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CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA –CONCYTSECRETARIA NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA –SENACYTFONDO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA, -FONACYTFACULTAD DE INGENIERIA, CENTRO DE INVESTIGACIONES-CIIUNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA INFORME FINAL OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DEL ACEITE ESENCIAL Y OLEORRESINA DE DOS ESPECIES DE LAUREL Y ORÉGANO PROYECTO FODECYT No. 111-2006 INGA. TELMA MARICELA CANO MORALES INVESTIGADORA PRINCIPAL GUATEMALA, FEBRERO DE 2010 AGRADECIMIENTOS AL CONCYT La realización de este trabajo, ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología, -FONACYT-, otorgado por La Secretaría Nacional de Ciencia y Tecnología -SENACYT- y al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología -CONCYT-. AGRADECIMIENTOS A OTRAS INSTITUCIONES La realización de este trabajo, también ha sido posible gracias al apoyo financiero y técnico de otras Instituciones como: Centro de Investigaciones de Ingeniería, Sección Química Industrial, Facultad de Ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala. Instituto de Investigaciones Agronómicas y Ambientales, Facultad de Agronomía, Universidad de San Carlos de Guatemala. “Finca Guadalupe” y a su propietario Sr. Gregorio Prem, por dar todo el apoyo técnico para la adquisición de la materia prima de laurel (Litsea glaucescens HBK). Empresa “Distribuidora Atlántida”, del Sr. Julio Crespo y la Fundación Centro de Servicios Cristianos, FUNCEDESCRI, a través del Sr. Emilio Manjón, también por dar apoyo logístico para la obtención de materia prima. Agradecimiento al empresario José Jarquín de la Finca “La Esperanza” de Tecpán Guatemala, por dar todo el apoyo técnico para la obtención del laurel (Litsea guatemalensis Mez.) y finalmente al Dr. Raúl Jáuregui del Centro Universitario de Oriente, CUNORI, por realizar los contactos con las comunidades de Río Hondo Zacapa para la obtención de orégano (Lippia graveolens HBK). BREVE BIOGRAFÍA ACADÉMICA DE LOS AUTORES INVESTIGADORA PRINCIPAL Ingeniera Química Telma Maricela Cano Morales Ingeniera Química de la Universidad de San Carlos de Guatemala, 1989. Profesora Titular VII, Facultad de Ingeniería de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Actualmente Directora del Centro de Investigaciones de la Facultad de Ingeniería de la USAC. Ha participado como Investigadora Principal, Coordinadora e Investigadora Asociada en diversidad de proyectos de investigación en la temática de extractos vegetales: Aceites esenciales, oleorresinas, extractos fluidos, extractos blandos, extractos secos, colorantes naturales, extractos tánicos y su aplicación en la industria y biocombustibles INVESTIGADOR ASOCIADO Ingeniero Agrónomo Marino Barrientos García. MSc. En Estadística Aplicada. Ingeniero Agrónomo de la Universidad de San Carlos de Guatemala, 1981. Maestro en Ciencias en Estadística Aplicada. Universidad de los Andes, Mérida, Venezuela, 1984. Profesor Titular X, Catedrático del Departamento de Estadística de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Ha desempeñado funciones de docencia, asesoría y consultoría en investigación y aplicaciones de la estadística, en diversas unidades de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Organismos Internacionales, Instituciones del Sector Público y en Empresas Privadas. Investigador asociado en diversos proyectos de investigación relacionados con Obtención y Caracterización de aceites esenciales y oleorresinas de diversas especies vegetales y obtención y caracterización de colorantes naturales de diversas especies vegetales. INVESTIGADOR ASOCIADO Ingeniero Forestal José Mario Saravia Molina. MSc. Tecnología e Industrias de la Madera. Ingeniero Forestal de la Universidad Federal Santa María de Brasil, 1977. Maestro en Ciencias en Tecnología e Industrias de la Madera, de la Universidad de Chile, 1997. Profesor Titular VIII, Catedrático de la Sub-área de Producción Forestal, de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Investigador Principal y Asociado en diversos proyectos de investigación relacionados con Caracterización Física, Química, Mecánica y Anatómica de diversas especies forestales , Obtención y caracterización de taninos de la corteza de varias especies forestales, Obtención y Caracterización de colorantes naturales de diversas especies vegetales. INVESTIGADORA ASOCIADA Ingeniera Industrial Ericka Johanna Cano Díaz Ingeniera Industrial de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Profesora Titular II, Facultad de Ingeniería de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Actualmente Investigadora en el Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales, LIEXVE, de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. Ha participado como Investigadora Asociada en diversidad de proyectos de investigación en la temática de aceites esenciales, oleorresinas, taninos, colorantes naturales. INVESTIGADOR ASOCIADO Ingeniero Agrónomo Edwin Enrique Cano Morales MSc. En Silvicultura y Manejo de Bosques. Ingeniero Agrónomo, Universidad de San Carlos de Guatemala, 1988. Maestro en Ciencias en Silvicultura y Manejo de Bosques, Colegio de Postgraduados de Chapingo, México, 1992. Profesor Titular VI Catedrático de la Sub-área de Producción Forestal y Secretario Académico de la Facultad de Agronomía de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Ha desempeñado funciones de docencia, asesoría y consultoría en investigación y aplicaciones de la silvicultura y manejo de bosques, en diversas unidades de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Organismos Internacionales, Instituciones del Sector Público y en Empresas Privadas. Investigador asociado en diversos proyectos de investigación relacionados con Obtención y Caracterización de aceites esenciales y oleorresinas de diversas especies vegetales y obtención y caracterización de colorantes naturales de diversas especies vegetales. INVESTIGADOR ASOCIADO Ingeniero Químico Mario José Mérida Meré Ingeniero Químico de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Profesor Interino, Escuela de Ingeniería Química de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Actualmente Coordinador del Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales, LIEXVE, de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. Ha participado como Investigador Asociado en diversidad de proyectos de investigación en la temática de aceites esenciales, oleorresinas, taninos, colorantes naturales y biocombustibles. INVESTIGADORA ASOCIADA Ingeniera Química Cinthya Patricia Ortiz Quiroa Ingeniera Química de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Profesora Interina, Facultad de Ingeniería de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Actualmente Investigadora en el Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales, LIEXVE, de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. Ha participado como Investigadora Asociada en tres proyectos de investigación en la temática de aceites esenciales, oleorresinas y colorantes naturales. INVESTIGADORA ASOCIADA Ingeniera Química Adela María Marroquín González Ingeniera Química de la Universidad de San Carlos de Guatemala. Profesora Interina, Facultad de Ingeniería de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Actualmente Investigadora en el Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales, LIEXVE, de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. Ha participado como Investigadora Asociada en dos proyectos de investigación en la temática de aceites esenciales, oleorresinas y taninos. AUXILIAR DE INVESTIGACION Adrian Antonio Soberanis Ibáñez Pensum Cerrado en Ingeniería Química, Facultad de Ingeniería, Universidad de San Carlos de Guatemala. Actualmente analista de laboratorio y auxiliar de investigación en el Laboratorio de Ensayo Fisicoquímico de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. Ha participado como Auxiliar de Investigación en 2 proyectos de investigación en la temática de aceites esenciales, oleorresinas y taninos. PRÓLOGO O PREFACIO Se les da el nombre de aceites esenciales a los aceites volátiles o aceites etéreos. Son mezclas complejas de sustancias, de variadas funciones químicas. El término aceite esencial es utilizado en general para designar aquellas sustancias volátiles obtenidas por destilación a base de vapor de las plantas, o por otros métodos. Las oleorresinas son preparados líquidos consistentes en aceites esenciales y materias resinosas. Pueden dividirse en 2 grandes grupos: Las que se preparan con especias y hierbas por extracción con disolventes volátiles, utilizados casi por exclusivamente en la industria de sustancias soporíferas; y las que se preparan de las partes odíferas de la planta, exceptuadas las flores, cuyo empleo principal es la industria de perfumes. En Guatemala, gracias a sus condiciones climáticas se cultivan una diversidad de productos vegetales muy apreciados en el comercio e industria tanto nacional como internacional, tal es el caso del orégano y laurel, que son ampliamente utilizados como medicamentos y como condimentos; sin embargo, se comercializan actualmente sin realizarles ningún proceso de transformación, más que a veces el simple secado de las plantas completas. Según Bandoni (2003), las principales ramas de la industria que más consumen plantas aromáticas, aceites esenciales y oleorresinas son: Industria cosmética, un rubro sobresaliente en esta industria es el de los dentífricos, por su gran consumo de derivados de la menta, Industria alimenticia, Industria licorera, Industria farmacéutica, productos de uso doméstico. La industria agroquímica utiliza algunos subproductos obtenidos a partir de aceites esenciales, para la elaboración de los llamados bioinsecticidas, o insecticidas biodegradables de origen natural. El objetivo principal de la presente investigación fue la obtención y caracterización de aceite esencial y oleorresina de orégano (Lippia graveolens HBK), y dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez., Litsea glaucescens HBK), plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala, para obtener productos utilizables en diversidad de industrias. Se determinó que el rendimiento del aceite esencial de las dos especies de laurel Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK son similares 0.85%, 0.87%, a nivel laboratorio, que coincide con los valores reportados en la literatura; el rendimiento del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) es 3.99%, a nivel laboratorio, el valor reportado en la literatura es 1.8%, y hace que el orégano (Lippia graveolens HBK) sea una especie vegetal promisoria para industrialización de su aceite esencial. De los componentes mayoritarios del aceite esencial de laurel (Litsea guatemalensis Mez.), únicamente está presente en la oleorresina, el nerolidol en un 21.12% en materia prima no exhausta y en un 7.22% en materia prima exhausta. De los compuestos mayoritarios del aceite esencial de laurel (Litsea glaucescens HBK), sólo el nerolidol está presente en la oleorresina obtenida, en un 6.05% en oleorresina de materia prima no exhausta y en un 38.42% en materia prima exhausta. De los componentes mayoritarios del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK), únicamente el timol está presente en la oleorresina de materia prima no exhausta, en un 8.37%. TABLA DE CONTENIDOS ÍNDICE Prólogo o Prefacio Tabla de contenidos Lista de Ilustraciones Lista de Tablas Lista de Abreviaturas Glosario i ii v ix xi xiii RESUMEN ABSTRACT xvi xvii PARTE I I.1 INTRODUCCIÓN I.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA I.2.1 Antecedentes I.2.2 Justificación I.3 OBJETIVOS E HIPÓTESIS I.3.1 Objetivos I.3.1.1 Objetivo general I.3.1.2 Objetivos específicos I.3.1.3 Hipótesis I.4 METODOLOGÍA I.4.1 Localización I.4.2 Las variables I.4.2.1 Variables Dependientes I.4.2.2 Variables Independientes I. 4.3 Indicadores I.4.4 Estrategia Metodológica I.4.4.1 Población y Muestra I.4.5 El Método I.4.6 La técnica estadística I.4.7 Los instrumentos a utilizar I.4.7.1 Cristalería I. 4.7.2 Equipo 1 3 6 7 7 8 10 10 11 11 11 17 17 18 18 18 PARTE II II.1 ACEITES ESENCIALES II.1.2 Definición y origen de los aceites esenciales II.1.3 Composición química de los aceites esenciales naturales II.1.4 Sustancias activas de las plantas medicinales II.1.4.1 Alcaloides II.1.4.2 Glucósidos II.1.4.3 Saponinas II.1.4.4 Fitohormonas II.1.4.5 Principios amargos II.1.4.6 Taninos II.1.4.7 Sustancias aromáticas II.1.4.8 Aceites grasos II.1.4.9 Glucoquininas (Insulinas vegetales) II.1.4.10 Mucílagos II.1.5 Aceites esenciales II.1.5.1 Industrialización de plantas aromáticas II.1.5.1.1 Industria cosmética II.1.5.1.2 Industria alimenticia II.1.5.1.3 Industria licorera II.1.5.1.4 Industria farmacéutica II.1.5.1.5 Productos de uso doméstico II.1.5.1.6 Industria agroquímica II.1.5.1.7 Química fina II.1.5.1.8 Industria tabacalera II.1.5.1.9 Industria textil II.1.5.1.10 Industria petroquímica y minera II.1.5.1.11 Industria de pinturas II.1.5.1.12 Otras industrias II.1.6 Función de los aceites esenciales en las plantas II.1.7 Métodos de obtención de aceites esenciales y oleorresinas II.1.7.1 Expresión II.1.7.2 Destilación II.1.7.3 Extracción con disolventes volátiles II.1.7.4 Enflurage II.1.7.5 Maceración II.1.8 Rectificación de los aceites esenciales naturales y oleorresinas II.1.9 Preliminares para un estudio de obtención de aceites esenciales y oleorresinas II.1.10 Naturaleza del material vegetal II.1.11 Reducción de la partícula II.1.12 Técnicas de la recolección, secado y conservación de las plantas que contienen aceites esenciales II.1.13 Deterioro a que están expuestos los aceites esenciales naturales y oleorresinas 25 26 26 26 27 27 28 28 28 28 28 28 29 29 29 29 29 29 30 30 30 30 30 31 31 31 31 31 32 32 32 33 33 33 34 34 34 34 35 35 37 II.2 OLEORRESINAS II.3 ORÉGANO II.4 LAUREL 38 41 46 PARTE III III.1 RESULTADOS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS 50 PARTE IV IV.1 IV.2 IV.3 IV.4 CONCLUSIONES RECOMENDACIONES REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANEXOS ANEXO A Análisis estadístico ANEXO B Fotografías de la ejecución del proyecto 75 78 79 81 82 90 PARTE V V.1 INFORME FINANCIERO 98 LISTA DE ILUSTRACIONES FIGURA No. DESCRIPCIÓN Página 1 Balanza Analítica 18 2 Balanza de Humedad 19 3 Bomba de Vacío 19 4 Molino de Martillos 20 5 Máquina Tamizadora 20 6 Plancha de calentamiento 21 7 Refractómetro 21 8 Refrigeradora 22 9 Rotaevaporador 22 10 Marmita de Extracción 23 11 Planta piloto de extracción-destilación 23 12 Neoclevenger 24 13 Especie orégano, materia vegetal deshidratada y fresca 41 14 Laurel, (Litsea glaucescens HBK) 46 15 Rendimiento porcentual promedio de aceite esencial a nivel laboratorio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. 