Download Sensibilidad A Antibióticos Y Productos Cúpricos De Bacterias

Fotos: Farfán, 2009
Asohofrucol
LINA FARFÁN
I.A. Ph.D LILLIANA HOYOS
Mic. Agrícola y veterinaria PUJ
Universidad Nacional de Colombia
Profesora Asistente
Universidad Nacional de Colombia
Universidad Nacional de Colombia
Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural

Presente en cultivos de Maracuyá y Gulupa.

Causada por un complejo de bacterias:
Xanthomonas spp.

Enfermedad muy limitante en gulupa:
- Erradicación de cultivos.
-
de ganancias.
-
Costos de producción :
Aplicaciones químicas.
Xanthomonadales
Enterobacteriales
Pseudomonadales
Burkholderiales
Xanthomonas
Erwinia y Pantoea
Pseudomonas, Burkholderia, Stenotrophomonas.
(Agrios, 2005)
Resistencia
Estreptomicina (Quezado et al., 2003)
Validamicina (Ishikawa et al., 2004)
Oxitetraciclina (Mac Manus et al., 2002)
Productos cúpricos (Spotts & Cervantes, 1995)
(Benítez et al, 2009)
Aplicación de productos químicos.
Antibióticos
Cultivo Maracuyá
Productos Cúpricos
Estreptomicina
Kasugamicina
Validamicina
Oxitetraciclina
Oxicloruro de Cobre
Sulfato de Cobre
Resistencia
Natural
Plásmido pEa34
Adquirida
Genes cop.
Evaluar
la
sensibilidad
de
cepas
bacterianas asociadas a bacteriosis en
gulupa, a algunos antibióticos y productos
cúpricos de uso agrícola.
•
Establecer la sensibilidad de las bacterias asociadas a
bacteriosis en cultivos gulupa, frente a seis antibióticos:
Ampicilina, Cloranfenicol, Kasugamicina, Oxitetraciclina,
Sulfato de estreptomicina, Sulfato de Kanamicina y
Validamicina.
•
Establecer la sensibilidad de las bacterias asociadas a
bacteriosis en cultivos gulupa, frente a dos productos
cúpricos de uso agrícola: Sulfato de cobre y Oxicloruro
de cobre.
Siembra M. Biológico
Material Biológico
(Shenge et al., 2006)
Preparación suspensiones
bacterianas
119 cepas bacterianas
Antioquia - Cundinamarca Boyacá
-Caldas
Cauca - Huila
Meta - Risaralda
Santander - Valle del Cauca
Xanthomonas spp.
Erwinia spp.
Pantoea spp.
Burkholderia spp.
Stenophomonas spp.
1 X 10 8 UFC/mL
Siembra de 3 gotas
10µl en superficie del
medios suplementados.
Control: AN
Incubación 28ºC/ 48
‘72h.
Evaluación de sensibilidad
P. Cúpricos
Método Incorporación en Agar
(Quezado et al., 2003; Loper et
al.,1991)
Sul. Estr., Oxitetrac. y
Kanam.= 25ppm
Cloran. y Ampi.=
50ppm
Kasug. y Valid.=
250ppm
Sul. y Oxic. de
cobre=750ppm
Siembra suspensiones
bacterianas
Sensible: No
crecimiento
No. de cepas
sensibles y
tolerantes a
c/producto.
Antibióticos
Tolerante:
Crecimiento
Sensibilidad de las cepas,
de acuerdo al número de
antibióticos evaluados.
No. cepas
tolerantes por
departamentos.
A.
B.
C.
Aislamientos sensibles (A)
Aislamientos Resistentes o
insensibles (B)

Determinación de antibiotipo aislamientos (Damaso, 1990).

