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Transcript
BACTERIOLOGIA
OBJETIVO GENERAL
Conocer las características
macroscòpicas, microscópicas,
fisiopatològicas e inmunológicas de los
diferentes grupos bacterianos frecuentes
en nuestro medio así como las técnicas y
procedimientos para identificarlos y
caracterizarlos en el laboratorio
OBJETIVOS
Reconocer los diferentes tipos de bacterias,
que proporcionan elementos que facilitan el
diagnostico de la bacteria en una muestra
clínica
Desarrollar talleres que facilitan la
profundización y comprensión de diferentes
aspectos de la fisiopatogenia de los
microorganismos a estudio.
Favorecer la formación integral a través de
las diferentes actividades propuestas en el
aula y por fuera de esta.
FAMILIA
MICROCOCCACEAE
GÉNEROS
Staphylococcus
Micrococos
Planococcus
Stomatococcus
ESTUDIOS DE HOMOLOGIAS DE
ACIDOS NUCLEICOS
Micrococcus=
Actinomyces
Artrobacterias
Staphylococcus=
Streptococcus
Enterococcus
Lactobacillus
Bacillus
Habitat
PIEL
MUCOSAS
OTROS SITIOS DEL
CUERPO
NATURALEZA
AMBIENTE
AMPLIA DISTRIBUCION
Difícil interpretaciónCorrelación con el cuadro clínico
Bacterias Gram Positivas
Aislados con mayor frecuencia
de muestra clínicas
Prueba de catalasa positiva
Micrococaceae
Staphylococcus
Positiva
Stomatococcus: débil
O negativa .
Planococcus
Micrococcus
PATOLOGIAS
FOLICULITIS
FURÙNCULOS
ABSCESOS
FARINGITIS
ENDOCARDITIS
ERISIPELA
CELULITIS
NEUMONIA
BACTEREMIA
Planococcus
MÒVILES
FLAGELOS 1- 3
PIGMENTO
AMARILLO
NARANJA
ASACAROLITICOS
COCOS GRAM
POSITIVOS
PARES O TÈTRADASS
FRUTOS DE MAR
CONGELADOS
HALOTOLERANTES
-1% a + de 15% NaCl
AMBIENTE
MARINO
Especies
Planococcus citreus ( 12% Na cl)
Planococcus kocuri
Planococcus halophilus( exmiembro del
gènero) = Micrococcus
No han sido implicados en enfermedades
humanas.
Micrococcus
Ambiente
Piel
Pigmentos carotenoides
Uso industrial:
Detección Agentes
antimicrobianos en
comidas para animales y
cosméticos.
Aislamiento
OCASIONAL
MUESTRAS CON CONTAMINANTES DE
LA PIEL , MUCOSAS O AMBIENTES.
OPORTUNISTA: sepsis, peritonitis
meningitis.
Especies
M. luteus
únicas especies que se
mantienen en el género ARN 16 S
M. lylae
M. varians
M. roseus
M. agilis
M. kristinae
M. nishinomiyaensis
M sedentarius
M. halobius
Stomatococcus
S. mucilaginosus.
Coco Gram positivo.
Microbiota normal T.R
Inmóvil.
Encapsulado
Catalasa positivo dèbil o
negativo.
Falta de desarrollo en
agar nutritivo con 5% de
NaCl. Lo diferencia de los
Micrococcus y
Staphylococcus.
Infecciones humanas
Endocarditis post
cateterismo cardiaco
Endocarditis en
válvulas naturales y
protésicas.
Sepsis asociada a
trauma de cabeza y
cuello, quimioterapia
del cáncer.
Endoftalmitis con
posterioridad a
implante de cristalino
Procesos malignos
Staphylococcus
33 especies
17 encontrados en muestras
clínicas.
Contacto cercano con animales
Staphilococcus capitis: Microbiota
normal humana: piel y glándulas
sebáceas del cuero cabelludo,
frente y cuello.
Staphilococcus auricularis:
conducto auditivo externo.
