Download genóforo bacteriano

TEMA 3
ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL
HEREDITARIO EN PROCARIOTAS
GENÓFORO DE LOS VIRUS
-Características generales
-Virus ADN-fago 
GENÓFORO BACTERIANO
-Cromosoma bacteriano
-ADN extracromosómico: PLÁSMIDOS
-clasificación
-utilización tecnología ADN recombinante
GENÓFOROS VIRALES
VIRIÓN
(diámetro 10-400 nm)
 organización simple y acelular
ausencia DNA y RNA en el
mismo virión
DNA/RNA
nucleocápside
incapacidad reproducirse de
forma independiente y llevar a
cabo división celular
GENÓFOROS VIRALES
VIRUS ARN-ADN
Tipo de
Molécula
Lineal
Tipo de
Hélice
Tipo de virus
según huésped.
Familia de virus
Animal
Retrovirus (Ribodesoxivirus)
- Sarcoma de Rous (Pollo)
- Leucemia de Rauscher (ratón)
- HIV (virus de inmunodeficiencia humana
causante del SIDA)
Sencilla
VIRUS ARN-ADN
Tipo de
Molécula
Tipo de
Hélice
Tipo de virus
según huésped.
Familia de virus
Circular
Doble (gap)
Animal
Hepatitis B
VIRUS HEP. B
GENÓFOROS VIRALES
FAGO 
lisis bacteria
ciclo lisogénico
 infecta E. coli
 cápside icosaédrica, DNA doble hélice lineal con ~ 48.000 pb
 extremos cohesivos: extremos 5’
nucleótidos de secuencia complemenaria)
monocatenarios
(12
GENÓFORO BACTERIANO
 ADN  doble hélice circular
 tamaño variable (0,1 a 8 x109 dalton)
 E. coli (1.100 m longitud, 3,2 x105 pares nucleótidos)
 Material genético  NUCLEOIDE
ARN (30%)
PROTEÍNA
(5-10%)
LÍPIDOS
ADN (60%)
(1%)
GENÓFORO BACTERIANO
 ADN altamente organizado
 Plegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO
GENÓFORO BACTERIANO
 Nº dominios en E. coli variable (12 a 80 dominios)
 Composición: ADN dúplex condensado + proteínas básicas
GENÓFORO BACTERIANO
PROTEÍNAS BÁSICAS DETECTADAS EN BACTERIAS
Proteína
Composición
Contenido
por células
Semejanza con eucariontes
HU
Dímero subunidades
 y  de 9.000 d.
40.000
dímeros
Histona H2A
H
Dímero subunidades
idénticas de
28.000 d.
30.000
dímero
Histona H2B
IHF
Subunidad  de
10.500 d.
Subunidad  de
9.500 d.
Desconocido
Desconocida
H1
Subunidad de
15.000 d.
10.000
copias
Desconocida
HLP1
Monómero de
15.000 d.
20.000
copias
Desconocida
P
Sububnidad de
3.000 d.
Desconocido
Protaminas
-Fis
-Dan (DNA-binding protein under
anaerobic conditions) = YgiP
(Nucleic Acids Research, 2010,
Vol. 38, No. 11 3605–3618)
ADN EXTRACROMOSÓMICO
PLÁSMIDOS
 ADN doble y circular
 Replicación autónoma; información no vital
 Posibilidad de integración en cromosoma principal
bacteriano  EPISOMA
- secuencias inserción y transposones
 Tamaño variable: 2.000 a 100.000 pb
ADN bacteriano
plásmidos
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
 TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F)
ENTRE BACTERIAS  CONJUGACIÓN
F+
F-
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
Hfr
factor F integrado en
genóforo bacteriano
 transferencia de marcadores
cromosómicos a F- con elevada frecuencia
 transferencia desde punto fijo y en un
orden determinado (integración específica
factor F)
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
plásmido E. coli resistente a ampicilina
(ampr) y tetraciclina (tetr)
ESTIRPE A
ESTIRPE B
cys+, leu+, thr+
cys-, leu-, thr--
medio mínimo con
leucina y treonina
medio mínimo con:
-treonina
-leucina
-sin suplementos
A.- Medio mínimo con leucina y treonina:
-cys+, leu+, thr+
-cys+, leu-, thr-
B.- Medio mínimo con:
- TREONINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu+, thr-
- LEUCINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu-, thr+
- MEDIO MÍNIMO: cys+, leu+, thr+
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
comparación secuencias ADN de  genes  evolución
-rasgos característicos gen (nº intrones, posición)
-estructura producto proteico gen  FUNCIÓN
modificación parte de secuencia ADN de un gen
y reinserción
CONSTRUCCIÓN ADN RECOMBINANTE
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
DIGESTIÓN ADN
(enzimas de restricción)
 corte ADN en fragmentos para su clonación
 cortes escalonados  ADN recombinante
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
clonación gen específico
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
diseño
plásmidos
como
vectores de
clonación
de ADN
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”