51 16 Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de aceite esencial a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. 52 17 18 19 20 21 22 23 Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de índice de refracción promedio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de densidad promedio (g/mL) de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel laboratorio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función de la concentración de alcohol etílico utilizado. Rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta utilizando el valor de la media de las tres especies: dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta en función de la especie de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) 54 56 58 60 61 62 63 24 25 26 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) y (Litsea glaucescens HBK). Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK). Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) con materia prima exhausta y no exhausta. 65 68 70 27 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. 72 28 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. 74 29 Materia prima de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.), (Litsea glaucescens HBK) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK), es colocada en el secador solar de la Facultad de Agronomía y en el secador eléctrico de flujo transversal del Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales –LIEXVE-, Sección Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. La materia prima contiene un porcentaje de humedad del 59.3% es colocada en bandejas, controlando su humedad hasta llegar a un porcentaje de menor del 12%. 89 30 Proceso de preparación de materia prima de laurel y orégano, separando las hojas de los tallos, para obtener un mejor rendimiento en las extracciones de aceite esencial y oleorresina, a nivel de laboratorio y a nivel planta piloto. 90 31 Proceso de extracción a nivel laboratorio de oleorresina de las especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y de orégano (Lippia graveolens HBK). 90 32 Extracción de oleorresina de la especie de orégano a nivel laboratorio, y concentración de los extractos de oleorresina a nivel planta piloto por medio del proceso de rotaevaporación de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.). 91 33 Extracciones de oleorresina de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK), a nivel planta piloto, por medio del método de maceración dinámica con alcohol etílico al 95%, y realización de las concentraciones a través de rotaevaporación. 92 34 Extracción de aceite esencial a nivel planta piloto. 93 35 Obtención de Aceite Esencial a nivel laboratorio (Neoclevenger). 94 36 Aceite esencial obtenido. 94 37 Medición de la densidad del aceite esencial obtenido. 95 38 Medición del índice de refracción con el Refractómetro Fisher Scientific 95 LISTA DE TABLAS TABLA No. DESCRIPCIÓN Página 1 Cristalería utilizada en la parte experimental 18 2 Reactivos utilizados en la parte experimental 24 3 Porcentaje de rendimiento de Aceite Esencial en función de la especie utilizada a nivel Laboratorio. 50 4 Porcentaje de Rendimiento de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. 52 5 Índice de refracción de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. 54 6 Densidad de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. 56 7 Porcentaje de rendimiento de Oleorresina en función de la concentración de alcohol etílico utilizado a nivel Laboratorio. 58 8 Porcentaje de rendimiento de Oleorresina de materia prima exhausta y no exhausta en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. 59 9 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) y (Litsea glaucescens HBK). 64 10 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK). 67 11 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) con materia prima exhausta y no exhausta. 69 12 13 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. 71 73 LISTA DE ABREVIATURAS SSA Suma de cuadrados para tratamientos o regiones. SSE Suma de cuadrados para el error. SST Suma de cuadrados total. fi Razón de variancia. k Grados de libertad n Repeticiones u observaciones. s 12 Cuadrados medios para los tratamientos o regiones. s2 Cuadrados medios para el error. y ij j-ésima observación del tratamiento i-ésimo. y Media de las observaciones. T Total de las observaciones. Ho Hipótesis nula. H1 Hipótesis alternativa. g Gramos. L litros mL Mililitros. m Metros. n 23 D Índice de refracción a temperatura dada en grados Celsius. inHg pulgadas de mercurio (presión) lb Libra μi Media para cada parámetro. N.C Nivel de confianza. R Repetición. Vi Volumen. ρ Densidad. Wi Peso. % Porcentaje. P Probabilidad. GLOSARIO Alcaravea Planta anual de las umbelíferas, de hojas lanceoladas, flores blancas y semillas pequeñas que, por ser aromáticas, se emplean como condimento. Almizcle Secreción abdominal, grasa, de olor intenso y sabor amargo, que segregan algunos mamíferos; por extensión, se aplica también a la sustancia que segregan ciertas aves en la glándula debajo de la cola. Se utiliza en cosmética. Alopatía Terapéutica cuyos medicamentos producen en el estado sano fenómenos diferentes de los que caracterizan las enfermedades en que se emplean. Antiséptico Sustancia que destruye los microbios o evita su existencia. Aromaterapia Utilización médica de los aceites esenciales. Astringente Sustancia que contrae los tejidos orgánicos. Bálsamo Medicamento compuesto de sustancias comúnmente aromáticas, que se aplica como remedio en las heridas, llagas y otras enfermedades. Bergamota Variedad de lima muy aromática. Carminativo Medicamento que facilita la expulsión de gases intestinales. Colutorio Enjuague y lavado bucal con la solución de algún medicamento. Copaiba Copayero, árbol. Coriandro Cilantro. Dismenorrea Menstruación dolorosa o difícil. Droga vegetal Parte de la planta medicinal utilizada en terapéutica. Emenagogo Cualquier fármaco que provoca menstruación. Emoliente Medicamento para ablandar alguna dureza o tumor. Enebro Arbusto de las cupresáceas, de tronco ramoso, copa densa, hojas rígidas dispuestas de tres en tres. Eneldo Planta herbácea que tiene propiedades medicinales. Fique Planta textil, de la fibra de esta planta se hacen cuerdas. Fitohormonas Hormona vegetal. Fitoinsulinas Insulina de origen vegetal. Fitoterapia Es la ciencia que estudia la utilización de los productos de origen vegetal con finalidad terapéutica, ya sea para prevenir, para atenuar o para curar un estado patológico. Glúcido Nombre genérico de los compuestos que incluyen los azúcares sencillos y sus derivados y polímeros. Llamados también hidratos de carbono y carbohidratos. Lúpulo Planta trepadora de las cannabáceas; las flores dan sabor a la cerveza. Mejorana Planta que tiene propiedades tónicas y digestivas. Miera Aceite espeso, amargo y de color oscuro, que se obtiene del enebro. Se usa en medicina. Pediculicida Producto químico para matar piojos (Pediculus humanus capitis). Peristaltismo Contracción muscular del esófago y del intestino que permite la progresión del contenido intestinal. Prostaglandina Nombre genérico de diferentes sustancias aisladas de diversos tejidos orgánicos, cuyo esqueleto químico está constituido por un anillo de ciclopentano. Se utilizan como estimulantes musculares y para el tratamiento del asma y de las úlceras. Sahumerios Acción y efecto de dar humo aromático a algo, a fin de purificarlo o para que tenga buen olor. Sándalo Árbol de gran tamaño semejante al nogal, de flores pequeñas y fruto parecido a la cereza. Crece en las costas de la India y de varias islas de Oceanía, proporciona una madera amarillenta y de excelente olor, de la que se extrae una esencia usada en farmacia y en perfumería. Terpenos Nombre común a ciertos hidrocarburos que se encuentran en los aceites volátiles obtenidos de las plantas, principalmente de las coníferas y de los frutos cítricos. Trementina Resina que fluye de los pinos, abetos, alerces y terebintos, pegajosa, odorífera y de sabor picante. Se emplea como disolvente. RESUMEN El objetivo principal del presente proyecto fue la obtención y caracterización de aceite esencial y oleorresina de orégano (Lippia graveolens HBK), y dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez., Litsea glaucescens HBK), plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala, para obtener productos utilizables en las industrias fitofarmacéutica, alimenticia y cosmética. Para la obtención de aceite esencial a nivel laboratorio se utilizó el método de hidrodestilación y a nivel piloto se utilizó el método de arrastre con vapor directo. Y, para la obtención de oleorresina tanto a nivel laboratorio como planta piloto se utilizo el método de maceración dinámica, utilizando como solvente alcohol etílico al 95%. Se determinó que el rendimiento del aceite esencial de las dos especies de laurel Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK son similares 0.85%, 0.87%, a nivel laboratorio, que coincide con los valores reportados en la literatura; el rendimiento del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) es 3.99%, a nivel laboratorio, el valor reportado es 1.8%. Los compuestos mayoritarios presentes en el aceite esencial de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) son: trans-dihidrocarvona (26.95%), cisdihidrocarvona (19.31%), nerolidol (14.44%), limoneno (15.34%), linalol (4.98%). Para la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) son: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%), linalol (11.18%), dos estudios reportan el componente sabineno en un 13%, el que no fue identificado. Para la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) obtenidos son: timol (87.33%), p-cimeno (7.90%), γ-terpineno (2.81%), carvacrol (3.14%), el valor obtenido para timol, está muy por encima del reportado, establecido en un rango de 40% a 60%. Para la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.), únicamente está presente en la oleorresina, el nerolidol en un 21.12% en materia prima no exhausta y en un 7.22% en materia prima exhausta. Para la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK), sólo el nerolidol está presente en la oleorresina obtenida, en un 6.05% en oleorresina de materia prima no exhausta y en un 38.42% en materia prima exhausta. Para la especie de orégano (Lippia graveolens HBK), únicamente el timol está presente en la oleorresina de materia prima no exhausta, en un 8.37%. ABSTRACT The main objective of this project was to obtain and characterization of essential oil and oleoresin of oregano (Lippia graveolens HBK), and two species of laurel (Litsea guatemalensis Mez., Litsea glaucescens HBK), medicinal and aromatic plants cultivated in Guatemala, for products used in plant protection industries, food and cosmetics. To obtain the essential oil was used at laboratory scale hydrodistillation method was used at pilot level and the method of direct steam distillation. And, for obtaining oleoresin both laboratory and pilot plant use dynamic maceration method, using as solvent 95% ethyl alcohol. It was determined that the yield of essential oil of two species of laurel Litsea guatemalensis Mez. and Litsea glaucescens HBK are similar 0.85%, 0.87%, at laboratory scale, which coincides with the values reported in the literature, the performance of the essential oil of oregano (Lippia graveolens HBK) is 3.99%, at laboratory, the value reported is 1.8%. The main compounds present in the essential oil of: laurel (Litsea guatemalensis Mez.) are trans-dihidrocarvona (26.95%), cisdihydrocarvone (19.31%), nerolidol (14.44%), limonene (15.34%), linalool (4.98%). For the species of laurel (Litsea glaucescens HBK) are: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%), linalool (11.18%), two studies report sabinene component by 13%, which was not identified. For the species