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CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS
No. 33
MANUAL DE PRÁCTICAS PARA
PROCESAR LAS TECNICAS BACTERIOLOGICAS
PROFRA: FAUSTINA
OROZCO GUTIÉRREZ
SAN LUIS RIO COLORADO, SONORA
SEMESTRE: AGOSTO 2011 - ENERO 2012
INDICE
1.- Objetivo General
2.- Objetivo Particular
3.- Práctica #1 Conocimiento y uso del microscopio
4.- Práctica #2 El Objetivo de Inmersión
5.- Práctica #3 Frotis de Saliva
6.- Práctica #4 Exudado nasal
7.- Práctica #5 Diferencias de medio de Cultivo
8.- Práctica #6 Esterilización de material (Uso de autoclave)
9.- Práctica #7 Preparación de medios de Cultivo en Tubo
10-Práctica #8 Preparación de medios de Cultivo en Caja de petri
11- Práctica #9 Cultivo Faringeo
12- Práctica #10 Frotis Bacteriano
13- Práctica #11 Tinción de Gram
14- Práctica #12 Antibiograma
15- Práctica #13 Urocultivo
1
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
OBJETIVO GENERAL.
Los cambios que se han efectuado en el sistema educativo nacional implican
modificaciones en los métodos de enseñanza, estudiar la BACTERIOLOGIA en
forma práctica traerá como consecuencia que el alumno adquiera, además de
conocimientos básicos, experiencia en el uso de métodos de investigación y
desarrolle aún más su capacidad para plantearse objetivos.
Con ayuda de este manual de prácticas el alumno obtendrá conocimientos
concretos sobre el estudio de Bacterias de interés médico.
2
Profra: Faustina Orozco Gutérrez
OBJETIVO PARTICULAR
Se busca que el estudiante, al realizar las prácticas reafirme los conocimientos
teóricos adquiridos en el aula y se motive para la investigación, experimentación y
el análisis. Asimismo, se espera que se interese en los procesos cambiantes del
mundo que nos rodea y adquiera una actitud positiva y transformadora de su
medio.
Los materiales necesarios para las prácticas son de fácil obtención y de bajo
costo, de manera que todo estudiante de cualquier nivel socioeconómico tenga
acceso a ellos.
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA
#1
CONOCIMIENTO Y USO DEL MICROSCOPIO
OBJETIVO
El alumno conocerá las partes del microscopio y los cuidados que requiere este
aparato, y ejercitará la práctica necesaria para su manejo.
INTRODUCCIÓN
¿Qué es un microscopio?
El microscopio es un instrumento de precisión que se utiliza para observar objetos
pequeños que no pueden ser examinados a simple vista. El ojo humano no es
capaz de distinguir objetos menores a 0.1 mm.
La importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias biológicas ha sido
fundamental. Gracias a su invención y perfeccionamiento se descubrieron las
células, cuáles son sus partes, cómo son los microorganismos, cómo se realizan
las funciones celulares, etc. En suma, este instrumento de observación le ha
permitido al ser humano asomarse al mundo microscópico.
CARACTERISTICAS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO:
En esta práctica, el alumno utilizará el microscopio compuesto. La capacidad de
aumento del microscopio compuesto depende del poder de resolución, éste se
define como la distancia mínima entre dos puntos que es posible distinguir por
separado, en lugar de ser apreciado como un solo punto borroso. Dicho de otra
forma, es la capacidad del microscopio para proporcionar imágenes separadas y
bien definidas de objetos que están separados por distancias muy pequeñas. El
poder de resolución depende en gran medida de la calidad de las lentes, las lentes
de mayor calidad (mejor pulidas) proporcionan mejor resolución.
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
4
El microscopio compuesto es el que con mayor frecuencia se utiliza en los
laboratorios de tipo estudiantil y está provisto de una serie de lentes que aumentan
el tamaño de los objetos. Estas lentes se encuentran en el ocular y los objetivos.
Un microscopio puede tener un ocular ( microscopio monocular) o bien dos
(microscopio binocular) .
Este microscopio funciona con luz ( solar o artificial) , por esta razón, para que un
objeto pueda ser observado debe ser semitransparente o al menos translúcido, es
decir, debe dejar pasar a través de él algunos rayos luminososLas células, por ejemplo, son tan pequeñas y delgadas en su mayoría que dejan
pasar la luz.
