Download INFORME PROTOCOLO 24 Feb VIUSID CERDOS 30

EVALUACION DE LA EFICACIA DE Viusid Vet Polvo* SOBRE LOS PARAMETROS
PRODUCTIVOS E INMUNOLOGICOS EN CERDOS DE GORDA.
Antecedentes.
La producción porcina en países industrializados y del tercer mundo, ha cambiado en los últimos años, lo
cual ha generado que grandes grupos de animales se alojen bajo condiciones intensivas, con
poblaciones de cerdos muy densas, lo que aumenta la incidencia y facilita el contagio de enfermedades
infecciosas dentro de la piara, elevando la mortalidad y produciendo una deficiente ganancia de peso,
mala conversión alimenticia, aumento en el número de días en que los cerdos llegan al rastro, y un
excesivo gasto en medicamentos. Todo lo anterior se traduce en pérdidas económicas.
En México al igual que en otros países las enfermedades infecciosas representan la principal causa de
muertes en los cerdos y, el uso indiscriminado de antibacterianos, ha fomentado la aparición de cepas
bacterianas resistentes como consecuencia del uso inapropiado de antibacterianos, facilitando el
establecimiento y prevalencia de enfermedades infecciosas.
Por lo anterior, una de las alternativas para mejorar los parámetros productivos e inmunes, es el empleo
de agentes o preparados inmunoestimulantes de origen no antibiótico, que a la vez mejoren los
parámetros productivos sin la restricción de la presencia de residuos de antibacterianos que conlleva al
establecimiento de los tiempos de retiro de estas sustancias.
Tal es el caso del Viusid-Vet Polvo*.
Viusid-Vet Polvo*es un preparado nutricional, a base de antioxidantes, vitaminas, oligoelementos y, un
principio activo producto de la extracción del regaliz (ácido glicirricínico) con actividades antivirales
potenciales.
La activación molecular de sus principios activos, incrementa la actividad de las funciones biológicas de
los mismos (efecto antiviral y antioxidante), sin modificación de la estructura molecular de los principios
activos, asegurando excelente funcionamiento en mejorar los mecanismos de un aumento significativo de
las defensas del organismo.
Por lo anterior, se consideró conveniente realizar una prueba de eficacia de Viusid-Vet Polvo* en
lechones de engorda para evaluar su efecto en los parámetros productivos y sobre funcionamiento y
producción de inmunidad humoral (anticuerpos) hacia la enfermedad de influenza porcina.
Material y métodos.
Localización:
El estudio se llevó a cabo en el Centro de Enseñanza e Investigación en Producción Porcina
perteneciente
a
la
Facultad
de
Medicina
Veterinaria
y
Zootecnia
de
la
UNAM (Universidad Nacional Autónoma de México), localizado en Jilotepec, Edo de México.
Especie: Se utilizaron 40 lechones recién destetados machos y hembras Duroc-Landrace de
aproximadamente 7 Kg, los cuales se dividieron en dos grupos de 20 lechones cada uno.
Producto: Viusid-Vet Polvo*, producto comercial de Catalysis, distribuido por Laboratorio Dermaceutical
México, S. A. de C. V. en presentación de bolsa de 5 Kg metalizado para aplicación vía alimento. Dosis
1,200 g/1 tonelada de alimento.
Alimentación de los Grupos:
Grupo Viusid Vet Polvo: Previa prueba de eficiencia de mezclado se utilizó alimento preparado en la
misma granja Experimental en presentación en harina manejado por etapas: durante 5 semanas que duro
toda la etapa desde destete hasta la etapa de crecimiento con un consumo estimado de 1.4 toneladas de
alimento y 8 semanas de la etapa de finalización, considerando un consumo estimado de 5 toneladas. La
dosis que se usó, Viusid-Vet Polvo* a razón de 1,200 g/ Ton de alimento.
Grupo Control: Alimento preparado en la misma granja experimental por etapas desde destete a
crecimiento y finalización ad libitum sin Viusid-Vet Polvo*.
Tiempo de evaluación: desde la etapa del destete hasta la fase de crecimiento 5 semanas y hasta la
semana 13 de finalización. Fecha de inicio 24 de Febrero y terminación 26 de Mayo, 2011.

