Download “Juan Manuel Márquez”.

TITULO: Aislamiento y drogorresistencia de
Staphylococcus aureus
Hospital “Juan Manuel Márquez.”
OBJETIVOS
Objetivo General:
Contribuir a un mayor conocimiento de la presencia y resistencia
antimicrobiana de Staphylococcus aureus en el Hospital “Juan
Manuel Márquez”y su área de atención.
Objetivos Específicos:
1.
2.
3.
4.
Determinar la presencia y frecuencia de cepas de
Staphylococcus aureus en los diferentes servicios de nuestro
hospital.
Analizar el estado actual de la drogorresistencia de las cepas de
S. aureus de origen nosocomial y aisladas en la comunidad,
frente a diferentes antibióticos utilizados comúnmente en
nuestro medio.
Determinar la presencia de cepas de Staphylococcus aureus
resistentes a Meticilina (MRSA).
Profundizar en los mecanismos de resistencia presentes en las
cepas aisladas.
UNIVERSO
Fuente
No. de cepas
%
Sala
68
55.73
Comunidad
54
44.26
122
100
Total
FLUJOGRAMA DE TRABAJO
CEPAS
IDENTIFICACIÓN
PRUEBAS BIOQUIMICAS
CRITERIOS CONVENCIONALES
Susceptibilidad por Difusión con Disco
(Kirby-Bauer)
SPSO
RPSO
RPRO
Fenotipo inducible
MLS
(Aproximación de discos
para inducir metilasas)
•
Resistencia
cruzada
Crecimiento en Placa de Oxacilina
• CMI (Oxacilina)
• PCR (gen mec A)
Mecanismo mediador de Resistencia
S. aureus
12%
15%
Estaf. Coag. Negativa
14%
Streptococcus sp.
Enterococcus sp.
E. coli
Otras enterobacterias
13%
6%
2%
4%
34%
Pseudomonas sp.
Otros
microorganismos
Figura 1. Porcentajes de los diferentes microorganismos
aislados en infecciones nosocomiales.
Hospital “Juan Manuel Márquez”.
9%
15%
13%
14%
11%
3%
5%
30%
S. aureus
Estaf.coag. Negativa
Streptococcus sp.
Enterococcus sp.
E. coli
Otras enterobacterias
Pseudomonas sp.
Otros microorganismos
Figura 2. Porcentajes de los diferentes microorganismos
aislados en muestras purulentas procedentes de la
comunidad. Hospital “Juan M. Márquez”.
Tabla 1. Porcentaje de resistencia de las cepas de Staphylococcus
aureus frente a los diferentes antibióticos utilizados. (Kirby-Bauer).
Antibióticos
%
Penicilina
97.5
Eritromicina
52,4
Tetraciclina
48,3
Sulfaprím
40,9
Clindamicina
32
Gentamicina
23,7
Cloranfenicol
20,5
Estreptomicina
13,9
Ciprofloxacina
13,1
Oxacilina
13,1
Vancomicina
0
ci
in
Ci
p
ro
f lo
ra
ci
xa
cl
ic
Te
t
en
ra
nf
fa
Cl
o
a
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l
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ic
in
m
ic
Va
n
co
ac
Ox
a
na
ili
na
ili
ic
Pe
n
Comunidad
na
Sala
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Figura 3. Porcentajes comparativos de resistencia de S. aureus
frente a los diferentes antibióticos según el origen de las cepas.
Diferencia significativa: Oxacilina (p=0.014) Estreptomicina (p=0.035)
Clindamicina (p=0.007)
Resistencia a Penicilinas en S. aureus
I- Sensibles a Penicilina
Sensibles a otras penicilinas,
a las combinaciones Beta lactámicos / inhibidores, a los cefems
y los carbapenemes.
II- Resistentes a Penicilina Resistentes a penicilinas sensibles
Sensibles a Oxacilina
a Beta -lactamasas (Ampicilina,
Amoxicilina, Azlocilina, Carbenicilina,
Mezlocilina, Piperacilina, Ticarcilina).
Sensibles a las penicilinas resistentes
a Beta lactamasas (Meticilina,Nafcilina
Cloxacilina, Dicloxacilina) a las combinaciones - lactámicos / inhibidores,
a los cefems y los carbapenemes.
Resistencia a Penicilinas en S. aureus
( Continuación........)
III- Resistentes a Penicilina
Resistentes a Oxacilina
(Cepa MRSA)
Resistentes a todos los
- lactámicos disponibles,
combinaciones - lactámicos /
inhibidores, cefems,
carbapenems.
La mayoría son resistentes
además a otros antibióticos
como aminoglucósidos,
Macrólidos , Clindamicina,
y Tetraciclinas (Resistencia
Múltiple).
RESISTENCIA A OXACILINA
PRODUCCIÓN DE PBP2a
MIC 64- 260 g/mL
RESISTENCIA HOMOGÉNEA
MIC 4-16 g/mL
RESISTENCIA HETEROGÉNEA
RESISTENCIA A LAS PENICILINAS RESISTENTES
A PENICILINASAS
• PRODUCCIÓN DE PBP2a
(Gen mec A)
• HIPERPRODUCCIÓN DE BETALACTAMASAS
• PRODUCCIÓN DE METICILINASAS
• ADQUISICIÓN DE OTRAS PBPs MODIFICADAS
• VARIANTE DE COLONIAS ENANAS
independiente
del gen mec A
CEPAS MRSA
HIPERPRODUCCIÓN DE
BETALACTAMASAS
PROTEÍNA PBP MODIFICADA
PROTEÍNA PBP 2a
CMI de 6-8 g/mL
CMI de 16-64 g/mL
CMI de 64-260 g/mL
(fenotipo homogéneo)
Crecimiento en Placas con Oxacilina
(“Oxacillin Screen Plate”)
Agar Mueller-Hinton con 6 g/mL de Oxacilina
suplementada con NaCl al 4%
Si es Positivo
Verdadero MRSA (PBP 2a)
Resistente a todos los
- lactámicos
Si es Negativo
Resistente sólo a Oxacilina,
Nafcilina y Meticilina.
