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Tema 7
ENZIMAS
PROPIEDADES GENERALES DE LOS ENZIMAS
Son los catalizadores de las reacciones químicas que se producen
en los sistemas biológicos.
Tienen gran poder catalítico
Poseen un elevado grado de especificidad de sustrato
Funcionan en soluciones acuosas en condiciones suaves de pH y temperatura
La mayoría de las enzimas son proteínas:
Cofactores: iones inorgánicos
Coenzimas : complejos orgánicos
Holoenzima
Apoenzima
grupos prostéticos
Las enzimas se clasifican según la reacción catalizada:
•Nomenclatura:
-Número clasificatorio de 4 dígitos (E.C.)
-Nombre sistemático
-Nombre trivial
ATP + D-Glucosa
ADP + D-Glucosa-fosfato
Número clasificatorio:
E.C. 2.7.1.1.
2.Clase: Transferasa
7. Subclase: Fosfotransferasa
1.Fosfotransferasas con OH como aceptor
1. D-glucosa como aceptor del fosfato
Nombre sistemático: ATP glucosafosfotransferasa
Nombre trivial: hexoquinasa
Mayor eficiencia catalítica. Debido a la capacidad de los enzimas de unir
específicamente ligandos y orientarlos adecuadamente, las reacciones enzimáticas
son 106 – 1012 veces más rápidas que las no catalizadas o las catalizadas por
catalizadores químicos no enzimáticos.
Capaces de catalizar reacciones bajo condiciones ambientales suaves
(Temperatura ambiente, pH neutro, presión atmosférica...). En general, los
catalizadores químicos no enzimáticos requieren condiciones más extremas, como
temperatura y presión elevadas, pH extremo...
Especificidad. Los enzimas reconocen específicamente reactivos y productos.
Raramente existen reacciones secundarias en la catálisis enzimática.
Capacidad catalítica regulable. La actividad de los enzimas puede aumentar
o disminuir mediante mecanismos de regulación ( regulación alostérica,
modificación covalente, cambios de la cantidad de enzima)
• En condiciones fisiológicas las reacciones sin catalizar tienden a ser lentas.
• Muchas reacciones bioquímicas suponen situaciones poco probables.
• Una enzima soluciona estos problemas proporcionando un ambiente
tridimensional favorable a la reacción.
SITIO ACTIVO
Características de los centros activos
1. El centro activo es una hendidura tridimensional formada por grupos
que provienen de diferentes partes de la secuencia lineal de aminoácidos.
2. Supone una pequeña porción del volumen total del enzima.
3. Son hoyos o hendiduras en los que el agua queda normalmente excluida.
4. Los sustratos se unen al enzima por numerosas fuerzas débiles.
5. La especificidad del enlace depende de la disposición exactamente
definida de los átomos del centro activo.
Interacciones en el centro activo
 Interacciones entre S y E:
1. No covalentes: puente de hidrógeno, van der Waals, electrostáticas,
hidrofóbicas.
2. Covalentes: enlace E-S ó grupos que se transfieren entre E y S.
- Unión a cofactores
- Unión a cadenas laterales de aminoácidos
 La máxima intensidad en la interacción aparece sólo durante
el estado de transición.
 Las interacciones que estabilizan el estado de transición no tienen porqué
ocurrir sólo en el centro activo, sino también en otros lugares alejados.
 Propiedades importantes de los enzimas: especificidad, catálisis, regulación.
Las enzimas alteran las velocidades
de reacción pero no los equilibrios
La energía de fijación entre enzima y
sustrato proporciona especificidad de
reacción y catálisis
CINÉTICA ENZIMÁTICA
La concentración de
sustrato afecta la
velocidad de reacción
catalizada por enzimas
La constante de Michaelis-Menten (KM) es un parámetro cinético importante pór
múltiples razones:
1.- KM es la concentración de un sustrato para la cual la velocidad de reacción es la
mitad de la velocidad máxima.
2.- El valor de KM caracteriza la interacción de la enzima con un sustrato dado.
A menor KM, mayor afinidad de la enzima por el sustrato, y a mayor KM, menor
afinidad.
Unidades de la velocidad de reacción
Se define la unidad de actividad enzimática (U) como la cantidad
de enzima que cataliza la conversión de 1 µmol de sustrato en un
minuto. (1 µmol/min).
Regulación de las reacciones enzimáticas
La actividad de los enzimas puede regularse por:
1.- Expresión génica.
2.- Efecto del pH.
3.- Efecto de la temperatura.
4.- Presencia de inhibidores.
5.- Modulación alostérica.
6.- Modulación por proteolisis.
· Compiten con el sustrato por el sitio activo.
· Estructura semejante a la del sustrato.
· Forman complejos EI (enzima-inhibidor).
· Ejemplo: AINEs
· Afectan a la Km
La Vmax no se altera.
Km aumenta
La inhibición competitiva y no competitiva son distinguibles cinéticamente.
· Se unen a un sitio diferente del sitio activo.
· Pueden unirse a E y a ES.
INHIBIDORES IRREVERSIBLES
· Inactivan permanentemente el enzima.
· Permiten determinar los residuos del sitio activo.
· Inactivadores suicidas: moléculas generalmente inertes que sólo cobran
actividad cuando son transformadas por el enzima al que inactivan. El enzima los
reconoce como sustratos, los modifica y reaccionan covalentemente con el enzima.
(Ej: difluormetilornitina en el tratamiento de la tripanosomiasis africana)
Retroalimentación en regulación de la actividad enzimática
Modificación covalente
ACTIVACIÓN POR CORTE PROTEOLÍTICO
· Es una modificación covalente: se rompe un enlace covalente.
· Irreversible.
· Forma común de regulación de enzimas con riesgo para la célula.
· Zimógenos: se sintetizan como precursores (peligrosos); se activan con un corte
proteolítico, se elimina un trozo de la molécula.