Download La muestra se realiza en asepsia alrededor del mechero Bunsen.

Realización de
antibiograma de una cepa
bacteriana.
Materiales disponibles
Tubo con suero fisiológico estéril
Agar con
bacterias
Medio de
cultivo
Mueller
Hinton
torunda
Plano de
colocación
Discos Antibioticos
1. Preparación del
inoculo
1.1. Con un asa de siembra estéril, pon una
colonia bacteriana en el agar de la placa de Petri .
Advertencia! La muestra se realiza en asepsia
alrededor del mechero Bunsen.
1.2. Haz una suspensión con
esta colonia bacteriana en
una tubo estéril con suero
fisiológico (5mL).
En el suero, frota el asa de
inoculación en las paredes
del tubo para dispersar
todas las bacterias.
1.3. Repite 4 veces, para
tener introducidas 5
colonias bacterianas en el
tubo.
ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia
alrededor del mechero Bunsen.
I
1.4
Homogeneiza tu
tubo mediante rotación
manual y escribe « I » en
este tubo.
2. Inoculación del medio
Mueller Hinton
antibiograma
2.1. En el tubo de
inoculación “I”, inserta
una torunda estéril.
Humedece la
torunda y escurre
el exceso de
líquido en la
pared del tubo.
ADVERTENCIA! La muestra se realiza en asepsia
alrededor del mechero Bunsen.
2.2. Inocúlalo en el medio de Mueller Hinton por
extensión de la torunda en su superficie.
Consigue estrías estrechas.
2.3. Reproduce la operación dos veces rotando
60° la caja cada vez para asegurarnos una
buena distribución del inóculo en la superficie
del medio:
60°
Rayas en
3 pases
60°
=
2. Coloca los discos
antibióticos.
3.1. Posiciona el agar Mueller Hinton
previamente sembrado en el plano de
depósito previsto.
3.2. Con unas
pinzas estériles,
situa los discos
antibioticos en la
superficie de agar
Cuando rellenas con discos, aplica una pequeña
presión para segurar el mantenimiento del disco,
pero no demasiado para evitar el riesgo de
perforación del agar.
4. Incubación de medio
Incuba la caja, en la posición invertida, 16 h
a 37°C mínimo
5. Analiza tus resultados
5.1. Tras la incubación, mide el diametro de
las zonas de inhibición del crecimiento
alrededor de los discos de antibióticos
5.2. Usa la tabla de lectura, para concluir la
sensibilidad o la resistencia de la cepa a los
diferentes antibióticos testados
Antibiótico
testado
Resistencia si el
diametro de
inhibición es
menor que :
Sensible si el
diametro de
inhibición es
mayor que:
Ampicilina
14 mm
19 mm
SXT
10 mm
16 mm
Eritromycina
17 mm
22 mm
Gentamicina
14 mm
16 mm
6. Conclusión
Sugiere un antibiótico adecuado para el
tratamiento de la infección nosocomial
causada por tu bacteria