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Bio-Influenza Código: 3001175 Inmunoensayo cromatográfico para la detección de influenza A y B en muestras faríngeas o nasales. USO DE LA PRUEBA La prueba rápida para la detección de Influenza A + B es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de la influenza A y B en muestras tomadas con hisopo en garganta o muestras de aspirado nasal. Su objetivo es ayudar en el diagnóstico diferencial rápido de la gripe A y las infecciones virales B. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA La influenza (comúnmente conocida como "gripe") es una infección viral altamente contagiosa de las vías respiratorias. Es una enfermedad contagiosa transmitida fácilmente a través de la tos y los estornudos que contienen virus vivos. Los brotes de gripe ocurren cada año durante los meses de otoño e invierno. Los Virus tipo A son típicamente más frecuentes que los virus de tipo B y están asociados con las epidemias de gripe más graves mientras que las infecciones de tipo B suelen ser más leves. El patrón oro de diagnóstico de laboratorio es el cultivo de células de 14 días con una de una variedad de líneas celulares que pueden apoyar el crecimiento de virus de la gripe. El cultivo de células ha limitado su utilidad clínica, ya que se obtienen demasiado tarde en el curso clínico de la intervención efectiva del paciente resultado. La reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) es un método nuevo que es generalmente más sensible que el cultivo con mejores tasas de detección 2-23%. Sin embargo, el RT-PCR es caro, complejo y debe realizarse en laboratorios especializados. La prueba rápida para Influenza A + B (Hisopo Nasal / Aspiración Nasal) detecta cualitativamente la presencia de influencia antígeno A y / o B en el hisopo nasal / garganta o especímenes de aspirado nasal, proporcionando resultados en 15 minutos. La prueba utiliza anticuerpos específicos para la influenza A y B de la influenza para detectar selectivamente la influenza A y la influenza B antígeno en frotis nasal, exudado faríngeo o especímenes aspirado nasal. En este ensayo, un anticuerpo específico a nucleoproteínas de la influenza A y la influenza B está impregnado en las regiones de línea de verificación del dispositivo de prueba. Durante la prueba, la muestra extraída reacciona con el anticuerpo para Influenza A y / o B de la influenza que se reviste sobre partículas. La mezcla migra hacia la membrana para reaccionar con el anticuerpo de la influenza A y / o B en la membrana y generar una o dos líneas de color en las regiones de prueba. La presencia de esta línea de color en una o ambas de las regiones de prueba indica un resultado positivo. Para servir como control del procedimiento, una línea coloreada aparecerá siempre en la zona de control si la prueba se ha realizado correctamente. MATERIALES SUMINISTRADOS 1. 20 Dispositivos de Prueba. 2. 20 hisopos estériles. 3. Reactivos de extracción. 4. Tubos de extracción. 5. Estaciones de Trabajo. 6. Inserto. MATERIALES NO SUMINISTRADOS 1. Temporizador. 2. Dispositivo de Aspiración. RECOLECCIÓN Y MANEJO DE LA MUESTRA Muestra de exudado nasofaríngea Inserte un hisopo esterilizado en una cavidad nasal de forma segura y recoger mucoepidermis de limpieza de cornetes varias veces. Muestra de exudado faríngea Inserte un hisopo esterilizado en la faringe y recoger mucoepidermis de limpieza principalmente de la región llamada pared-faríngeas y de la amígdala palatina varias veces, y debe tener cuidado de no hacer que la saliva se adhiera a la torunda. Aspiración nasofaríngea. Conecte un catéter de aspiración a una trampa de aspiración que se encuentra junto al dispositivo de aspiración, inserte el catéter a una de las cavidades nasales, inicie el dispositivo de aspiración y luego recoja la muestra del aspirado nasal. Sumerja un hisopo esterilizado dentro de la muestra nasal aspirada y recolectada y haga que el espécimen se adhiera a la esponja del hisopo. DESARROLLO DE LA PRUEBA Deje que las pruebas, los reactivos y/o controles alcancen la temperatura ambiente (15-30°C) antes de la prueba. 1. Retire el dispositivo de prueba de la bolsa de aluminio sellada y úsela lo antes posible. Se obtendrán mejores resultados si el ensayo se realiza inmediatamente después de abrir la bolsa de aluminio. 