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Coliformes, Coliformes Fecales
and E. coli
Laboratorio de Microbiologia de
Alimentos
Coliformes
 Aerobicos y facultativos anaerobicos
 Gram negativo
 No formadores de esporas
 Forma de bacilo
 Fermentan lactosa, con produccion de
acido y gas dentro de 48 hr a 35 C
Coliformes- Porque son
importantes
 Organismo indicador (no
necesariamente un patogeno)

Coliformes fecales
 Potencial contaminate en carne

Patogeno potencial
 Enterobacter en formula de infantes
 Coliformes no fecales – agua, suelo,
ambiente
Métodos para Detectar
Coliformes
 MPN



Basado en probabilidad estadistica
NO es contaje directo
Técnica líquida
 Sólido

Contaje directo en medio
Coliforms
MPN - Continuación
El objetivo es “diluir el organismo
 Seleccione la muestra más diluída con
todos los tubos positivos y los próximos
dos

3,2,1 – Nuestra combinación
 Determine el MPN utilizando la tabla de
MPN
Coliformes
MPN
 Puede tambien utilizarse 5 tubos para
MPN – Aumenta la exactitud
 EXACTITUD – Cuan cercano a los
valores reales
 PRECISION – Cuan cercano son los
números uno al otro
 Asegúrate de usar la tabla apropiada
Se asume en MPN
 Distribución al azar de la bacteria
 Los organismos no se aglutinan
 Si hay un microorganismo presente,
crecera
 Existen las condiciones apropiadas para
crecer
Ventajas sobre el uso de
placas
 El tamano de la muestra puede ser
mayor
 Mejor para números bajos de
organismos
 El medio líquido es más suave para el
organismo porque no se expone al calor
 Requiere preparación de medio con
antelación
Medio - LST
 Lauryl Sulfate Tryptose Broth
 Prueba PRESUMPTIVA para coliformes

Se informa como “presumptive coliforms/g”
 Ingredientes




Lauryl Sulfate – Algunas bacterias no pueden
crecer - Selectivo
Lactosa – Producción de gas – Diferencial
w/durham tubo
NaCl – Aumenta razón de reproducción
Tryptona – Fuente de Nitrógeno
 Incube a 35 C por 48 horas
Medio - BGLB
 Brilliant Green Lactose Bile
 Incube a 35 C por 48 horas
 Producción de gas – Positivo
 Ingredientes


Oxgall – forma de bilis
Brilliant Green Dye – Inhibe Gram +
 Resultados son coliformes confirmados
 No utilize BGLB directamente – Altamente
inhibitorio
Medio – EMB Agar
 Eosine Methylene Bule Agar
 Placas ya servidas
 Estriado para aislar del MPN
 Ingredientes - Diferencial




Peptona – Proteina
Lactosa – Produccion de acido
Tinte Eosine – Inhibitorio
Azul de metileno – Indicador de pH
 E. coli and Enterobacer

Nucleated, dark centered, with or without a
metallic green sheen – CONFIRMED COLIFORMS
Coliforms
Coliforms
Método Sólido
 VRBA

Violet Red Bile Agar
 Peptone – Nitrogen Source
 Lactose – Acid Production
 Neutral Red – Indicator (6.8 red, 8.0 yellow)
 Crystal Violet – Inhibits Gram +
 NaCl – Increase Growth Rate
 Bile Salts
VRBA
 Típica – Rojo-púrpura, Colonias
Elípticas, puede ser una zona de
precipitación
 Se recomiendan placas con 10-100
colonias– Colonias más grandes
 Ponga una capa de agar luego que la
primera solidifique
 Resultados – Presumptive Coliformes
Coliformes