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Microbiología del agua María Cecilia Arango Jaramillo María Cecilia Arango Jaramillo Virus Bacterias Algas Protozoos Hongos microscópicos Habitan en: Aguas naturales Aguas dulces Estuarios Aguas saladas Aguas termales María Cecilia Arango Jaramillo Los microorganismos del agua son: INDÍGENAS Característicos de la masa de agua natural TRANSITORIOS Entran al agua en forma intermitente, procedentes de: •El aire •El suelo •Procesos industriales •Procesos domésticos María Cecilia Arango Jaramillo PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN EL AGUA María Cecilia Arango Jaramillo Reciclaje de nutrientes por microorganismos María Cecilia Arango Jaramillo Papel de los microrganismos en el reciclaje nutrientes Son la base de las cadenas tróficas acuáticas Reciclan la materia haciéndola disponible para otros organismos – Mineralización – Producción de proteína microbiana Mayor productividad por metro cuadrado en el agua que en el suelo. María Cecilia Arango Jaramillo Bacterias que causan cambios organolépticos en el agua María Cecilia Arango Jaramillo Bacterias que obstruyen conducciones de agua Principalmente: ferrobacterias y sulfobacterias María Cecilia Arango Jaramillo Ferrobacterias Filamentosas Oxidan carbonato ferroso Hidróxido férrico 4FeCO3 + O2 + 6H2O 4FeOH + 4CO2 + 40 cal Soluble insoluble precipita en la membrana celular Cecilia Arango Jaramillo En medio ácido +María ferrocianato de K azul de prusia Hábitat de las ferrobacterias: Grandes depósitos geológicos de Fe Canalizaciones y conducciones donde frecuentemente produce obstrucciones El FeOH precipitado forma costras en el interior de tuberías de hierro en aguas ricas en este elemento María Cecilia Arango Jaramillo Ferrobacterias: – Leptothrix – Crenothrix – Gallionella Sphaerotilus: No es ferrobacteria obligada. Oxida también Mn++Mn+++ Tampoco es María Cecilia Arango Jaramilloautótrofa obligada Sulfobacterias Origen: hidrotermal y volcánico Características de aguas poluídas ricas en H2S Intervienen en procesos de descomposición orgánica: – Oxidando el H2S – Liberando E para biosíntesis Thiothrix, Beggiatoa (anaerobia H2S facultativa, principal causante de obstrucciones) María Cecilia Arango Jaramillo + 1/2 O2 ________________ > S + H2O + 41 cal Bacterias que producen color en el agua Bacterias que al oxidar Fe++ y Mn++ producen indirectamente alteraciones de color en el agua María Cecilia Arango Jaramillo La producción de color en el agua es importante en abastecimientos provenientes de pozos El hierro contenido en sus aguas promueve la actividad oxidante de las bacterias María Cecilia Arango Jaramillo Crenothrix, Leptothrix, Gallionella Obtienen energía oxidando Fe++ (soluble) Fe+++ (insoluble) Coloración pardo bermellón en el agua María Cecilia Arango Jaramillo Bacterias que producen olor y sabor en el agua Origen del olor y del sabor: bacterias y otros microorganismos María Cecilia Arango Jaramillo Productos de descomposición de bacterias anaerobias: – Mercaptanos – Gas sulfhídrico – Subproductos aminados – Ácidos grasos, etc María Cecilia Arango Jaramillo Olor intenso en el agua El sabor Desechos Microorganismos (bacterias) Sabor en el agua Se acentúa con la cloración, especialmente si es producido por compuestos fenólicos María Cecilia Arango Jaramillo Actinomycetos: Promueven la descomposición de: – Plantas acuáticas – Algas (Anabaena, Oscillatoria, Aphanizomenon, diatomeas) Utilizan su nitrógeno a expensas del cual aumentan sus poblaciones Olor y sabor en el agua María Cecilia Arango Jaramillo Streptomyces produce olor a tierra en: el agua el suelo en cultivo Producen olor y sabor en el agua: Crenothrix (ferrobacteria) El cloro libre intensifica este olor María Cecilia Arango Jaramillo Beggiatoa (Sulfobacteria) Origen de la flora microbiana en el agua María Cecilia Arango Jaramillo Origen de la flora microbiana La flora del agua atmosférica es proporcionada por el aire y es lavada con la lluvia en las partículas La flora de las aguas subterráneas es afectada por procesos de filtración María Cecilia Arango Jaramillo La flora de las aguas superficiales llega al agua periódicamente del aire del arrastre superficial de tierra de vertimientos domésticos e industriales María Cecilia Arango Jaramillo Distribución de los microorganismos en el medio acuático María Cecilia Arango Jaramillo Los microorganismos