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Práctica experimental
Detección de Compentes de ADN
modificados generalmente en alimentos
por polimerasa-reacción-cadena (PCR)
Introducción
Objetivos del experimento
1. Detección cualitativa de una modificación genética
en alimentos.
2. Detección de modificaciones causadas por
- El incio del virus del mosaico de la coliflor (CaMV)
- La terminación de la nopalina sintasa (NOS) en
agrobacterium tumefaciens
Ambas secuencias son muy usadas para regulación de
genes extraños a soja y maiz en ingeniería genética
Procedimiento paso a paso
1. Paso: Aislar ADN
- Extracción de Soja controlada sin componentes
genéticamente modificados (-GMO)
- Extracción de examen de alimentos (T)
Procedimiento paso a paso
2. Paso: PCR
Como control para material vegetal existente en
alimentos y para una exitosa PCR:
 Amplificación de un código genético para una
proteina en el fotosistema II con longitud de 455
Bp
Como dos secuencias de ADN caraterísticos para
una modificación genética en alimentos:
 Ampliación de un gen
a) de CaMV-Iniciación con 203 Bp
b) de NOS-terminación con 225 Bp
Programa de tiempo de la cicladora
120``, 94 °C
Desnaturalización
60``, 94 °C
Desnaturalización
40 Ciclos
10`, 72 °C
Completar
120``, 72 °C
Elongación
60``, 59 °C
Recocido
Precedimiento paso a paso
3. paso: Electroforesis y evaluación
Detección de productos de PCR por
electroforesis en gel de agarosa
Tinción de ADN y evaluación del gel
¿Contiene tu examen de alimentos ADN extraño?
Resultado esperados
PS II secuencia genética
(455 Bp)
Secuencia NOs
(225 Bp)
Secuencia CaMV
(203 Bp)
1
1
2
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