Resistencia: Mecanismos Bioquímicos (Castro, 1995).
Control (C)
Antibiótico
Evaluado
Concentración
Evaluada
No. Cepas
Sensibles
Géneros
Bacterianos
Sensibles
No. Cepas
Resistentes
Géneros
Bacterianos
Resistentes
Sulfato de
Kanamicina
Sulfato de
Estreptomicina
Cloranfenicol
25ppm
4 Bk, 40 Er, 9 Pt, 5
Ps, 13 Xs, 10 NI.
50ppm
Kasugamicina
200ppm
Validamicina
200ppm
30
(27%)
24
(21%)
19
(17%)
105
(87%)
58
(50,5%)
114
(95,5%)
1 Bk, 14 Er, 3 Pt, 2
Ps, 6 Xs, 4 NI.
Ampicilina
89
(73%)
95
(79%)
100
(83%)
14
(13%)
61
(49,5%)
5
(4,5%)
18
(70%)
3Bk, 2Er, 2Pt, 3Ps,
8Xs.
8
(30%)
2Bk, 3Er, 1Pt, 2Xs.
Oxitetraciclina
25ppm
50ppm
25ppm
(22 cepas)
5 Bk, 44 Er, 10 Pt,
5 Ps, Xs, 10 NI.
4 Bk, 45 Er, 11 Pt,
7 Ps, 16 Xs, 9 NI.
1 Bk, 7 Er, 3 Pt, 1
Ps, 2 Xs.
4 Bk, 25 Er, 6 Pt, 5
Ps, 8 Xs, 7 NI.
1 Er, 1 Pt, 1 Ps, 2
NI.
10 Er, 2 Pt, 2 Ps, 5
Xs, 4 NI.
1 Bk, 9 Er, 1 Pt, 3
Xs, 5 NI.
4 Bk, 47 Er, 9 Pt, 6
Ps, 17 Xs, 14 NI.
1 Bk, 29 Er, 6 Pt, 2
Ps, 11 Xs, 7 NI.
5 Bk, 53 Er, 11 Pt,
6 Ps, 19 Xs, 12 NI
Bk: Burkholderia sp.; Er: cf Erwinia sp.; Pt: Pantoea sp.; Ps: Pseudomonas sp.; Xs: Xanthomonas sp.; NI: No identificados.
Kasugamicina
Resist. Cromosómica
o extracromosómica.
Concentraciones
(Sales et al., 2005)
(Damaso, 1990)
Resistencia en
bacterias epifitas.
Resistencia desde 60s
(Macmanus et al., 2002)
Sul.
Estreptomicina
(Sobiczewski et al., 1991)
Xanthomonas sp.
Pseudomonas sp.
E. amylovora.
(Misavage et al., 1990; Spotts &
Cervantes, 1995; Russo et al., 2008)
Cloranfenicol
Impermeabilidad
de membrana
(Remo, 1993).
Factor R (Remo, 1993).
Ampicilina
Validamicina
Resis. Natural
β- lactamasas
(Linares, 2002)
(Damaso, 1990)
Resist. Natural
X. campestris pv. campestris
Ralstonia solanacearum
(Ishikawa et al., 2004)
120
No. de aislamientos
100
80
Sensibles
60
Resistentes
40
20
0
Sulfato de Cobre
Oxicloruro de cobre
Producto evaluado
[]
denaturación
de proteínas
(Agrios, 2005)
Sulfato de
cobre
Resistencia de
Xanthomonas sp. a [ ]
de 1-50ppm.
P. syringae
resistente 160ppm
(Spotts & Cervantes, 1995)
(Quezado et al., 2003; Maneguim
et al., 2007)
Aplicaciones
constantes
(Ministerio de
Agricultura, 2007)
Iones de cobre
libres.
(Lee et al., 1993)
Oxicloruro de
cobre
Propagación de genes
de resistencia: saprófitos
y patógenos.
(Quezado et al., 2003)
Genes cop
(Cooksey, 1993;
Llacer, 2000)
40
35
No. de Cepas
30
25
20
15
10
5
0
6
Antibioticos
5
antibioticos
4
antibioticos
3
antibioticos
2
antibioticos
No. de Antibióticos


Resistencia cruzada (Remo, 1993).
Factores R heterogénicos (Dámaso, 1990).
1
antibiotico
0
antibioticos
No. de
Departamento aislamientos
No. Aislamientos Tolerantes
SK
SE
CL
AM
KA
VA
OX
Antioquia
2
0
0
0
2
1
2
0
Boyacá
11
2
1
2
11
5
9
0
Caldas
Cundinamarca
4
70
0
10
0
8
1
11
2
52
2
26
4
59
0
16
Huila
5
1
0
2
5
3
5
0
Meta
2
2
2
1
2
2
2
0
Risaralda
3
2
0
1
3
3
3
0
Tolima
Valle del
Cauca
9
5
4
1
9
6
9
1
13
8
8
0
11
8
13
1
Total
119
30
23
19
97
56
106
18
SK: Sulfato de kanamicina; SE: Sulfato de estreptomicina; CL: Cloranfenicol; AM: Ampicilina; KA: Kasugamicina; VA:
Validamicina; OX; Oxitetraciclina
Valle del
Cauca
Control X. campestris
pv. passiflorae en
plantas de maracuyá.
Sul. estreptomicina
e hidr. Cobre.
(1000-3000 ppm)
(Castillo & Granada, 1995)
(Castillo & Granada, 1995)
Kasugamicina
Más empleados en
plantaciones gulupa.
(Angulo, 2009)
Prod. cobre
Sul.
estreptomicina
Aplicaciones
Resistencia: cultivos de
manzano.
(Cooksey, 1990)
Antioquia, Caldas,
Huila y Risaralda =
Resistencia
Fotos: Farfán, 2009

Con base en las menores concentraciones
empleadas, Sulfato de estreptomicina
presento el mayor porcentaje de control de
aislamientos bacterianos.

Se encontró, que los mayores índices de
tolerancia a antibioticos se presentaron en
las evaluaciones con ampicilina y
validamicina.

Se obtuvo aislamientos tolerantes a
oxitetraciclina,
pertenecientes
a
los
géneros de Burkholderia spp., Erwinia spp.,
Pantoea spp. y Xanthomonas spp.

Se encontró, que Sulfato de cobre ejerció
control sobre la totalidad de la población
evaluada.
Fotos: Farfán, 2009

El mayor número de aislamientos
sensibles se obtuvo a cuatro de los siete
antibióticos evaluados.

Cundinamarca fue el departamento con
los mayores índices de tolerancia para
cada uno de los antibióticos evaluados.

Las bacterias fitopatógenas asociadas a
bacteriosis en gulupa (Passiflora edulis
Sims.), son tolerantes oxicloruro de cobre
y a los antibióticos evaluados.

Los antibióticos no son efectivos para
el control de bacteriosis en gulupa.