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Riesgos genéticos
asociados a técnicas de
reproducción asisitida
Presenta: Dr. Pedro A. Ponce Barberena
Profesor titular: Dr. Héctor S. Godoy Morales
Profesor asociado: Emb. Luciano Cedillo García-Lascurain
CURSO DE SUBESPECIALIDAD EN BIOLOGIA DE LA
REPRODUCCION HUMANA
HOSPITAL ANGELES PEDREGAL
Marzo 2011- Febrero 2013
Introducción
Enero 14 y 15 2005
Hospital for Sick Children – Toronto – Ontario – Canadá
45 profesionales
Riesgos del embarazo y del feto
Después de un periodo de infertilidad y con TRA
Recomendaciones
Introducción
Más de 2 millones de niños nacidos por TRA
RCIU OR 1.59 IC95%( 1.20-2.11)
Parto pretérmino < 33 SDG OR 2.99 IC95%( 1.54-5.80)
Parto pretérmino < 37 SDG OR 1.93 IC95%(1.36-2.74)
Bajo peso al nacer < 1,500 g OR 3.78 IC95%(4.29-5.75)
Muerte in utero OR 2.40 IC95%(1.59-3.63)
Introducción
Síndrome de Beckwith-Wiedemann
Síndrome de Angelman
Infertilidad
Métodos
Grupo de investigadores y clínicos expertos en:
epidemiología, ginecología y obstetricia, embriología clínica,
biología molecular, genética clínica y de cáncer, impronta
genómica, consejería genética, bioética , salud de la mujer y
leyes.
Propósito
Resumen de los conocimientos actuales de los riesgos de los
hijos nacidos por ART
Redes de contactos y la transferencia de conocimientos entre
los expertos en la materia
Determinar si se ameritan más estudios
Desarrollar recomendaciones para futuras investigaciones en
los desenlaces clínicos causados por alteraciones genéticas o
epigenéticas despúes de la infertilidad o TRA.
Resumen de la revisión
sistemática
Judith Hall MD.
Niños de embarazo único están tienen mayor riesgo de parto
pretérmino, muy bajo peso al nacer, muerte perinatal.
* Anormalidades cromosómicas relacionadas al sexo (
anormalidades en cromosomas paternos)
Los embarazos gemelares por TRA = espontáneos
* Evidencia sugestiva pero no concluyente para la pérdida
del imprinting genómico ( S. B-W y S. Angelman)
Resumen de la revisión
sistemática
Los datos fueron insuficientes o no sugestivos para la
asociación de FIV con :
- Infecciones respiratorias
- Hipospadias
- Trastornos del desarrollo y psicosociales
- Malformaciones mayores
- Cáncer infantil
- Anormalidades del crecimiento
Dificultades
Heterogéneo en indicaciones para el tratamiento y TRA
Riesgo a priori de parejas infértiles para defectos al
nacimiento
Asignación del grupo control con parejas infértiles que
conciban sin tratamiento ó fértiles que conciban con TRA
Reporte de 2 casos no relacionados de Síndrome de
Angelman concebidos por ICSI
Paciente 1 :
3 años de edad
Referido por retraso en el desarrollo : habla - hipotonía
Pobre balance, dificultad
exageradamente feliz.
para
dormir,
personalidad
Madre de 33 años y padre de 31 años (oligospermia y
astenozoospermia)
Embarazo normal
Paciente 1 :
Cariotipo del paciente 46 XX y normal para X frágil
RM y estudio metabólico normal
Exámen físico : macrosomia, obesidad, microbraquicefalico,
facies de felicidad, brazos flexionados
FISH: normal
Paciente 1 :
Southern Blot: anormal
- Una banda fuertemente no metilada y una con metilación
débil (10% de la intensidad por densitometría)
 PCR del exon 1 del gen SNRPN : igual.
 METILACION EN MOSAICO
 Padres con estudio normal
Paciente 2:
2 años 8 meses
Referido por retraso mental y deficiencia en el habla
Vómitos frecuentes , hiperactiva y muy amigable
Microbraquicefalia, boca ancha, prognatismo, hipotonía de
tronco, marcha ataxica
Electroencefalograma: actividad epileptiforme
Habla en sonidos no palabras
Paciente 2:
Madre de 31 años y padre de 32 años (oligospermia , hipohipo)
Embarazo normal
Cariotipo ambos padres normal
FISH : normal
Southern Blot y PCR: anormal
- Una banda no metilada
Individuos normales:
Gen SNRPN :
- Alelo materno metilado
- Alelo paterno no metilado
Coincidencia o casualidad por ICSI
Síndrome de Angelman :
- 1/15 000
Defectos de imprinting : (< 5%)
- 1/300 000
2 casos (ambos por defecto de imprinting) ninguno por
deleción del cromosoma 15q (70%).
