha
sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de
Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antígeno de
Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de
Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.
Sin embargo, dado que ningún método puede ofrecer una
seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este
material y todas las muestras de pacientes se deberán manejar
como posibles transmisores de enfermedades infecciosas.
R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa 1 x 105 ml
R1b. Enzima/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo
5 x 20 ml
CONTROL
2 x 2 ml
SIGNIFICADO CLINICO(1)
La Creatina Kinasa (CK) está aceptada internacionalmente como
un indicador sensitivo y específico del infarto de miocardio agudo
(AMI). Existen 3 tipos de iso-enzimas CK, CK-MM, CK-MB y
CK-BB. El CK-BB lo produce el cerebro a partir del tejido del
esqueleto y el corazón y el CK-MB se produce a partir del
músculo del corazón. En la mayoría de los casos la actividad de
CK aumenta durante las 6 horas posteriores a un infarto agudo.
Los valores máximos se observan al cabo de unas 20 horas. La
actividad de CK normalmente vuelve a su normalidad durante el
cuarto o quinto día posterior al infarto.
PRINCIPIO(3)
Análisis de Inmunoinhibición: Se incorpora un anticuerpo en el
reactivo CK. Este anticuerpo se unirá e inhibirá la actividad de la
subunidad M de CK-MB. Esto significa que sólo se mide la
actividad de la subunidad B en el suero. Si la actividad se
multiplica por el factor 2, nos dará la actividad de la CK-MB en
suero.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado o EDTA
COMPOSICION DEL REACTIVO
Componentes
Concentraciones en la Prueba
R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa
Tampón Imidazola
0.10 mol/l, pH 6.7
Glucosa
20 mmol/l
Mg-acetato
10 mmol/l
EDTA
2.0 mmol/l
R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo
ADP
2.0 mmol/l
AMP
5.0 mmol/l
Pentafosfato de Diadenosina
10 µmol/l
NADP
2.0 mmol/l
HK
≥ 2.5 U/ml
G-6-PDH
≥ 1.5 U/ml
N-acetilcisteina
20 mmol/l
Fosfato de Creatina
30 mmol/l
Antibody to CK-M
CONTROL
Hojas de Salud y Seguridad están disponibles si se desean.
Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos
según las pautes locales.
Los reactivos deben utilizarse solamente para su
propósito por personal de laboratorio cualificado, y bajo
condiciones de laboratorio apropiadas.
ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS
R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad
cuando se conserva entre +2 y +8°C.
R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo
Reconstituir un frasco de Enzimas/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo R1b con el volumen adecuado de
Tampón/Glucosa R1a:
2,5 ml para el kit de 19 x 2,5 ml (CK 1296)
20 ml para el kit de
5 x 20 ml (CK 1553)
Estable durante 21 días entre +2 y +8°C y 3 días entre
+15 y +25°C.
CONTROL
Abrir un frasco de suero de control cuidadosamente,
evitando la pérdida de material, y reconstituir en
exactamente 2 ml de agua doblemente destilada. Cerrar el
frasco y dejar reposar durante 15 minutos, disolver el
contenido completamente agitando o rotando suavemente.
La CK-MB es estable en suero durante 5 días entre +2 y +
8°C, 8 horas a +25°C y 4 semanas a -20°C cuando se
congela sólo una vez.
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MANUAL/ RX MONZA CK 1296
CÁLCULO MANUAL
MATERIAL SUMINISTRADO
CK NAC/CK-MB Buffer/Glucose
Enzimas/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo
Suero de control
MATERIALES NECESARIO NO SUMINISTRADOS
Control CKMB Randox No. (Cat. CK 1212)
Control Cardíaco de Tres Niveles Randox, No. (Cat.
CQ 3100 Nivel y Nivel 3)
Randox CK-MB Calibración (Cat. No. CK 2393)
NOTA DE PROCEDIMIENTO(4)
La Macro-CK es una forma atípica de CK y se compone de
complejos de Inmunoglobulina de Isonenzimas normales. Esta
forma migra entre MM y MB y se observa principalmente en
mujeres ancianas. Esto no tiene significación clínica, pero su
presencia puede causar resultados falsamente elevados. Si se
sospecha la contribución de Macro-CK se deberá confirmar su
presencia por medio de electroforésis.
PROCEDIMIENTO
Antes de llevar a cabo el análisis para medir la actividad de la CKMB en suero, es necesario medir la actividad de la CK total
utilizando el método NAC activado.
PARA RX MONZA
Seleccione CK-MB en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo
un blanco de agua según las instrucciones.