Datos para el Diseño experimental.
o Granja Experimental CEIEPP, UNAM.
o Número de animales en prueba
40.
o Animales de grupo control
20.
o Animales de grupo Viusid … ….20.

Parámetros en evaluación:
o Ganancia diaria de peso promedio por grupo (g).
o Consumo de Alimento (Kg).
o Índice de conversión alimenticia por grupo semanal (Kg).
o Peso promedio semanal por grupo (Kg).

Pruebas serológicas y PCR (Polymerase Chain Reaction).
Monitoreo:
Para realizar las pruebas se tomaron 20 muestras de sangre completa con anticoagulante para
separación de sueros y realizar la prueba de inhibición de hemoaglutinación contra virus de Influenza
Porcina por grupo. Para corroborar el comportamiento del sistema inmune en la generación de
anticuerpos hacia la enfermedad presente en la granja (influenza porcina).
La determinación de los títulos de anticuerpos contra la enfermedad de influenza porcina en el suero de
cada cerdo se utilizo la prueba de inhibición de la hemoaglutinación con el virus de referencia
A/swine/New Jersey/11/76 (H1N1) GeneBank access K00992 y con el subtipo A/swine/Minnesota/90882/98 (H3N2). Número de acceso al GeneBank AF153234.
Para considerar a los animales expuestos al virus de influenza porcina subtipos H1N1 y H3N2 como
animales positivos deben tener una dilución 1:80 o mayores o su expresión logarítmica respectiva
equivalente a 1.9 log. La interpretación de los animales negativos a la prueba se basa en los títulos de
anticuerpos localizados en la dilución 1:40 o menores o ser menor a 1.9 log.
Se estableció el siguiente programa de monitoreo para los grupos control y grupo dosificado con
Viusid-Vet Polvo*:
Días de edad
15 días
30 días
45 días
70 días
91 días
Pruebas de laboratorio
HI-IP
HI-IP
HI-IP
HI-IP
HI-IP
Grupos
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
RT-PCR Tiempo real: se tomaron 20 hisopos nasales por cada grupo para realizar la prueba de RTPCR en tiempo real para evaluar la etapa de excreción viral. Durante la segunda semana de iniciado el
destete los días 24, 26, 28, 30 de Marzo y 01 de Abril.
Los hisopos recolectados se sumergen en MEM y el exceso de medio del hisopo será retirado
presionando el hisopo sobre las paredes del tubo. El medio se centrifuga y filtra, para posteriormente
obtener 700 µl para extracción de RNA viral. Una vez extraído el RNA se utilizará para RT-PCR en
tiempo real.
Para la interpretación de ésta prueba se basa en determinar la presencia del virus de Influenza Porcina
través de la concentración viral presente en los hisopos nasales expresada en logaritmos. Los animales
con una concentración viral mayor a igual a 2.85 logaritmos corresponden a los animales positivos.
Los animales que contengan una concentración viral menor a 2.85 logaritmos corresponden a los
animales negativos.
El diseño para la toma de muestras para PCR está influenciado por los días de excreción viral,
previamente identificada la etapa en que los animales se infectan en dicha granja.
Monitoreo
1
2
3
4
5
Grupos Control y Viusid-Vet Polvo*
Fechas
Pruebas
Grupos
24 Marzo
RT-PCR Control y Viusid Vet. Polvo *
26 Marzo
RT-PCR Control y Viusid Vet. Polvo *
28 Marzo
RT-PCR Control y Viusid Vet. Polvo *
30 Marzo
RT-PCR Control y Viusid Vet. Polvo *
01 Abril
RT-PCR Control y Viusid Vet. Polvo *
Análisis Estadístico:
Los objetivos del análisis estadístico fueron:
A. Determinar los efectos promedio de los tratamientos, controlando las características generales de la
población e individuales de los sujetos.
B. Probar si el tratamiento interactúa con las variables cuantitativas, por lo que se analizaron con un
modelo mixto con mediciones repetidas, pruebas de normalidad con el programa SPSS, la variable % de
mortalidad, se analizo al final del estudio una sola vez., se transformaron a pubit o logit, para analizar cuál
de ellas ajusta los datos a una normal, antes de analizarla por medio de un análisis de varianza con el
factor tratamiento.
