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Mecanismos moleculares de interacción virus-célula: el modelo del
virus de la peste porcina africana
Componentes del Grupo
Jefe de línea/Investigador Principal
Group Leader:
Yolanda Revilla Novella
Personal Científico:
Ricardo Madrid González
Postdoctorales/ / Postdoctoral Fellows:
Daniel Pérez Núñez
Elena García Sánchez
Becario Predoctoral/Predoctoral Fellow:
Ana Quintas Gorozarri
Técnico de investigación/Technical Assistance
María Luisa Nogal París
Informe científico
Muchos virus presentan interés básico y aplicado por ser causantes de importantes
enfermedades en las que la respuesta inmune es ineficaz. Es el caso de la peste
porcina africana, una devastadora enfermedad causada por un complejo virus (VPPA),
para la que no existe vacuna. La transmisión de la enfermedad se mantiene bajo
diferentes escenarios epidemiológicos, incluyendo cerdo doméstico, jabalíes y
garrapatas. La infección es endémica en el África Sub-Sahariana, Cerdeña y
recientemente en Cáucaso y Rusia, lo que junto con la aparición de brotes en Ucrania
y Polonia, está amenazando a la Unión Europea. Además, la emergencia de cepas
atenuadas indetectables por los kits de diagnóstico disponibles, contribuye a la
diseminación de la enfermedad. Por ello analizamos los niveles de citoquinas en
células porcinas infectadas por cepas atenuadas y virulentas, caracterizando factores
específicos de la atenuación. En este sentido, uno de nuestros objetivos es además,
desarrollar kits de ELISA y/o PCR/RT- PCR más sensibles.
Asimismo estamos caracterizando mecanismos de interacción entre el virus y la célula
infectada, con especial énfasis en la entrada, internalización y tráfico viral, basándonos
en la experiencia reciente del equipo en este tipo de estudio.
Finalmente, nos proponemos desarrollar herramientas y estrategias para generar
vacunas frente al VPPA. Para ello, estamos manipulando el genoma de cepas
atenuadas del virus, obteniendo mutantes carentes de genes cuyos productos
modulan la expresión de MHC-I (EP153R), regulan la producción de IFN-β (A276R y
A528R), o interfieren con factores pro-inflamatorios (A238L). Alternativamente, éstos u
otros genes serán incorporados en vectores vacunales, tipo amplicón PRV ó Parapox,
para ensayar su potencial protección en cerdos, bajo distintas pautas de vacunación.
Gran parte de la información requerida para seleccionar los genes y mecanismos
candidatos es resultado del trabajo de muchos años de varios de los componentes de
esta Línea de Investigación.
Research Summary
Certain viruses are the major causative agents of diseases by interfering key host
pathways and leading to an ineffective immune response. This is the case of African
swine fever, a devastating disease caused by a complex virus (ASFV), for which no
vaccine is available.
The transmission of the infection remains under different epidemiological settings,
including domestic and wild pigs, wild boar and ticks, and is endemic in sub-Saharan
Africa, Sardinia and recently in Caucasus and Russia. The situation is also worrying
since declared outbreaks in Ukraine and Poland, are threatening the European Union.
In addition, the emergence of new attenuated strains, undetectable by available
diagnostic kits, contributes to dissemination. Thus, we are analyzing the levels of
cytokines in porcine cells infected with attenuated or virulent viral isolates to
characterize specific factors of attenuation. In addition, other of our objectives is to
develop more sensitive ELISA and / or PCR type tools.
We are also characterizing mechanisms of interaction between the virus and the
infected cell, with special emphasis on the entry, viral internalization and trafficking,
based on previous experience of the team in the study of ASFV.
Finally, our group aims to generate vaccines against ASFV by using different
approaches. In one of them, we manipulate attenuated virus strains, to obtain mutants
lacking genes that modulate the expression of MHC-I, as EP153R, or which regulate
the production of IFN-β, as A276R and A528R, or able to interfere pro-inflammatory
factors, like A238L. Alternatively, these and other viral genes will be incorporated into
vaccine vectors (amplicons type PRV or Parapox), to be tested in animals under
different new guidelines. Obviously, much of the information required to select
candidate genes to be manipulated come from previous work by over 20 years of
laboratories that make up this Line of research.
Figura: Factorías virales rodeadas por las proteínas del VPPA p72 y CD2v durante la
infección de células COS-7.
Publicaciones
-Daniel Pérez-Núñez, Marta Martínez-Bonet, Eduardo García-Urdiales, María L. Nogal,
Susana Barroso, Yolanda Revilla and Ricardo Madrid. CD2v interacts with adaptor
protein AP-1 during African swine fever infection. PLoS One, 2015.
-Daniel - Sánchez, E.G., Quintas, A., Nogal, M.L., Castelló, A., and Revilla, Y. (2013)
African swine fever virus controls the host transcription and cellular machinery of
protein synthesis. Virus Research 173, 58-133 (Review).
- Gallardo, C., Soler, A., Nieto, R., Carrascosa, A.L., De Mía, G.M., Bishop, R.P.,
Martins, C., Folorunso, O.F., Couacy-Hymman, E., Heath, L., Martín, E., Simón, A.,
Martín, R. and Arias, M. (2013) Comparative evaluation of novel African swine fever
virus (ASF) antibody detection techniques derived from specific ASF viral genotypes
with the OIE internationally prescribed serological tests. Vet. Microbiol. 162, 32-43.
- De León, P., Bustos, M.J. and Carrascosa, A.L. (2013) Laboratory methods to study
African swine fever virus. Virus Research 173, 168-179 (Review).
Tesis doctorales
- Elena García Sánchez. “Estudio de la Macropinocitosis como Mecanismo Endocítico
de Entrada del Virus de la Peste Porcina Africana”. Universidad Autónoma de Madrid.
Diciembre 2013 (sobresaliente Cum laude). Directora: Yolanda Revilla Novella
- Ana Quintas Gorozari.”Regulación del proceso de traducción durante la infección
viral”. Universidad Autónoma de Madrid. (en progreso ). Directora: Yolanda Revilla
Novella
TRABAJOS DE MÁSTER (TFM):
- Estudio de la Activación de la ruta PI3K-Akt durante la infección del VPPA y
participación de receptores celulares fundamentales para la susceptibilidad a la
infección (CD163). Miriam Samblas García. Directoras: Yolanda Revilla Novella /Elena
García Sánchez.(2013)
- Study of different porcine Cell lines as Models for in vitro ASFV Infection. Paloma
Fernández Calvo. Directoras: Yolanda Revilla Novella /Elena García Sánchez.(2014)
TRABAJO DE FIN DE GRADO (TFG)
- Desarrollo de Herramientas para el estudio, diagnóstico y vacunas de ADN frente al
VPPA José Espejo Valle-Inclán. Directores, Yolanda Revilla Novella /Daniel PérezNúñez (2014)