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UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
Biología I – Ingeniería Ambiental y Sanitaria
Prof. Liliana Gómez Gómez
OBJETIVOS
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Identificar y reconocer cada una de las partes del microscopio y su función,
mediante la descripción dada.
Adquirir habilidad en la realización de montajes húmedos.
MATERIALES
Portaobjetos, cubreobjetos, gotero, hilos de colores, tijeras, periódico, revistas, agua
de charco (coloración verde), colores, hoja de examen cuadriculada, papel
absorbente, marcador.
PRE – LABORATORIO
 Mencione con una descripción MUY BREVE la evolución de las clases de
microscopio.
 Utilizando un diagrama explique el sistema de lentes fundamentales, y como
funcionan para el principio óptico del microscopio compuesto.
 ¿Porque razón el objetivo de inmersión debe sumergirse en un líquido especial
(aceite de cedro) para poder observar la imagen del microscopio?
 Enumere las diferencias entre un montaje húmedo y un montaje seco.
MARCO TEÓRICO.
El hombre llevado por el afán de revelar el misterio de ciertos milagros, se atrevió a
penetrar en regiones habitadas por enemigos, seres invisibles. Un mundo cuyo
conocimiento es en definitiva más importante para el verdadero bienestar de la
estirpe humana, un mundo que nos llevo no solo a conocer diferentes
microorganismos, también estructuras que conforman nuestro cuerpo y el de otros
sistemas vivos; cuando en la humanidad nace el deseo de investigación científica,
aparecen instrumentos como el MICROSCOPIO.
El MICROSCOPIO, es un aparato óptico mecánico, el cual permite aumentar el
tamaño de estructuras invisibles al ojo humano. Fue inventado por Hans y Zacarías
Janssen, pero reconocido por el gran fabricante e investigador Antón Van
Leuwenhoek. Hay diferentes variedades de microscopio, pero en nuestra práctica
vamos a trabajar con el microscopio fotonico, básicamente todos los microscopios
cuentan con tres sistemas que son:
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Sistema Mecánico
Sistema Óptico
Sistema De Iluminación
Sistema Mecánico.
EL MICROSCOPIO
PRACTICA 2
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Base o Pie: estabilidad al microscopio gracias a su peso.
Brazo o Columna: prolongación superior del pie, mango del cual se sostienen y
transporta el microscopio; sirve de sostén para otros elementos.
Platina: es una superficie plana que lleva un orificio central (el cual deja pasar la
luz), sobre este se coloca la lamina portaobjetos, la cual se sujeta mediante
pinzas a un carro móvil
Tubo Óptico: puede ser recta o inclinada, tiene soporte o brazo que se une a la
platina y a la base del microscopio, proporciona sostén a los objetivos y al ocular.
Reglillas: colocadas en el área superior de la platina, determinan las
coordenadas X,Y, las cuales permiten la localización de un punto dado en la
preparación.
Sistema de Enfoque: consta de dos tornillos que accionan una cremallera y
permiten ajustar la distancia requerida o distancia de trabajo, según el objetivo
que se emplee, mediante el desplazamiento del tubo óptico, o de la platina en
algunos modelos se diferencian dos tornillos. Tornillo Macrometrico, permite
enfocar la imagen. Tornillo Micrométrico, más pequeño, de movimiento rápido
y ajuste fino, permite dar nitidez a la imagen.
Portaobjetivos o Revolver: dispositivo metálico el cual lleva dos, tres, cuatro o
cinco objetivos y mediante un movimiento giratorio permite cambiar de objetivo.
Sistema Óptico.
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Condensador: se localiza debajo de la platina consta de una lente convergente
que recoge los rayos de luz y los concentra en el plano de la muestra mejorando
la iluminación sobre la preparación.
Objetivo: localizados hacia la parte media del aparato, producen una imagen
ampliada del objeto (lente frontal) y esta “imagen intermedia” es captada (lente
media) y sufre una nueva ampliación por el ocular (lente superior). Los objetivos
se clasifican en seco y de inmersión.
- Objetivos Secos: son los que se emplean más corrientemente, entre la lente
frontal y el cubreobjetos solo hay aire, generalmente hay de menor aumento
(10X) y de mayor aumento (40X).