Staphilococcus hyicus: dermatitis
en ganado porcino
Staphilococcus intermedius:
infecciones en perros (
Infecciones cutáneas),
mordeduras por perros.
Staphilococcus delphini: delfines
Staphilococcus felis: gatos
domésticos
HABITAT
PIEL
MUCOSAS DEL HOMBRE Y ANIMALES
SERES HUMANOS INFECTADOS POR CONTACTO FRECUENTE
ENZIMA COAGULASA
IDENTIFICA
Staphylococcus
patògenos.
Coagulasa positivo:
Staphilococcus
aureus
Coagulasa negativo:
Staphilococcus epidermidis
Staphilococcus
saprophyticus
Saphylococcus aureus
Patógeno humano
Ambiente externo
Fosas nasales 20 - 40 %
adultos.
pliegues cutáneos.
Perinè
Axilas
Vagina
Microbiota normal
oportunista
Staphilococcus aureus
Cocos gram positivos
FACTORES PREDISPONENTES
A INFECCIONES GRAVES
DEFECTO EN LA DESTRUCCIÒN INTRACELULAR
DESPUÈS DE LA FAGOCITOSIS
FACTORES PREDISPONENTES
A INFECCIONES GRAVES
LESIONES
CUTÀNEAS
cirugías
cuerpos extraños,
suturas, catéteres
prótesis.
infecciones por otros
agentes como virus.
tumores malignos
FACTORES PREDISPONENTES
A INFECCIONES GRAVES
administración profiláctica o terapéutica de
agentes antimicrobianos
Propiedades Vs enfermedad
FACTORES DE
VIRULENCIA
CAPSULA.
Exopolisacarido
evitando la fagocitosis
Adherencia
Inmunotipificaciòn del
polisacárido capsular:
8 tipos.
70-80% PERTENECEN AL SEROTIPO CAPSULAR 8
Resistentes a la penicilina serotipo 5
PROTEÌNA A
unida a peptidoglicano y
se puede segregar al
medio
interfiere en la
ingestión por los
leucocitos PMN.
fagocitosis
Base de las pruebas
de aglutinación.
Constituyente de la pared
Peptidoglicano
Ácidos teicoicos:
adherencia a la
superficie de las
mucosas.
Rigidez y estabilidad.
Enzimas
CATALASA: inactiva el peroxido de hidrogeno y
radicales tòxicos formados por el sistema
MIELOPEROXIDASA .
COAGULASA: recubre las células bacterianas
con fibrina y las hace resistentes a la
fagocitosis.
FIBROLISINAS: diseminación de la infección a
tejidos contiguos.
LEUCOCIDINA: lisa granulocitos y macrofagos,
compuesta de 2 proteinas termolabiles .
ENZIMAS
HIALURONIDASA:
hidrólisis de matriz
intercelular del muco
polisacáridos de los
tejidos permite la
diseminación del
microorganismo.
ESTAFILOCINASA:
degrada coagulos de
fibrina por conversiòn del
plasminogeno a la
enzima fibrinolitica,
plasmina
ENZIMAS
LIPASA: degrada acidos grasos protectores de
la piel diseminación en tejidos cutáneos y
subcutáneos.
TOXINAS
ENTEROTOXINAS: responsable de la
características clínicas de la intoxicación
alimentaría.
Mecanismo de acción desconocido
Tto de sostén.
Flanes ensaladas de papa, carnes
procesada helados postres.
Diarrea y vomito 2-8 horas
Toxinas
Hemolisina, leucocidinas, toxina del
síndrome del shock tóxico, toxina
epidermolítica y enterotoxinas.
Citotoxinas como:`
alfa toxina: destruye monocitos y
plaquetas (forma anillo polimérico)
beta toxina: esfingomielinasa C
gamma toxina: hemolítica
delta toxina: tipo Detergente
Sindrome de shock tóxico SST
Multisistèmica
Estafilocóccico:
Producción de TSST-1
Cuadro Clínico:
Fiebre > 38.9 ºC
Eritrodermia difusa
Vòmito
Diarrea
Insuficiencia renal
Cefalea
Escalofrío
Faringitis
conjuntivitis
Hipotensión arterial
Descamación de la piel
Sistémica: SNC, hepático,
hematológico, muscular o
ELUDIR LOS PASOS DEL PROCESAMIENTO ANTIGENICO
Staphilococcus aureus
Infecciones
cutáneas benignas
hasta enfermedades
sistémicas
potencialmente
fatales.