Un objeto que no sea translúcido se verá totalmente negro a través del
microscopio óptico y no podrá ser observado.
Cuando los rayos luminosos pasan a través del objeto, llegan a las lentes que
amplifican la imagen que captarán los ojos. La distancia entre el objeto observado
y el objetivo del microscopio determina el enfoque. Para un enfoque preciso, los
objetivos deben acercarse o alejarse con ayuda de los tornillos macrométrico y
micrométrico.
La mayoría de los microscopios compuestos están provistos de cuatro objetivos:
5X, 10X, 40X, y 100X. La X significa aumentos. Así, 5X significa cinco aumentos.
Para conocer cuantas veces se amplifica la imagen del objeto, se multiplica el
aumento marcado en los objetivos, así se obtiene la imagen aumentada 50, 100,
400 o 1000 veces, respectivamente 1.
1 Ciencias Naturales, Hernández Cervantes Cristina, DGETI, Pág33
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
5
CÓMO ENFOCAR LA IMAGEN EN EL MICROSCOPIO COMPUESTO
1.- Coloca una preparación sobre el orificio del centro de la platina.
2.- Mira el microscopio lateralmente ( no por el ocular) y usa el tornillo
macrométrico para bajar el tubo o subir la platina hasta que llegue al tope,
cuidando que el revólver esté situado en el objetivo de 10X, cada vez que inicies el
proceso del enfoque. Nunca bajes el tubo sin mirar lateralmente, pues
Éste puede llegar hasta la preparación y chocar con ella.
3.- Ve a través del ocular con ambos ojos. Aunque esto es difícil al principio, es
necesario acostumbrarse a ignorar las imágenes correspondientes a objetos que
estén fuera del campo del microscopio.
4.- Mira por el ocular, gira el tornillo macrométrico de tal manera que el tubo se
mueva hacia arriba ( o la platina hacia abajo) hasta que se observe una imagen.
Con el tornillo micrométrico se precisa el enfoque de la preparación.
5.-Una vez realizado el enfoque con el objetivo de 10X, puede hacerse
inmediatamente el enfoque a 40X girando el revólver para cambiar el objetivo de
10X por el de 40X y ajustando la imagen con el tornillo micrométrico.
6.-Para hacer observaciones con aceite de inmersión, sigue las instrucciones:
a) Después de enfocar la zona que se desea examinar con el objetivo seco
fuerte (40X), colocar una gota de aceite de inmersión sobre el cubreobjetos (justo
por donde pasa el haz de luz) y girar lentamente el revólver hasta poner en
posición el objetivo de inmersión (éste debe quedar sumergido en la gota de
aceite de inmersión ).
b) con el tornillo micrométrico, hacer ajustes leves de la imagen hasta lograr el
enfoque deseado. Lo anterior debe realizarse con mucho cuidado para no dañar la
lente. En caso de no encontrar el enfoque es recomendable regresar al paso 4 y
repetir los pasos 5 y 6.
c) Observar a través del ocular y enfocar únicamente con el tornillo micrométrico
para lograr nitidez en la imagen.
6
Imagen del microscopio compuesto
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
7
Realización de la práctica
Material
Muestras
2 porta objetos
agua
2 cubre objetos
cabellos
1 Microscopio compuesto
algodón
Colorante ( EOSINA)
Pipeta pasteur
DESARROLLO
1.- Escucha con atención la explicación de la profesora acerca de cuáles son las
partes del microscopio y sus funciones.
2.- Señala en el esquema, los nombres de cada una de las partes del microscopio.
Utiliza un color distinto para cada sistema.
3.- Dibuja los esquemas de las observaciones de cada una de las siguientes
preparaciones.
a) preparaciones húmedas o frescas. Cerciórate de que las lentes del microscopio
estén limpias.
b)
realiza un montaje húmedo con dos cabellos de distinto color con raíz,
cruzados uno sobre otro, agregarles 1 gota de agua, tápalo con el cubreobjeto,
observa al microscopio con objetivo 10x. A este procedimiento se le llama montaje
húmedo o fresco y la preparación también se denomina húmeda o fresca.
4.- En un porta objeto, agrega un pedazo de algodón, enseguida agregar 1 gota de
eosina, tápalo con el cubre objeto y observa con objetivo 10 y 40X.
