Download VIRUS DEL PAPILOMA Y CANCER DE CUELLO UTERINO

VIRUS DEL PAPILOMA Y CANCER DE CUELLO UTERINO
"Dr. Oscar Orozco Díaz
E
l carcinoma de cuello uterino
es causa importante de mortalidad en la mujer en muchos
países occidentales; en Colombia es
la neoplasia más frecuente en mujeres constituyendo alrededor del
25% de los tumores diagnosticados.
En el desarrollo del cáncer de
cervix se ha postulado recientemente al virus del Papiloma Humano (VPH) c o m o posible f a c t o r
etiológico de transmisión sexual.
Los papilomavirus son una familia
de virus ADN c o n la característica
común de inducir tumores epiteliales
benignos (papilomas o verrugas) en
sus huéspedes habituales. Hasta hoy
se han encontrado más de 60 tipos
de VPH, los cuales se encuentran
asociados a las lesiones y sitios de
infección específicos. Actualmente
la identificación de los diferentes tipos de VPH se realiza mediante técnicas de hibridización utilizando sondas de ADN específicas para c a d a
tipo.
En el humano, la infección del tracto
genital por VPH se asocia en general a los tipos 6,11,16 y 18. Aproximadamente un 80% de las biopsias de
cáncer genital contienen algún tipo
de VPH,fundamentalmente 16 o 18.
El análisis de la s e c u e n c i a de
nucleótidos de virus de papiloma
humano y de animales, ha reveLaboratorio
Actual/Año
9 No. 25 Agosto
1992
lado la existencia de una organización semejante del genoma en
el cual se observan las regiones E o
región de expresión temprana y L o
región de expresión tardía. Algunas
evidencias indican que en la región
de expresión temprana se encuentran genes relacionados c o n la
transformación celular, particularmente las regiones que codifican
para las proteínas E6 y E7 las cuales
han mostrado jugar un papel importante en el proceso oncogénico
en varios sistemas experimentales.
Por lo tanto, el estudio y detección
de estas proteínas y/o sus genes en
tejidos tumorales, así c o m o la valoración de la respuesta inmune
contra bs mismas podrían ser de gran
ayuda para el entendimiento de la
historia natural de la enfermedad y
por lo tanto podría repercutir en un
mejor diagnóstico temprano y manejo de esta neoplasia.
y E7 y a partir de ahí se infirió su
secuencia de aminoácidos. Con
esta información, en el Instituto de
Inmunología del Hospital
San Juan de Dios-Universidad Nacional se produjeron péptidos sintéticos que representaban parte de estas proteínas; estos péptidos se
utilizaron para generar anticuerpos
monoclonales c o n el objetivo de
crear herramientas (anticuerpos)
que nos permitiesen detectar de una
manera específica y sensible la presenci a
de
estas
proteínas
oncogénicas y valorar su nivel de expresbn en tejbos con diferentes grados de transformación maligna.
Debido al bajo nivel de expresión de
las proteínas codificadas por las
regiones E6 y E7 y ai no existir un sistema >x in vitro" de cultivo que permita obtener estas proteínas en cantidades suficientes, se ha buscado
otras alternativas para su estudio.
Los anticuerpos generados se escogieron inicialmente c o n el criterio
de reactividad específica frente a
los péptidos sintéticos; estudios posteriores mostraron qu e la mayoría
de ellos tenía reactividad cruzada
c o n componentes de células no infectadas por el virus. Solo uno de los
estudiados mostró una reactividad
específica (para E6 de VPH 18) pero
la expresión de esta proteína solo
pudo revebrse portécnbas muy sensibles y no por técnicas inmunohistoquímicas corrientes en las líneas celulares infectadas por el virus.
Es así c o m o en el laboratorio de
Inmunología del Instituto Nacional de
Cancerología (INC) se estudió la secuencia reportada de los genes E6
'Jefe Sección de Inmunología Instituto Nacional
d e Cancerología .
15
Dados estos resultados, y c o n el fin
de verificar la reactividad de estos
anticuerpos, se p r o c e d i ó a utilizar
otra alternativa de obtención de las
proteínas. Es así c o m o mediante el
empleo de técnicas de ingeniería
genética se logró aislar y clonar los
genes de estas proteínas, obteniéndolas posteriormente en bacterias mediante el empleo de un
vector de expresión piasmídico.
Este trabajo permitió observar qu e
era posible obtener cantidades suficientes de las proteínas recombinantes; hasta el momento hemos
trabajado c o n la proteína E6 de VPH
18, modelo en el cual los anticuerpos
generados contra los pép-tidos sintéticos no parece n reconocer de
manera clara y conveniente para
nuestros p r o p ó s i t o s la p r o t e í n a
recombinante. No obstante, hemos
logrado c o n esta proteína obtener
antisueros en. ratón qu e sí son bastante específicos de la misma, abriendo entonces un camino más seguro
para la obtención de anticuerpos específicos de E6 qu e nos permitirán en
un futuro cercano obtener la herramienta deseada para el estudio de
1ó
la presencia del virus en los diferentes estadios de la enfermedad,
Otros proyectos en curso en
nuestro laboratorio están relacionados de una parte con el estudio
de la respuest a inmune anti-VPH en
las pacientes con cáncer de cuello uterino, utilizando para ello las proteínas recombinantes y los péptidos
sintéticos ya obtenidos, para bus-
car la relación de esta respuesta
c o n la progresión de la enfermed a d . También nos proponemos
estudiar la relación entre estadio
histopatológico, presencia del virus
y activación de oncogenes c o m o
otra aproximación en el análisis de
los factores relacionados c o n la
progresión tumoral.
Laboratorio
Actual/Año
9 No. 25 Agosto
1992