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Jornada de Actualización Científica en Biología “Novedades del Congreso Europeo ESHRE 2013” ESTADO ACTUAL DE LOS MÉTODOS DE ELECCIÓN DEL MEJOR EMBRIÓN PARA TRANSFERIR DR. GUSTAVO MARTÍNEZ Fertilidad San Isidro Repaso de las técnicas de selección embrionaria que tenemos a disposición hoy en la embriología clínica SELECCIÓN EMBRIONARIA EMBRIONES CON MAYOR PROBABILIDAD DE IMPLANTACIÓN SELECCIÓN POR MORFOLOGÍA EMBRIONARIA • Es la más usada y es muy útil • Sistema subjetivo que no siempre permite seleccionar los embriones con la mejor probabilidad de implantación SELECCIÓN POR MORFOLOGÍA EMBRIONARIA • Morfología de los oocitos • Evaluación de pronúcleos • Clivaje temprano • Morfología celular • Fragmentación OBJETIVO ACTUAL El objetivo de muchos grupos de investigación es encontrar un sistema objetivo que permita identificar los embriones con el mayor potencial de implantación independizándonos de su morfología Este es el Santo Grial que hemos perseguido los biólogos desde el comienzo de la fecundación in vitro cuando Robert Edwards logró el primer nacimiento Rosslyn Chapel ESTRATEGIAS Y TECNOLOGÍA DISPONIBLES • Transferencia en estadio de blastocistos • Omics: o Metabolomics o Proteomics o Transcriptomics • array-CGH (Comprative Genomic Hybridization) • Monitoreo continuo (Time-lapse) TRANSFERENCIA EN ESTADIO DE BLASTOCISTOS • Extender el cultivo hasta Día 5 para transferir los embriones más avanzados. • Trabajos aleatorizados recientes muestran mayor tasa de éxito que en la transferencia en estadios previos. TRANSFERENCIA EN ESTADIO DE BLASTOCISTOS Contras: • Se necesita suficiente cantidad de embriones para poder extender el cultivo hasta el día 5. • Se necesitan buenas condiciones de cultivo para tener éxito. • Mayor tiempo para la expresión de fenómenos epigenéticos o Aumento de los partos pretérminos o Bajo peso al nacer o Mortalidad perinatal TRANSFERENCIA EN ESTADIO DE BLASTOCISTOS Algunos datos de interés - I Calidad del torfectodermo (según Gardner) es el mejor predictor de la capacidad implantatoria MCI A / TE B vs. MCI B / TE A MCI A ≈B TRANSFERENCIA EN ESTADIO DE BLASTOCISTOS Algunos datos de interés - II Cultivo bajo en O2 = Más blastocistos / Mejor calidad • Aumenta la velocidad de clivaje • Mayor número de células • Aumenta el intake de nutrientes • Mayor consumo de aminoácidos OMICS (Dra. Catherine Racowsky) Metabolómica: • Estudio de los metabolitos embrionarios en el medio de cultivo. • Evaluación de la presencia de productos de excreción o la determinación de que moléculas incorporó el embrión. • Muy interesante por ser no invasivo. OMICS (Dra. Catherine Racowsky) Proteómica: • Estudio de las proteínas expresadas por el embrión. • Permitiría identificar aquellas proteínas cuya presencia, ausencia o alteración se correlaciona con la posibilidad que tiene el embrión de implantarse. OMICS (Dra. Catherine Racowsky) Transcriptómica: • Estudio del conjunto de ARNs producidos por el embrión. • Estudia qué porción del genoma es transcripto a ARN mensajero, es decir, qué material genético es expresado en un embrión en cultivo. OMICS (Dra. Catherine Racowsky) • Diferentes trabajos han demostrado la ineficacia para predecir la capacidad implantatoria de un embrión empleando la Metabolómica y la Proteómica • Existen trabajos prometedores que muestran buenos resultados empleando la Transcriptómica arrays-CGH Se analiza el genoma completo en busca de ganancias o pérdidas de material genético, permitiendo identificar duplicaciones o ausencias de pequeñas regiones cromosómicas. arrays-CGH Se realiza sobre blastómeras aisladas o células del trofectodermo. arrays-CGH Permite transferir blastocistos genéticamente normales los cuales tendrán mayor poder de implantación. arrays-CGH • Se necesitan una cantidad suficiente de embriones de Día 3 para producir blastocistos. • Se necesitan buenas condiciones de cultivo para tener éxito. arrays-CGH Dos blastocistos de buena calidad (según clasificación de Gardner) vs. Un blastocisto seleccionado por CGH = Tasa de éxito Aumento de los múltiples MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) • Evalúa los embriones en base a su morfocinética. • Incubadora con cámara evaluando 24 x 7 con fotografía seriada sin estresar el embrión. • Relaciona la dinámica del desarrollo embrionario con un diagnóstico automático de que embriones tienen la probabilidad más alta de implantación. MONITOREO CONTINUO (Dr. Joe Conaghan) Se vio correlato entre la llegada a blastocisto y: • Tiempo desde la aparición de pronúcleos hasta el 1er clivaje • Tiempo desde el 1er clivaje hasta el 2o clivaje • Tiempo desde el 2o clivaje hasta el 3er clivaje • Tiempo desde el 3er clivaje hasta el 4o clivaje MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) • Tecnología cara • Time consuming • Aún debe demostrarse la correlación con el potencial de implantación mediante estudios prospectivos MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) Existen 3 sistemas disponibles en el mercado MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) Primo Vision Vitrolife Cámara dentro de la incubadora MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) EmbryoScope IVI Incubadora con cámara MONITOREO CONTINUO (Dr. Marcos Meseguer) Eeva Merck-Serono Cámara dentro de la incubadora Único que calcula automáticamente la probabilidad de implantación de los embriones gracias al desarrollo de un algoritmo FUTURO Dr. Meseguer Pese a ser extremadamente subjetivo e impreciso, la evaluación morfológica es todavía el “gold standard” para la selección embrionaria FUTURO Dra. Racowsky Transcriptoma + Time-Lapse + Selección morfológica convencional MUCHAS GRACIAS