- Objetivo de Inmersión: debe interponerse entre la lente frontal y la
preparación un líquido que por su índice de refracción apropiado permita un
mayor grado de luminosidad. Este líquido puede ser agua, aceites, glicerina,
el más utilizado es el aceite de cedro.
Prismas: la porción media de los microscopios modernos contiene prismas en
su interior y su función es proyectar la imagen formada por el objetivo sobre el
plano ocular.
Ocular: localizado en la parte superior del aparato formado por un sistema de
lentes. Es el punto de mira del observador, aumenta la imagen dada por el
objetivo, el ocular corriente es de 10X.
EL MICROSCOPIO
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Sistema De Iluminación
 Lámpara eléctrica.
 Filtros: cristales de colores que nos ofrecen luz la cual viabiliza la observación
microscópica.
 Diafragma: se localiza inmediatamente debajo del condensador regula la
cantidad o intensidad de la luz que debe ir a la preparación, por cierre o abertura
del mismo.
Distancia Frontal o Distancia de Trabajo.
Es el espacio que existe entre la superficie del lente del objetivo y la laminilla, una
vez se encuentre enfocada la preparación.
A mayor aumento del objetivo, disminuye la distancia de trabajo, los microscopios
con lentes parafocales poseen un sistema de enfoque a diferentes aumentos. Así,
una vez enfocada la preparación a menor aumento, queda enfocada al utilizar al
objetivo de mayor aumento. Para un ajuste mayor se debe mover ligeramente el
tornillo micrométrico.
Principios Ópticos.
Toda lente o sistema de lentes que, interpuesto entre un objeto próximo al ojo,
permite observar aquel de un tamaño mayor y con detalles no visibles a simple vista
se le considera un microscopio. El microscopio compuesto consta de dos sistemas
de lentes convergentes y la imagen del objeto observado a través de él es real,
invertida y muy aumentada.
Poderes del Microscopio.
Se podría pensar que al emplear lentes adicionales se lograrían mayores aumentos,
pero en la formación de la imagen no solo importa la ampliación, se requiere que la
imagen sea nítida, para lo cual es necesario combinar los diferentes poderes del
microscopio, como son:
 Poder de Aumento: permite magnificar la imagen, en general el aumento (A),
esta dado por la relación:
A = Tamaño De La Imagen
Tamaño Del Objeto
En el microscopio compuesto, el aumento total es igual al producto del aumento del
objetivo por el aumento del ocular.
A. total = A. del objetivo x A. del ocular
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Poder de Resolución: se refiere a la capacidad de un sistema óptico de
presentar dos puntos próximos distintos o separados; se especifica por la
distancia mínima en que se logra diferenciar esos dos puntos.
Poder de Definición: permite formar imágenes claras con contornos definidos.
Poder de Profundidad de Campo o Penetración de Foco: permite observar
varios planos en un mismo enfoque.
PROCEDIMIENTO
Identificación de las partes del microscopio:
Con el microscopio que tiene a su disposición, localice e identifique las partes de
este, teniendo en cuenta el fundamento teórico.
Preparación de un montaje húmedo:
Sobre la lamina portaobjetos limpia coloque una gota de agua, dentro de la gota
coloque el objeto que se va a observar. Para nuestro ejercicio se utilizarán: letras
en blanco y negro, a color e hilos de diferentes colores. Coloque la laminilla sobre
el portaobjetos en posición oblicua y apoyando una arista, sobre el portaobjetos, al
lado de la gota, déjela caer suavemente sobre la gota. Evite que se formen burbujas
de aire.
La preparación debe quedar completamente cubierta y embebida por el liquido, evite
el exceso de agua, (o de colorante, en preparación coloreadas), en los bordes de la
laminilla o sobre esta, retire el exceso con papel absorbente, no olvide marcar la
lámina al lado derecho; antes de colocar la lamina sobre la platina, fíjese que esté
completamente seca en la parte inferior. Si se ve que la preparación se está
deshidratando, agregue unas gotas de agua por el borde de la laminilla.