Infecciones cutáneas
Foliculitis simple:
Infección Superficial
que Rodea Los
folículos Pilosos.
INFECCIONES EN LA EPIDERMIS
FOLICULITIS
Agente Causal: Staphylococcus aureus
INFLAMACIÓN UTER INA
BOVINOS
Pared uterina : Metritis
Serosa o peritoneo visceral : Perimetritis
Mucosa : Endometritis
Ligamentos extensores : Parametritis
Por infección ascendente desde vulva y vagina.
Por vía hematógena.
Puede causar muerte embrionaria, abortos o acúmulos de pus (piometra).
Corynebacterium pyogenes, Staphylococcus, Streptococcus y Escherichia coli.
Leves: mucus opaco con el exudado mucopurulento.
Moderado: puede necrosis, acumulación de pus y una descarga
vulvar de color blanco grisáceo.
Los restos de la placenta necrótica dan un medio para la proliferación bacteriana.
Macro: congestión, edema y ulceraciones del endometrio, lumen lleno de
epitelio descamado, fragmentos placentarios, exudado, líquidos sucios de un
color café o pardo y de muy mal olor.
Secuelas: absorción de toxinas, trombosis de las venas uterinas, septicemia , muerte
y metástasis
PIOMETRA
Complejo endometritis quística hiperplasia
y
piometra de la perra y de la gata.
Estimulo estrogénico excesivo y prolongado, se presenta en perros
hermafroditas con Tumores de células de sertoli
Macro: hiperplasia pared uterina y glándulas endometriales
quísticas y visibles a simple vista. Sale un exudado sucio, café
y de mal olor por la vulva, Piometra, Mucometra e hidrometra.
Staphilococcus spp. ,Streptococcus y Escherichia coli
Tratamiento: Histerectomía.
Signos: Fiebre, poliuria, polidipsia, anorexia, neutrofilia,
distensión abdominal, vómitos, toxemia, bacteriemia y
glomerulonefritis.
Perras viejas, en la mayoría hay cuerpo lúteo persistente.
Salpingitis
Vía ascendente del útero
Infecciones vecinas peritoneales y hematógenas
Streptococcus, Staphylococcus, E. Coli,
Corynebacteium,
Trichomonas, Brucella abortus, Tuberculosis.
Bilaterales con descamación celular, linfocitos y
células plasmáticas,
proliferación de células del estroma.
IMPÈTIGO: infección superficial de
la piel : NIÑOS
INFECCIONES EN LA EPIDERMIS
IMPETIGO AMPOLLAR
Agente Causal:
Staphylococcus
aureus
Lesiones: Ampollas
que se rompen
dejando zona
eritematosa que se
cubre con costras
finas
INFECCIONES EN LA EPIDERMIS
FORUNCULOSIS
Agente más frecuentemente encontrado: S. aureus
lesión: afecta tejido subcutáneo y produce síntomas
sistémicos
INFECCIONES EN LA DERMIS
Celulitis Necrotizante Monomicrobiana
Agentes Causales:
S. aureus y S. pyogenes
Lesión: Eritematosa, caliente, dolorosa y con
bordes mal definidos
SINDROME DE LA PIEL ESCALDADA
Agente Causal: Staphylococcus aureus
– toxina exfoliatina
Foco de Infección: Piel u otra
localización
Lesión: Enrojecimiento de la piel, dolor
cutáneo que evoluciona en ampollas
que se rompen y dejan la piel al
descubierto
SINDROME DEL SHOCK TOXICO
Estafilocóccico:
– Producción de SST-1
– Cuadro Clínico:
Fiebre > 38.9 ºC
Eritrodermia difusa
Hipotensión arterial
Descamación de la piel
Sistémica: SNC,
hepático,
hematológico,
muscular o mucosas
infecciones
Heridas quirúrgicas
infectadas: foco para
infecciones
Sistèmicas
bronconeumonía.
adquirida en
comunidad=
neumonía viral
Neumonía
nosocomial
Bacteriemia
asociadas a
enfermedades
malignas.
