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XI CONGRESO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA Y BIOINGENIERÍA “ANÁLISIS DE ASOCIACIÓN DEL POLIMORFISMO A66G EN EL GEN MTRR CON LOS DEFECTOS DE CIERRE DEL TUBO NEURAL EN UN HOSPITAL DEL SECTOR SALUD EN LA CIUDAD DE MÉRIDA, YUCATÁN, MÉXICO”. Rodríguez Estrada Lucía, González-Herrera L, Castillo-Zapata I, Pinto-Escalante D. Centro de Investigaciones Regionales. Universidad Autónoma de Yucatán. FAX: (999) 9 24 57 55. E mail: [email protected] Palabras clave: Polimorfismo A66G, MTRR, Defectos de cierre del tubo neural Introducción: La falta de cierre o bien la reapertura de una región del tubo neural, puede dar lugar a malformaciones como la espina bífida y anencefalia, entre otras, que en conjunto se conocen como defectos de cierre de tubo neural (DCTN) (1,2). El gen Metionina Sintetasa Reductasa (MTRR) codifica una proteína que participa en el metabolismo de los folatos, manteniendo la MS en estado activo(3).El polimorfismo A66G-MTRR ha sido asociado como un factor de riesgo para DCTN. Así mismo, la interacción entre los genes MTRR y MTHFR ha mostrado un aumento en el riesgo para DCTN(2,3). Sin embargo, existe controversia, ya que también se ha descrito que la variante A66G ejerce un efecto protector. En un estudio previo, demostramos que la frecuencia del polimorfismo C677T-MTHFR es elevada (54%) y no se asocia con los DCTN en la población yucateca (4). La frecuencia de la mutación A66G-MTRR y su asociación con los DCTN se desconocen en Yucatán, donde los DCTN son altamente prevalentes. Objetivo: Analizar la frecuencia del polimorfismo A66G del gen MTRR, como factor de riesgo asociado con los DCTN en un Hospital de Mérida, Yucatán, México. Metodología: Se analizaron 387 muestras de ADN: 113 de sujetos con DCTN, 61 padres y 92 madres de DCTN, así como 121 controles. La determinación del genotipo A66G se realizó mediante amplificación con la técnica de PCRRFLPs, utilizando la endonucleasa Afl III. Se incluyeron los haplotipos MTRR/MTHFR, este último fue genotipificado previamente. El análisis de asociación se realizó mediante la comparación de frecuencias alélicas y genotípicas entre casos y controles con una prueba de X2 (p<0.05), utilizando el paquete estadístico EpiInfo 2000. Se obtuvieron los valores de riesgo en términos de la razón de momios OR e IC 95%, tomando como valor de referencia igual a 1 a la frecuencia del genotipo o alelo silvestre. Resultados y Discusión. La frecuencia de heterocigotos AG y del alelo G fue significativamente mayor p<0.0001, en los controles (95.6 %, 50.8 %), que en los sujetos con DCTN (15 %, 8.4%), y sus madres (16 %, 9.2 %). Se encontró diferencia significativa para los haplotipos MTHFR 677/ MTRR: CT/AG, CC/AG presentes en padres y madres de sujetos con DCTN. El cuadro 1 muestra los valores del riesgo relativo OR con IC 95 % entre casos y controles. Los valores de riesgo obtenidos para el alelo G en los sujetos con DCTN, sus madres y padres, sugieren que el polimorfismo 66G se asocia con los DCTN como un factor de protección para disminuir el riesgo de desarrollar un DCTN o tener descendencia afectada en la población estudiada. Los resultados concuerdan con los del Reino Unido donde el alelo 66G en el gen MTRR es un factor de protección para DCTN (5) Por otro lado, apoya nuestro resultado, el hallazgo posterior de que el alelo 66A es el que presenta niveles elevados de Hcy, el cual es un factor asociado a los DCTN. Cuadro 1. Frecuencia genotípica y alélica del polimorfismo A66G-MTRR en sujetos con DCTN (DCTN); en sus madresy padres (MDCTN y PDCTN) y en el grupo control (control). Grupos OR CI (95%) P MDCTN vs MControl PDCTN vs PControl DCTN vs Control MDCTN vs MControl PDCTN vs PControl GG 0.01 AG 0.00 Alelo G 0.10 AG 0.12 Alelo G 0.16 GG 0.01 AG 0.02 Alelo G 0.10 CT/AG 0.01 TT/AG 0.03 CC/AG 0.01 CT/AG 0.05 TT/AA 0.52 CT/AA 0.39 CC/AG 0.03 0.00 – 0.22 0.00 – 0.02 0.05 – 0.19 0.05 – 0.32 0.08 – 0.33 0.00– 0.12 0.01– 0.05 0.05 – 0.17 0.00– 0.13 0.00 – 0.35 0.00 – 0.18 0.00– 0.59 0.02 – 8.20 0.02 – 4.28 0.00 – 0.58 0.0028 0.00005 0.00005 0.00001 0.000005 0.00001 0.00005 0.00005 0.00001 0.0005 0.0005 0.0005 0.5 0.5 0.005 Conclusión. La frecuencia del alelo G y de genotipo heterocigoto AG en sujetos con DCTN, así como en sus padres y madres mostró diferencia significativa comparada con sus controles, por lo tanto este polimorfismo podría representar un factor de protección para desarrollar algún DCTN y/o para tener descendencia afectada en la población yucateca. Agradecimiento a PRIORI y CONACYT-OMNILIFE con cuyo financiamiento se realizó esta investigación. Bibliografía. 1. 2. 3. 4. 5. Cotran R., Kumar V., Collins T. Patología estructural y funcional. Editorial Interamericana Mc Graw Hill. Pag.1346-1347. Wilson A, Platt R, Leclerc D., et al. . A common variant in metionina synthase reductase combined with low cobalamin (vitamin B12) increases risk for spina bifida. Mol Gen Met. 1999, Vol. 67, 317-323. Gaughan DJ., Kluijtmans LA., Barbaux S., et al. The methionine synthase reductase (MTRR) A66G polymorphism is a novel genetic determinant of plasma homocysteine concentrations. Atherosclerosis. 2001 Aug; 157(2): 451-456. González Herrera L, García Escalante G, Castillo Zapata I et al. Clin Genet 2002; 62, 5: 394 – 398. Relton Cl., Wilding CS., Jonas PA et al. Gene –gene interaction in folate – related genes and risk of neural tube defects in a UK population. J Med Genet 2004:41: 256-260.