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Actividad para el alumno
Dibuja las observaciones de preparación fija
1OX
_______________________
_______________________
_______________________
40X
_______________________
_______________________
_______________________
10X
______________________
_______________________
_______________________
40X
_______________________
________________________
________________________
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
CUESTIONARIO
1.- ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio para los estudios biológicos?
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_________________________________________________________
2.- ¿Por qué es necesario manejar con cuidado el microscopio?
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
______________________________________________________
3.- ¿Qué cuidados se deben tener al utilizar el microscopio?
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
______________________________________________________
4.-¿cómo debe ser un objeto para poder ser observado en el microscopio?
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
______________________________________________________
__________________________
_______________________
Nombre del alumno
Profesora: Faustina Orozco
FECHA:_____________________
10
PRÁCTICA #2
El objetivo de inmersión (100x)
Introducción:
Los objetivos de mayor aumento tienen una distancia focal muy pequeña, y los
rayos que desde la muestra se dirigen al objetivo atraviesan al vidrio del
cubreobjetos y al pasar el aire se separan de la normal y solo llega una pequeña
parte de la luz a la muestra; haciendo de este un problema para la visión. Pero
cuando se intercala una gotita de aceite de cedro (aceite de inmersión; que tiene
un índice de refracción casi igual al vidrio) entre el objetivo y el cubreobjetos los
rayos emergentes ya no se separan de la normal, si no que continúan su camino
sin desviación, consiguiendo así que una mayor cantidad de luz llegue al objetivo,
mejorando la visión. Se le llama objetivo de inmersión porque cuando se observa
con éste es necesario que el objetivo quede inmerso en el aceite de cedro,
también se le puede llamar objetivo mojado.
Cuestionario:
1.- ¿Qué nombres recibe el objetivo de 100x?
Objetivo de inmersión u objetivo mojado
2.- ¿De qué nos sirve emerger el objetivo en el aceite de cedro?
En que de esta forma los rayos de luz de la fuente de iluminación siguen su
camino sin desviarse, consiguiendo así que una mayor cantidad de luz llegue al
Objetivo
3.- ¿Por qué se le llama se le llama objetivo de inmersión?
Porque cuando se observa con este es necesario que el objetivo quede inmerso
(emergido) en el aceite de cedro.
MATERIAL: 2PortaObjetos, 1 lanceta, Eosina
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PROCEDIMIENTO:
1.- Realizar un frotis sanguíneo
2.- Poner 1 gota de sangre en un extremo del portaobjeto
3.- Con ayuda de otro porta objeto esperar a que la sangre recorra lo ancho del
porta, sobre la gota de sangre deslizar rápidamente con ayuda del porta hacia lo
largo del porta, quedando así el frotis.
4.- Esperar a que seque
5.- Fijar con alcohol por espacio de 30 Segundos
6.- Colorear con Eosina por 3 minutos
7.- Quitar el exceso del colorante en agua corriente y esperar a que seque
8.- Observar al microscopio con objetivo 10X
9.-Teñir con policromo por 3 minutos, quitar el exceso de colorante con agua
esperar a que seque.
10.- Agregar 1 gota de aceite de Inmersión y observar con 100X
11.- Dibujar lo observado
Nombre del Alumno:
Revisado:
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #3
FROTIS DE SALIVA (USO DEL MICROSCOPIO OBJETIVO 10X Y 100X)
Material:
1 porta-objeto
1 Hisopo
1 Mechero
1 Pipeta pasteur desechable
PROCEDIMIENTO
1.- Raspar la lengua con un Hisopo estéril
2.- En forma ovalada pasar el Hisopo al portaobjeto
3.- Pasar el porta-objeto por la flama del mechero para fijar la muestra “Teniendo
el máximo cuidado de NO sobre calentar la muestra “
4.- Agregar cristal Violeta o fushina fenicada por espacio de 2 minutos
5.- Quitar el exceso de colorante con agua de la llave
6.- Esperar a que seque y observar al microscopio con objetivo 10x y
100X(agregar 1 gota de aceite de inmersión)
7.- Dibujar lo observado identificando las formas de las bacterias que se observan
Objetivo 10X
Nombre del Alumno:
Revisado:
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
Objetivo 100X
PRÁCTICA #4
EXUDADO NASAL
MATERIAL:
1 Porta-Objeto
1 Hisopo
1 Mechero
1 Pipeta pasteur desechable
PROCEDIMIENTO
1.- Marca un espacio en el portaobjeto donde se hará el frotis
2.- Con un hisopo estéril tomar muestra de secreción nasal, pasando el Hisopo por
la fosa nasal.
