Download nmx-f-200-1971. alimentos. método de prueba para la

RECOPILADO POR:
EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS
NMX-F-200-1971.
ALIMENTOS.
MÉTODO
DE
PRUEBA
PARA
LA
DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE BACTERIAS LICUEFACIENTES EN
GRENETINA. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS.
1. ALCANCE
La presente Norma establece el procedimiento para determinar la presencia de bacterias
licuefacientes en 0.01 g grenetina.
2. APARATOS Y EQUIPO
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Balanza analítica con sensibilidad de 0.0001 g.
Incubadora con regulador de temperatura
Autoclave capaz de mantener 1 ± 0.05 kg/cm2) de presión manométrica.
Baño de agua con regulador de temperatura
Tubos de ensayo de 16 x 150 mm
Equipo usual de laboratorio (previamente esterilizado):
3. MATERIALES Y RECTIVOS
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Algodón no absorbente
Grenetina
Preparación de los tubos
Se pesan 64 g de grenetina y se humedecen, durante una hora en 500 ml de agua destilada.
Una vez humedecida la grenetina se funde en baño de agua a 60ºC y se llenan los tubos de
ensayo con 10 ml de la solución. Se tapan con algodón y se esterilizan a 1.05 kg/cm2 durante
15 minutos. Se sacan del autoclave y se dejan solidificar a temperatura ambiente
4. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
De la muestra obtenida como se indica en la Norma Mexicana de Calidad para Grenetina
Pura Comestible NMX-F-043 en vigor se homogeneiza, y se toma 1 g para la determinación.
5. PROCEDIMIENTO
5.1 Principio
Se hace un cultivo en un medio de grenetina, efectuándose la incubación a 37ºC durante 48
horas. La aparición de nata y licuación del medio indican la presencia de bacterias
licuefacientes
5.2 Determinación
5.2.1 Se pesa un gramo de grenetina usando un vidrio de reloj flameado en un mechero. Se
pasa la muestra a un frasco de 150 ml que contenga 99 ml de agua destilada estéril y fría. Se
deja reposar durante 2 horas a temperatura ambiente, al cabo de las cuales se funde la
muestra en baño de agua a 45ºC máximo. Se agita hasta disolución completa, cuidando que
la muestra no se derrame.
5.2.2 Se inoculan los tubos que contienen el medio de cultivo con 1 ml de la solución de
muestra y se tapan con algodón. Se debe tener la precaución de quemar los algodones y la
pipeta con la que se hace la inoculación se flamee previamente y no toque las paredes del
tubo.
Se agitan los tubos con un movimiento de rotación y se llevan a la incubadora a 37ºC
durante 48 horas.
6. CÁLCULOS Y RESULTADOS
La aparición de nata y licuación del medio de cultivo dentro de las primeras 48 horas indican
la presencia de bacterias licuefacientes.
7. REPRODUCCIÓN DE LA PRUEBA
Se deben efectuar un mínimo de 4 determinaciones al mismo tiempo, para poder tener
seguridad en la prueba.
8. APÉNDICE
8.1 Norma de referencia
8.1.1 Norma Mexicana de calidad para grenetina pura comestible NMX-F-043-1970 en
vigor.
8.2 Bibliografía
The bacteriological Examination of Water Supplies, Report No. 71 on Public Health and
Medical Subjects. Ministry of Health. Ministry of Housing and Local Goverment. London
1961.