pueden estar a cualquier profundidad Hasta en las fosas oceánicas María Cecilia Arango Jaramillo Las capas superiores y los sedimentos del fondo albergan las mayores poblaciones de microorganismos, particularmente en aguas profundas María Cecilia Arango Jaramillo Microorganismos planctónicos Floración: crecimiento excesivo, explosivo Dan color aparente al agua: rojo, pardo, verde, ambar, amarillo Microorganismos bentónicos Algunos forman biopelículas Oscillatoria erytrea Mar Rojo María Cecilia Arango Jaramillo Microorganismos planctonicos y bentónicos ( fotosíntéticos y heterótrofos ) Bentos: Fotótrofas y hetrótrofas ZONA LITORAL ZONA LIMNÉTICA ZONA PROFUNDA Planton: Fotótrofas y hetrótrofas Epiliton: heterótrofas bentónicas sobre partículas Nivel de compensación Oxidantes del Azufre Bentos: hetrótrofas, muchas anaeróbicas Sedimentación María Cecilia Arango Jaramillo Aguas bien aireadas, metabolismo oxidativo. Gran variedad cualitativa pero no cuantitativa de especies Sistema fluvial Predominio de bacilos gram-negativos anaerobios facultativos. Dominio de las algas verdeazuladas, flagelados y bacterias micro aerófilas. Producción de CH4, FeS. Etapas terminales: ausencia de eucariotas excepto protozoos anaerobios (Bodo spp.), y ocasionalmente metazoos como Tubifex spp. Muy pocas especies. Reducción de N03-. Cesa la nitrificación, producción de H2 y Reducción de Mn y de productos de la fermentación. Reducción de Fe(lll) puede liberar P S04 2- Afloramiento de bacterias fototróficas soluble. Poblaciones que crecen con H2S.Producción de FeS a de diatomeas y partir de Fe (lll) reducido. clorofíceas. Potencial dePredominio oxidoreducción completo de anaerobios y María Cecilia Arango Jaramillo desaparición de microaerófilos y la mayoría de anaerobios facultativos Hay una diversidad de pruebas para intentar supervisar la calidad del agua No se utiliza la enumeración de bacterias de cada comunidad, porque: Es difícil por los métodos sofisticados que requiere La comunidad bacteriana varían mucho y rápido ante cambios ambientales. María Cecilia Arango Jaramillo Es más sencillo identificar y enumerar pequeños invertebrados bénticos o algas perifíticas. Aguas residuales La polución tiene lugar cuando compuestos o microorganismos indeseables penetran en el ambiente acuático y cambian sus propiedades y con ellas se pierde el equilibrio produciéndose una variación en la distribución y composición de la comunidad. María Cecilia Arango Jaramillo Los microorganismos pueden contribuir a la contaminación de diversas maneras: – Produciendo enfermedades – Creando una biomasa estéticamente desagradable – Generando metabolitos tóxicos. María Cecilia Arango Jaramillo Enfermedades producidas por microorganismos acuáticos María Cecilia Arango Jaramillo En áreas de polución doméstica predominan: Bacterias: Coliformes Estreptococos fecales Especies de Bacillus, Proteus, Clostridium, Thiothrix, Thiobacillus,etc. Patógenos causantes de infecciones del tracto intestinal María Cecilia Arango Jaramillo Los microorganismos en el agua pueden afectar la salud de personas, animales, plantas y otros organismos María Cecilia Arango Jaramillo Organismos patógenos transportados por el agua Bacterias Virus Protozoos Escherichia Salmonella Shigella Vibrio Leptospira Mycobacterium Enterovirus Hepatitis A Adenovirus Coxsackie A y B Reovirus Parvovirus Entamoeba Acanthamoeba Giardia Schistosoma María Cecilia Arango Jaramillo Si hay fecales en el agua de consumo, hay posibilidad de: Fiebre tifoidea: Salmonella tiphi, otras salmonelas Transmisión por alimento y eventualmente por el agua Cólera Vibrio cholerae Endémica en Asia: niños Epidémica en América: adultos y niños María Cecilia Arango Jaramillo Disentería amebiana: Entamoeba hystolitica agua y alimentos Disentería bacilar o shiguelosis: Shiguella spp Mayor susceptibilidad en niños de 1 - 4 años María Cecilia Arango Jaramillo Parasitosis: Tenias Áscaris Tricocéfalos Hepatitis A o hepatitis viral infecciosa Persona a persona Alimentos Agua María Cecilia Arango Jaramillo Moluscos contaminados Otras enfermedades: Poliomielitis Gastroenteritis viral y por Escherichia coli Dermatomicosis En aguas recreacionales con más de 2500 coliformes/100ml, pueden aparecer María Cecilia Arango Jaramillo infecciones de ojos, nariz, oídos y garganta Propagación de virus humanos en el agua Excretas humanas Impregnación de suelos Mares Aguas