BACTEREMIA:
Endocarditis,
osteomielitis,
pioartritis.
Meningitis
peritonitis
Clinical Manifestations of S Aureus
Clinical Manifestations of S Aureus
Clinical Manifestations of S Aureus
Clinical Manifestations of S Aureus
Intoxicaciones alimentarias
Producción de exotoxinas
Enzimas
Beta lactamasas: RESISTENCIA A LA
PENICILINA Y AMPICILINA
ENZIMAS
Leucocitos PMN
LISIS DE GLOBULOS ROJOS
Toxinas para dañar membranas)
HEMOLISINAS:
Alfa-toxinas:
Acción Citolítica: Forma poros
en las membranas
Acción Dermonecrótica en el
conejo
Letal en el ratón
Es una neurotoxina
Causante de los síntomas del
Shock Tóxico
Beta-toxina: (Doble halo de
hemólisis en agar sangre)
Esfingomielinasa. Sin
actividad en células humanas
Delta-toxina: Sin papel
conocido
Gamma-toxina:
Actúa como surfactante y
activa la adenilatociclasa lo
que resulta en la producción
de AMP C : diarrea
Actúa como necrotizante de
la piel
TOXINAS
Leucocidina Exotoxina:
MEMBRANA DE LEUCOCITOS PMN
FORMA POROS: ALTERAN PERMEABILIDAD
EXFOLIATINAS: epidermolìticas:
formado por 2 proteínas:
ET-A
ET-B
proteolítica, disuelve la epidermis
síndrome de la piel escaldada
PIEL ESCALDADA
FORMACION DE
ESCARAS EN LA
CAPA SUPERFICIAL
DE LA PIEL.
PIEL DESNUDA Y
CARNE VIVA
Staphylococcus
coagulasa negativos
Bacteriemia en
Huéspedes
comprometidos
Endoftalmitis
posquirúrgica
OSTEOMIELITIS
TIPOS DE
INFECCIONES
Infecciones por
dispositivos
permanentes
Infecciones urinarias
nosocomiales
Endocarditis de
Válvulas cardiacas
Staphylococcus epidermidis
50- 80% de aislamientos
son coagulasa negativos
Endocarditis
catéteres intravenosos
Peritonitis
Bacteremia
Osteomielitis
Inf. Heridas
Infecciones de vías
urinarias
Staphylococcus epidermidis
adherencia
Macromoléculas en la
superficie celular y
extracelular.
Plásticos y elementos
extraños.
Adhesina del
polisacárido capsular
Interacción con
componentes
tisulares y sèricos
Pasos Iniciales De La Colonización Tisular Para
Establecimiento De Infecciones De Heridas Quirúrgicas
Interacción con
proteínas del tejido
conectivo y proteínas
sericas.
COLONIZACION
PRODUCCIÒN DE GLICOCALIZ:
MATRIZ EXTRACELULAR MUCOSA.
FORMACION DE BIOPELICULAS EN
SUPERFICIES PLÀSTICAS
LA MATRIZ AFECTA LA FAGOCITOSIS
AL INHIBIR LA QUIMIOTAXIA DE PMN
Otros Staphylococcus
Coagulasa Negativos
Staphilococcus
saprophyticus
Staphilococcus
mulans
Staphilococcus
lugdunensis
Staphylococcus saprophyticus
Patògeno
I. U en mujeres jóvenes
2 causa de cistitis
Pielonefritis 41-86 %de
pacientes.
Uretritis en hombres y mujeres
I. U por sondas
Prostatitis en ancianos
Suplementos de nutrición
parenteral bacteremia y
sepsis.
Recto más frecuentemente
colonizado.
TEST DE LA NOVOBIOCINA
Staphylococcus saprophyticus
FACTORES DE VIRULENCIA
Mayor Adherencia a
células uroepiteliales,
uretrales.