of oregano (Lippia graveolens HBK) obtained are: thymol (87.33%), p-cymene (7.90%), γ-terpinene (2.81%), carvacrol (3.14%), the value for thymol, is well reported above, set in a range of 40% to 60%. For the species of laurel (Litsea guatemalensis Mez.), is only present in the oleoresin, the nerolidol in a 21.12% in raw material and not exhausted by 7.22% in raw material exhausted. For the species of laurel (Litsea glaucescens HBK), only nerolidol present in the oleoresin obtained in a 6.05% in oleoresin of raw material is not exhausted and in a 38.42% in raw material exhausted. For the species of oregano (Lippia graveolens HBK), only thymol is present in the oleoresin of raw material is not exhausted by 8.37%. PARTE I I.1 INTRODUCCIÓN El objetivo principal de la presente investigación fue la obtención y caracterización de aceite esencial y oleorresina de orégano (Lippia graveolens HBK), y dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez., Litsea glaucescens HBK), plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala, para obtener productos utilizables en diversidad de industrias. En los últimos años se ha tenido un gran auge en el uso de extractos de plantas, tal es el caso de los aceites esenciales y oleorresinas cuya demanda en varios países ha aumentado. Guatemala es un país de tradición en exportación de algunos aceites esenciales, tal es el caso de cardamomo, té de limón, citronela, sin embargo, la tendencia es buscar otras alternativas y extraer aceites esenciales y diversos extractos de otras plantas. En el caso de las especies estudiadas, laurel y orégano; una de las especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), es nativo de México a Centro América; en Guatemala se ha descrito en Alta Verapaz, Baja Verapaz, Huehuetenango, Quetzaltenango, San Marcos y Zacapa, la otra especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) es endémico de Guatemala, crece en bosques abiertos de pino y matorrales de 1500-3150 msnm; se ha descrito en Chimaltenango, Guatemala, Jalapa, Sacatepéquez y Sololá (Cáceres, 1996), de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK), se tiene ya la primera plantación, a través del primer proceso de domesticación de la especie realizada en la Finca El Hato, ubicada en el municipio de San Bartolomé Milpas Altas, del Departamento de Sacatepéquez. En el caso del orégano (Lippia graveolens HBK) crece de una manera silvestre en el bosque espinoso, en áreas de Rio Hondo, Zacapa. Según Bandoni (2003), las principales ramas de la industria que más consumen plantas aromáticas o aceites esenciales son: Industria cosmética, un rubro sobresaliente en esta industria es el de los dentífricos, por su gran consumo de derivados de la menta, Industria alimenticia, Industria licorera, Industria farmacéutica, productos de uso doméstico; muchos de estos productos, como desinfectantes, desodorantes de ambientes, jabones de lavar, suavizantes, son formulados en base a fragancias o a subproductos obtenidos de plantas aromáticas. La industria agroquímica utiliza algunos subproductos obtenidos a partir de aceites esenciales, para la elaboración de los llamados bioinsecticidas, o insecticidas biodegradables de origen natural. El uso de la (+)-carvona (presente en la alcaravea y el eneldo) como inhibidor de la formación de brotes en la papa almacenada. En la Química fina: ya que así como existe una industria del petróleo, existe una industria de la trementina. Esta esencia obtenida de la resina de varias especies de Pinus spp., es una valiosísima materia prima para la semisíntesis de productos aromáticos (el citado aceite de pino, terpineol, canfeno, acetato de isobornilo), insecticidas, vitaminas y otros productos de uso industrial. Pero no es el único caso. El safrol es un terpeno obtenido de varias esencias de origen tropical, y es usado para la semisíntesis de la vainillina. El citral es otro ejemplo de materia prima consumida por toneladas por la química fina. Se usan en la Industria tabacalera, industria textil, Industria petroquímica y minera, Industria de pinturas y en otras industrias como disolventes para la limpieza de chips en computación, como reemplazantes de derivados petroquímicos; ecológicamente más seguros (biodegradables), con olores menos agresivos que los disolventes petroquímicos, con un punto de inflamación más alto que los disolventes tradicionales, lo que produce menos riesgos durante el uso o almacenamiento. Por lo anterior se puede señalar que es importante realizar investigaciones en la temática de Obtención y caracterización de extractos provenientes de plantas medicinales y aromáticas los cuales tienen una amplia aplicación en diversidad de industrias. Ya que en Guatemala se cuenta con la riqueza en biodiversidad ya mencionada es necesario realizar estudios de factibilidad de la obtención de extractos de plantas promisorias que aun no se utilizan como materias primas, evaluando rendimientos y calidad de los extractos. De esta manera, con los resultados de las investigaciones y determinando cuales son las plantas promisorias, incentivar a comités, cooperativas, pequeñas empresas y organizaciones no gubernamentales a introducirse al cultivo de estas plantas y también proceder a la obtención de los extractos, los cuales tienen mayor valor en el mercado. I.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA I.2.1 ANTECEDENTES EN GUATEMALA Dentro del proceso de investigación llevado a cabo en la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería, se tienen varias investigaciones de extracciones de aceites esenciales, oleorresinas, taninos y colorantes dentro de la línea de investigación en Extracciones Vegetales. Estas investigaciones han sido cofinanciadas por DIGI, CONCYT, CYTED, FUNCEDESCRI, EMPRESA PALO BLANCO, DISTRIBUIDORA ATLÁNTIDA Y EXTRACT. En el año de 1998 se ejecutó el proyecto CONCYT, 71-97 denominado “Factibilidad de la Extracción del aceite esencial de ajo, jengibre para su exportación”, en este proyecto, tanto para ajo como para jengibre se variaron los métodos de extracción y el tamaño de lote. Se utilizaron los métodos de arrastre con vapor directo, arrastre con vapor utilizando maceración y el método de hidrodestilación. Se determinó que el principal principio activo del mismo es el Zingibereno, el cual por medio de cromatografía gaseosa se determinó que se encontraba en un promedio de 31%, valor dentro del rango reportado en la literatura que es entre 30 y 36%. En el año 2000, Cano Telma, Benítez Ingrid, Chávez Blanca y Aguilar Byron ejecutaron el proyecto 28-97 CONCYT denominado “Obtención y caracterización de Capsaicina, ingrediente activo de productos fitofarmacéuticos y Agroindustriales de 3 especies de Capsicum (Capsicum chínense, Capsicum annuum L.V. y Capsicum nahum)”, para tal efecto se realizó un experimento bifactorial en el que se utilizaron 2 concentraciones de alcohol etílico al 70% y al 95% y 2 niveles de deshidratación, en fresco y en seco, utilizando 3 especies de capsicum, se concluyó que de las 3 especeis de Capsicum estudiadas: chile habanero (Capsicum chinense), chile jalapeño (Capsicum anuum) y chile verde o chocolate (Capsicum anuum L.V.) con la que se obtuvo el mayor porcentaje de capsaicina en la oleorresina fue con el Capsicum chinense, cuyo valor fue de 10.28%, que está dentro del rango del valor teórico esperado que está entre 10% a 12%. El más alto rendimiento de oleorresina es de 14.6221%, se obtiene para la especie Chile habanero seco (Capsicum chinense) y utilizando alcohol etílico al 70%. El más alto porcentaje de rendimiento de capsaicina, en función del solvente utilizado fue de 0,002% para la especie Chile habanero (Capsicum chinense) seco, utilizando alcohol etílico al 95%. El nivel de deshidratación del Capsicum (fresco y seco con humedad al 10%) y la concentración del solvente no influye en el porcentaje de rendimiento de la oleorresina. Para obtener el más alto porcentaje de capsaicina en la oleorresina, la variable que produce un efecto más marcado es el nivel de deshidratación, seguido de la especie y concentración del solvente. En el período 2001-2002, Cano Telma, Chávez Blanca, Aguilar Byron, Hernández Mischael ejecutaron el proyecto 77-00 CONCYT, denominado “Obtención y caracterización del aceite esencial de 4 plantas medicinales cultivadas en Guatemala, manzanilla (Matricaria recutita L.), pericón (Tagetes lucida Cav.), ajenjo (Artemisa absintium L.) e hinojo (Foeniculum vulgare Miller), evaluando el rendimiento y la calidad en función del nivel altitudinal de 4 diferentes niveles y el método de extracción utilizado fue el de arrastre con vapor directo, a nivel planta piloto”. En este proyecto se concluyó que de las 4 plantas medicinales estudiadas, para el pericón (Tagetes lucida Cav.), se obtuvo un porcentaje de rendimiento de 0.2831% porcentaje muy cercano al valor que reporta la literatura, para las demás especies, manzanilla, ajenjo e hinojo se obtuvo valores muy bajos comparados con el valor que reporta la literatura. En el año de 2002 Cano Telma, Chávez Blanca, Godínez Jorge y Monzón David ejecutaron el proyecto 6-25, PUIDI-DIGI, denominado “Obtención y caracterización del aceite esencial y oleorresina de la pimienta negra (Piper nigrum L.) cultivada en Guatemala”, evaluando tres distintos tamaños de lote para la extracción de aceite esencial basado en el rango de operación de la planta piloto de extracción del Centro de Investigaciones de Ingeniería (CII/USAC). La extracción de aceite esencial, se realizó en triplicado con un tiempo de extracción de 4 horas, un tamaño de partícula entre 1190 y 841 micrones y 15% de humedad. Para la extracción de oleorresina se evaluaron dos factores: 3 tamaños de lote (15, 10 y 9 lb) y dos concentraciones de solvente (etanol (CH3CH2OH) al 95% y 70%). Se realizaron extracciones sucesivas a diferentes tiempos de maceración de la materia prima (36 horas, 48 horas y 72 horas), hasta llegar a agotamiento de la materia prima. Se concluyó que el valor más alto de rendimiento de aceite esencial de la pimienta negra cultivada en Guatemala fue de 0.96% para un lote de 15 lb, valor cercano al límite inferior que reporta la literatura que está en el rango entre 1 a 3%. El valor más alto de rendimiento total de oleorresina, efectuando la sumatoria de los rendimientos de las diferentes maceraciones para un tamaño fijo de lote fue 6,3249%, para un lote de 10 lb, utilizando como solvente alcohol etílico al 70%. En el año 2002 García César, Chávez Blanca, Benítez Ingrid y Cerezo Otto ejecutaron el proyecto DIGI “Alternativa de desarrollo tecnológico para la recuperación de las fracciones extractables y caracterización de los componentes claves curcumina y cariofileno contenidos en el rizoma de la cúrcuma (Cúrcuma longa) para su agroindsutrialización en Guatemala”, concluyeron que el rendimiento general promedio extraído de aceite esencial de rizoma de cúrcuma fresca (Cúrcuma longa L.) a nivel de laboratorio fue de 0.39%, mientras que a nivel planta piloto fue de 0.29%, lo que refleja una eficiencia de extracción de 0.74% para propósito de un escalamiento preliminar. Además, el rendimiento general promedio de oleorresina extraída de rizoma de cúrcuma fresca (Cúrcuma longa L.) a nivel de planta piloto con tiempos de extracción de 0.74% para propósito de un escalamiento preliminar. Además, el rendimiento general promedio de oleorresina extraída de rizoma de cúrcuma fresca (Cúrcuma longa L.) a nivel planta piloto con tiempos de extracción de 48 horas para la primera maceración estática fue de 11.63% y para la segunda maceración fue de 10.10%. En el año de 2004 el estudiante Julio Gabriel López Mazín realizó la tesis de grado con el tema “Evaluación del rendimiento de oleorresina de las hojas de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) de Tecpán, Chimaltenango en función del tamaño de partícula, utilizando dos solventes distintos a nivel planta piloto” el cual fue asesorado por la Inga. Telma Maricela Cano Morales. En esta investigación se evaluó el rendimiento porcentual de la oleorresina de las hojas secas de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) a nivel planta piloto, utilizando como método de extracción la maceración de la hoja molida, filtración y posterior concentración del extracto obtenido; se manejó como variables controlables, los tamaños de partículas de las hojas utilizadas siendo estos los comprendidos entre los tamices No.5 y No.7 y los comprendidos entre los tamices No.7 y No.20; y dos solventes distintos, el etanol grado industrial al 66.64% p/v y el hexano grado industrial 84.6% p/v. El mayor rendimiento de oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) fue de 7.5% y se obtuvo de la extracción con etanol para la partícula de hoja comprendida entre el tamiz No.7 y el No.20. El rendimiento de oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) de la extracción por maceración y concentración depende del solvente que se utilice. Los rangos de tamaño de partícula utilizados para los tamices No.5 y No.7 y los tamices No.7 y No.20, no afectan significativamente el rendimiento de la oleorresina. La interacción del solvente utilizado y el tamaño de partícula utilizado si afecta significativamente el rendimiento de la oleorresina. Los tres componentes mayoritarios del aceite esencial de la oleorresina extraída con etanol y hexano, son cineol, linalol y terpineol. En el