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Universidad Nacional del Nordeste Secretaria General de Ciencia y Técnica COMUNICACIONES CIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS 2008 TIPIFICACION ANTIGÉNICA Y SECUENCIACIÓN GENÉTICA DE CEPAS DEL VIRUS DE LA RABIA PARESIANTE DE LA PROVINCIA DE CORRIENTES (ARGENTINA): PERÍODO 1997-2003 Miranda, Amaury O. Identificación del Plan de Trabajo / Proyecto: Tema de Tesis Doctorado en Biología FCEFQyN-UNRC Facultad / Instituto: Facultad de Cs. Veterinarias. UNNE Domicilio: Sgto. Cabral 2139 (3400) Corrientes. Argentina. Teléfono/Fax: 03783-425753 int. 161 Palabras Claves: Brote Epizoótico. Variante Antigénica. Árbol Filogenético - E-mail: [email protected] RESUMEN Brotes epizoóticos de rabia paresiante en la Provincia de Corrientes (Argentina), extendidos ininterrumpidamente durante siete años, inducen a indagar en el tiempo y en el espacio los casos de rabia e identificar por primera vez antigénica y genéticamente los aislamientos de cepas correspondientes a casos de rabia diagnosticados en el laboratorio. Los datos de vigilancia epidemiológica permiten identificar las circunstancias en las que se desencadenó el brote, las especies animales involucradas y los aspectos de la historia natural de los animales que contribuyen a la perpetuación del virus en la naturaleza. La caracterización genética de los diferentes aislamientos de campo del virus permite la identificación de variantes virales asociadas con brotes diferentes o provenientes de diferentes reservorios domésticos y silvestres. Se dispuso realizar la caracterización antigénica y genética mediante los Acs Mcs y RT-PCR, secuencia génica de los aislamientos de virus rábico recuperados en el período 1997-2003 de la provincia de Corrientes, correlación entre las técnicas de caracterización e identificar las especies silvestres que mantienen los ciclos endémicos, señalar la circulación de variantes y sus reservorios tendiente a establecer un mapa nosológico, información que es de utilidad para el control y prevención de la rabia humana y animal. Se caracterizaron los genes que codifican para la nucleoproteína de 66 aislamientos de rabia obtenidos de bovinos y equinos procedentes de la Provincia de Corrientes (Argentina), correspondientes al brote epizoótico registrado entre los años 1997-2003, utilizando anticuerpos monoclonales y análisis de secuencias genéticas parciales mediante RT-PCR, secuencia. Se analizo una región de 316 nt, correspondiente al gen de la nucleoproteína localizada entre los nucleótidos 1157 y 1473 (según SADB19 strain). La secuencia obtenida se edito usando el software CHROMAS (Versión 1.3, Mc Carthy 1996, Griffith University, Queensland, Australia). El alineamiento completo se realizo con Clustal X 1.8. El análisis se realizó usando como método de sustitución a Kimura dos parametros y neighbor-joining para reconstruir el árbol filogenético (MEGA Versión 2.0). Otras secuencias de la nucleoproteína del virus de la rabia de murciélagos se incluyeron para comparación: D. rotundus de Brasil (Bradrbt, AF070449) y no se indagó en cuanto a Tadarida brasiliensis Lasiurus sp., Myotis sp. y Histiotus sp ya que los mismos no participaron en los aislamientos logrados. La caracterización antigénica y genética del virus de la rabia aislados de muestras relacionadas a murciélagos, fueron muy similares entres si, mostrando una similaridad del 98.9%. La variante antigénica (AgV) especifica que se detectó en las 66 muestras es AgV3, que se asocia a la especie de murciélago Desmodus rotundus, concordante con el caso humano de Resisntencia Chaco del año 1997 y del caso humano de Corrientes del año 2001.El análisis filogenético y los datos de vigilancia mostraron variante genética del virus de la rabia como circulando independientemente del ciclo de la rabia urbana, y correspondencia exclusiva con el ciclo aéreo transmitida por murciélagos hematófagos Desmodus rotundus AgV3. Finalmente, los resultados son limitados a grandes especies (bovino y equino) de un período anormal de prolongada epizootia que se extendió entre los años 1997-2003, los que segregaron dentro de un linaje monofilético. Los aislamientos no descendieron directamente de los virus históricos y podrían presentar nuevas introducciones a través de la frontera internacional con la República del Paraguay. Estos resultados enfatizan la importancia de la colaboración internacional a través de sistemas de vigilancia nacionales para la evaluación de medidas de control apropiadas. En encuesta directa realizada al productor afectado, se recavó que el ganado no se encontraba inmunizado cuando se inicia el brote epizoótico, además de registrarse un notable aumento en las colonias de D. rotundus en la región. Este es el primer estudio coordinado de caracterización antigénica y génica molecular del virus de la rabia en la Provincia de Corrientes (Argentina), la que posibilitará establecer planes sanitarios eficaces en prevención de dicha zoonosis y en consecuencia a la prevención de los casos fatales humanos. . 11, 12 y 13 de Junio de 2008 - Campus Universitario “Deodoro Roca” - Avda. Libertad 5400 - (3400) Corrientes – Argentina.