2. Coloque el tubo de extracción en la estación de trabajo. Sostenga la botella del reactivo de extracción verticalmente. Añada 10 gotas de solución (aprox. 0,5 ml) al tubo de extracción sin tocar el borde del tubo. 3. Coloque la muestra de hisopo en el tubo de extracción para liberar el antígeno del hisopo. 4. Retire el hisopo apretando la cabeza contra el interior del tubo de extracción para expulsar la mayor cantidad de líquido posible del hisopo. Deseche el hisopo de acuerdo con el protocolo de eliminación de residuos de riesgo biológico. 5. Coloque la punta del gotero en la parte superior del tubo de extracción. Coloque la placa en una superficie limpia y nivelada. Añada 3 gotas de solución a la muestra (S) y luego inicie el temporizador. 6. Deje el dispositivo en el tubo y lea los resultados en 10 minutos. No interpretare resultados después de 20 minutos. Nota: Concentraciones muy bajas del antígeno A y/o B podría resultar en una línea débil que aparece en las regiones de la prueba (A y B) después de un período prolongado de tiempo; por lo tanto, no lea los resultados después de 20 minutos. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS POSITIVO: Influenza B Positivo: Una banda de color aparece en la región de control (C) y otra línea de color aparece en la región de la banda B. Influenza A Positivo: Una banda de color aparece en la región de control (C) y otra línea de color aparece en la región de la banda A. Influenza A + B Positivo: Una banda de color aparece en la región de control (C) y otras dos bandas de color aparecen en la línea de la región A y la línea de la región B, respectivamente. NEGATIVO: Una banda de color aparece en la región de control (C). Ninguna banda aparece en la región de la línea (A / B). INVÁLIDO: No aparece ninguna Banda de control. Los resultados de cualquier prueba que no ha producido una banda de control en el momento de lectura especificada deben desecharse. Por favor, revise el procedimiento y repita con una nueva prueba. ALMACENAMIENTO Almacene a temperatura ambiente (15-30°C). La prueba es estable hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa sellada. La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar después de la fecha de caducidad. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. No utilizar después de la fecha de caducidad. 2. La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta el momento de usar. 3. Todas las muestras deben considerarse potencialmente peligrosas y manipularse de la misma manera que un agente de la infección. CONTROL DE CALIDAD Un control interno está incluido en la prueba. Una línea roja que aparece en la región de control (C) es el procedimiento de control interno. Confirme que el volumen de muestra es suficiente y que el procedimiento es correcto. Normas de control no se suministran con este equipo; Sin embargo, se recomienda que un control positivo y un control negativo sean utilizados para confirmar el procedimiento de prueba y para verificar su rendimiento. VALORES ESPERADOS La influenza A + B Dispositivo en Prueba Rápida (Hisopo nasal / Aspiración Nasal) ha sido comparada con una prueba comercial líder de RT-PCR. La correlación entre estos dos sistemas es más del 99%. CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO Sensibilidad, especificidad y precisión La Influenza A + B Dispositivo en Prueba Rápida (Hisopo Nasal /Aspiración Nasal) se ha evaluado con muestras obtenidas de diferentes pacientes. RT-PCR se utiliza como método de referencia para el Dispositivo de Influenza A + B Prueba Rápida (Hisopo Nasal /Aspiración Nasal). Las muestras se consideraron positivas si RT-PCR indicó un resultado positivo. Las muestras se consideran negativas si RT-PCR indicó un resultado negativo en la muestra del hisopo nasal. Muestras de exudado nasal Tipo A RT-PCR Influenza A+B Prueba Rápida Pos Neg. Total Pos Neg 100 2 Tipo B Total 102 RT-PCR Pos Neg 85 2 Total 87 1 180 181 2 200 202 101 182 289 87 202 289 Sensibilidad Relativa Especificidad Relativa Precisión Total Sensibilidad Relativa Especificidad Relativa Precisión 2 0 Neg. Total 46 Sensibilidad Relativa