año 2005 el estudiante Tito Estuardo Vides Quiñonez realizó la tesis de de grado con el tema “Obtención y caracterización de oleorresina de clavo (Eugenia Cariophyllata, Thunb.), cultivado en Guatemala, a nivel Planta Piloto” el cual fue asesorado por la Inga. Qca. Telma Maricela Cano Morales. En ésta investigación se evaluó el porcentaje de rendimiento de la oleorresina de clavo (Eugenia cariophyllata Thunb.) a nivel planta piloto, en función del tiempo de maceración, utilizando como método de extracción la maceración sin agitación o recirculación del clavo molido, filtración y posterior concentración del extracto; se utilizó como solvente una solución acuosa de etanol al 70 % y se manejó como variable controlable tres diferentes tiempos de maceración, siendo éstos 12, 24 y 36 horas. Se determinó que el rendimiento de la oleorresina de clavo (Eugenia cariophyllata Thunb.) extraído en la planta piloto es de 19.5 % para un tiempo de 12 horas, 20.8 % para un tiempo de 24 horas y 22.6 % para un tiempo de 36 horas, con composición y propiedades semejantes. Para la interpretación estadística de los resultados se utilizó un nivel de significancia del 5.00 %; sobre esta base se determinó que el rendimiento no se ve afectado significativamente por el tiempo de maceración. Se realizó un análisis cualitativo por medio de cromatografía de capa fina de la oleorresina obtenida para confirmar la presencia de los compuestos mayoritarios, siendo éste el eugenol. En el año 2006 la estudiante Nora Matilde Deulofeu Gabriel realizó la tesis de grado con el tema “Determinación del rendimiento de la oleorresina de tres distintas clases de cardamomo (Elattaria cardamomum Maton) cultivado en Alta Verapaz, extraída por maceración dinámica y dos solventes distintos, a nivel laboratorio” el cual fue asesorado por la Inga. Qca. Telma Maricela Cano Morales. En esta investigación se evaluó el rendimiento de la oleorresina de cardamomo (Elattaria Cardamomum Maton) a nivel laboratorio, utilizando como método de extracción la maceración dinámica del fruto molido, filtración y posterior concentración del extracto obtenido por medio del rotaevaporador; las variables controlables fueron las clases de cardamomo siendo de primera, segunda y tercera clase y dos solventes distintos puros, el etanol y el hexano. I.2.2 JUSTIFICACIÓN DEL TRABAJO DE INVESTIGACIÓN En Guatemala, gracias a sus condiciones climáticas se cultivan una diversidad de productos vegetales muy apreciados en el comercio e industria tanto nacional como internacional, tal es el caso del orégano y laurel, que son ampliamente utilizados como medicamentos y como condimentos; sin embargo, se comercializan actualmente sin realizarles ningún proceso de transformación, más que a veces el simple secado de las plantas completas. Con el auge que se tiene en los últimos tiempos de la utilización de los extractos tanto aceite esencial como oleorresinas en la industria de alimentos, medicamentos y cosméticos de productos vegetales, se observa la necesidad de que se determine la viabilidad de poder realizarle a estos productos vegetales proceso de transformación que conlleven a aumentar su valor agregado. Con la ejecución del presente proyecto se espera ofrecer a personas individuales, pequeños empresarios, agricultores o grupos organizados de las comunidades urbanas y rurales una alternativa de industrialización de sus cultivos. Además, realizar una introducción de la utilización del aceite esencial y oleorresina de orégano y laurel cultivados en Guatemala, en las industrias farmacéutica, alimenticia y cosmética de Guatemala obteniendo de esta manera productos competitivos en el mercado. Se pretende desarrollar la capacidad de investigación e incrementar el contacto y la cooperación entre el sector académico dedicado a la investigación y los sectores productivos. Se espera ofrecer una alternativa técnica de aprovechamiento de 3 plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala. Los datos experimentales obtenidos en el presente proyecto de investigación, se tiene que el rendimiento promedio del orégano para el lote de 7.5 lb, fue de 4.88%, que fue donde se obtuvo mayor rendimiento, es un rendimiento alto comparado con la mayoría de plantas medicinales y aromáticas, por lo que es una planta promisoria para extracción de aceite esencial: es importante promover la instalación de plantas extractoras de aceite esencial en esas áreas, similares a las que están instaladas en el municipio de Cunen Quiche, en la Finca Chilascó de Baja Verapaz y en el municipio de Campur, Alta Verapaz, promovidas por la Fundación Centro de Servicios Cristianos, FUNCEDESCRI, Organización no gubernamental que apoya a las comunidades de los mencionados lugares para el cultivo de plantas medicinales y aromáticas y obtención de aceites esenciales de las mismas. En varias comunidades del área rural de Guatemala se pueden producir plantas medicinales y/o aromáticas y en las mismas comunidades extraer los aceites crudos, los cuales podrían ser colectados y transportados a las empresas productoras para realizarles un proceso de purificación. En el caso de las oleorresinas, son extractos que se obtienen por un proceso no complejo, tendrían oportunidad las empresas pequeñas y medianas de extractos de introducirse en la obtención de las mismas. Las oleorresinas son extractos etanólicos que se obtienen de plantas aromáticas y se utilizan al igual que las plantas de donde se obtienen, como aditivo en alimentos, pero tienen la ventaja con relación a las plantas secas y molidas, que ocupan menos volumen con la consiguiente facilidad de su manejo. Además poseen un mayor tiempo de vida de anaquel I.3 I.3.1 OBJETIVOS E HIPÓTESIS OBJETIVOS I.3.1.1 OBJETIVO GENERAL Obtención y caracterización de aceite esencial y oleorresina de orégano y laurel, plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala, para obtener productos utilizables en las industrias fitofarmacéutica, alimenticia y cosmética. I.3.1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS I.3.1.2.1 Extraer y caracterizar el aceite esencial de orégano y laurel cultivados en Guatemala, a nivel de laboratorio utilizando el método de hidrodestilación y en la planta piloto de extracción-destilación, utilizando el método de extracción por arrastre con vapor directo, variando el tamaño de lote: 10 lb, 20 lb y 30 lb realizando análisis fisicoquímico y cromatografía gaseosa, para determinar el porcentaje de sus principios activos: timol en el aceite esencial de orégano, citral y limoneno en el aceite esencial de laurel. I.3.1.2.2 Extraer y caracterizar la oleorresina de orégano y laurel, cultivados en Guatemala, a nivel laboratorio por el método de maceración dinámica utilizando alcohol etílico al 95%, y en la planta piloto de extraccióndestilación, utilizando el método de maceración dinámica, concentración al vacío y refinación por rotaevaporación. Realizando análisis fisicoquímico y cromatografía líquida de alta presión HPLC. I.3.1.3 HIPÓTESIS I.3.1.3.1 HIPÓTESIS DE TRABAJO Es factible la obtención y caracterización del aceite esencial y oleorresina de orégano y laurel, plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala, para obtener productos utilizables en las industrias fitofarmacéutica, alimenticia y cosmética. I.3.1.3.2 HIPÓTESIS ESTADÍSTICA I.3.1.3.2.1 HIPÓTESIS ALTERNATIVA (H1) Existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de aceite esencial en función de la especie vegetal a nivel laboratorio. Existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de aceite esencial en función de las especie vegetal a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa en el valor del índice de refracción del aceite esencial en función de la especie vegetal, a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa en el valor de la densidad del aceite esencial en función de la especie vegetal, a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa en la composición química del aceite esencial en función de la especie vegetal a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función de la especie vegetal a nivel laboratorio. Existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función de la especie vegetal a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función del tipo de materia prima utilizada, exhausta o no exhausta, a nivel planta piloto. Existe diferencia significativa en la composición química de la oleorresina obtenida en función del tipo de materia prima utilizada, exhausta o no exhausta, a nivel planta piloto. I.3.1.3.2.3 HIPÓTESIS NULA (H0) No existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de aceite esencial en función de la especie vegetal a nivel laboratorio. No existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de aceite esencial en función de las especie vegetal a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa en el valor del índice de refracción del aceite esencial en función de la especie vegetal, a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa en el valor de la densidad del aceite esencial en función de la especie vegetal, a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa en la composición química del aceite esencial en función de la especie vegetal a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función de la especie vegetal a nivel laboratorio. No existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función de la especie vegetal a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa del porcentaje de rendimiento de la oleorresina en función del tipo de materia prima utilizada, exhausta o no exhausta, a nivel planta piloto. No existe diferencia significativa en la composición química de la oleorresina obtenida en función del tipo de materia prima utilizada, exhausta o no exhausta, a nivel planta piloto. I.4 METODOLOGÍA I.4.1 LOCALIZACIÓN La parte experimental de la investigación se llevó a cabo en la Universidad de San Carlos de Guatemala coordenadas 14° 35' 17.46", -90° 33' 6.25", en condiciones ambientales de temperatura, 25°C y presión atmosférica, 640 mmHg en las siguientes instalaciones: 1.4.1.1 Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales, -LIEXVE-, Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería, en el cual se llevó a cabo tanto el secado de la materia prima en el secador eléctrico de flujo transversal de bandejas instalado en el mismo, así como se realizaron las extracciones de aceite esencial y oleorresina y la concentración de los extractos en la Planta Piloto de Extracción-destilación y a nivel laboratorio utilizando el rotaevaporador. 1.4.1.2. Laboratorio de ensayo Fisicoquímico de la Sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería, aquí se realizaron los análisis fisicoquímicos de los extractos obtenidos. 1.4.1.3 Laboratorio de Toxicología de la de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, en donde se realizaron las cromatografías de gases con acoplamiento de espectrometría de masas a los aceites esenciales y oleorresinas. I.4.2 LAS VARIABLES I.4.2.1 Variables dependientes Como variables dependientes se tienen: Porcentaje de rendimiento de aceite esencial obtenido a nivel laboratorio como. Porcentaje de rendimiento del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto. Índice de refracción de los aceites esenciales obtenidos a nivel planta piloto. Densidad de los aceites esenciales obtenidos a nivel planta piloto Composición química de los aceites esenciales obtenidos a nivel planta piloto. Porcentaje de rendimiento de la oleorresina obtenida a nivel laboratorio. Porcentaje de rendimiento de la oleorresina utilizando materia prima no exhausta, obtenida a nivel planta piloto. Porcentaje de rendimiento de la oleorresina utilizando materia prima exhausta a nivel planta piloto. Composición química de oleorresina utilizando materia prima no exhausta a nivel planta piloto. Composición química de oleorresina utilizando materia prima exhausta a nivel planta piloto. I.4.2.2 Variables Independientes Nivel de la especie: se utilizó como materia prima 3 especies vegetales Laurel (Litsea glaucescens HBK) Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Orégano(Lippia graveolens HBK) I.4.3 Indicadores I.4.4 Estrategia Metodológica I.4.4.1 Población y Muestra Se realizó la compra de 455 Kg de cada una de las especies vegetales estudiadas (orégano y laurel) cultivado en la zona del altiplano de Guatemala. La compra se realizó directamente con los productores a través de FUNCEDESCRI. Se procedió a realizarles lavados con solución de hipoclorito de sodio al 2.00 %. I.4.4.2 Molido El material se redujo de tamaño, utilizando un molino de cuchilla. I.4.4.3 Secado El material se procedió a secar por lotes en el secador eléctrico de flujo transversal de bandejas ubicado en el Laboratorio de Investigación de Extractos vegetales, -LIEXVE- de la sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería a una temperatura no mayor de 40oC para evitar pérdida del aceite esencial, hasta obtener una materia con humedad de aproximadamente 12.00 %, según normas ISO 939, 7925 y 6754. I.4.4.4 Diseño de Tratamientos Para la obtención del aceite esencial en la planta piloto, se sometió la materia prima al proceso de arrastre con vapor directo fijando el tiempo de extracción de 2 horas, según referencia bibliográfica del experto brasileño en extractos, Dr. Nicolai Sharapin. Se escogieron tres tamaños de lote: 