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COMPLEJO DE GOLGI Becker,W.M. y col. 2000 COMPLEJO DE GOLGI Vesículas fusionadas a MP Cuerpos de Golgy (Dictiosomas) Tinción inmunoquímica del Complejo de Golgi. Becker,W.M. y col. 2000 AG Vesículas de transporte RER http://images.google.com.mx/imgres?imgurl=http://scientia.japonismo.com/IMG/jpg/celula .jpg&imgrefurl=http://scientia.japonismo.com/Una-celula-pordentro.html&h=255&w=400&sz=35&hl=es&start=12&tbnid=LgZxuUS1pEGSM:&tbnh=79&tbnw=124&prev=/images%3Fq%3Dves%25C3%25ADculas%2Bde%2Btrans porte%26gbv%3D2%26svnum%3D10%26hl%3Des animación Ver animación del interior celular http://scientia.japonismo.com/Una -celula-por-dentro.html AG Vesiculas de cubierta Clatrina Vesículas de transporte RER COP I COP II Endosoma temprano Aparato de Golgi Complejo de Golgi. Cara Cis (CGN) Red Cis Golgi Cara Trans (TGN) Red trans Golgi CGN TGN Becker,W.M. y col. 2000 Tinción Inmunohistoquímica - N-Acetilglucosamin-transferasa I CH2OH H H OH O OH H H HO H HN C CH3 O b-D-Acetilglucosamina (GlcNAc) Glucoproteínas Retículo endoplásmico COP I, COP II Complejo de Golgi Membrana plasmática Granulos de Secreción Endosomas Fluído de Lípidos y Proteínas •Modelo de Cisterna Estacionaria •Modelo de Maduración de Cisternas AG aa RER Núcleo Retículo endoplásmico COP I, COP II Complejo de Golgi animación Membrana plasmática Granulos de Secreción Endosomas Procolágena Fibroblasto Caseína Célula mamaria Anterogrado Retrógrado Asparagina Papel del R.E. y C.G. en Glicosilación Serina de proteínas. Treonina •Unión N. (N-Glicosilación) Hidroxilisina •Unión O. (O-Glicosilación) Hidroxiprolina Becker,W.M. y col. 2000 CH2OH H H OH O CH2OH OH H H H HO H HN C CH3 H H Membrana del RE OH OH HO O b-D-Acetilglucosamina (GlcNAc) H OH O Síntesis del núcleo del oligosacarido Dolicol fosfato Dolicol H P Glicosil sintetasas D- Manosa Dolicol P P N Dolicol P P N N Dolicol P P N N Glucosilación del Núcleo Ensamble de N N P P Dolicol N N P P Dolicol N N P P Dolicol P P Dolicol núcleo de Oligosacarido y Transferencia de Proteína. Oligosacariltransferasa N N Becker,W.M. y col. 2000 Glucoproteína: No cambia Oligosacarido rico en manosa Oligosacaridos complejos Glucosilación Terminal Proteína N-glucosilada 3 Glucosas 1 Manosa Glucosidasas Manosidasas Ac. Siálico Azúcares comunes enlazados en glucoproteínas Carbohidratos encontrados en glucoproteínas Carbohidratos de una glucoproteína Becker,W.M. y col. 2000 Glucocaliz de célula epitelial Pasos de la compartamentalización de Glucosilación y posterior Modificación de Proteínas •Biosíntesis del oligosacarido por glucosilación -N •Adición del núceo del oligosacarido a un residuo de asparagina RE CGN Glucosil transferasas Migración a través del AG Glucansintetasas Adición de N-acetilgalactosamina a serina o treonina •Primer paso de fosforilación de proteínas lisosomales •Remoción de manosa •Segunda fosforilación de proteínas lisosomales Cisterna media •Remoción de manosa •Adición de N-acetilgalactosamina •Adición de galactosamina •Adición de ac. siálico TGN •Adición de ac. siálico •Adición de sulfato a tirosina Oligosacaridos de manosa Oligosacaridos Complejos Becker,W.M. y col. 2000 Selección de Proteínas Becker,W.M. y col. 2000 Tráfico vesicular a traves del Sistema de Endomembranas Ejemplo de código señal Función de Señal Importar hacia el RE +H3N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-GlyIle-Leu-Phe-Trp-Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-GLn-LeuThr-Lys-Cys-Glu-Val-Val-Phe-Gln- Retención en la luz del RE Importar hacia mitocondria -Lys-Asp-Glu-Leu-COO+H3N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-PhePhe-Lys-Pro-Ala-Thr-Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg- Importar hacia núcleo Importar hacia los peroxisomas Tyr-Leu-Leu-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-ValSer-Lys-Leu Selección de Proteínas Becker,W.M. y col. 2000 Tráfico vesicular a traves del Sistema de Endomembranas Enzima lisosomal es sintetizada y glucosilada GlcNAC-1-P Carbohidrato RER Fosfotrasnferasa Enzima Dirección de Glicosidasa Manosa es fosforilada por actividad secuencial de dos enzimas CGN enzimas solubles a Endosomas y Lisosomas mediante Manosa-6 P enlaza a el receptor y la enzima y son empaquetados en la vesícula de transporte TGN la señal de Manosa-6-P 6.4 El receptor es reciclado Endosoma Tardio El pH es más bajo, la enzima se disocia del receptor 5.5 Lisosoma Becker,W.M. y col. 2000 GlcNAC Enfermedad I-Cell o Mucopolisacaridosis II Enzima lisosomal es sintetizada y glucosilada GlcNAC-1-P Carbohidrato RER Fosfotransferasa Enzima Dirección de Glicosidasa Manosa es fosforilada por actividad secuencial de dos enzimas CGN enzimas solubles a Endosomas y Lisosomas mediante Manosa-6 P enlaza a el receptor y la enzima y son empaquetados en la vesícula de transporte TGN la señal de Manosa-6-P 6.4 El receptor es reciclado Endosoma Tardio El pH es más bajo, la enzima se disocia del receptor 5.5 Lisosoma Becker,W.M. y col. 2000 GlcNAC Tráfico de Proteínas de Secreción Becker,W.M. y col. 2000 Nobel Prize: George E. Palade, 1974, physiology/medicine; 1950s and 60s, George Palade, síntesis de proteínas y el camino de secreción por exocitosis Evidencias autorradiográficas de la vía de secreción. •Constitutiva •Regulada Becker,W.M. y col. 2000 Secreción Constitutiva Axón presináptico Dirección del impulso nervioso presináptico Secreción Regulada: Liberación de neurotransmisores Protuberancia sináptica Vesículas sinápticas conteniendo moléculas de neurotransmisor Membrana presináptica Vesícula sináptica Mitocondria Membrana presináptica Membrana postsináptica Espacio sináptico Dendrita postsináptica Moléculas de neurotransmisor Espacio sináptico Receptores de membrana postsináp-tica Sinápsis química Becker,W.M. y col. 2000 Secreción Regulada: Liberación de Insulina Granulos de zimógeno Ducto Golgi Retículo endoplásmico Mitocondria Núcleo Unidad Acinar Célula Acinar Becker,W.M. y col. 2000 Granulos de Zimógeno