Especificidad Relativa Precisión Neg 48 94 1 95 241 241 2 158 160 243 289 96 159 255 100% 97.9% 99.2% 99.4% 99.3% 98.8% Reactividad con cepa de influenza humana La influenza A + B dispositivo en Prueba Rápida (Hisopo nasal / Aspiración Nasal) fue probado con las siguientes cepas de la Influenza humana y una línea perceptible en las regiones de la prueba fue observada. Influenza Virus A A/NWS/3310 (H1N1) A/Hong Kong/8/68(H3N2) A/Port Chalmers/1/73(H3N2) A/WS/33(H1N1) A/Nueva Jersey/8/76(HsN1) A/Mal/302/54(H1N1) Influenza Virus B Brillante B/R5 B/Rusia/69 B/Lee/40 B/Hong Kong 5/72 Prueba Especificidad con diversas cepas virales Descripción Nivel de Prueba Adenovirus C Humano 5.62 x 105 TCID50/ml Adenovirus B Humano 1.58 x 104 TCID50/ml Adenovirus tipo 10 3.16 x 103 TCID50/ml Adenovirus tipo 18 1.58 x 104 TCID50/ml Coronavirus Humano OC43 2.45 x 106 LD50/ml Coxsackievirus A9 2.65 x 104 LD50/ml 1.58 x 105 TCID50/ml Coxsackievirus B5 1.58 x 107 TCID50/ml Herpes virus Humano 5 1.58 x 104 TCID50/ml Ecovirus 2 3.16 x 105 TCID50/ml Ecovirus 3 1x104 TCID50/ml Ecovirus 6 3.16x106 TCID50/ml Virus Simple Herpes 1 1.58 x 106 TCID50/ml Herpes virus Humano 2 2.81 x 105 TCID50/ml Rinovirus Humano 2 2.81 x 104 TCID50/ml Rinovirus Humano 14 1.58 x 106 TCID50/ml 99.0% Sarampión 1.58 x 104 TCID50/ml 98.9% 98.6% Paperas 1.58 x 104 TCID50/ml Sendai Virus 8.89 x 107 TCID50/ml Virus Parainfluenza 2 1.58 x 107 TCID50/ml Virus Parainfluenza 3 1.58 x 108 TCID50/ml Virus Sincitial Respiratorio 8.89 x 104 TCID50/ml Virus Sincitial Humano Respiratorio 1.58 x 105 TCID50/ml Rubeola 2.81 x 105 TCID50/ml Varicela Zoster 1.58 x 103 TCID50/ml 5 1 Tipo B Total 59 RT-PCR Pos Neg 65 1 150 153 4 151 212 69 Total 66 162 166 163 232 95.1 94.2% 99.3 99.4% 98.1 97.8% Total Pos 98.9% Neg 6 46 Pos Total 8.89 x 106 TCID50/ml Pos 3 Neg Rinovirus Humano 16 RT-PCR Neg. Influenza A+B Prueba Rápida Pos Tipo B RT-PCR 97.7% Tipo A Pos Tipo A RT-PCR 99.0% Muestras de exudado faríngeo Influenza A+B Prueba Rápida Muestras de aspirado nasal LIMITACIONES DE LA PRUEBA 1. La influenza A + B dispositivo en prueba rápida (Hisopo Nasal /Aspiración Nasal) es sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. La prueba se debe utilizar para la detección de la influenza A y / o B del virus en frotis nasal, exudado faríngeo o espécimen aspirado nasal. Ni el valor cuantitativo ni la tasa de aumento de la influenza A y / o la concentración de virus B pueden determinarse mediante esta prueba cualitativa. 2. La influenza A + B Dispositivo en Prueba Rápida (Hisopo Nasa /Aspiración Nasal) sólo indicará la presencia de la influenza A y B o virus en la muestra de ambas cepas viables y no viables de Influenza A y B. 3. Al igual que con todas las pruebas de diagnóstico, los resultados deben interpretarse junto con otra información clínica. 4. Un resultado negativo obtenido de este kit debe ser confirmado por la cultura. Un resultado negativo se puede obtener si la concentración de la influenza A y / o B presente en el hisopo nasal no es adecuada o está por debajo del nivel detectable de la prueba. 5. El exceso de sangre o moco en las muestras del frotis pueden interferir con el rendimiento de la prueba y pueden dar un resultado positivo falso. La exactitud de la prueba depende de la calidad de la muestra. Los falsos negativos pueden ser resultado de la recolección inadecuada de la muestra o un mal almacenamiento. 6. El uso de aerosoles nasales a concentraciones elevadas puede interferir con los resultados. 7. Un resultado positivo para la influenza A y / o B no se opone a una confitura subyacente con otro patógeno, por lo tanto la posibilidad de una infección bacteriana subyacente debe ser considerada. REFERENCIAS 1. Williams, KM Jackson MA Hamilton M (2002) Pruebas de diagnóstico rápido para URI's en niños, impacto el médico Toma de Decisiones y Costa. 2. Betts, R.F. 1995 Virus de la Influenza, p. 1546-1567, el Principio y Práctica de Enfermedades Infecciosas, 4ª ed. Churchill Livingstone. 3. Recomendaciones de la OMS sobre el uso de pruebas rápidas para el diagnóstico de la influenza Mundial. Organización de la Salud. Julio de 2005. Distribuido por: Grupo Industrial MexLab S.A. de C.V. 01800-111-4343 www.grupomexlab.com Rev. 10-2016