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Diagnostico de Laboratorio Infección Respiratoria Aguda Grave IRAG text Pan American Health Componente de laboratorio Ante la detección de caso inusitado o conglomerado de IRAG • text • • • Tomar muestra Menores de 5 años de edad: aspirado nasofaríngeo hasta 72 horas del inicio de los síntomas; De 5 años y más de edad: hisopado nasal y faríngeo combinado hasta 72 horas del inicio de los síntomas; Muestra de sangre – serología; Hemocultivo. 2 Pan American Health Infección Respiratoria Aguda Grave IRAG Posibles patógenos: ejemplos Virus de la influenza Bacilo diftérico Estreptococo Pertusis Virus Sincitial Respiratorio Muestras Hisopado de faríngeo (faringe posterior) Hisopado o aspirado texto nasofaríngeo Nasal Fuente: adaptado de WHO- Guidelines for collection of clinical specimens during field investigation of outbreaks. Hantavirus Virus de la dengue Leptospira SANGRE 2 muestras Fase aguda y convalecencia Bacterias responsables de las neumonías Sangre Estudios de laboratorio Cultivo, serotipificación, detección de antígenos, niveles de anticuerpos, susceptibilidad 3 Pan American Health Métodos de Laboratório Diagnostico de Influenza text Pan American Health Diagnostico de Laboratorio de Influenza Es una herramienta esencial: • En la detección y en la identificación temprana de agentes etiológicos. • En la identificación oportuna de un nuevo subtipo de influenza (con potencial pandémico). text 5 Pan American Health La sensibilidad y la especificidad de cualquier método de diagnóstico es influenciado por: • • • text El tipo de prueba Los procedimientos de ejecución de la técnica El espécimen clínico utilizado − − − Momento de la toma de muestra Origen de la muestra Calidad de la muestra 6 Pan American Health El éxito del diagnostico virológico de influenza depende de: • La toma de muestra dentro de las 72 horas del inicio de los síntomas • El procedimiento adecuado de colección del espécimen •text Las condiciones de envío y del almacenamiento de las muestra antes de procesarla en el laboratorio 7 Pan American Health Colección de muestras clínicas • • • • Hisopo nasal y de faríngeo combinados Aspirado nasofaringeo Aspirado transtraqueal Lavado bronquioalveolar Situaciones Especiales (UCI) • Sangre text 8 Pan American Health Faríngeo text 9 Pan American Health text Foto autorizada por Dr. Hector Chiparelli - Uruguay 10 Pan American Health text Fotos autorizadas por Dr. Hector Chiparelli - Uruguay 11 Pan American Health Métodos • • • • • Imunofluorescencia indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza text 12 Pan American Health Imunofluorescencia • • • text Detecta Influenza A, B; parainfluenza 1,2,3; VRSvirus sincitial respiratorio y adenovirus. Importante método para el diagnóstico diferencial entre los principales virus respiratorios. Pode ser realizado en centros de referencia o en el centro nacional de influenza. 13 Pan American Health Tinción por Inmunofluorescencia Indirecta de células de aspirado traqueal text World Bank Training by Alexander Klimov, CDC 14 Pan American Health Métodos • • • • • Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza text 15 Pan American Health Cultivo Del Virus • Para el aislamiento viral • Técnica de alta sensibilidad pero compleja • Realizada en el CNI o en el centro de referencia • Importante por que permite text disponibilidad de cepas virales para la producción de vacuna 16 Pan American Health Métodos • • • • • Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza text 17 Pan American Health Técnicas Moleculares • • • • • text Detecta el RNA viral presente en las muestras clínicas y en cultivos virales Alta sensibilidad Altísima complejidad Realizado en CNI, laboratorio de referencia. Método rápido: 24 hrs. para diagnóstico y caracterización 18 Pan American Health Métodos • • • • • Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza text 19 Pan American Health Serología • Se utiliza para complementar el diagnóstico • Realizado con muestras pareadas de suero del paciente, tomadas con un intervalo de dos semanas (fase aguda y convalesciente) • Métodos: – Test de Inhibición de la Hemoaglutinación (HI) – Inmunoensayo de enzimas (ELISA) text – Prueba de neutralización del virus en cultivo de células – Western Blot 20 Pan American Health Interpretación de los análisis de serología IHA Muestra Aguda Muestra Convaleciente Interpretación Bajo título Bajo título No hay evidencia de infección Bajo título Alto título Seroconversión (evidencia de infección reciente) text Alto título Alto título Infección en el pasado imposible de determinar 21 Pan American Health Métodos • • • • • Imunofluorescencia Indirecta Cultivo del Virus Técnicas Moleculares – PCR Técnicas Serológicas Prueba Rápida para Influenza text 22 Pan American Health Prueba Rápida para Influenza • Apoya en la investigación de brotes de los equipos de respuestas rápida • Apoya la decisión de iniciar tratamiento con antivirales antes de las 48 hrs. text 23 Pan American Health Prueba Rápida para Influenza Desventajas: • • • • No recomendada para la vigilancia epidemiológica. No permite la identificación del subtipo viral. Obtención de resultados falsos negativos. Algunos Kits no realizan la identificación del tipo viral A/B. • Costo elevado. text • Baja sensibilidad comparada al aislamiento viral. 24 Pan American Health
