Download tema 3 organización del material hereditario en procariotas

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Transcript
TEMA 3
ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL
HEREDITARIO EN PROCARIOTAS
GENÓFORO DE LOS VIRUS
-Virus ARN
-Virus ADN-fago 
GENÓFORO BACTERIANO
-Cromosoma bacteriano
-ADN extracromosómico: PLÁSMIDOS
-clasificación
-utilización tecnología ADN recombinante
GENÓFOROS VIRALES CON ARN
 Especie a la que afectan:
-vegetal
-animal
-bacterias (fagos)
 Tipo de ARN: -sencillo o doble
-enteros o segmentados
 Muy empaquetados y plegados (proteínas similares
a histonas)
 Gran variación peso molecular
VIRUS ARN
Tipo de
Molécula
Tipo de
Hélice
Sencilla
Tipo de virus
según huésped.
Familia de virus
Fago
MS2, f2, Q
Animal
Picornavirus (polio)
Togavirus
Rhabdovirus (estomatitis, rabia)
Myxovirus (gripe)
Paramyxovirus (Sendai, paperas)
Vegetal
Virus mosaico tabaco (TMV)
Fago
Ø6
Animal
Reovirus
Vegetal
Tumor de las heridas
Vegetal
Viroide (PSTV)
Lineal
Doble
Circular
Sencilla
VIRUS TMV
GENÓFOROS VIRALES CON ADN
 Especie a la que afectan:
-animal
-bacterias
 Tipo de ADN:
-sencillo o doble
-lineal o circular
-con/sin extremos cohesivos (fago )
 Gran variación peso molecular
VIRUS ADN
Tipo de
Molécula
Tipo de virus
según
huésped.
Familia de virus
Fago
ØX174
M13
Animal
Parvovirus
Doble
Animal
Papovavirus (SV40, polioma)
Adenovirus
Herpetovirus (Herpes)
Poxvirus (viruela)
Iridovirus (peste porcina)
Doble
Fago
Extremos cohesivos: Fago  Ø80, 434, P2, 186)
Redundancia terminal: serie T-par, T3 y T7
Tipo de
Hélice
Sencilla
Circular
Lineal
FAGO M13
FAGO 
lisis bacteria
ciclo lisogénico
 infecta E. coli
 cápside icosaédrica, DNA doble hélice lineal con ~ 48.000 pb
 extremos cohesivos: extremos 5’
nucleótidos de secuencia complemenaria)
monocatenarios
(12
VIRUS ARN-ADN
Tipo de
Molécula
Lineal
Tipo de
Hélice
Tipo de virus
según huésped.
Familia de virus
Animal
Retrovirus (Ribodesoxivirus)
- Sarcoma de Rous (Pollo)
- Leucemia de Rauscher (ratón)
- HIV (virus de inmunodeficiencia humana
causante del SIDA)
Sencilla
VIRUS ARN-ADN
Tipo de
Molécula
Tipo de
Hélice
Tipo de virus
según huésped.
Familia de virus
Circular
Doble (gap)
Animal
Hepatitis B
VIRUS HIV
VIRUS HEP. B
GENÓFORO BACTERIANO
 ADN  doble hélice circular
 tamaño variable (0,1 a 8 x109 dalton)
 E. coli (1.100 m longitud, 3,2 x105 pares nucleótidos)
 Material genético  NUCLEOIDE
ARN (30%)
PROTEÍNA
(5-10%)
LÍPIDOS
ADN (60%)
(1%)
GENÓFORO BACTERIANO
 ADN altamente organizado
 Plegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO
GENÓFORO BACTERIANO
 Nº dominios en E. coli variable (12 a 80 dominios)
 Composición: ADN dúplex condensado + proteínas básicas
GENÓFORO BACTERIANO
PROTEÍNAS BÁSICAS DETECTADAS EN BACTERIAS
Proteína
Composición
Contenido
por células
Semejanza con eucariontes
HU
Dímero subunidades
 y  de 9.000 d.
40.000
dímeros
Histona H2A
H
Dímero subunidades
idénticas de
28.000 d.
30.000
dímero
Histona H2B
IHF
Subunidad  de
10.500 d.
Subunidad  de
9.500 d.
Desconocido
Desconocida
H1
Subunidad de
15.000 d.
10.000
copias
Desconocida
HLP1
Monómero de
15.000 d.
20.000
copias
Desconocida
P
Sububnidad de
3.000 d.
Desconocido
Protaminas
-Fis
-Dan (DNA-binding protein under
anaerobic conditions) = YgiP
(Nucleic Acids Research, 2010,
Vol. 38, No. 11 3605–3618)
ADN EXTRACROMOSÓMICO
PLÁSMIDOS
 ADN doble y circular
 Replicación autónoma; información no vital
 Posibilidad de integración en cromosoma principal
bacteriano  EPISOMA
- secuencias inserción y transposones
 Tamaño variable: 2.000 a 100.000 pb
ADN bacteriano
plásmidos
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
 TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F)
ENTRE BACTERIAS  CONJUGACIÓN
F+
F-
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
Hfr
factor F integrado en
genóforo bacteriano
 transferencia de marcadores
cromosómicos a F- con elevada frecuencia
 transferencia desde punto fijo y en un
orden determinado (integración específica
factor F)
FUNCIÓN PLÁSMIDOS
plásmido E. coli resistente a ampicilina
(ampr) y tetraciclina (tetr)
ESTIRPE A
ESTIRPE B
cys+, leu+, thr+
cys-, leu-, thr--
medio mínimo con
leucina y treonina
medio mínimo con:
-treonina
-leucina
-sin suplementos
A.- Medio mínimo con leucina y treonina:
-cys+, leu+, thr+
-cys+, leu-, thr-
B.- Medio mínimo con:
- TREONINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu+, thr-
- LEUCINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu-, thr+
- MEDIO MÍNIMO: cys+, leu+, thr+
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
comparación secuencias ADN de  genes  evolución
-rasgos característicos gen (nº intrones, posición)
-estructura producto proteico gen  FUNCIÓN
modificación parte de secuencia ADN de un gen
y reinserción
CONSTRUCCIÓN ADN RECOMBINANTE
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
DIGESTIÓN ADN
(enzimas de restricción)
 corte ADN en fragmentos para su clonación
 cortes escalonados  ADN recombinante
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
clonación gen específico
TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
diseño
plásmidos
como
vectores de
clonación
de ADN