Ureasa: invasión de
tejido vesical
Proteína fibrilar
asociada a la
superficie de la célula
Otros Staphylococcus coagulasa
negativos
– Staphilococcus haemolyticus
– Staphilococcus hominis
– Staphilococcussimulans
– Staphilococcus lugdunensis
– Staphilococcus scleiferi
– Staphilococcus warneri
- Staphilococcus saccharolyticus
MORFOLOGIA
DIFERENCIACION DE LOS MIEMBROS
DE LA FAMILIA MICROCOCACEAE
Frotis teñido con GRAM :
Staphylococcus
Cocos Gram positivos.
0.5um – a más de 1um
de diámetro.
Aislados, pares, cadenas
cortas, en grupos tanto
por dentro como por
fuera de los leucocitos
PMN.
Difícil de identificarlos en
frotis directos con los
Streptococcus,
Micrococcus, y
Peptoestreptococcus.
MORFOLOGIA D ELAS COLONIAS
Micrococcus:
Crecen lentamente 48h
de incubación
1- 2 mm. de diámetro
Mate, convexas regulares
Pigmentos
Staphylococcus:
desarrollo más rápido.
1-2 mm de diámetro
después de 24 h.
Lisas, mantecosas,
ligeramente convexas
Bordes enteros
Pigmentos
Muestran variedad en el
tamaño dando un
aspecto mixto.
Prueba de catalasa
Catalasa positiva.
Raras cepas de
Staphylococcus
catalasa negativa
Enterococcus
Pseudocatalasa.
Staphilococcus.
mucilaginosus :
negativo o débil
positivo
METODOS PARA DIFERENCIAR
Staphylococcus Micrococcus
fermentación de
+
la glucosa OF
producción de
+
ácido a partir de
el glicerol
susceptibilidad SUSCEPTIBLE RESISTENTE
a al furazolidina
susceptibilidad
RESISTENTE SUSCEPTIBLE
A la bacitracina
Staphylococcus aureus
Prueba de coagulasa en
portaobjetos:
COAGULASA UNIDA O
FACTOR DE AGREGACIÒN.
COAGULASA EN TUBO:
EDTA
Enzima extracelular
- 4 h después de la incubación
a 35 c deben mantenerse a
temperatura ambiente y leídas
a las 24- 48h
producción de fibrolisinas
AGLUTINACION CON LATEX:
plasma determinación de
proteína A
Staphylococcus aureus
RARAS CEPAS
Staphilococcus.
aureus coagulasa
negativa.
COAGULASA
POSITIVAS
Staphilococcus.
intermedius
Staphilococcus hyicus
Staphilococcus delphini
Staphilococcus schleiferi
ESQUEMA DE IDENTIFICACION
muestra clinica
Abscesos, heridas,secreciones, otros
Agar sangre y caldo de
enrriquecimiento
Incubacion 36°C,37°C,
18-24 H
Colonias aisladas observar
hemolisis
Gram: cocos Gram (+) en
Racimo
Frotis directo coloreado con gram:
cocos Gram (+)
significativo si se observa abundantes
PMN
Prueba de catalasa (+)
Prueba coagulasa
negativa
positiva
S aureus
Susceptibilidad a la novobiocina
resistente
S saprophyticus
sensible
S epidermidis
Staphilococcus aureus
PRUEBA DE DNA ASA
PRUEBA DE DESOXIRRIBUNUCLEASA
Staphilococcus aureus produce DNA asa
que hidroliza el ADN.
Susceptibilidad a la Novobiocina
CATALASA: POSTIVA
Staphylococcus spp
COAGULASA
P:
N: Staphilococcus
epidermidis
Staphilococcus
aureus
NOVOBIOCINA
P:
Staphilococcus
epidermidis
(>16)
Staphilococcus
saprophyticus
N:
Staphilococcus
saprophyticus
(<16)
COLONIAS DE Staphylococcus aureus
GRAM DE Micrococcus spp
COLONIAS DE Micrococcus spp