10, 20 y 30 lb con tres repeticiones. I.4.4.5 Proceso de extracción de las fracciones extractables Experimento A Se realizó el proceso extractivo discontinuo o por lotes de la materia seca y molida a través de la secuencia del flujograma 1. La materia prima fue pesada con exactitud para cada tratamiento; la misma se colocó dentro del extractor y se le aplicó el método de arrastre con vapor, la materia agotada de aceite esencial se sometió a maceración con etanol al 95% por 2 horas a temperatura ambiente de 23ºC con tres repeticiones cada maceración y se procedió a realizar la concentración de los extractos. Experimento B Se ejecutó el proceso extractivo discontinuo o por lotes de la materia seca y molida a través de la secuencia del flujograma 2. La materia prima debió ser pesada con exactitud para cada tratamiento; la misma se colocó dentro de la marmita y se sometió a maceración con etanol al 95% a temperatura ambiente de 23 oC con una relación 1:10 por 2 horas con tres repeticiones cada maceración y se procedió a realizar la concentración de los extractos. I.4.4.6 Método para extraer aceite esencial Arrastre con vapor directo En éste método se introdujo la materia vegetal dentro del extractor, distribuyendo la misma en parrillas, luego se inyectó vapor por la parte de abajo, hasta formar el equilibrio entre la materia vegetal y el vapor, el vapor reblandece o rompe las paredes de las glándulas aceitosas, libera el aceite y lo arrastra, entonces el aceite junto con el vapor se pasa a través de un condensador, obteniendo el aceite esencial, hidrolato y agua en el vaso florentino, luego se separa por medio de decantación. El hidrolato está formado por la parte del aceite esencial que es parcialmente soluble en agua y la cual se separa por la adición de una sal, se determina la cantidad de aceite obtenida y se realizan los análisis fisicoquímicos de índice de refracción, densidad y composición química mediante cromatografía gaseosa con acoplamiento de espectrometría de masas. I.4.4.7 Purificación del aceite esencial y la oleorresina Se realizó mediante la eliminación de agua en el aceite esencial obtenido por destilación y la eliminación de agua en la oleorresina obtenida por maceración, se ejecutó por reconcentración al vacío a temperaturas menores de 35 oC para eliminar el etanol y el agua por decantación y mediante una posterior rotaevaporación se elimina el etanol. I.4.4.8 Determinación de densidad (ρ) La determinación de la densidad se realizó con un picnómetro de 5 mL. I.4.4.9 Determinación del Índice de refracción ( n 23 D ) Se filtró el aceite esencial por medio de embudo con filtro al vacío. Se utilizó un refractómetro Abbe. I.4.4.10 Análisis Cromatográfico Las muestras a caracterizar se colocaron en recipientes limpios, herméticamente sellados, color ámbar de 5 mL para evitar su descomposición, y fueron llevadas al Laboratorio de Toxicología de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia de la Universidad de San Carlos de Guatemala donde se les realizó el análisis químico por medio de cromatografía de gases con acoplamiento de espectrometría de masas para el aceite esencial y oleorresina. I.4.4.11 Análisis estadístico Para la evaluación estadística se utilizó un diseño completamente al azar con un arreglo combinatorio. Para cada especie vegetal se evaluaron 3 tratamientos para la extracción de aceite esencial, con tres repeticiones cada uno, haciendo un total de 9 determinaciones. Para la extracción de oleorresina utilizando materia prima sin aceite esencial, se utilizó un diseño completamente al azar para los 3 tratamientos, la materia prima se sometió a un tiempo fijo de maceración dinámica con triplicado, haciendo un total de 9 unidades experimentales. Para la extracción de oleorresina sin previo agotamiento de aceite esencial (proceso B) se utilizó un diseño completamente al azar con un arreglo combinatorio, en el cual se aplicó un experimento factorial evaluando el tamaño de lote lo cual da un resultado de 3 tratamientos con tres repeticiones cada uno, para hacer un total de 9 unidades experimentales. Para el análisis de los resultados se utilizó el modelo estadístico de análisis de varianza. I.4.4.11 Diagramación A continuación se describen los diagramas de los diseños de tratamientos experimentales, así como el flujograma del proceso de obtención de los extractos a nivel de planta piloto: DIAGRAMAS DE LOS DISEÑOS DE TRATAMIENTOS EXPERIMENTALES DIAGRAMA 1. Destilación atmosférica por arrastre con vapor Tratamientos-lotes 10 lb 20 lb 30 lb Destilación atmosférica por arrastre con vapor Aceite esencial R1 R2 R3 DIAGRAMA 2. Extracción de oleorresina por el método de maceración dinámica con etanol al 95%. Tratamientos-lotes 10 lb 20 lb 30 lb Extracción de oleorresina por el método de maceración dinámica con etanol al 95% Oleorresina R1 R2 R3 FLUJOGRAMA 1. Proceso de extracción de aceite esencial por destilación atmosférica por arrastre de vapor y oleorresina de orégano y laurel, con materia prima agotada del aceite esencial. DROGA VEGETAL MOLIDA ACEITE ESENCIAL + HIDROLATO DESTILACIÓN ATMOSFÉRICA POR ARRASTRE CON VAPOR 2 HORAS 94°C VAPOR SECO DECANTACIÓN 15 °CELSIUS DROGA VEGETAL HUMEDA AGOTADA DE ACEITE ESCURRIDO CONDENSADO ACEITE ESENCIAL HIDROLATO DROGA VEGETAL ESCURRIDA MACERACIÓN DINÁMICA POR 24 HORAS 23 °CELSIUS ETANOL 95 % DROGA VEGETAL + OLEORRESINA + ETANOL DROGA VEGETAL AGOTADA ETANOL RECUPERADO FILTRACIÓN AL VACÍO 20 “Hg 23°CELSIUS CONCENTRACIÓN AL VACÍO OLEORRESINA FLUJOGRAMA 2. Proceso de extracción de aceite esencial por destilación atmosférica por arrastre con vapor y oleorresina de orégano y laurel, con materia prima agotada del aceite esencial. DROGA VEGETAL MACERACIÓN DINÁMICA POR 24 HRS 23°CELSIUS ETANOL 95% DROGA VEGETAL AGOTADA + OLEORRESINA + ETANOL DROGA VEGETAL AGOTADA ETANOL RECUPERADO FILTRACIÓN AL VACÍO 20 “ Hg 23° CELSIUS CONCENTRACIÓN AL VACÍO OLEORRESINA I.4.5 El Método Para la obtención de aceite esencial a nivel laboratorio se sometió la materia prima al proceso de Hidrodestilación utilizando el equipo de destilación a nivel laboratorio denominado Neoclevenger, diseñado en base a Farmacopea Europea, fijando el tiempo de extracción en 2 horas. Para la obtención del aceite esencial en la planta piloto, se sometió la materia prima al proceso de arrastre con vapor directo fijando el tiempo de extracción en 2 horas. Para la obtención de oleorresina tanto a nivel laboratorio como planta piloto se utilizo el método de maceración dinámica, utilizando como solvente alcohol etílico al 95%, a temperatura ambiente de 23oC y un tiempo de 2 horas. I.4.6 La Técnica Estadística Para la evaluación estadística se utilizó un diseño completamente al azar con un arreglo combinatorio. Para cada especie vegetal se evaluaron 3 tratamientos para la extracción de aceite esencial, con tres repeticiones cada uno, haciendo un total de 9 determinaciones. Para la extracción de oleorresina utilizando materia prima sin aceite esencial, se utilizó un diseño completamente al azar para los 3 tratamientos, la materia prima se sometió a un tiempo fijo de maceración dinámica con triplicado, haciendo un total de 9 unidades experimentales. Para la extracción de oleorresina sin previo agotamiento de aceite esencial (proceso B) se utilizó un diseño completamente al azar con un arreglo combinatorio, en el cual se aplicó un experimento factorial evaluando el tamaño de lote lo cual da un resultado de 3 tratamientos con tres repeticiones cada uno, para hacer un total de 9 unidades experimentales. Para el análisis de los resultados se utilizó el modelo estadístico de análisis de varianza. I.4.7 Instrumentos utilizados I.4.7.1 Cristalería Tabla No. 1 Cristalería utilizada en la parte experimental CRISTALERÍA CAPACIDAD Beackers tipo Pirex 600 mL Earlenmeyers tipo Pirex 500 mL Agitadores magnéticos 1 mL Probetas graduadas 1000 mL Neoclevenger - Varillas de agitación - Viales 1mL Tubos de ensayo 100 mL Rotaevaporador - Balón fondo plano 500 mL I.4.7.2 Equipo Figura No. 1 Balanza Analítica Marca: Adventurer, Serie: G1231202040133, Voltaje: 8 -14.5 V, Frecuencia: 50/60 Hz, Máxima Capacidad: 150 g, Lectura Mínima: 0.001 g, Hecha en USA Figura No. 2 Balanza de humedad Marca: Boeco, Serie: 16204490, Voltaje: 230 V, Frecuencia: 50/60 Hz, Máxima, Capacidad: 150 g, Lectura Mínima: 0.001 g, Hecha en Alemania Figura No. 3 Bomba de vacío Marca: Gast, Modelo: O523-VAFG588DX, Voltaje: 100 -115 V, Frecuencia: 50 Hz, Potencia: ¼ Hp, Revoluciones: 1725/1425 rpm, Hecha en Michigan, USA Figura No. 4 Molino de cuchillas Marca: DEL KYRIOS, Modelo: Motovario 5.4Az112M4, Voltaje: 240-480 V, Frecuencia: 60 Hz, Hecho en Italia. Figura No. 5 Máquina Tamizadora Marca: Sound Enclosure W.S. TYLER, Modelo: R- 30050, Hecho en Estados Unidos Figura No. 6 Plancha de Calentamiento Marca: CORNING, Modelo: PC-620, Voltaje: 120 V, Frecuencia: 60 Hz., Potencia: 1113 W, Hecha en Estados Unidos. Figura No. 7 Refractómetro Marca: Abbe, Modelo: 32200, Rango de Temperatura: 0 a 70° C, Precisión: ± 0.0002, Rango de Medición: 1.3000 – 1.7000 Figura No. 8 Refrigeradora Marca: Daewoo, Modelo: FR-147RV, Voltaje: 115 - 120 V, Frecuencia: 60 Hz., Amperaje1.1 A, Refrigerante: R-134ª, Hecha en Korea. Figura No. 9 Rotaevaporador Figura No. 10 Marmita de Extracción Figura No. 11 Planta piloto de Extracción-Destilación Figura No.12 Neoclevenger Tabla No. 2 Reactivos utilizados en la parte experimental REACTIVOS PRESENTACIÓN Agua desmineralizada Garrafón de 19 L Alcohol etílico Solución al 30, 70 y 95% PARTE II MARCO TEÓRICO II.1 ACEITES ESENCIALES Parece ser que el famoso médico y filósofo español Arnoldo de Vilanova describió por vez primera la destilación de aceites esenciales (1235-1311) con fines terapéuticos. Philippus Aureolus Bombastus Parecelsus Von Hohenheim (1493-1541), célebre Médico Suizo, desarrolló su teoría acerca de la “Quinta Esencia”, o sea la parte más sutil o sublime de una sustancia, considerada como portadora de efectos terapéuticos. Por varias publicaciones del siglo XVI sobre el arte de la destilación, sabemos que el aceite esencial de espliego procedía de Provenza (Francia), y tenemos noticia de la manera de separar el aceite de agua. Existían de 15 a 20 aceites distintos que podía adquirirse en las farmacias, tres esencias “Officinalis” (aceites de trementina, de espliego y de bayas de enebro) del Dispensatorium Pharmacopolarum (1546) y, además, 61 aceites esenciales del Dispensatorium Valeri Cordi (1592). En los siglos XVII y XVIII, los farmacéuticos, de quienes cabe citar a Baumé, Rovelle, Bindheim, Hoffmann y Clauber, se interesaron más profundamente por la naturaleza de los aceites esenciales. El desenvolvimiento de la industria de los aceites esenciales empieza con el siglo XIX a consecuencia de los trabajos experimentales de Lavoisier. El primer estudio concienzudo sobre el aceite de trementina lo publicó J. Jo Houston de la Billardiere, que encontró una proporción de Carbono e Hidrógeno de 5:8, la cual se estableció más adelante para todos los hemiterpenos, terpenos, sesquiterpenos y politerpenos. El término “Terpeno” lo empleó por vez primera Kekulé, y la coronación de las investigaciones sobre estas substancias fue obra de O. Wallach. Desde entonces, los conocimientos tomaron rápidamente incremento y se hallan ligados estrechamente con los nombres de O. Aschan, E. Gildemeister, H. Walbaum, S. Bertran, A. Heisse, C. Cléber, E. Kremers, P. Barbier, L. Bouveault, E. Charabot y los contempráneos L. Ruzicka, J.L. Simonsen Guenther, etc. La iniciación del cultivo de plantas productoras de aceites esenciales en Guatemala, se debe al Sr. Julio Samayoa en su finca Cerritos, durante la primera guerra mundial; luego siguieron René Keilhauer y más tarde su hijo Minor Keilhauer. Estas plantaciones aromáticas corresponden al Cimbopogon Nardos Rendle, el Cimbopogon Citratos (Decandolle), y al Cimbopogon flexuosus Stapt. Estas dos últimas crecen muy bien a una altura a 400 a 2000 pies sobre el nivel del mar, en clima tropical, abundante sol y donde no falte la lluvia. El aceite esencial se encuentra en las hojas, su extracción se hace con arrastre de vapor en alambiques de hierro. II.1.2 Definición y origen de los aceites esenciales Se les da el nombre de aceites esenciales a los aceites volátiles o aceites etéreos. Son mezclas complejas de sustancias, de variadas funciones químicas. El término aceite esencial es utilizado en general para designar aquellas sustancias volátiles obtenidas por destilación a base de vapor de las plantas, o por otros métodos. Por otra parte, solamente existen hipótesis para explicar el origen de los aceites esenciales en las plantas. a) Hay la teoría que los terpenos están formados por la adición del beta-amino ácido butílico normal a la leucina con la eliminación de amoníaco y agua, o por la adición alfa-amino ácido isocaproico a la alanina para dar cimeno. Cimeno más leucina da ácido cinámico, uno de los principales constituyentes de la corteza de la canela. Ácido cinámico y cimeno se isomerizan produciendo terpenos. b) Existe también la opinión que los terpenos son originados de carbohidratos; la primera etapa es la formación del aldehído beta-metil-crotónico de acetona y acetaldehído. Dos moléculas de aldehído metil-crotónico se polimerizan para obtener geraniól, el cual se isomeriza muy fácilmente a terpenos. c) Otra hipótesis admite la formación de terpenos a partir de carbohidratos y proteínas. II.1.3 Composición química de los aceites esenciales naturales Se ha encontrado que los aceites esenciales contienen principalmente compuestos orgánicos líquidos, más o menos volátiles. La gran variedad de compuestos disueltos contenidos en los aceites esenciales se pueden clasificar de la siguiente manera: 1. Esteres: principalmente de ácido benzoico, acético, salicílico y cinámico. 