Resultados
Resultados productivos generales por grupo quedaron resumidos en el siguiente cuadro:
GDP (g)
Consumo
Promedio (Kg)
Conversión
(Kg)
Ultimo peso
(Kg)
Control
789
1.87
2.42
1,347.50
Viusid Vet Polvo*
804
+2%
1.75
2.12
-12%
1,542.50
+14%
%
-6%
El resumen de los resultados productivos semanales del grupo de cerdos control se presenta en la
siguiente tabla:
Peso inicial de
semana
(g)
145.30
N. R.**
173.10
307.40
374.60
468.90
564.55
697.00
809.00
895.50
1015.25
1065.10
1274.00
Semanas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Promedio
General
Grupo Control
Peso final de
Consumo
semana
promedio
(g)
(Kg)
173.10
0.35
N. R.**
N. R.**
308.10
0.61
374.60
0.81
468.90
1.10
564.55
1.81
697.00
2.15
809.00
2.41
895.50
2.48
1015.25
2.48
1065.10
2.89
1274.00
2.62
1347.50
2.73
1347.50
1.87
GDP
promedio
(Kg)
0.198
N. R.**
0.482
0.480
0.673
0.683
0.946
0.800
0.617
0.855
1.420
1.700
0.617
C.A.
promedio
(Kg)
1.76
N. R.**
1.25
1.69
1.63
2.65
2.27
3.01
4.00
2.90
2.00
1.50
4.40
0.789
2.42
** N. R.= no se registró.
El resumen de los resultados productivos semanales del grupo de cerdos Viusid Vet Polvo* se presenta
en la siguiente tabla:
Grupo Viusid-Vet Polvo*
Semanas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Promedio
General
** N. R.= no se registró
Peso inicial
de semana
(g)
Peso final
de semana
(g)
Consumo
promedio
(Kg)
GDP
promedio
(Kg)
C.A.
promedio
(Kg)
126.30
N. R.**
149.40
277.10
364.40
443.30
547.00
699.00
804.55
946.50
1077.00
1211.75
1430.50
149.90
N. R.**
277.20
364.40
443.30
574.00
699.00
804.55
946.50
1077.00
1211.75
1430.50
1542.50
0.31
N. R.**
0.56
0.87
1.09
1.57
2.11
2.30
2.31
2.40
2.74
2.47
2.31
0.168
N. R.**
0.456
0.623
0.563
0.740
1.080
0.753
1.010
0.932
0.962
1.560
0.800
1.86
N. R.**
1.20
1.39
1.93
2.12
1.95
3.05
2.28
2.57
2.80
1.50
2.80
1542.50
1.75
0.804
2.12
.
Con base en los resultados anteriores se afirma lo siguiente:
A la 7ta semana de iniciado el experimento, el grupo con Viusid tuvo una gran diferencia en la ganancia
diaria de peso con relación al grupo control en un más 134 gramos (1.080 Kg vs 0.946 kg
respectivamente), lo cual coincidió también con una mejor conversión alimenticia en un más 32 gr
(1.95 Kg vs 2.27 Kg), al final de la prueba se observa una gran diferencia en la ganancia diaria de peso
con relación al grupo control en mas 15 gramos (804 gr vs 789 g respectivamente), lo cual coincidió
también con una mejor conversión alimenticia en mas 0.300 kg (2.12 kg vs 2.42 kg).
Análisis de Laboratorio.
Inhibición de la hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H1N1.
Monitoreo
Control
Promedio
Log
Viusid
Promedio
Log
Control
Viusid
Dif Viusid
Dif Viusid Control %
Desviacion Desviacion
vs Control
vs Control Positivos
Estandar Estandar
15 días
2.09
2.01
-0.08
0.19
0.28
0.09
30 días
2.26
2.03
0.23
0.24
0.26
45 días
2.29
2.19
-0.10
0.21
70 días
1.97
2.2
0.23
91 días
1.96
2.24
%Promedio
Grupal
2.11
2.13
Viusid %
Positivo
Dif Viusid
vs Control
100
88
-12
0.02
100
89
-11
0.29
0.08
100
94
-6
0.17
0.22
0.05
94
100
6
0.28
0.12
0.24
0.12
100
100
=
0.02
0.186
0.258
0.07
98.8
94.20%
-4.60%
Inhibición de la hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H3N2.