residuales Ríos y lagos Abono con lodos de depuradoras Agua subterránea Mariscos Recreación Agua potable HOMBRE Verduras María Cecilia Arango Jaramillo Agua de riego Aerosoles Contaminación por microorganismos patógenos Los microorganismos patógenos se encuentran en todas las aguas residuales María Cecilia Arango Jaramillo La utilización indiscriminada de los mismos cursos fluviales para: baños agua de bebida y eliminación de residuos Pone la población en peligro A no ser que los cauces de agua se examinen y traten minuciosamente. María Cecilia Arango Jaramillo Para evitar las enfermedades existen: Procedimientos para examinar el agua y determinar su calidad microbiológica. Métodos de purificación del agua para proporcionar agua potable y segura Métodos de tratamiento de aguas residuales antes de su eliminación o reutilización María Cecilia Arango Jaramillo Procedimientos para examinar el agua y determinar su calidad microbiológica. María Cecilia Arango Jaramillo El aislamiento de un microorganismo patógeno constituiría la prueba irrefutable de peligro potencial Pero pueden estar en número tan exiguo que su aislamiento sea difícil y no adecuado como sistema de "alarma". María Cecilia Arango Jaramillo Los procedimientos actuales de análisis del agua se basan en que: la mayoría de los microorganismos patógenos alcanzan cauces como resultado de la contaminación fecal Detectarla a bajos niveles es la mejor garantía para preservar la potabilidad de las reservas de agua. María Cecilia Arango Jaramillo La contaminación fecal puede ser demostrada mediante la detección en el agua de bacterias que están presentes en números muy elevados en el contenido intestinal del hombre y de otros animales. "Prueba de la Determinación de Coliformes”: Única prueba microbiológica estatutaria vigente en muchos países del mundo María Cecilia Arango Jaramillo Un examen bacteriológico estricto no garantiza completamente que la muestra de agua se encuentre necesariamente libre de otro tipo de patógenos que tengan características de supervivencia distintas. María Cecilia Arango Jaramillo Un incremento general en la incidencia de un patógeno exigiría rápidamente el uso de otros análisis más complicados. Para qué se hacen los análisis de agua: Evaluar la calidad de las aguas de abastecimiento doméstico a nivel urbano y rural Evaluar la calidad de las aguas costeras y aguas dulces destinadas a recreación Detectar la influencia de los pozos sépticos, ubicados en la cercanía de la línea de costa y de ríos y quebradas María Cecilia Arango Jaramillo Analizar los aportes de los pluviales a la carga bacteriana del cuerpo receptor Cuantificar la influencia de descargas puntuales importantes, como plantas de tratamiento de líquidos cloacales e industriales. María Cecilia Arango Jaramillo Microorganismos indicadores de la calidad del agua En el análisis rutinario de aguas no se aislan patógenos porque: Podrían no aparecer en muestras de laboratorio pues: – Tienen acceso en forma esporádica – No sobreviven en el agua por mucho tiempo Necesitan mucho tiempo para detectarse Si están en número muy pequeño no se pueden detectar por métodos de laboratorio María Cecilia Arango Jaramillo Se usan microorganismos indicadores: Su presencia en el agua prueba que está polucionada con material fecal de personas o animales de sangre caliente Se encuentran sólo en aguas polucionadas Y cuando están presentes en el agua indican que hay patógenos María Cecilia Arango Jaramillo Método de determinación del número de gérmenes Número de gérmenes: Número de unidades formadoras de colonias totales o de una especie determinada en un gr o en 1 ml de material investigado bajo condiciones de cultivo definidas María Cecilia Arango Jaramillo Métodos de determinación del número de gérmenes: Métodos del número más probable (NMP). Método de filtro de membrana Método de la placa vertida Método de título María Cecilia Arango Jaramillo Método del número más probable Paralelamente varias series decimales de dilución (mínimo tres) en medio de cultivo líquido. Número de tubos con crecimiento NMP, tablas de McRady, 100 ml de muestra María Cecilia Arango Jaramillo Colimetría Prueba Presuntiva Inoculación en caldo lactosado No producción de gas Producción de gas + - Fin de la prueba Prueba Confirmativa Resiembra a partir de los tubos positivos caldo lactosado Siembra de muestras + en EMB Colonias pequeñas, con