La metilación del cromosoma 15 no se realiza antes de la
ovulación
Sino durante o después de la fertilización (defecto de
imprinting)
ICSI:
- Fertilización y activación del ovocito
- Introducción del acrosoma y enzimas
Stress mecánico en el ovocito y daño de estructuras intracelulares
50% de éxito ICSI
Falta de producción o disfunción de factores para el imprinting del
cromosoma 15.
Young et al. (2001) : Bajo ciertas condiciones el cultivo in vitro de
de pre-embriones de ovejas que se fertilizan en vivo pueden
producir un crecimiento exagerado.
El imprinting materno suceptible.
Estudios prospectivos y de metilación prenatal.
Introducción
Síndrome de Beckwith-Wiedemann (BWS)
Defecto congénito : crecimiento excesivo y neoplasia
Macrosomía, macroglosia, defectos de linea media abdominal y
predisposición a cáncer embrional
Epigenético – pérdida del imprinting
11p15
(15%)H19: RNA no traducido
IGF2: factor de crecimiento autocrino
(100%)LIT1:RNA no traducido (gen KvLQT1)
Introducción
Pérdida del imprintig : hiper-hipo metilación
Activación aberrante del IGF2.
Métodos
1994 Registro de BWS en el Genetic Epidemiology Branch
of the National Cancer Institute.(NCI)
Diagnóstico clínico (2/5): macroglosia, peso y talla >90,
hipoglicemia en el primer mes de vida, pliegues redundantes
en las orejas, defecto de línea media.
2001 Washington University
Cuestionario 1994-2001 (natural o TRA por tipo)
Genómica del DNA : linfocitos de sangre periferica
Gen H19 y LIT1 ( Zeta-Probe GT blotting)
Resultados
Incremento en la frecuencia de FIV en niños con BWS:
-
7 BWS por FIV-TE
-
Esporádicos sin historia familiar de BWS
-
6/7 ovocitos y espermatozoides propios
-
1/7 ovocito donado y espermatozoide propio
-
4/7 ICSI con espermatozoides eyaculados
-
1/7 ICSI con TESE
-
2/7 sin ICSI
Resultados
3/7 Washington University y 4/7 NCI
Washington University : TRA con (3/65)BWS 4.6%
NCI: Estudio no sistemático de las TRAs.
Resultados
Características clínicas de los niños con BWS que nacieron
después de TRA:
Sin diferencias comparado con niños nacidos de embarazos
espontáneos.
Característica
p
Frecuencia (%)
Macrosomía
5/7 (71%)
0.587
Hipoglicemia
2/7 (29%)
0.390
Defecto
abdominal
6/7 (86%)
0.770
Macroglosia
6/7 (86%)
0.957
Pligues en orejas
3/7 (43%)
0.306
Hemi-hipertrofia
3/7 (43%)
0.900
Resultados
Alteraciones del impronting en pacientes con BWS que
nacieron después de TRA:
6/7 muestras
5/6 imprinting anormal de LIT1 ( hipometilación)
- 1/6 LIT1 + H19 (hipermetilación)
1/6 metilación normal ( LIT1 y H19)
Resultados
Resultados
Discusión
Primera evidencia de asociación TRA y BWS.
Defecto específico de imprinting (6/7)
Sugieren el aumento en la frecuencia de defectos epigenéticos con
algunos aspectos de la TRA.
Síndrome de Angelman y BWS : Alelo materno afectado (no
metilado)
Improbable que sea relacionado a la diferenciación
espermática.
ICSI u otra TRA: interrupción de la metilación del genoma
materno o en etapas tempranas del embrión.
Conlcusiones
Asociación real
Número de pacientes, llenado del cuestionario
Factores: medio de cultivo para el ovocito, tiempo de
exposición a un medio específico o factores de crecimiento,
la etapa de la diferenciación del espermatozoide al momento
del ICSI
ICSI por sí mismo
Más estudios para explicar la patogénesis y la asociación
Prevención.