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Regional Norte Laboratorio de Microbiología Fernández E.; Reyes J.; Martínez R.; Villavicencio F.; Vásquez R.; Ushiña L.; Villacís J. E. Introducción Klebsiella pneumoniae es una de las especies estudiadas dentro de las enterobacterias por su relevancia clínica, ya que suele ser el agente causal de varias infecciones asociadas al cuidado de la salud, en especial en pacientes que necesitan de cuidados intensivos. Existen reportes en varios países de la presencia de resistencias a los antimicrobianos prescritos, dada principalmente por la producción de β-lactamasas de espectro extendido y carbapenemasas que inactivan a los antimicrobianos β-láctamicos, convirtiéndose en un problema de salud pública.1,2 Por medio del laboratorio de microbiología – INSPI y el laboratorio de microbiología del hospital han identificado cepas de Klebsiella pneumoniaemultiresistentes, aisladas de distintas muestras clínicas y que corresponden a los diferentes servicios hospitalarios, confirmando por análisis molecular. Objetivo general • Constatar la epidemiología involucrada en la Red de Resistencia a los Antimicrobianos (RAM) e Infecciones Asociadas a la Atención en Salud (IAAS) de K. pneumoniaeen un hospital de la red. Objetivos específicos • Confirmar las cepas en estudio utilizando técnicas Introducción (28 p) convencionales y moleculares. Texto (24 p, tamaño de letras) • Identificarmínimo el gen que le confiere resistencia y la relación clonal de las cepas. Metodología o diseño de estudio El laboratorio de microbiología del hospital mediante el sistema automatizado VITEK han identificado cepas de K. pneumoniae multi-resistentes aisladas de distintas muestras clínicas de los diferentes servicios hospitalarios, las cuales fueron enviadas al laboratorio de microbiología INSPI-Quito como parte del control de infecciones dentro RAM e IAAS, donde se procedió a la confirmación y seguimiento utilizando técnicas convencionales y moleculares desarrolladas en el laboratorio de referencia nacional, identificando tanto el gen que le confiere resistencia como la relación clonal presente en las mismas, procesando un total de 197 muestras entre los meses de Octubre 2013 a Junio 2014 de las que se seleccionó 7 cepas que corresponden a los criterios de multi-resistencia, diferentes tipos de muestras, servicios y tiempo de recolección (Tabla 1.). Una vez obtenidos los cultivos puros, se procedió con la confirmación fenotípica, antibiograma y confirmación genotípica (PCR) de la presencia de la resistencia microbiana en estudio. Con la finalidad de observar la relación de clonalidad entre las cepas aisladas de distintos servicios se realizó la investigación utilizando la técnica de campos pulsados (PFGE), y posteriormente se realizó el análisis de resultados mediante un dendograma con el software UVP • Presencia de 4 clones distintos de K. pneumoniae multi-resistentes, de los cuales se detecta el mismo clon en los servicios de cardiología, medicina interna, UCI, cirugía vascular mediante PFGE. Resultados • Confirmación fenotípica de presencia de resistencia a carbapenémicos mediante test de HODGE y sinergia de antibióticos (Fig. 1a, b. respectivamente) • Confirmación de la presencia del gen blakpc que presta resistencia a las carbapenémicos y corresponde al mecanismo tipo KPC perteneciente al grupo A de Ambler por medio de PCR. Conclusiones • • • El estudio de la epidemiología molecular de Klebsiella pneumoniaeen un hospital de la red muestra la existencia de cepas multi-resistentes Las siete cepas de K. pneumoniae presentaron una distribución clonal. Uno de los clones ha colonizado 4 servicios del hospital Recomendaciones • • • • • • Incrementar la vigilancia en los hospitales de la red e incluir el resto de clínicas para estudios de vigilancia y control. Controlar las condiciones de aseo y buenas prácticas de higiene hospitalaria con educación continua. Continuar con la estrategia de manejar cuartos de aislamiento. Evaluar la capacidad bactericida de los productos de limpieza y su concentración para su uso. Continuar con el programa de manejo adecuado de los antimicrobianos. Desarrollar la cartilla de perfiles de susceptibilidad del hospital. Agradecimientos Se agradece a la red de laboratorios de resistencias con los que se trabaja y a la DNVE. Referencias 1. Echeverri-Toro, Lina M, Rueda, Zulma V, Maya, Wilmar, Agudelo, Yuli, & Ospina, Sigifredo. (2012). Klebsiella pneumoniae multi-resistente, factores predisponentes y mortalidad asociada en un hospital universitario en Colombia. Revista chilena de infectología, 29(2), 175-182. Recuperado en 27 de agosto de 2014, de http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S071610182012000200009&lng=es&tlng=es. 10.4067/S0716-10182012000200009. 2. Bermejo, Joaquín, Bencomo, Blanca, Arnesi, Nora, Lesnaberes, Patricia, Borda, Noemí, & Notario, Rodolfo. (2006). Alta correlación entre el consumo de ciprofloxacina y la prevalencia de Klebsiella pneumoniae productora de ß-lactamasas de espectro extendido. Revista chilena de infectología, 23(4), 316-320. Recuperado en 27 de agosto de 2014, de http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-10182006000400004&lng=es&tlng=es. 10.4067/S0716-10182006000400004. Iquique N° 14-285 y Yaguachi Teléfono: 022568041 - 022552715 – 022565858 www.inspi.gob.ec, [email protected] 9 de Septiembre del 2014