centro oscuro y brillo metálico + O Siembra en tubos con CLVBB Producción de gas + Terminación de la prueba Colonias más típicas de siembra por estría EMB Coloración de Gram: Bacilos Gram - no María Cecilia Arango Jaramillo esporulados Método de filtro de membrana Filtro estéril sobre unidad de filtración de 0.45 Se filtra cierto volumen de agua: bacterias quedan retenidas El filtro se coloca sobre soporte absorbente saturado con el medio adecuado. Incubar en cajas de petri especiales que permiten acomodar el soporte y el medio adecuado Desarrollo de colonias sobre el filtro María Cecilia Arango Jaramillo Ventajas: Examinar grandes volúmenes de agua Más rápidas que técnicas de tubo Estyimación cuantitativa de tipos de bacterias (coliformes, etc.) Limitación Aguas con muchos sólidos disueltos o suspendidos NMP = #coliformes x 100/ vol filtrado María Cecilia Arango Jaramillo Contaminación debida a materia orgánica demandante de oxígeno: La materia orgánica biodegradable de origen doméstico, agrícola o industrial puede marcar cambios en un cuerpo de agua Principalmente como consecuencia de la alteración en el equilibrio de O2 de agua. María Cecilia Arango Jaramillo El O2 tiene una solubilidad en el agua relativamente baja (9,8 ppm (mg/l) a 20°C), y la actividad microbiana puede consumir con rapidez el O2 disuelto. María Cecilia Arango Jaramillo DBO: Cantidad de oxígeno requerido por las bacterias, para descomponer la materia orgánica bajo condiciones aeróbicas. Condiciones aeróbicas + 200C + número suficiente de bacterias La materia orgánica es descompuesta en CO2 y agua. María Cecilia Arango Jaramillo Tiempo que tarda la materia orgánica en descomponerse: 10 días En la práctica cinco días, período en el cual se descompone entre el 70 - 80% de la materia orgánica. En este caso a la prueba se le nombra DBO5 María Cecilia Arango Jaramillo La prueba de DBO permite : Conocer la contaminación de un cuerpo de agua con aguas residuales domésticas o industriales, en términos del oxígeno que requieran para oxidar la materia orgánica que llevan en solución, bajo condiciones aeróbicas. Estas pruebas son de rutina en: Las plantas de purificación de agua En el cobro de las tasas retributivas. María Cecilia Arango Jaramillo Para hacer este bioensayo se requiere : Proteger las muestras para evitar la aireación Según los métodos APHA-AWA, diluir con agua destilada las muestras con mucha materia orgánica, para garantizar la oxigenación, debido a la poca solubilidad del O2 (9 mg/l a 200C ). Aguas naturales muy limpias no necesitan dilución. No deben existir tóxicos en el agua Las condiciones ambientales y el nivel de nutrientes para las bacterias deben ser apropiados María of Cecilia Jaramillo Standard Methods for Examination Water Arango and Wasted Water Método de medición del DBO Si hay necesidad, se diluye la muestra Ajustar la temperatura a 200C Airear la muestra, por agitación, hasta alcanzar nivel de saturación Llenar con la muestra dos o más botellas Winkler A una de las botellas se le mide oxígeno, las demás se dejan en incubación por 5 días a 200C. Al final de este tiempo, se mide el oxígeno presente Se resta el valor obtenido en la muestra analizada el primer día La diferencia en la en la cantidad de oxígeno equivale al valor de DBO presente en la muestra. María Cecilia Arango Jaramillo Standard Methods for Examination of Water and Wasted Water Métodos de purificación del agua para proporcionar agua potable y segura María Cecilia Arango Jaramillo Tratamiento de coagulación - sedimentación Se espera que con este tratamiento se remuevan entre el – 40 - 50% de de la DQO – 80 - 90 % de sólidos suspendidos, incluyendo los microorganismos María Cecilia Arango Jaramillo Costos de la coagulación - sedimentación : Aunque el área de establecimiento es más pequeña que la de los tratamientos biológicos, los equipos son costosos. Los costos de operación tales como coagulantes, control permanente de pH y energía son relativamente altos. Adaptable a: Tratamiento de aguas de abastecimiento Tratamiento de aguas residuales de la mayoría de las industrias desde la metal - mecánica a las de pulpa y papel. María Cecilia Arango Jaramillo Tratamiento convencional Agua cruda Cribado Clarificador Cloración Sedimentación Canales de sedimentación Almacenamiento María Cecilia Arango Jaramillo Cámara de mezcla del floculante Cámara de floculación Distribución