Enfoque visual a menor aumento:
La preparación se coloca sobre la platina y se fija con las pinzas. Centrada en la
platina y mirando por fuera, acerque el objetivo de menor aumento en la lamina,
girando el tornillo macrométrico, hasta que quede a una distancia ligeramente menor
que la distancia de trabajo (aproximadamente 5mm). Ahora enfoque a través del
ocular, subiendo lentamente el objetivo (o retirando la platina segur el microscopio)
hasta ver la imagen del preparado. Una vez obtenida la imagen complete el enfoque
con el tornillo de ajuste fino (el micrométrico), si es necesario gradué la intensidad
luminosa, ajustando la apertura del diafragma y la altura del condensador, si el
condensador es fijo, varíe la distancia de luz. Evite la sobre iluminación.
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Esquematice la observación asegúrese de no aumentar detalles que no
corresponden.
Enfoque visual a mayor aumento:
Una vez observada la preparación a menor aumento, pase a posición de trabajo de
mayor aumento, girando suavemente el revolver. Si la lente tropieza con la
preparación, levante el objetivo empleando el tornillo macrométrico, y proceda como
en el caso anterior, observando por fuera y no a través del ocular. (En este caso la
distancia al cubreobjeto es de menos de un mm). Enfóquela imagen con el tornillo
micrométrico, siempre alejando el objeto de la preparación.
Una vez observada la preparación con la letra, dibuje anotando el aumento
correspondiente, repita el procedimiento con los hilos de colores y diferentes
letras también a color.
Enfoque visual con el objetivo de inmersión:
Coloque una gota muy pequeña de aceite de inmersión sobre la laminilla (si la
preparación es un extendido fijado al calor, coloque una gota de aceite de inmersión
directamente sobre la lamina en nuestro ejercicio se utilizará el frotis de sangre)
proceda como en el caso anterior, teniendo en cuenta que la distancia de trabajo es
menor con el objetivo de inmersión y se requiere mayor intensidad de luz. Adecue
el condensador de acuerdo a las necesidades. Esquematice la observación.
Inicie sus observaciones con el objetivo de menor aumento, el cual le brindara una
imagen panorámica amplia y con mayor profundidad de foco. Luego pase a mayor
aumento y precise las estructuras. Siéntese en posición correcta y cómoda para
observar y dibujar. Los dibujos deben ser claros y deben guardar proporciones.
Acostúmbrese a observar con ambos ojos abiertos esto le evitara fatiga ocular.
Recomendaciones para el cuidado del microscopio.
 Cuidadosamente llene la hoja de inventario de los datos correspondientes al
microscopio asignado.
 Familiarícese con el microscopio y antes de usarlo revise si todas las partes
se encuentran limpias y en buen estado. Si presenta algún daño avise
inmediatamente al profesor.
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No enfoque a mayor aumento guiando el tornillo Macrométrico y mirando
simultáneamente a través del ocular; puede fácilmente romper la
preparación.
Una vez realizada la observación limpie con papel de lentes los objetivos,
utilice papel para lentes no use pañuelo.
En las preparaciones de montaje húmedo o coloreadas, no debe quedar
liquido sobre la lamina o debajo de ella.
Las preparaciones no deben tocar la lente frontal de los objetivos.
Al colocar o retirar una lamina el objetivo de menor aumento debe estar en
posición de trabajo. Cuando utilice micropreparados fíjese que la laminilla
quede en la cara superior de la lámina, es decir mirando hacia el objetivo.
Mantenga seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama algún
líquido séquelo utilizando la bayetilla o el papel absorbente.
Limpie siempre el objetivo de inmersión después de usarlo, solo con papel
para lentes.
No debe retirar ningún componente óptico o mecánico del microscopio, ni
intercambiar los oculares.
Una vez utilizado el microscopio, debe quedar limpio y con el objetivo de
menor aumento en posición de trabajo.
Para transportar el microscopio, tómelo del brazo del aparato con una mano
y con la otra de la base, siempre en posición vertical, pues al voltearlo se
puede caer una de las lentes o el espejo.
Para el Análisis de resultados:
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Cuales diferencias encuentra en el enfoque entre los diferentes objetivos.
¿En el momento del enfoque si cree estar manejando demasiada luminosidad,
que haría?, justifique su respuesta.
Cuales ventajas encuentra en un montaje húmedo y cual en un montaje seco.
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