Pipetear en tubos de ensayo:
Blanc
Reactivo S0
Patrón
S1
Muestra
50 µl
500 µl
50 µl
500 µl
50 µl
500 µl
Salino
Patrón
Muestra
Reactivo
Mezclar y aspirar en la Rx Monza.
CALIBRACIÓN PARA RX MONZA
Se recomienda el uso de solución salina y el Calibrador Randox
CKMB para calibración.
Long. de onda
CK-B (U/l)
CK-MB (U/l)
340 nm
Hg 334 nm
Hg 365 nm
825 x ∆A
841 x ∆A
1486 x ∆A
1651 x ∆A
1683 x ∆A
2972 x ∆A
El cambio de absorbancia por minuto (∆A/min) también se puede
medir y la media de las 5 mediciones de deberá utilizar en el
cálculo.
Los factores a utilizar entonces serán:Longitud de onda
CK-B (U/l)
CK-MB (U/l)
4127
4207
7429
8254
8414
14858
∆A 340 nm/min
∆A Hg 334 nm/min
∆A Hg 365 nm/min
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda para el control de calidad diario el Control de
CKMB Randox o el Control Cardíaco de Tres Niveles Randox.
Se deberán analizar dos niveles de controles al menos una vez al
día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su
repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara.
2. Comprobar que todo material está limpio.
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento bacteriano
puede contribuir a la inexactitud de los resultados.
4. Comprobar la temperatura de reacción
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los
Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.
INTERFERENCIAS
La hemólisis interfiere con el análisis.
RANGO DE REFERENCIA
Infarto de Miocardio(MI)
La probabilidad de daño del miocardio es elevado cuando se
presentan los siguientes 3 factores:-
PARA USO MANUAL
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medición:
340 nm, Hg 334 nm o Hg 365 nm
1 cm de espesor
25°C, 30°C y 37°C
frente al aire
25°C
30°C
37°C
Semi-micro
Macro
1 CKhombres
>80 U/l1
>130 U/l2
>195 U/l*
CKmujeres
>70 U/l1
>110 U/l2
>170 U/l*
2 CK-MB
>10 U/l1
> 16 U/l2
> 25 U/l*
3 una actividad de CK-MB entre 6 y 25% de la actividad CK
total
0,04 ml
0,1 ml
*Valores calculados
1,0 ml
2,5 ml
Se puede sospechar un MI aunque los valores obtenidos sean
inferiores a los límites especificados. Para confirmar si ha
ocurrido un infarto reciente, el test se deberá repetir al cabo de
4 horas.
Pipetear en la cubeta:
Muestra
Enzimas/Coenzimas/
Substrato/Anticuerpo
Temperatura
Mezclar, y dejar reposar a la temperatura apropiada durante 10
minutos. Después añadir a la cubeta, y leer la absorbancia A1.
Leer la absorbancia A2 exactamente 5 minutos más tarde.
∆A = A2 - A1
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia para reflejar la edad, sexo, dieta y localidad
geográfica de la población.
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MANUAL/ RX MONZA CK 1296
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante
el analizador RX monza.
LINEARIDAD
El Anticuerpo inhibe hasta 2000 U/l de CK-MM.
Este ensayo es linear hasta 2044 U/l de actividad CKMB.
SENSIBILIDAD
La concentración mínima detectable de CKMB con un nivel de
precisión aceptable se determinó como 23,5 U/l.
PRECISION
Precisión Dentro del Análisis
Nivel 1
Nivel 1
Mean (U/l)
136
161
SD
4.89
7.03
CV(%)
3.61
4.37
n
20
20
Precisión Total
Mean (U/l)
SD
CV(%)
n
Nivel 1
136
6.83
5.04
20
Nivel 2
161
6.56
4.08
20
CORRELACION
Se comparó este método (Y) con otro método comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión
lineal:
Y = 1.0756 X - 18.799
con un coeficiente de correlación r = 0.9903
Se analizaron 43 muestras con valores de entre 34,4 y 1733 U/l.
REFERENCIAS
1. Stein, W., Med. Weit 1985; 36: 572.
2. Szasz, G., and E. W. Busch. Paper presented at 3rd Eur. Congr.
Clin. Chem., Brighton/England, June 1979; 3 - 8 (abstract).
3. Wurburg, U., et al., Clin. Chem. 1976; 54: 357.
4. Jacobs et al, The Laboratory Test Handbook, 2nd edition
Revisado 29 July 11 bm
Rev. 001
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