Monitoreo
Control
Promedio
Log
Viusid
Promedio
Log
Control
Viusid
Dif Viusid
Dif Viusid Control %
Desviacion Desviacion
vs Control
vs Control Positivos
Estandar Estandar
15 días
1.81
1.79
-0.02
0.14
0.22
0.08
30 días
1.90
1.69
-0.21
0.24
0.17
45 días
1.92
1.87
-0.05
0.23
70 días
1.62
1.79
0.17
91 días
1.60
1.83
%Promedio
Grupal
1.77
1.79
Viusid %
Positivo
Dif Viusid
vs Control
69
47
-22%
-0.07
69
35
-34%
0.28
0.05
81
59
-22%
0.19
0.22
0.03
25
47
22%
0.23
0.23
0.17
-0.06
25
65
40%
0.02
0.20
0.21
0.01
53.80%
50.60%
-3.20%
PROMEDIOS GLOBALES
TITULO H1N1
Grupos
TITULO H3N2
Promedio
%
Promedio
%
Log
Positivos
Log
Positivos
Control
151.85
98.89%
68.85
53.75%
Viusid
163.53
94.25%
71.30
50.59%
% Diferencia
11.68
-4.64%
2.45
-3.16%
Aparentemente el grupo con Viusid Vet Polvo* sentó mejores resultados (menor porcentaje de positivos)
durante los primero 45 días de haberlo consumido, posteriormente el porcentaje de positivos entre los
grupos es indistinto. Quizá esto sea debido a que el producto mejora el sistema inmune del cerdo antes
de la madurez inmunológica, la cual ocurre a los 65 días de edad, por lo cual la cantidad de cerdos
positivos a los 70 y 91 días fue ligeramente mayor en el grupo con Viusid Vet Polvo*.
Lo anterior concuerda con el hecho de que el grupo con Viusid presentó los promedios de títulos más
bajos también hasta el día 45 post-tratamiento (inmunidad más estable). Esto concuerda con los
resultados de PCR, ya que el grupo sin Viusid-Vet Polvo* presentó más circulación viral, lo cual resulta
en una mayor cantidad de anticuerpos, esto explica los resultados serológicos.
Gráficas de serología
Gráfica 1. Inhibición de hemoaglutinación para el virus de influenza porcina subtipo H1N1 para los
grupos control y Viusid-Vet Polvo* a 15, 30, 45, 70 y 91 días de tratamiento.
Grafica 1
En esta gráfica se observa que el grupo tratado mejoró continuamente la respuesta inmune desde el
primero y hasta el último muestreo.
Gráfica 2. Inhibición de hemoaglutinación para el virus de influenza porcina subtipo H3N2 para los grupos
control y Viusid-Vet Polvo* a 15, 30, 45, 70 y 91 días de tratamiento.
Grafica 2
Hacia el subtipo H3N2 no se presentó el mismo comportamiento sin embargo se debe considerar que el
principal subtipo circulante en los cerdos en crecimiento es el subtipo H1N1 de tal manera que la
respuesta inmune va a estar dirigida hacia H1N1 lo cual se evidencia en la grafica anterior.
En conclusión las pruebas de serología en el grupo con Viusid-Vet Polvo* sentó mejores resultados
(menor porcentaje de positivos H1N1 Y H3N2), durante los primeros 45 días de haberlo consumido;
posteriormente el porcentaje de positivos entre los grupos es indistinto. Esto debido a que el producto
mejora el sistema inmune del cerdo antes de la madurez inmunológica, la cual ocurre a los 65 días de
edad, por lo cual la cantidad de cerdos positivos a los 70 y 91 días fue ligeramente mayor en el grupo con
Viusid-Vet Polvo*
Lo anterior concuerda con el hecho de que el grupo con Viusid-Vet Polvo* presentó los promedios de
títulos
más
bajo
a
los
45
días
post-tratamiento
(inmunidad
más
estable).
Esto explica los resultados serológicos.
Esto concuerda con los resultados obtenidos de la prueba de PCR (Polymerase Chain Reaction), ya que
el grupo sin Viusid-Vet Polvo* presentó más circulación viral, lo cual resulta en una mayor cantidad de
anticuerpos.
Resultados de la prueba de RT-PCR (Polymerase Chain Reaction) Tiempo real.