(Penicilinas isoxazolínicas)
Tabla 4. Características de la resistencia a Oxacilina de las cepas MRSA
CMI
Cepas
Resistencia
A Oxac
por KB
Crecimiento
en placa
de Oxac
4
8
64-256
n = 16
16
(100%)
15
(93.75 %)
1
(6.25 %)
2
(12.5 %)
13
(81.25 %)
Gen
Leyenda:
KB: Kirby – Bauer
CMI: Concentración Mínima Inhibitoria (µg/mL)
mecA
15
(93.75%)
Fenotipo
Homogéneo
13
(81.25 %)
Resistencia
Cruzada
14
(87.5 %)
Tabla 5. Porcentajes de resistencia de las cepas MRSA para otros
antibióticos
Antibiótico
%
Penicilina
100
Sulfaprím
93,75
Tetraciclina
93,75
Eritromicina
87,5
Gentamicina
87,5
Cloranfenicol
81,25
Estreptomicina
75
Ciprofloxacina
75
Clindamicina
75
Vancomicina
0
Resultado del método de aproximación
de discos para inducir metilasas
Eritromicina
Zona Halo Cortado
Clindamicina
GRUPO MLS
MACRÓLIDOS
Eritromicina
Claritromicina
Oleandomicina
Azitromicina
Espiramicina
LINCOSAMIDAS
Clindamicina
ESTREPTOGRAMINAS
Micamicina
Pristamicina
Vernamicina
Virginamicina
Quinupristina/Dalfopristina
Tabla 6. Resistencia a Oxacilina y Macrólidos de las cepas estudiadas
Cepas
Sala
n = 68
Comunidad
n = 54
Total
n = 122
Resistencia
a Oxac
por KB
Crecimiento
en placas
con Oxac
Resistencia
a Eritro
por KB
Fenotipo
inducible
MLS
14
(20.6 %)
14
(20.6%)
12
(17.6%)
38
(55.9%)
24
(35.3 %)
2
(3.7 %)
1
(1.85%)
1
(1.8%)
26
(48.1%)
12
(22.2%)
16
(13.1 %)
15
(12.3%)
13
(10.6%)
64
(52.4%)
36
(29.5%)
Leyenda:
KB: Kirby – Bauer
MLS: Macrólidos – Lincosamidas – Estreptograminas
Gen
mec A
Quemados
25%
12,5%
6,25% 6,25%
Ortopedia
50%
Misceláneas
Comunidad
Pacientes
Fibroquísticos
Figura 4. Porcentajes de cepas MRSA por fuente de
aislamiento
CONCLUSIONES
1. En el Hospital “Juan Manuel Márquez”, Staphylococcus aureus es la
segunda causa de infecciones nosocomiales, la mayor frecuencia de
cepas aisladas se obtuvo en muestras purulentas y el mayor número
de cepas de esta especie correspondió a la Sala de Quemados.
2. Las cepas de S.aureus estudiadas, presentaron una alta resistencia a
Penicilina, Eritromicina, Tetraciclina y Sulfametoxazol/Trimetropím.
Todas fueron susceptibles a Vancomicina y para todos los antibióticos
analizados, los niveles de resistencia fueron siempre mayores en las
cepas de origen nosocomial, con diferencias significativas solamente
para Oxacilina, Clindamicina y Estreptomicina.
3. Se detectó un 13,1% de cepas MRSA, con mayor frecuencia entre las
cepas intrahospitalarias y menor para las aisladas en la comunidad.
Un alto porcentaje de estas cepas presentaron resistencia cruzada con
otras familias de antibióticos.
4. El 93,75% de las cepas MRSA fueron portadoras del fenotipo clásico de
resistencia para Meticilina (gen mec A) y el mecanismo de resistencia
para Oxacilina predominante fue el fenotipo homogéneo, con la
presencia del gen mec A que codifica para la proteína PBP 2a.
5. El 29,5% de las cepas estudiadas presentaron el fenotipo inducible para
Macrólidos, Lincosamidas y Estreptograminas y la mayor parte de
ellas correspondió al grupo de origen nosocomial.
6. La mitad de las cepas MRSA se aislaron en la sala de Quemados.
RECOMENDACIONES
1.
Mantener la vigilancia sistemática de la drogorresistencia bacteriana
en nuestros hospitales, para poder tomar decisiones clínicas
racionales en la prescripción de la terapia antimicrobiana.
2.
Tratar de incluir el ensayo de crecimiento en placas de Oxacilina para
Staphylococcus aureus en los laboratorios de microbiología de
nuestro sistema de salud, para contribuir a una mejor valoración de
las cepas MRSA.
3.
Valorar la introducción del método de aproximación de discos para la
determinación de resistencia a MLS como rutina en los antibiogramas
que se realizan sistemáticamente en los laboratorios de nuestra red
de salud.
4.
Establecer un control sistemático sobre la aparición de cepas de
Staphylococcus aureus resistentes a Meticilina, su posible relación
con la presencia de portadores y su potencial derivación a cepas VISA.
5.
Divulgar estos resultados entre los clínicos de nuestro hospital y los
médicos de asistencia primaria para contribuir al desarrollo de una
adecuada política de antibióticos.
¿Qué Necesitamos?
• Discos de Penicilina de 10 u
• Discos de Oxacilina de 1 μg
• Oxacilina en Polvo
• Discos Eritromicina de 15 μg
• Discos de Clindamicina de 2 μg