2. Alcoholes: linalol, geraniol, citronelol, terpinol, mentol, borneol. 3. Aldehídos: citral, citronela, benzaldehído, cinamaldehído, aldehído cumínico, vainilla. 4. Ácidos: benzoico, cinámico, mirístico, isovalérico todos en estado libre. 5. Fenoles: eugenol, timol, carvacrol. 6. Cetonas: carvona, mentona, pulegona, irona, fenchona, tujona, alcanfor, metilnonil cetona, metil heptenona. 7. Esteres: ciñelo, éter interno (eucaliptol), acetol, safrol. 8. Lactonas: cumarina. 9. Terpenos: cafeno, pineno, limoneno, felandreno, cedreno. 10. Hidrocarburos: cimeno, estireno (feniletileno). II.1.4 Sustancias activas de las plantas medicinales Los principios activos son las sustancias responsables de la acción farmacológica; son sustancias que las plantas sintetizan y almacenan durante su crecimiento como parte de su metabolismo. En todas las especias se encuentran presentes simultáneamente principios activos y sustancias indiferentes (llamadas también de lastre), que determinan la eficacia del medicamento vegetal al acelerar o hacer más lenta la absorción de los principios activos en el organismo. Por lo general en una planta existen varios componentes medicinalmente activos, de los cuales uno de ellos el principal, determina las aplicaciones que tendrá la planta, el contenido de estos principios varía dependiendo del hábitat, de la recolección y de la preparación de la planta. La mayor parte de plantas medicinales desarrollan plenamente eficacia cuando se les emplea por períodos prolongados de tiempo (entre 6 y 8 semanas). Existen dos tipos de sustancias activas en las plantas medicinales: los productos del metabolismo primario (sacáridos principalmente), que son sustancias formadas en todas las plantas verdes gracias a la fotosíntesis y que les resultan indispensables para vivir; el segundo tipo de sustancias está compuesto por productos del metabolismo secundario; es decir, resultantes de procesos originados principalmente por la asimilación del nitrógeno. Estos productos parecen a veces inútiles para la planta, pero sus efectos terapéuticos son por el contrario destacables. Normalmente estas sustancias no se encuentran en las plantas en estado puro, sino en forma de complejos cuyos distintos componentes se complementan y se refuerzan en su acción sobre el organismo (Sharapin, 2000). Los compuestos medicinales de las plantas pertenecen a cualquiera de los siguientes grupos: II.1.4.1 Alcaloides Los alcaloides son compuestos nitrogenados complejos, de naturaleza básica, que provocan en general potentes efectos fisiológicos. Se trata, en su mayor parte, de venenos vegetales muy activos, dotados de una acción específica. Son el resultado del metabolismo de los aminoácidos. Su función es reguladora y protege a la planta contra los insectos y parásitos. Normalmente la medicina los emplea en estado puro, y su auténtico valor sólo se asegura en las manos del médico. II.1.4.2 Glucósidos Son productos del metabolismo secundario de las plantas. Están formadas por dos pares. La primera contiene un azúcar, por ejemplo la glucosa, y es casi siempre inactiva; pero mantiene un efecto favorable sobre la solubilidad del glucósido y su absorción, así como sobre su transporte a uno u otro órgano. La segunda parte es la que determina el efecto terapéutico; es la más activa, denominada aglucón. II.1.4.3 Saponinas Son muy frecuentes en las plantas medicinales. Desde el punto de vista químico también se caracterizan por la presencia de un radical glúcido junto a un radicalaglucón. Irritan las mucosas, producen un relajamiento intestinal, incrementa las secreciones mucosas bronquiales (son expectorantes). Son empleadas como diuréticos y desinfectantes de las vías urinarias. II.1.4.4 Fitohormonas Son sustancias que se producen por síntesis celular individualizada y que posteriormente se distribuye el resto de la planta (auxinas, giberelinas, citoquininas, ácido abscísico, etileno). Influyen sobre su crecimiento, el desarrollo del fruto, sobre la caída de las hojas y sobre el desarrollo de la raíz. También en el proceso de maduración y en actuar como defensa ante plagas en épocas de bajas temperaturas. Hoy son muy empleadas en horticultura. Se hallan entre otras en la avena, la zanahoria, el anís y la salvia. Utilizadas en cosmética como gel de baño e hidratantes para la piel. II.1.4.5 Principios amargos Estas sustancias tienen un gusto amargo, excitan las células del gusto, estimulan el apetito y aumentan la secreción de jugos gástricos. II.1.4.6 Taninos Estas sustancias, cuya composición química es variable, tienen un carácter común: su capacidad de coagular las albúminas, los metales pesados y los alcaloides. Su interés medicinal radica principalmente en su carácter astringente: su propiedad de coagular las albúminas de las mucosas y de los tejidos, creando así una capa de coagulación aislante y protectora, que reduce la irritación y el dolor, y detiene las pequeñas hemorragias. II.1.4.7 Sustancias aromáticas En este grupo se incluyen un cierto número de sustancias, frecuentes en las drogas vegetales, de composición y actuación a menudo muy variables. Pueden acompañar en la planta a otras sustancias activas. En este grupo encontramos a los glucósidos fenólicos y un segundo grupo de sustancias aromáticas formado por los productos de condensación de moléculas de ácido acético activo (acetogeninas). II.1.4.8 Aceites grasos Se trata de aceites vegetales líquidos a la temperatura ambiente. El frío los perturba y los solidifica. Son insolubles en agua, pero muy solubles en los disolventes orgánicos como el cloroformo y la acetona. Se utilizan normalmente para la fabricación de remedios y con fines alimentarios e industriales. II.1.4.9 Glucoquininas (insulinas vegetales) Se trata de sustancias que actúan sobre la glucemia; también se les llaman fitoinsulinas. II.1.4.10 Mucílagos Son mezclas amorfas de polisacáridos que, en presencia del agua, componen sistemas coloidales altamente viscosos. Ejercen acción favorable contra las inflamaciones de las mucosas, especialmente contra las de las vías respiratorias y digestivas, atenúan los dolores de las contusiones, aligeran la piel en la aplicación de cataplasmas. Reducen el peristaltismo intestinal. II.1.5 Aceites esenciales Se les da el nombre de aceites esenciales a los aceites volátiles o aceites etéreos. Son mezclas complejas de sustancias, de variadas funciones químicas. El término aceite esencial es utilizado en general para designar aquellas sustancias volátiles obtenidas por destilación a base de vapor de las plantas, o por otros métodos. II.1.5.1 Industrialización de plantas aromáticas Las principales ramas de la industria que más consumen plantas aromáticas o aceites esenciales son (Bandoni, 2003): II.1.5.1.1 Industria cosmética Para la elaboración de perfumes. Su importancia comercial resulta singularmente relevante, pues muchos cosméticos tienen un posicionamiento en el mercado debido casi exclusivamente a la fragancia que contienen. Y en forma especial merece destacarse el mercado de las fragancias: perfumes, aguas de tocador, colonias, extractos, etc. Otro rubro sobresaliente es el de los dentífricos, por su gran consumo de derivados de la menta. II.1.5.1.2 Industria alimenticia Para la elaboración de sabores, salsas, aditivos, bebidas, colas y otras alcohólicas. Muchas de estas plantas son usadas como especias (clavo, canela, jengibre, nuez moscada, vainilla, coriandro, comino, ajo, etc.). Otras, tienen una aplicación muy específica, como el lúpulo en la industria cervecera, o la mostaza y el azafrán. En apicultura se ha extendido en los últimos años la demanda de calidades tipificadas de mieles, y muchas de éstas provienen de cultivos de plantas aromáticas, como el eucalipto, el orégano o la salvia. II.1.5.1.3 Industria licorera Esta especialidad se nutre casi exclusivamente de plantas aromáticas. Ya sean extractos o esencias, el rol en esta industria es fundamental. En muchos países existe una industria licorera dedicada a especies autóctonas, la que aprovecha el conocimiento popular de las plantas aromáticas, para la elaboración de formulaciones tipo amargos, aperitivos, o licores regionales. II.1.5.1.4 Industria farmacéutica El amplio uso que tiene en alopatía productos como el eugenol, como analgésico tópico, el eucaliptol y el timol como antisépticos, el mentol como antipruriginoso, o el abisabolol como antiinflamatorio local. Los aceites esenciales son utilizados en aromaterapia. También conviene recordar el uso en veterinaria de algunos productos aromáticos, como piojicidas (limoneno y mentas), repelentes de insectos (citronela), en la forma de extractos para distintas dolencias de animales de cría (romero, tomillo, menta), etc. II.1.5.1.5 Productos de uso doméstico Muchos de estos productos, como desinfectantes, desodorantes de ambientes, jabones de lavar, suavizantes, son formulados en base a fragancias o a subproductos obtenidos de plantas aromáticas. En este caso la trementina y las esencias cítricas son las esencias más ampliamente utilizadas. La trementina es usada para la elaboración de productos de semisíntesis, como el comercialmente llamado aceite de pino, que no tiene relación alguna con la esencia natural de pino. II.1.5.1.6 Industria agroquímica Utiliza algunos subproductos obtenidos a partir de aceites esenciales, para la elaboración de los llamados bioinsecticidas, o insecticidas biodegradables de origen natural. El uso de la (+)-carvona (presente en la alcaravea y el eneldo) como inhibidor de la formación de brotes en la papa almacenada. II.1.5.1.7 Química fina Así como existe una industria del petróleo, existe una industria de la trementina. Esta esencia obtenida de la resina de varias especies de Pinus spp., es una valiosísima materia prima para la semisíntesis de productos aromáticos (el citado aceite de pino, terpineol, canfeno, acetato de isobornilo), insecticidas, vitaminas y otros productos de uso industrial. Pero no es el único caso. El safrol es un terpeno obtenido de varias esencias de origen tropical, y es usado para la semisíntesis de la vainillina. El citral es otro ejemplo de materia prima consumida por toneladas por la química fina. II.1.5.1.8 Industria tabacalera Es uno de los mayores consumidores de mentol. Pero también numerosos extractos de plantas aromáticas son aprovechados en esta actividad industrial. II.1.5.1.9 Industria textil En la elaboración de enmascaradores de olores, en tratamiento con mordientes después o durante el teñido. II.1.5.1.10 Industria petroquímica y minera Utiliza esencias o terpenos derivados de ellas como vehículos de flotación y lubricantes. II.1.5.1.11 Industria de pinturas Como enmascaradores de olores. El limoneno, como disolvente biodegradable. II.1.5.1.12 Otras industrias Disolventes para la limpieza de chips en computación, como reemplazantes de derivados petroquímicos; ecológicamente más seguros (biodegradables), con olores menos agresivos que los disolventes petroquímicos, con un punto de inflamación más alto que los disolventes tradicionales, lo que produce menos riesgos durante el uso o almacenamiento. En algunos casos con más baja presión de vapor y por lo tanto más seguros y aceptables para las legislaciones sobre control de los llamados VOC (Volatile organic compounds: compuestos orgánicos volátiles), etc. Pero de todas éstas, las dos ramas industriales con mayor demanda de plantas aromáticas son la alimenticia y la de extractivos para sabores y fragancias. En este último caso, lo ideal es que los mismos capitales que producen o acopian el material vegetal, sean los que obtienen los extractivos. Más aún, dado los grandes volúmenes de materia prima que deben movilizarse, resulta singularmente importante que la planta extractora esté instalada lo más cerca posible del cultivo o de la zona donde se acopia la planta aromática. Los principales productos obtenidos de plantas aromáticas son aceites esenciales, oleorresinas (obtenidas principalmente de especias), concretos, absolutos, extractos y tinturas (Bandoni, 2003). II.1.6 Función de los aceites esenciales en las plantas Hasta la presente fecha, no hay una teoría universalmente aceptada con respecto a la formación de los aceites esenciales y el papel que juegan en la vida de las plantas solo se cuenta con numerosas hipótesis que se describen a continuación: Los aceites esenciales penetran en los espacios intercelulares disminuyendo la transpiración de la planta. Incrementan la velocidad de circulación de substancias nutritivas en la planta, la cual regula su metabolismo. Son compuestos aromáticos que sirven para proteger contra los insectos y el crecimiento de hongos a las plantas. El aroma de las flores atrae a los insectos, promoviendo de esta manera su reproducción. Los aceites esenciales degradan a los glucósidos, en otras palabras actúan como agentes enzimáticos. Pueden proporcionar un medio de preservación a las plantas. II.1.7 Métodos de obtención de aceites esenciales y oleorresinas Los aceites esenciales