El siguiente cuadro presenta los resultados de la prueba RT-PCR trabajada a partir de hisopos nasales
de ambos grupos, control y Viusid Vet Polvo*.
Muestras (+) >2.85 copias/reacción.
Monitoreo
Control
Promedio
Log
Viusid
Promedio
Log
Control
Viusid
Dif Viusid
Dif Viusid Control %
Desviacion Desviacion
vs Control
vs Control Positivos
Estandar Estandar
15 días
3.02
2.82
-0.20
2.01
1.31
-0.70
30 días
2.68
2.83
0.15
0.74
0.75
45 días
2.69
2.66
-0.03
0.58
70 días
2.62
2.56
-0.06
91 días
%Promedio
Grupal
2.33
2.12
2.66
2.59
Viusid %
Positivo
Dif Viusid
vs Control
40%
45%
5%
0.01
35%
40%
5%
0.46
-0.12
40%
25%
-15%
0.74
0.40
-0.34
35%
25%
-10%
-0.21
0.49
0.30
-0.19
5%
0%
-5%
0.03
0.91
0.64
0.26
31%
27%
-4%
El grupo control presenta mayor porcentaje de animales positivos a partir del tercer muestreo y una
desviación estándar mayor en todos los muestreos (excepto en el segundo monitoreo).
El grupo Viusid-Vet Polvo* inicio con mayor circulación viral (45% de positivos) y a partir del tercer
muestreo disminuyó la circulación viral.
La desviación estándar fue disminuyendo, esto podría asociarse a una mejor respuesta inmune,
generada por el Viusid-Vet Polvo*.
El promedio del título viral en cerdos con Viusid-Vet Polvo* fue disminuyendo a partir del segundo
muestreo.
Gráficas de RT-PCR tiempo real.
Gráfica 3. Carga viral del virus de influenza porcina para los grupos control y Viusid-Vet Polvo*
expresada en logaritmos por medio de la prueba RT-PCR tiempo real.
Grafica 3
Grafica 4. Porcentaje de animales positivos al virus de influenza porcina expresada en logaritmos por
medio de la prueba RT-PCR tiempo real.
Grafica 4
En graficas 3 y 4, el grupo Viusid-Vet Polvo* demostró mayor estabilidad inmunológica por el menor
coeficiente de variación de los títulos en logaritmos, lo cual deja en evidencia mayor protección del
sistema inmune, dando como resultando a partir de la segunda semana de tratamiento una disminución
de la carga viral así como reducción en el porcentaje de animales positivos.
Análisis estadístico de los parámetros productivos.
Los resultados de la prueba iniciada el 24 de febrero se analizaron con un modelo mixto lineal, con la
variable semana para probar el efecto intra-sujetos y la variable tratamiento (grupos control y Viusid-Vet
Polvo*) para probar el efecto entre sujetos, para todas las variables analizadas: peso (g), consumo de
alimento (Kg), ganancia diaria de peso (g) y conversión alimenticia (Kg) a través del paquete estadístico
IBM-SPSS19®.
Tanto peso (P=0.013), como consumo de alimento (P=0.001) y conversión alimenticia (P=0.033)
mostraron diferencias significativas a favor del grupo tratado con Viusid-Vet Polvo*.
Solo la ganancia diaria de peso no mostró diferencias atribuibles al tratamiento (P=0.758).
A continuación se muestran los gráficos de las medias de cada variable por semana.
Figura 1. Medias marginales del peso (g) semanal de los cerdos control y tratados con Viusid-Vet Polvo*
de la prueba iniciada el 24 de febrero.
Figura 2. Medias marginales del consumo de alimento (Kg) semanal de los cerdos control y tratados con
Viusid-Vet Polvo* de la prueba iniciada el 24 de febrero.
Figura 3. Medias marginales de la ganancia de peso (Kg) semanal de los cerdos control y tratados con
Viusid-Vet Polvo* de la prueba iniciada el 24 de febrero
Figura 4. Medias marginales de la conversión alimenticia (Kg) semanal de los cerdos control y tratados
con Viusid-Vet Polvo* de la prueba iniciada el 24 de febrero.
Conclusiones:
1. Con el uso de Viusid-Vet Polvo* en el alimento de crecimiento y finalización a una dosis de 1.2
Kg en cada tonelada de alimento mejoró los parámetros productivos durante el presente ensayo.