3.- En forma ovalada realizar el frotis sin salirse del margen
4.- Pasar el porta-objeto por el mechero para fijar la muestra
5.- Teñir por espacio de 5 minutos con azul de metileno
6.- Quitar el exceso de colorante con agua de la llave
7.- Esperar a que seque y observar al micrsocopio primero con objetivo 10X y
después en 100x.
1.- ¿Qué es lo que se observa? ______________________________________
Dibújalo
Nombre del Alumno:
Revisado:
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #5
DIFERENCIAS DE MEDIOS DE CULTIVO
Tiempo estimado: 1 hora por parte
1.- Anotar el nombre del medio
2.- En un vidrio de reloj agregar un poco de medio y anotar sus características
3.- En un tubo Pyrex 13 X 150 agregar un poco de medio y agua destilada
4.- Agitar y observar que pasa
5.- ¿Qué necesitamos para que se haga la mezcla?
6.- ¿Qué sucede después de aplicar calor?
Material
2 tubos Pyrex
1 gradilla
1 mechero
1 vidrio de reloj
2 aplicadores de madera
1 pinza para tubo de ensaye
Reactivos
2 Medios de Cultivo
1 Agar
1 Caldo.
Nombre del Medio________________________________________
Características___________________________________________
Nombre del alumno:___________________________________
Revisado:
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA # 6
ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL
( USO DE AUTOCLAVE)
MÉTODO: VAPOR A PRESIÓN
INTRODUCCIÓN
Es un medio eficaz y práctico de esterilización por cuanto destruye tanto las
formas vegetativas como las esporas en un tiempo comprendido entre los 20 a 30
minutos..
El agua hierve a los 100° C según la presión atmosférica, pero sí se aumenta
esta, la temperatura será más alta, lo que se logra en un aparato llamado
autoclave
Generalmente la esterilización se realiza a 121° C con (15 libras de presión)
durante media hora, aunque algunos prefieren trabajar a presiones que van de 10
a 20 libras.2
P R O C E D I M I EN T O.
1.- Tapar los matraces y tubos de ensayo con algodón, después envolverlos
2.- ya que el material lo tenemos envuelto, procedemos llevarlo al autoclave,
donde esta previamente preparada con agua destilada o de garrafón.
3.- tapamos y cerramos perfectamente
4.- cuando empieza el vapor a salir se baja la válvula teniendo el cuidado de que
la presión No pase de 15 libras y la temperatura de 120° C por un tiempo de 30
minutos.
5.- Pasado el Tiempo dejar escapar el vapor, levantando la válvula, una vez fría,
procedemos a sacar el material esterilizado.
MATERIAL:
1 MATRAZ DE FONDO PLANO DE 125MLS.
TUBOS 13 X 100
ALGODÓN
PAPEL REVOLUCIÓN
CINTA SCOCH
2 Bacteriología, Bryan H., Bryan CH, Bryan A., Ed, Continental, Pág.119
1.- POR QUÉ NECESITAMOS ESTERILIZAR EL MATERIAL ANTES Y DESPUÉS
DE PROCESAR UN CULTIVO BACTERIOLOGICO?
__________________________________________________________________
____________________________________________________________
_______________________________________________________________
2.-QUÉ SUCEDERIA SI LA PRESIÓN DEL AUTOCLAVE SUBE MAS DE 20
LIBRAS?________________________________________________________
__________________________________________________________________
____________________________________________________________
3.- ANOTA EL TIPO DE MATERIALES QUE SE PUEDEN ESTERILIZAR EN EL
AUTOCLAVE
_______________________________________________________________
__________________________________________________________________
____________________________________________________________
_______________________________________________________________
4.- MENCIONA LOS TIPOS O METODOS DE ESTERILIZACIÓN QUE EXISTEN
A PARTE DEL METODO DE VAPOR A PRESIÓN.
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
______________________________________________________
ALUMNO:______________________
FECHA:________________________
PROFRA:____________________
PRÁCTICA #7
Preparación de Medios de cultivo en Tubo Líquido, Semi-sólido y Sólido
Material: 3 Tubos 13 x100, 1gradilla, 1 Mechero, 3 Espátulas
Tiempo Estimado: 1 hora cada parte del grupo.
