Download 49 Propagación in vivo: clonaje de segmentos nodales del tallo de

PROPAGACIÓN IN VIVO
CLONACIÓN DE SEGMENTOS NODALES DEL TALLO DE REPOLLO
El género Brassica incluye una enorme variedad de plantas
utilizadas en la alimentación, ya sea por sus hojas
(repollos, coles, repollito de Bruselas), sus flores (coliflor,
brócoli), sus raíces (nabo, rábano), sus semillas (mostaza)
y su aceite (canola).
El repollo común (Brassicaoleracea var. capitata) se
caracteriza por sus numerosas hojas gruesas y
superpuestas. Dentro de la cabeza, se encuentra el tallo,
con una gema terminal y numerosas gemas axilares bien
desarrolladas (Figuras 1 y 2).
Figura 1. Cabeza de repollo, tallo y gemas.
Figura 2. Tallo de repollo con las yemas
Yema
Tallo
Yema
El método de clonación a partir de segmentos nodales consiste en el aislamiento de un fragmento
del tallo con gemas axilares y su transferencia a un medio de cultivo apropiado, donde se
desarrollarán las plantas hijas.
El método ha sido usado para la propagación vegetativa, tanto in vivo como in vitro.
BIBLIOGRAFÍA
AGEE S. Attack of the killer cabbage clones. Disponible en
http://sciencebuddies.com/mentoring/project_ideas/PlantBio_p016.shtml
RAVEN P.H, EVERT R.F. e EICHHORN S.E. Biologia Vegetal, 6a Edição. Rio de Janeiro, Editora Guanabara
Koogan S.A., 2001.
Guía 49
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
PROPAGACIÓN IN VIVO / CLONACIÓN DE SEGMENTOS NODALES DEL TALLO
ACTIVIDAD PRÁCTICA
La clonación de individuos de una determinada especie vegetal a partir de segmentos nodales
permite una propagación vegetativa rápida de los ejemplares considerados más interesantes.
OBJETIVO
Obtener clones de repollo a partir de segmentos nodales con gemas axilares.
MATERIALES
Una cabeza de repollo, 1 cuchillo, 1 azulejo o tabla para cortar, bolsas pequeñas del tipo ziploc,
papel toalla, un frasco spray con agua.
PROCEDIMIENTO
1.
Colocar varias capas de papel toalla dentro de las bolsitas. Humedecer levemente el papel,
mediante 3 o 4 rociados con el frasco spray. CUIDADO! No colocar agua en exceso.
2.
Deshojar la cabeza de repollo, con las manos. Identificar las gemas axilares y la gema
terminal.
3.
Cortar el tallo en rodajas y colocar cada una de ellas en una bolsita, cuidando de no invertir el
sentido de polaridad natural de la planta (Figura 3).
4.
Incubar en presencia de luz y observar periódicamente.
Figura 3: Las etapas del procedimiento
RESULTADOS
¿Cuántas gemas se desarrollaron? ¿Cuánto tiempo tardaron las gemas en desarrollarse?
DISCUSIÓN
Preparar y realizar un mini-proyecto de transferencia de los clones a la tierra.
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NUESTRO COMENTARIO
Obtuvimos buenos resultados siguiendo este procedimiento (Figura 4). También testeamos otros
materiales como tierra, arena, y una mezcla de tierra y vermiculita (Figura 5). En todos los casos,
las gemas axilares se desarrollaron bien. Intentamos la transferencia en tierra, pero a pesar de que
los clones sobrevivieron un tiempo no alcanzamos a observar ningún enraizamiento (Figura 6).
También transferimos algunos clones a medio semisólido (0,2% de Nutrikelp y 0,8% de agar),
donde observamos la formación de un callo espectacular (Figura 7).
Figura 4. Desarrollo de gemas axilares en segmentos nodales del tallo de repollo.
Figura 5. Desarrollo de gemas axilares del tallo de repollo, en diferentes substratos.
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Figura 6. Los clones, una vez transferidos a tierra.
Figura 7. Formación de un callo en el medio con Nutrikelp, un producto comercial que contiene
sales minerales y citocininas.
¿CÓMO ARMAR UN PROYECTO?
Experimentar con diferentes sustratos para observar el desarrollo de clones a partir de las gemas
axilares.
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