son producto del protoplasma celular de plantas y representan los productos del metabolismo celular. Los aceites esenciales se encuentran en brotes, flores, corteza, hojas, tallos, frutos, semillas, madera y rizomas, y en algunos árboles en exudados oleorresinosos. Para liberar los aceites esenciales de una planta se emplean los métodos siguientes: 1) expresión, 2) destilación, 3) extracción con disolventes volátiles, 4) enflurage y 5) maceración. La mayor parte de los aceites se obtiene por destilación, generalmente con vapor, pero ciertos aceites se pueden dañar con altas temperaturas. II.1.7.1 Expresión Al exprimir por máquinas puede producirse un aceite casi idéntico al producto exprimido a mano y es el método aplicado en forma comercial. De los procesos de exprimir a mano, el proceso de esponja es el más importante, ya que produce el aceite de mayor calidad. Aquí la fruta se parte, y la piel se monda y se sumerge por varias horas; cada cáscara se prensa contra una esponja y el aceite se absorbe en ella, que se exprime periódicamente. Una persona puede preparar sólo 680 g de aceite de limón por día siguiendo este método, aún se práctica, especialmente en Sicilia. II.1.7.2 Destilación Se coloca la planta, o parte que contenga el principio aromático, en la caldera de un alambique de hierro, cobre o vidrio, y se cubre con agua. Al calentar la caldera se evapora el agua y el aceite volátil, que se condensa en el refrigerante, recogiéndose con el agua en el colector, de la cual se separa al cabo de cierto tiempo por diferencia de densidades, y finalmente se aísla con un embudo provisto de un grifo en la parte más estrecha. De este modo se obtienen casi todos los aceites volátiles. En algunos casos se cubre la planta o partes de la misma con alcohol, en vez de agua; así se obtiene la esencia disuelta en el alcohol; este sistema se emplea hoy muy poco, pues es mucho mejor obtener la esencia con el agua y después disolverla en alcohol. La temperatura tan baja a que hierve el alcohol, en comparación con la ebullición del calor para desprenderla por completo de la planta, sobre todo tratándose de semillas, por otro lado la destilación con arrastre de vapor es la que tiene mayor aplicación para obtener el aceite crudo, consiste en aplicar la corriente de vapor directamente sobre el material a destilar, a una presión adecuada, lo cual se efectúa en alambiques provistos de su entrada de vapor el cual se distribuye en el interior por medio de pichachas o de tubos perforados. II.1.7.3 Extracción con disolventes volátiles Consiste en poner en contacto el material con una corriente de disolvente, hasta que éste se apodera de toda la esencia, que luego es separada por destilación. El factor más importante para lograr el éxito en este método es la selección del disolvente. El disolvente debe ser 1) selectivo, disolver rápidamente y totalmente los componentes odoríferos, con sólo una parte mínima de materia inerte. 2) tener un bajo punto de ebullición. 3) químicamente inerte al aceite, 4) evaporarse completamente sin dejar cualquier residuo odorífero, 5) de bajo precio y, de ser posible, no inflamable. Se han empleado muchos disolventes por el mejor es éter de petróleo altamente purificado y el benceno es el que le sigue. II.1.7.4 Enflurage El proceso de enflurage es un proceso de extracción de grasas en frío que se aplica sólo en algunos tipos de flores delicadas y que produce aceites que de ninguna forma se podrían obtener por destilación. En el caso de jazmín y tuberosas, las flores cortadas continúan produciendo perfume mientras siguen vivas (cerca de 24 h). La grasa o base consiste en una mezcla altamente purificada de una parte de sebo y dos partes de manteca, con 0.6% de benzoína como conservador. Este método ya no se emplea de modo comercial. II.1.7.5 Maceración La maceración fue un proceso importante antes de la introducción de los métodos modernos de extracción con disolventes volátiles. La maceración se asemeja a la extracción por disolventes, la diferencia es que el material permanece varios días sumergido; en este sistema se usa aceite, grasa fundida, y aún alcohol etílico. II.1.8 Rectificación de los aceites esenciales naturales y oleorresinas La palabra rectificación literalmente significa una corrección o un proceso de limpieza. Una destilación con arrastre de vapor, una destilación al vacío o cualquier otro tipo donde se aplique una segunda destilación a un aceite esencial, puede ser considerada como una rectificación. La destilación fraccionada a presión reducida presenta muchas ventajas como lograr que los puntos de ebullición desciendan considerablemente, suprime la acción oxidante del aire sobre los productos calientes. Para llevar a cabo la destilación fraccionada de compuestos orgánicos de peso molecular medio o alto, la cantidad de calor necesaria, aún a presión reducida, es tal que provoca la destrucción de la molécula. Dada la necesidad de destilar y separar estos productos, se empieza a emplear la técnica de destilación molecular, que está basada en la evaporación y no en la ebullición de los diferentes componentes. II.1.9 Preliminares para un estudio de obtención de aceites esenciales y oleorresinas Como consecuencia de que no todos los aceites esenciales se obtienen de la misma manera, es necesario conocer las características de las materias primas, así como la forma en que se obtendrán los aceites esenciales. Para satisfacer las condiciones de multifuncionalidad, economía, fiabilidad, resistencia a la temperatura, calidad de los aceites esenciales, es necesario el conocimiento de los factores siguientes: II.1.10 Naturaleza del material vegetal La materia prima empleada en la extracción de los aceites esenciales se clasifica de la siguiente manera: Semillas y frutos Hierbas y hojas Flores y pétalos Racimos y Rizomas Generalmente, las semillas, frutos, racimos y rizomas no se degradan pasado el almacenamiento. Las hierbas, hojas y flores para el corte no prevenido entre el almacenamiento y conservación se degradan y es necesario un periodo corto en la recolección y el proceso de obtención del aceite sea de diez a treinta horas. Ciertas materias vegetales se les debe reducir el tamaño y así favorecer la obtención del aceite siendo necesario la existencia de molinos y cortadoras. II.1.11 Reducción de la partícula La materia prima que se emplea con más frecuencia en la extracción del aceite se presenta bajo la forma de sólidos. Para aumentar la superficie de contacto y obtener la forma más apta de reacción, la operación preliminar a la extracción es generalmente la trituración. Se debe emplear el seccionamiento que consiste en la división de los sólidos por medio de cortadoras y luego empleando una banda de cuchillas. También se debe emplear el proceso de percusión cuyo efecto de rompimiento se realiza por golpes bruscos de martillos. II.1.12 Técnicas de la recolección, secado y conservación de las plantas que contienen aceites esenciales El hecho de separar, cortando o partiendo, una sección del cuerpo vegetal, a ser posible por medio de una navaja bien afilada o, en el caso de un vegetal leñoso, con unas tijeras de jardinero, produce cierto número de transformaciones biológicas en la parte separada. Las células vegetales empiezan a marchitarse. Al separar la parte aérea de su raíz se provoca ante todo la interrupción del flujo alimenticio y de transpiración: ascensión del agua hasta las células, transportando los nutrimentos que lleva disueltos. Si la planta no es inmediatamente extendida al aire en finas capas, corre el peligro de estropearse. Las enzimas que contiene, y que antes favorecían la formación de materias activas. Empiezan ahora a descomponerla. En el organismo vegetal las anteriores reacciones de degradación, y el producto se transforma desde el punto de vista químico. Una incorrecta forma de secado aumenta aún más la cantidad de productos de degradación sin valor terapéutico perdiendo así el principio activo su calidad. Las materias primas vegetales, en función de su naturaleza y de su aplicación terapéutica, deben sufrir ciertos tratamientos químicos o mecánicos. Estos tratamientos comprenden: la forma de recolección o de recogida, el secado, el descortezado, el picado, la eliminación de algunas partes, la molienda, el tamizado, la trituración, el tueste y hasta la fermentación. Cada uno de dichos procedimientos busca la obtención de una cierta estabilización de las substancias activas contenidas en la planta. El secado de las plantas en general como las medicinales, las especias y las plantas de uso técnico-industrial, debe ser realizado por el productor o por el propio recolector. Se determina la época de la recolección, tanto de las plantas silvestres como de las cultivadas, en función del contenido de materias activas a lo largo de su ciclo vegetativo. En general deberán ponerse a secar las plantas lo más rápidamente posible tras su colecta, para evitar así que se requemen al marchitarse. Normalmente, no se aconseja el secado a pleno sol, pues los rayos solares producen una pérdida de materias activas, un amarilleo con un rápido oscurecimiento de los vegetales y una alteración de su valor medicinal o aromático. Las plantas recogidas por sus aceites esenciales pierden así hasta un tercio de sus materias activas. Sin embargo se recomienda, en algún caso excepcional, practicar un corto secado previo al sol, para a continuación situar la cosecha en el interior, con una buena corriente de aire, incluso en ocasiones poniendo las plantas ante un ventilador. En realidad secar una planta no es más que retirarle progresivamente la humedad. A menudo será necesario, antes de practicar el secado, regar la cosecha con agua, para eliminar de esa forma el polvo y las impurezas, las partículas de tierra, etc. También puede efectuarse la última fase en un secadero, junto a una fuente de calor artificial. El secado debe durar hasta la obtención de una consistencia perfectamente fiable: hasta las partes relativamente duras deben ser fáciles de partir al curvarlas. Una excesiva desecación provoca sin embargo la pulverización de las plantas y acarrea la pérdida de sus materias activas. Por el contrario, si su humedad residual permanece alta, se corre siempre el peligro de verlas pudrirse o enmohecerse durante su conservación. En verano, en lugares cerrados, con el calor natural, las flores se secan en 3-8 días, las hojas en 4-6 días por término medio; en otoño y primavera hay que prever bastante más tiempo. No es recomendable secar las plantas colocándolas encima de un radiador; es preferible valerse de un pequeño secador eléctrico con termostato. No es aceptable extender los productos directamente sobre el suelo para su secado; no se utilizará nunca papel de periódico como soporte, sino papel blanco de envolver que esté bien limpio. II.1.13 Deterioro a que están expuestos los aceites esenciales naturales y oleorresinas Generalmente el deterioro es atribuido a reacciones generales como: oxidación, resinificación, polimerización, hidrólisis de esteres y a la interacción de grupos funcionales. Estos procesos parecen estar activados por calor, aire, humedad, luz y en algunos casos posiblemente por metales. Como regla general, cualquier aceite esencia será tratado antes de almacenarlo, removiéndole impurezas metálicas, humedad y materia suspendida. Los envases deben quedar completamente llenos, colocándose en un lugar fresco y protegido de la luz. Antes de sellar los recipientes es conveniente burbujear nitrógeno o anhídrido carbónico para desalojar del envase la cámara de aire que pudiera haber quedado dentro del aceite. II.2 OLEORRESINAS Las oleorresinas son preparados líquidos consistentes en aceites esenciales y materias resinosas. Pueden dividirse en 2 grandes grupos: Las que se preparan con especias y hierbas por extracción con disolventes volátiles, utilizados casi por exclusivamente en la industria de sustancias soporíferas; y las que se preparan de las partes odíferas de la planta, exceptuadas las flores, cuyo empleo principal es la industria de perfumes. Las oleorresinas de especias corresponden enteramente a la primera categoría de oleorresinas mencionadas anteriormente, hay que distinguirlas de las llamadas acuarresinas, que típicamente se preparan por extracción de alcohol acuoso y no con disolventes, aunque hay cierta superposición en las aplicaciones de ambos tipos de productos. Puesto que disolventes distintos pueden dar como resultado productos de diferentes características de olor a partir de la misma sustancia, la elección de los disolventes es una de las funciones más importantes en la fabricación de oleorresinas. Después de la separación de las materias sobrantes se libera el extracto de su disolvente volátil mediante la destilación al vacío, lo que deja como residuo la oleorresina deseada. Las oleorresinas de especies que constituyen la forma líquida más concentrada de la especia, reproducen el carácter de la especia con mucha mayor plenitud que los aceites esenciales. Se utilizan como agentes soporíferos en la industria de elaboración de alimentos. Como su elevada concentración hace difícil que las oleorresinas como tales se incorporen en las mezclas de productos alimentarios, se dispersan en una base seca, como ejemplo harina y dextrosa. Las oleorresinas es uno de los ejemplos típicos de más fácil control de calidad y más limpias que las especias