PROCEDIMIENTO
1.- En una Gradilla etiquetar 3 tubos como Caldo Nutritivo (CN), Agar SIM
(SIM), Agar Endo (ENDO).
2.- Agregar el medio a cada tubo con una espátula, después agua destilada
a la mitad del tubo.
3.- Mezclar por *Frotación* (ojo) Frotación “NO Inmersión”
4.- Anotar las características de cada medio
a) Qué Sucede en cada medio?____________________________________
b) ¿Qué necesitamos hacer para que se mezcle perfectamente?
c) Después de aplicar__________________ ¿Qué paso?____________________
d) Menciona ¿Cuál medio es Líquido, Semi-sólido y Sólido ?
Nota: Los tubos que contengan Endo ponerlos Inclinados
Nombre del Alumno:____________________________________________
Revisado:_____________________________________________________
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRÁCTICA #8
PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO EN CAJA DE
PETRI
INTRODUCCIÓN
Todo material en el cual los microorganismos encuentran alimento y en el
que pueden reproducirse es un Medio de Cultivo.
Cuando los microorganismos de un cultivo son todos de la misma especie,
se dice que es un Cultivo Puro.
Cuando dos o más especies de microorganismos se desarrollan en un medio
se le conoce como un Cultivo Mixto.
Sí un cultivo contiene accidentalmente más de una especie de bacterias o
microorganismos, se habla de un Cultivo Contaminado.3
PROCEDIMIENTO
1.- Pesar _____________ (Medio Agar Nutritivo)
2.- Pasar el medio a un matraz de 125 mls.
3.- Agregar 100ml. De agua destilada
4.- Calentar en el mechero, pasar suavemente el matraz en la flama sin
dejar de mover en forma circular (No debe de tirarse el contenido, cuando
llegue al punto de ebullición)
5.- Antes de vaciar a la caja de Petri, Flamear la boca del matraz
6.- vaciar el contenido a la caja de petri.
7.- Refrigerar hasta utilizar de nuevo
Material:
Balanza granataria
Espátula
Mechero
Matraz de 125mls (esterilizado).
Caja de Petri (Esterilizada)
.
SE REVISA MEDIO PREPARADO POR EQUIPO
FECHA:________________________
PROFRA:__________________
FAUSTINA OROZCO GTEZ.
PRÁCTICA #9
Cultivo Faringeo
INTRODUCCIÓN
En microbiología se entiende por “Siembra” la operación que consiste en
depositar un germen asépticamente en un medio de cultivo.
Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios:
a) Practicarla en medios de cultivo
b) Emplear instrumentos asépticos
c) No contaminar ni destruir el Inóculo
d) Esterilizar los instrumentos antes y después de cada operación. 4
PROCEDIMIENTO
1.- Tomar muestra de la Faringe con el hisopo sosteniendo la lengua con
el abatelengua
2.- Realizar la siembra en caja de petri con el medio previamente preparado
en forma de estría, cerca de la flama del mechero
3.-Llevar la caja de Petri a la Incubadora con una temperatura de 38°C
6.- Revisar el crecimiento a las 24 Horas de haber realizado la siembra
Material
1 Caja de Petri ya preparada con medio Agar Nutritivo
1 Abatelengua
1 mechero
1 Hisopo Estéril
4 www.scribed.com/doc/17102259/6-LABORATORIO-DE-MICROBIOLOGIA
Profra. Faustina Orozco Gutierrez
PRÁCTICA #10
FROTIS BACTERIANO
INTRODUCCIÓN:
Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de
una muestra ó cultivo con objeto de separar lo más posible los
microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy
difícil obtener una imagen clara y nítida. El frotis debe ser posteriormente
fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de
tinción.
PROCEDIMIENTO
1.- Esterilizar el asa de nicromo
2.- Poner 1 gota de agua que se encuentra en el vaso de precipitado sobre
el portaobjeto.
3.-Tomar de la caja de petri muestra bacteriana y ponerla sobre la gota de
agua, haciendo movimientos circulares hasta que se extiendan las bacterias
4.- Fijar sobre la flama del mechero ( teniendo cuidado de no sobrecalentar
la muestra)
5.-Esterilizar el Asa de Nicromo
MATERIAL:
1 MECHERO
1PORTA OBJETO
1 ASA DE NICROMO
PIZETA CON AGUA DESTILADA
Nombre del Alumno:____________________________________
Revisado:_____________________________________________
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
PRACTICA #11
TINCIÓN DE GRAM
INTRODUCCIÓN:
La tinción de GRAM es un tipo de tinción Diferencial empleado en
Microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras
Clínicas. Debe su nombre al Bacteriólogo Danés Christian Gram que
desarrollo la técnica en 1884.
Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como
para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación Bacteriana
considerándose GRAM POSITIVAS Bacterias de color MORADAS, AZULES
GRAM NEGATIVAS Bacterias de color ROSA Ó ROJIZO.
PROCEDIMIENTO:
Marcar el porta objeto en la parte de abajo del frotis.
1.- Agregar violeta de Genciana por 1 Minuto cubrir todo el frotis, lavar el
exceso con agua destilada.
2.- Agregar Lugol por 1 Mins. 30” ( lavar el exceso de colorante) con agua
3.- Después agregar alcohol acido (agregar y lavar)
4.- Agregar Fucsina fenicada por 30 segundos, lavar y secar
5.- Observar al microscopio con objetivo 10x, después con 100x ó Objetivo
de Inmersión.
Reporte:
Bacterias Gram:_________________________
Morfología:___________________________
Nombre del alumno:___________________________________
Revisado:___________________________________________
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
Preparación de Solución para Antibiograma
Preparar Caldo Nutritivo
En un tubo de cristal Estéril con tapón agregar caldo nutritivo
Con el Hisopo agarrar bacterias y dejarlas incubar por espacio de 24 horas
Después de este tiempo habrá desarrollo
Poner el Sensidisco dependiendo del resultado de la tinción de GRAM (+)(-) será
el sensidisco a utilizar.
Hacer una siembra en agar nutritivo y poner el sinsidisco observar a las 24 horas.
SIEMBRA DIRECTA PARA ANTIBIOGRAMA
En un tubo agregar caldo nutritivo y ponerle (3) veces bacterias con el Hisopo, se
pondrá turbio.
Realizar la siembra en la caja de petri, aplicar el Sensidisco con pinzas según
corresponda el Gram. (Esterilizar las pinzas antes y después de aplicar el
Sensidisco) Observar a las 24 Horas.
PRÁCTICA #12
ANTIBIOGRAMA
INTRODUCCIÓN:
El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar
la Sensibilidad de una colonia Bacteriana a un Antibiótico o grupo de
antibióticos.
El antibiograma, una vez realizado, da la siguiente información:
** Grado de Sensibilidad de la colonia bacteriana a un determinado
antibiótico.
**
Diferencia de sensibilidad por parte de la colonia a diferentes
antibióticos.
Con esta información se clasifica el efecto del antibiótico sobre esa
determinada colonia en:
Resistencia (R)
Intermedio (I)
y
Sensible(S)
Procedimiento:
-Antes de 15 mins. De haber ajustado la turbidez, inocular las placas
-Tomar con el hisopo la muestra del tubo presionando en las paredes del
tubo para eliminar el exceso.
-Rotar el hisopo por la superficie del agar por lo menos 3 veces para
extender el inoculo rotando la placa a 60°.
-Aplicar los discos entre 3 y 15 minutos.
- No debe estar más cerca de 24 mm. De centro a cetro.
_ Aplicar los sensidiscos con una pinza estéril
_No mover los sensidiscos una vez que han hecho contacto en el medio
_Incubar por 24 Horas
Pasado este tiempo tomar la lectura de inhibición
Reporte de antibiograma
Profra. Faustina Orozco Gutiérrez
Práctica #13
UROCULTIVO
INTRODUCCION:
Es un examen de Orina que determina sí existe una infección de las vías
urinarias. Se investiga la presencia de Bacterias en Orina, su cantidad,
especie y sensibilidad a los antibióticos.}
Material
1 Vaso Estéril
1 Medio ya preparado
1 Mechero
1 Hisopo
3 tubos 13 x 150
1 gradilla
Procedimiento
Se realiza la siembra, tomando muestra con el hisopo sobre el medio ya
preparado en la caja de petri, cerca de la flama del mechero, se mete a la
incubadora la caja de petri una vez realizada la siembra y se checa a las 24
horas, de haberse realizado la siembra.
Examen Físico y Químico de Orina
Sedimento Urinario
Reporte:
Nombre del alumno: ________________________________________Grupo:_______
Revisado:
Profra: Faustina Orozco Gutiérrez