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Desde la costa hasta el
talud continental en
ambos laterales de la ZCP
Monitoreo de Vibrio spp.
de importancia
epidemiológica
Jurquiza V., Odizzio M., La Torre S., Salomone A., Sanabria A.,
García A., Izzo S. y Costagliola M.
Género Vibrio
Bacilos pleomórficos
Gram-negativos
Habitantes naturales
del ambiente acuático
> 90 especies identificadas
12 patógenas para el hombre
8 asociadas a ETAs
3 importancia epidemiológica
Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus y Vibrio vulnificus
implicadas en brotes de enfermedad en humanos
V. cholerae y V. parahaemolyticus
manifestación clínica  gastroenteritis
V. vulnificus infecciones no intestinales
 septicemias, infección de heridas
http://vibrio-cholerae.org/
Vibrio cholerae
Vibrio parahaemolyticus
Serotipos O1 y O139
gen ctx
toxina CT
responsable de las
epidemias de cólera
Todos los serotipos
O:K pueden producir
enfermedad
TDH /TRH factores
de virulencia
http://research.pomona.edu/jane-liu/
liu-lab-research/
http:hku-envhealth.blogspot.com.ar/
Broberg, 2011
Vibrio vulnificus
Biotipo 1
Patógeno oportunista
en personas
inmunosuprimidas
www.aafp.org/afp
Volume 76, (4) 2007
El contagio se produce por ingestión de alimentos de origen marino
(pescado o mariscos) o aguas contaminadas.
V. vulnificus, además, es contaminante de heridas abiertas a partir del
contacto con agua contaminada o como consecuencia de la manipulación de
pescados o mariscos contaminados.
En el ambiente
•Libre en suspensión
•Asociado a partículas formando biofilms
•Asociado a plancton (copépodos),
•Formando parte de la flora comensal de peces, mariscos y crustáceos
Lutz C. et al. 2013. Front.Microbiol. 4: 375.
• Tº del agua
factor más importante que rige la distribución y abundancia de Vibrio spp.
• Salinidad
• Disponibilidad de nutrientes
• Concentración de plancton
• Asociación con organismos marinos
Debido a que, el medio ambiente puede actuar
como reservorio y vehículo de transmisión.
OBJETIVOS
Monitorear la presencia de Vibrio spp. de importancia epidemiológica
en muestras ambientales para garantizar la inocuidad de los productos pesqueros.
Aportar datos a los estudios de evaluación de riesgo
microbiológico para Vibrio spp.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se analizaron muestras de agua y sedimento
METODOLOGÍA
Agua
método cualitativo
Presencia/
Ausencia (P/A).
Sedimento
método cualitativo
Manual de Procedimientos
para el Aislamiento,
Identificación y
Caracterización de V.
parahaemolyticus de la OPS
y el BAM (FDA)
NORMA ISO/TS 21872
+
Recuento experimental
Molinari et al.
Confirmación por
PCR
Detección de genes
especie-específicos
y factores de
virulencia
RESULTADOS
Fueron recuperados 123 aislamientos presuntivos
de V. cholerae, V. parahaemolyticus y V. vulnificus.
Vibrio cholerae
Gen VC 16S-23S
 No fue detectado en agua ni en
sedimento.
300 pb
PCR Vibrio cholerae agua. Gen VC-F2 y VCmR1 (300 pb)
C+: V. cholerae ATCC 14033. PM: Marcador de peso molecular
Vibrio vulnificus
 No fue detectado en agua.
 Sedimento, fueron identificados bioquímicamente
4 aislamientos:
3
en la estación 3u de la Costal II.
1
en la estación 2 Costal I.
Vibrio parahaemolyticus
 Agua
4 aislamientos positivos,
estaciones 1u y 2 u de la Costal II.
 Sedimento
43 aislamientos positivos,
estaciones 1u, 2u y 3u de la Costal II.
Se confirmó la presencia del gen toxR, especieespecífico de V. parahaemolyticus.
