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Aislamiento de hongos y bacterias
antagonistas a Rosellinia bunodes
en café
T.A. Melgarejo, P. Klein y C.E. Fribourg
Universidad Nacional Agraria La Molina
Departamento de Fitopatología
Importancia:
ƒ Aunque no existen datos publicados, la enfermedad es muy
común en todas las zonas productoras de café… cacao, y
otros cultivos de selva
ƒ Plantaciones antiguas o nuevas instaladas en bosques
secundarios.
ƒ No existe control químico disponible.
ƒ Estrategia actual de control: prácticas culturales
ƒ Parásito facultativo que forma “rizomorfos” expuesto a
biocontroladores? … micoparásitos.
Objetivo:
ƒ Encontrar un biocontrolador eficiente capaz de prevenir o
reducir los daños causados por Rosellinia bunodes en
plantas de café.
Materiales y métodos:
ƒ Patogenicidad e identificación de Rosellinia sp. Utilizando
características morfológicas de las estructuras vegetativas y de la
colonia en medio maiz tierno agar (MTA) – Fernandez & Lopez
(1964).
ƒ Identificación de suelos supresivos (Campos con presencia de la
enfermedad, pero bajas incidencias – historial de campo) – Alto
Huallaga.
ƒ Verificación de la supresividad – utilizando el ensayo de
crecimiento en tubos – Dhingra & Sinclair (1995)
Suelo autoclavado
Suelo autoclavado : suelo original (9:1)
Suelo autoclavado : suelo original (1:1)
Suelo calentado a 60ºC x 30 min
Suelo original
T1
T2
T3
T4
T5
Materiales y métodos:
ƒ Medios para el aislamiento de antagonistas:
ƒ Bacterianos – Pseudomonas agar, Tryptic soy agar,
Cetrimid agar, Nutriente agar
ƒ Actinomycetos – Chitin agar, Yeast malt agar
ƒ Micoparásitos – Placa pre-colonizada por Rosellinia sp.
(Krauss & Bustamante, 1999)
ƒ Evaluación de la capacidad antagonista
ƒ Bacterias y actinomicetos: Utilizando membranas de
celulosa (Gibbs, 1967).
ƒ Micoparasitos: Utilizando placas precolonizadas por
Rosellinia sp. (Krauss et al., 1999).
Resultados: Patogenicidad
ENFERMA
Síntomas secundarios
SANA
Resultados: Patogenicidad
SANA
ENFERMA
SANA
Síntomas primarios
ENFERMA
Micelio con septas
protuberantes
Resultados: Patogenicidad
Ensayo en microparcelas para evaluar los
antagonistas in vivo
Resultados: Suelos supresivos
T1: Suelo autoclavado
T2: Suelo autoclavado : suelo original (9:1)
T3: Suelo autoclavado : suelo original (1:1)
T4: Suelo calentado a 60ºC x 30 min
T5: Suelo original
T1
T2
T3
T4
T5
Resultados: Evaluación de la capacidad antagónica
Crecimiento in vitro (mm)
9.0
8.0
a
LSD=1.15
a
b
7.0
6.0
bcd
T
cde
bc
5.0
cde
4.0
cde
de
e
f
3.0
f
fg
2.0
1.0
hg
h
0.0
T
SM5 SM1 SM7 SM3 RN5 RN1 SM4 RN6 SM2 RN3 RN2 SM6 RN4 RN7
Aislamientos antagonistas (bacterianos-actinomycetos)
RN7
Resultados:
Evaluación de la
capacidad
hiperparásita
Crecimiento de los micoparasitos
(cm)
9.0
8.0
a
a
LSD=1.89
a
7.0
ab
6.0
bc
5.0
4.0
c
3.0
2.0
d
1.0
d
d
T
THH3
RNB1
HR05
HH9
HH3
T. virens
Micoprasitos
T. harz
HC3
HRO5
RNB1
THH3
THH1
0.0
Conclusiones:
ƒ Se ha aislado altas poblaciones de bacterias, actinomycetos y
micoparasitos aparentemente asociados a la supresividad a
Rosellinia sp. en café.
ƒ Un aislamiento bacteriano identificado como Microbacterium sp.
inhibió completamente el crecimiento in vitro de Rosellinia sp.,
aunque solo fue fungistática.
ƒ Se identificó cuatro aislamientos de Trichoderma spp. como fuertes
micoparásitos in vitro. Actualmente estos potenciales
biocontroladores están siendo ensayados en ensayos in vivo bajo
condiciones de invernadero utilizando microparcelas.
Agradecimiento:
Este proyecto está siendo financiado por la International Foundation
for Science (IFS), Suecia. Grant 3282-1
Colaboraron en el trabajo: Carola De La Torre y Gracile Sangay
Universidad Nacional
Agraria la Molina