2. Con el uso de Viusid-Vet Polvo* como inmunomodulador en el alimento de crecimiento y
finalizador de cerdos en engorda se observó mejor estabilidad del sistema inmune a través de la
pruebas de inhibición de hemoaglutinación para el virus de influenza Porcina H1N1 y al mismo
tiempo redujo la carga viral del virus de IP determinada por medio de la prueba RT-PCR.
3. Viusid Vet Polvo* mejoró la ganancia diaria de peso en 3 gramos y el índice de conversión
alimenticia en 60 gramos promedio de alimento por Kilogramo de peso vivo.
4. Cabe mencionar que la ganancia diaria de peso no estuvo influenciada por un aumento en el
consumo de alimento, al contrario se obtuvo un mejor aprovechamiento de los nutrientes
evidenciado por un mejor consumo en el grupo tratado con Viusid Vet Polvo*.
Aplicar Viusid-Vet Polvo* a cerdos en engorda no causa ninguna alteración de la homeostasis ni
signología alguna tras la aplicación del producto pero si favorece una expresión productiva en las
razas de engorda de alta productividad
****Marca registrada, Viusid-Vet Polvo* Catalysis, España, distribuido por Dermaceutical México,
S. A. de C. V.
ATENTAMENTE
MVZ LUIS OCAMPO CAMBEROS
PROFESOR TIEMPO COMPLETO
DEPARTAMENTO DE FARMACOLOGIA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA (FMVZ)
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO (UNAM)
Bibliografía.
1. Dai, JH. Et al. Glycyrrhizin enhances interleukin-12 production in peritoneal macrophages.
Immunology 103 (2): 235-43, 2001.Sugawara, I, et al: Human interferon-gamma (IFN-gamma)
containing cells bear various surface
2. Growth Promoters. The Pig Site.
3. Hirabayashi, K: Antiviral activities of glycyrrhizin and its modified compounds against human
immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and herpes simplex type 1 (HSV-1), in vitro. Research
Laboratory, Minophagen Pharmaceutical. Japan, 1990.
4. Hughes, P.; Heritage, J.: Antibiotic Growth Promoters-Promoters in food animals. (2002).
University of Leeds, United Kingdom.
5. Krausse, R. et al: In vitro anti-Helicobacter pylori activity of extractum liquiritae, glycyrrhizin and its
metabolites. J. Antimicrobial Chemother. 54 (1):243-6, 2004.
6. Lin, JC: Mechanism of action of glycyrrhizic acid in inhibition of Epstein-Barr virus replication in
vitro. Antiviral. Res: 59 (1): 41-47, 2003.
7. Lo, HH. Et al. Glycyrrhizinic acid inhibits arylamine N-acetyltransferase activity in Klebsiella
pneumoniae in vitro. J Appl. Toxicol. 17 (6), 385-90, 1997.
8. Mordenti, A.: Probiotics and new aspects of growth promoters in pig production. Chiem-ptions
Mediterraneennes.
9. Ohtsuki, KIahida, N: Inhibitory effect of glycyrrhizin on polypeptide phosphorylation by polypeptide
dependent protein kinase (kinase P) in vitro. Biochem-Biophys-Res-Commun 157/2, 1988.
10. Phenotypic markers. Microbiol. Immunol. 30(10): 1049-59, 1986.
11. Pompei, R, Marccialis, MA: Effect of glycyrrhizinic acid on herpes simplex virus type 1
glycoprotein synthesis. Universitá di Cagliari, Italy.1G-MOD.83/2, 1985.
12. Tanaka, Y, et al: Antibacterial compounds of licorice against upper airway respiratory tract
pathogens; J. Nutr. Sci. Vitaminol (Tokyo) 47 (3):270-73, 2001.
13. Vondruskova, H.; Slamova, R.; Trckova, M.: Alternatives to antibiotic growth promoters in
prevention of diarrhea in weaned pigs: a review Veterinarian Medicine, 55, 2010 (5): 199-224.
14. Yechering Industrial Products, Co, LTD (2006). E-mail: infoechering.com.
15. Zdzislaw, M.: Organic acids as potential alternatives to antibiotic growth promoters for pigs.
Advances in pork production. Vol. 18 (2008).