No fueron detectados aislamientos toxigénicos
(ausencia de los genes tdh y trh).
PCR V. parahaemolyticus (gen toxR 368 pb) en sedimento.
10: C + (ATCC 17802); PM: Marcador de peso molecular 100 pb.
PCR múltiple genes tdh (250 pb)y trh (500 pb)
en sedimento. 13. C+ CAIM 1772 tdh+/trh+
[http://www.ciad.mx/caim/CAIM.html]).
Cuantificación de
Vibrio
parahaemolyticus
Costal II
Costal I
Est.
UFC/g
1u
370
2u
330
3u
200
5u
-
1
-
2
-
3
-
5
-
Asociación entre detección de V. parahaemolyticus en agua y sedimento
y su relación con temperatura y salinidad
Agua / Temperatura
Agua / Salinidad
22
34,5
21
34,0
33,5
20
Salinidad
Temperatura
33,0
19
18
17
32,5
32,0
Se observa
> frecuencia de
aislamiento de
31,5
31,0
16
30,5
15
30,0
14
13
P
A
Mediana
25%-75%
Rango
de valores
29,5
P
A
Presencia/Ausencia de Vibrio
parahaemolyticus
Presencia/Ausencia de Vibrio parahaemolyticus
Mediana
25%-75%
Rango
de valores
Vibrio
parahaemolyticus
con Tº y  Sal.
Sedimento / Salinidad
Sedimento / Temperatura
34,4
22
Temperatura (ºC)
19,44-21,29
33,8
20
Salinidad
Temperatura
18
16
14
33,2
Salinidad
30,14-32,43
32,6
12
32,0
10
8
6
P
A
Presencia/Ausencia de Vibrio parahaemolyticus
Mediana
25%-75%
Rango
de valores
31,4
P
A
Presencia/Ausencia de Vibrio
parahaemolyticus
Mediana
25%-75%
Rango
de valores
Diagramas de cajas (Box Plots) obtenidos para temperatura y salinidad en muestras de agua y sedimento,
según la recuperación de V. parahaemolyticus: P (presencia) - A (ausencia).
CONCLUSIONES
 Si bien se demostró la presencia de V. parahaemolyticus, no fueron
detectados marcadores de virulencia.
 En función de los resultados obtenidos y de acuerdo a la normativa
internacional de aceptación de V. parahaemolyticus en productos
de la pesca (< 102 ufc/g), el riesgo de padecer enfermedad por el
consumo de productos pesqueros en la ZCP podría calificarse bajo.
 Debido a que, es la primera vez que se realiza este análisis en la
zona, resulta necesario efectuar repeticiones del mismo, con
variaciones espacio-temporales que refuercen estas conclusiones.
GRUPO DE TRABAJO MICROBIOLOGÍA
URUGUAY:
Dirección Nacional de Recursos Acuáticos-DINARA
Marta Odizzio, Sabrina La Torre y Analía Sanabria
ARGENTINA:
Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero-INIDEP
Marcela Costagliola, Verónica Jurquiza, Andrea Salomone, Analía
García y Silvina Izzo
Criterios microbiológicos para Vibrio parahaemolyticus
 Holanda, < 102 ufc/g punto de venta para productos pesqueros importados
congelados, cocinados o crudos.
 Reino Unido la Health Protection Agency (HPA), productos listos para el
consumo, en el punto de venta, insatisfactorios > 102 ufc/g.
 Estados Unidos, límite máximo un nivel de 102 ufc/g.
 Australia y Nueva Zelanda, en manufactura y venta m=102; M=103,
(n=5; c=2; m=102; M=103)
 Japón para ostras crudas < 102 ufc/g.
 España límite máximo de 102 ufc/g, (n=5, c=0, m=M=102 ufc/g).
A partir de capturas procedentes de zonas de riesgo, debería establecerse un plan de
vigilancia especial en relación con algunas de las serovariantes principales del O3:K6
surgidas en los últimos años en relación con brotes de enfermedad.
AESAN, 2010
¡Muchas gracias…!