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Obtención de Agentes de Control
Biológico .
Montevideo,
21 de febrero de 2003
Objetivos:
• Transmitir la importancia de los procesos de
búsqueda y selección de ACB como base del éxito de
un programa de CB.
• Analizar las diferentes vías o caminos posibles en el
proceso de búsqueda y selección.
•Discutir los factores que condicionan estos procesos.
• Comprender como los resultados finales pueden estar
condicionados por las técnicas utilizadas.
•Analizar posibles estrategias de búsqueda y selección
de ACB
Aislamiento de ACB
• Aislamiento de ACB
– ¿Dónde encontrar ACB?
– ¿Cómo aislar?
– ¿Cualquier antagonista?
– ¿Qué características deseamos encontrar?
Importancia del aislamiento y
selección
• “El aislamiento y la selección de
microorganismos antagonistas sustentan a todo
Programa de Control Biológico determinando
las chances de éxito”. (Bettiol 1991)
•El número de microorganismos en una
comunidad microbiana es inmenso.
– En la rizosfera de un árbol de roble se calcula
que existen 45 mil billones de m. o. (45 x 1015)
Dónde encontrar ACB
• En cualquier lugar puede existir algún
microorganismo antagonista.
•Muchos m.o. valiosos se encuentran en forma
azarosa.
Dónde encontrar ACB
• En cualquier lugar puede existir algún
microorganismo antagonista.
•¿Existe algún lugar donde sea más probable
hallarlo?
•En aquellos sitios donde coincidiendo la presencia
del patógeno, la planta huésped y el ambiente
favorable al desarrollo de la enfermedad esta no
ocurre, es posible que allí esté funcionando
naturalmente algún tipo de biocontrol.
Dónde encontrar ACB cont..
• Esto puede suceder naturalemente:
– suelos supresivos
• Podemos forzar la situación:
– Colocamos plantas o frutos en situaciones favorables
al desarrollo de la enfermedad y seleccionamos
aquellos individuos que se mantuvieron sanos.
•Monilinia fructicola en duraznos.
• Penicillium expansum en manzana.
Selección de ACB para Monilinia
Aislamiento
Algunos lugares
• Suelos supresivos
• Sobre las partes aéreas de las plantas (m.o.
epifíticos, o del filoplano)
• Sobre la superficie de las raíces (rizoplano)
• Colonizando a patógenos
• Dentro de la planta (endofitos)
• Fitopatógenos (razas leves o avirulentas)
¿Por qué sobre la planta?
• Porque se ha demostrado que sobre la planta
viven numerosos m.o. entre los cuales existen
antagonistas de los patógenos y promotores de las
defensas de las plantas.
¿Por qué sobre la planta?
• En el agua de lavado concentrada crecen
solamente bacterias y levaduras
Aislamiento de frutos
¿Por qué sobre la planta?
• Porque se supone que si están allí es porque están
adaptados a vivir en esas condiciones.
– Si queremos controlar a un patógeno que ingresa por
heridas nos interesa que nuestro antagonistas sea un
buen colonizador de heridas.
¿Por qué sobre la planta?
• Porque existe mayor aceptación por parte de los
consumidores a admitir a los m.o. que
naturalmente viven sobre la planta que a otros
extraños.
Colonizadores de patógenos
• Se pueden encontrar antagonistas colonizando
naturalmente a los patógenos de plantas.
•Se pueden utilizar a los patógenos como cebo
para capturar a sus antagonistas.
Colonizadores de patógenos
Endófitos
• Para superar una de las limitantes mayores del
CB. Obtener antagonistas con capacidad curativa.
• Control de patógenos vasculares.
Plant species
Lichens
Mosses
Ferns
Conifer needles
Conifer twigs
Dicots (general)
Erica leaves
Erica stems
Rhododendron
Vaccinium
Minutes in
NaOCL
1
1
3
5
7
3
3
5
3
3
NaOCl dilution
Reference
1:5
1:5
1:5
1:2
1:2
1:5
1:5
1:5
1:5
1:5
Petrini (1986)
Petrini (1986)
Dreyfuss & Petrini (1984)
Carroll & Carroll (1978)
Carroll & Carroll (1978)
Petrini (1986)
Petrini (1986)
Petrini (1986)
Petrini (1985)
Petrini (1985)
Aislamiento
• En medio generales
• Selectivamente
– Hongos
– Bacterias
– Capaces de digerir al patógeno
Selección
• In vitro
– Cultivos duales
• In vivo
– Inoculación en plantas
• Intermedios
– utilizando trozos de vegetal
Cultivos duales
• Consiste en sembrar en una misma placa
enfrentados al antagonista y al patógeno
Selección “in vitro”
• Fácil de realizar
• Rápida
• Menor costo relativo.
• Solamente selecciona por algunos mecanismos
de acción, descartando antagonistas que podrían
funcionar sobre la planta.
• Tiene baja correlación con la performance a
campo.
Selección “in vivo”
• Consiste en inocular plantas con el
patógeno y al antagonista
Selección sobre frutos
Selección “in vivo”
• Selecciona independientemente de los
mecanismos de acción antagónica.
• Implica un mayor trabajo
• Mayor tiempo
• Mayor costo relativo.
• Mayor equipamiento (Plantas, invernáculo,
personal, etc)
Selección combinada
• Consiste en inocular tejidos vegetales en el
laboratorio.
Otras consideraciones
• ¿A quién debe enfrentar nuestro antagonista?
• ¿En qué condiciones?
•Elección de la cepa
más agresiva
•Elección de la cepa más
resistente a fungicidas
Resumen final
• El aislamiento y selección de antagonistas es un
proceso fundamental en cualquier programa de
control biológico.
• Las técnicas utilizadas pueden sesgarnos los
resultados.
•No existe una única estrategia de trabajo.
• El arte está en diseñar aquella estrategia que nos
conduzca en la forma más directa hacia nuestro
objetivo final.