molidas equivalentes, aparte de las ventajas ya mencionadas, otra ventaja es que son más estables cuando se calientan. Hasta principios del decenio de 1970, la producción de oleorresinas tenía lugar principalmente en los países de índole industrial (industrializados), con predominio en los Estados Unidos y Gran Bretaña, debido a la complejidad de la tecnología y los riesgos que tenía el hecho de producir una industria de oleorresina. Debido a la considerable reducción de los costos de transporte a través del tiempo se trasladaron gran cantidad de equipo y tecnología a países como India, Singapur y países productores de especias del lado occidental. Las esperanzas excesivamente optimistas sobre el ritmo probable de transferencia de tecnología, originó que se establecieran demasiadas instalaciones de elaboración.; como consecuencia muchas industrias empezaron a trabajar bajo su capacidad de producción, hecho que hoy en día sigue dándose. El ritmo más elocuente y rápido en el crecimiento del consumo de oleorresina se registró durante el periodo 1965-1975, pero luego de ello dicho ritmo se hizo más lento. Hoy en día continúa creciendo con lentitud pero a un ritmo que es considerado constante. Debido a la gran ventaja que poseen las oleorresinas sobre los aceites esenciales y sobre las especias en crudo, las oleorresinas han ido aumentando su consumo a nivel global en los Estados Unidos, Canadá y Reino Unido. A largo plazo cabe una evolución general en los países industrializados del mundo entero llamados países del primer mundo. Es diferente la situación del mercado en lo que respecta a las oleorresinas de especias, sobre todo porque no existen prácticamente sucedáneos sintéticos de las especias y sus derivados. Además de la legislación sobre alimentación y medicamentos, cada vez más estrictas vigente en muchos aspectos; Aunque los mejoramientos introductorias en las técnicas de elaboración, como la pasteurización han contribuido en cierta manera para que se cumplan esos requisitos, han intensificado también la tendencia que favorece a las oleorresinas frente a las especies molidas. Sin embargo, recientemente esta tendencia se ha mitigado algo. Las oleorresinas se obtienen de especies por medio de una extracción con disolventes orgánicos que después se eliminan por destilación, el producto resultante es un líquido que contiene una mezcla de los compuestos volátiles y no volátiles de la materia prima, aún cuando no se extraen todos los responsables del aroma. Las oleorresinas son muy viscosas y coloreadas y se usan en concentraciones muy bajas, normalmente de 5% a 10% con respecto a la especie de donde se extraen. En su obtención se pueden acarrear algunas sustancias indeseables que dependen de la polaridad del disolvente y del contenido de humedad de la materia prima; las contaminaciones más importantes se deben a la presencia de taninos, azúcares, almidones, resinas y pigmentos, que se eliminan por medio de algunos tratamientos de solubilización, filtración o centrifugación; el paso que requiere de más precaución es la concentración, ya que sus constituyentes son muy sensibles a las altas temperaturas y se destruyen con facilidad. Las oleorresinas que primero se desarrollaron fueron extraídas de las especies con solvente, extrayendo el solvente por medio de vacío y luego el material inerte era tirado. La oleorresina resultante era de una apariencia pesada (como ver asfalto) en forma de masa, rica en compuestos aromáticos, no siempre agradables, inapetecibles por su apariencia, y, debido a su viscosidad, difícil de trabajar. Muchos de los solventes utilizados inicialmente eran peligrosos, eran inflamables y a veces explosivos si no se les manejaba con cuidado. Acetona, hexano, éter y varios alcoholes son ejemplos de estos solventes peligrosos. Estos medios de extracción no eran solventes completos ya que no extraían los compuestos hidrofílicos de la especie, que también contribuye al completo sabor de la especie. La industria se inclinó por el uso de hidrocarbonos clorinados debido a que tiene un punto de ebullición bajo, no es inflamable, es de fácil recuperación y es un solvente completo, produce una oleorresina de cuerpo completo, rica en todos los compuestos saborizantes de la especie original. Sin embargo, los solventes clorinados han caído en desuso en casi todo el mundo debido a su alto potencial carcinógeno. Las oleorresinas se componen principalmente de aceite esencial, resinas orgánicas solubles y otros materiales relacionados con la especie original como ácidos grasosos no volátiles. La cantidad de aceite graso presente depende de la materia prima así como del tipo de solvente utilizado. Las semillas de especies producen más aceites grasos que las demás partes de la planta. Los compuestos no volátiles, como los que contribuyen al olor fuerte y picante de la pimienta negra son iguales de importantes que los aceites esenciales volátiles si lo que se desea es un sabor igual al de la especie aromática correspondiente. Los compuestos deben estar en la misma proporción en la que están en la especie original. Las resinas y los aceites grasos actúan como conectores naturales de los compuestos más volátiles del aceite esencial. Algunas oleorresinas libres de solvente son difíciles de manejar debido a su alta viscosidad. En esos casos, se le agrega propilenglicol o un aceite graso para hacer más fluido el producto. Algunas oleorresinas son alteradas para ofrecer más ventajas al producto terminado. En la manufactura de productos saborizantes para productos cárnicos preparados, sopas instantáneas, salsas; muchos de estos extractos son mezclados en proporciones ya formuladas por el fabricante de sabores para producir una densidad de sabor, sabor similar, al que se obtendría con la mezcla de especies frescas, y en ocasiones a un costo menor. Es necesario mencionar que algunas oleorresinas tienen un sabor muy concentrado, la mayoría es difícil de pesar exactamente para mezclarse con otros ingredientes, los ingenieros en alimentos han tenido la necesidad de dispersar estos compuestos en un medio adecuado si estos se van a utilizar extensivamente en operaciones de manufactura. De aquí nació la idea de especies solubles. II.3 ORÉGANO Figura No.13 Especie Orégano materia vegetal deshidratada y fresca Nombre científico Lippia graveolens HBK Sinónimos Lantana ariganoides Mart. & Gal.; Lippia berlandieri Schauer; Goniostachyum graveolens Small. Familia botánica Verbenaceae. Nombres vulgares en los países iberoamericanos Orégano, mejorana, orégano de monte (México, Guatemala, El Salvador, Honduras, Costa Rica). Descripción taxonómica Arbusto delgado de hasta 2 m de alto, las ramas con pubescencia cortopilosa; hojas con peciolos de 5-10 cm de largo, usualmente obtusas o redondeadas en el ápice, algunas veces agudo, redondeadas o subcordadas en la base, densamente suave-pilosas en el haz, suave al tacto, glandular y densamente tomentosa o pilosa en el envés, el margen finamente crenado; pedúnculos 2-6 en la axila de la hoja, 4-12 mm de longitud; flores en espigas subglobosas a oblongadas, 4-120 mm de largo, brácteas 4 guresas, obado a lanceoladas, agudas, glandulares y densamente pilosas, cáliz 1-2 mm de largo, glandular y viloso; corola blanca, el tubo estrigoso, 3-6 mm de largo. Hábito o forma de vida Arbusto erecto. Anualidad-Perennidad Perenne Distribución geográfica Originaria de América. Se distribuye desde Baja California y el sur de Texas hasta Nicaragua. En Guatemala se ha descrito en El Progreso, Petén y Zacapa, se ha cultivado en Chimaltenango y Escuintla. Hábitat Se encuentra principalmente en la falda de los cerros, en lugares muy pendientes, con suelos pesados, pedregosos y de ambiente seco. Las áreas se encuentran densamente pobladas y se pueden identificar como verdaderos bosques de orégano. Se encuentra plantas de diferente tamaño y en forma aislada, lo que hace suponer su multiplicación natural por semilla. Altitud De 200 a 400 m sobre el nivel del mar. Clima Crece en climas secos, de acuerdo con la clasificación de zonas de vida de Holdrige en las zonas de vida bosque seco subtropical y monte espinoso subtropical. Suelos En condiciones naturales crece en suelos arcillosos pesados y pedregosos. Bajo condiciones de cultivo se desarrolla bien en suelos franco y francoarenosos. Requerimientos ambientales Temperatura de 20 a 25 °C. Precipitación de 400 a 900 mm anuales, distribuidos de mayo a octubre. Usos etnomédicos La decocción o infusión de hojas se usa por vía oral para tratar anemias, afecciones gastrointestinales (amebiasis, antiséptico intestinal, cólico, diarrea, disentería, dispepsia, estreñimiento, indigestión) y respiratorias (asma, bronquitis, catarro, influenza, laringitis, pleuresía, resfrió, tos, tos ferina, tuberculosis), hidropesía, ictericia, en vino se toma como expectorante y tónico. La decocción en leche se usa para tratar asma y bronquitis; el jarabe de las hojas secas se usa para tratar diabetes, disentería, catarro y resfrío. En homeopatía se usa para condiciones histéricas. Tópicamente la decocción se aplica para la cicatrización de heridas, llagas e inflamaciones en la garganta; en baños se usa para fortalecer niños debilitados, combatir la gripe y para aliviar el prurito y la sarna; en cataplasma para madurar abscesos y baños se usa como calmante. La planta fresca macerada en aceite se aplica a los dolores reumáticos; la maceración alcohólica contra ataques. Se le atribuye propiedad antioxidante, antiséptica, aromática, calmante, carminativa, cicatrizante, desinflamatoria, diaforética, digestiva, diurética, emenagoga, espasmolítica, estimulante, estomáquica, expectorante, pectoral, sudorífica y tónica. Otros usos populares Por su sabor, aroma y valor nutritivo las hojas secas se usan para sazonar carne, pescado, embutidos, ensaladas, guacamol, pozol, salsas y licores; además se usa como planta de jardín, aromática, cosmética y para preparar arreglos florales. Otros usos populares Por su sabor, aroma y valor nutritivo las hojas secas se usan para sazonar carne, pescado, embutidos, ensaladas, guacamol, pozol, salsas y licores; además se usa como planta de jardín, aromática, cosmética y para preparar arreglos florales. El aceite esencial tiene uso en perfumería, jabonería y cosmética. Las semillas se usan para extracción industrial de ácidos grasos, con un rendimiento de 29.2%. Farmacología Experimental Estudios antibacterianos demuestran que la tintura de hojas de Lippia graveolens es activa contra E. Coli, P. Neruginosa, S. Tuphi, S. Flexneri, S. Aureus, S. Pneumoniae y S. Pyogenes, pero inactiva contra H. Influenza; la infusión de has demostró actividad contra los mismos organismos. Estudios antifúngicos demuestran que los extractos con diclorometano y etanol con activos contra C.A. bicans, A. Flavus, E. Floccosum, M. Gypseum y T. Rubrum, pero inactivos contra C. Neoformans. Composición química El tamizaje fitoquímico de hojas de Lippia graveolens contiene: aceite esencial (1.8%), glicósidos, saponínicos, taninos y triterpenos, celulosa, pigmento y elementos minerales; la corteza y raíz contienen glicósidos, saponínicos, aceite esencial y taninos. Las hojas contienen además flavononas y lapacheno. Farmacognosia La materia médica son hojas y sumidades floridas secas, que deben reunir las mismas características fisicoquímicas y sanitarias de la materia prima usada para la elaboración de productos fitofarmacéuticos. En la revisión realizada de la literatura se encontraron pocas referencias sobre la relación entre la actividad farmacológica atribuida a la composición química, no se encontraron estudios tendientes a la formulación de productos fitofarmacéuticos. El aceite esencial de Lippia graveolens tiene densidad 0.890-0.922, índice de refracción 1.479-1.498; contiene timol (40-60%), p-cimeno (7.7-9.2%), 1,8-cineol (4.54.8%), carvacrol (3.1-21%), gama-terpineol (3.1-3.9%), metil-timol (2.4-3.8%), mirceno (0.9-2.5%), 3-careno (0.9-1.5%), cariofileno (0.8-1.2%), linalol (0.7-1.3%) y al menos 34 elementos más en menores cantidades. Toxicología Los extractos acuoso y etanólico de hojas de Lippia graveolens (500 ppm) presentan cierta toxicidad dosis-dependiente contra peces del género Nollinesia. Su administración durante el embarazo está contraindicada, ya que puede producir aborto. Indicaciones terapéuticas Por su acción antiséptica, digestiva y expectorante está indicado su uso por vía oral en el tratamiento de inapetencia, digestión lenta, meteorismo, tos, faringitis, sinusitis, bronquitis, y amenorrea. Se recomienda administrar tres veces al día en dosis de 2-4 g en infusión, 1-3 mL de extracto fluido, 4-6 gotas de esencia, 1-2 cápsulas de 50 mg, 0.1-0.4 g en supositorios. Tópicamente se aplican inhalaciones húmedas y aerosoles para tratar afecciones respiratorias. Por sus propiedades antisépticas y cicatrizantes la infusión y esencia en linimento y pomadas están indicadas para tratar heridas, tinea y dolores reumáticos; la cataplasma se aplica en los abscesos varias veces al día. Por su acción antiséptica puede combinarse con eucalipto, nance, tomillo y zarzaparrilla; por su acción digestiva con anís, hierbabuena, manzanilla y pericón; por su acción emenagoga con Altamira, borraja, manzanilla y pericón; por su acción expectorante con hierbabuena, eucalipto, marrubio, orozus, sauco y tomillo. II.4 LAUREL Figura No. 14 Laurel (Litsea glaucescens HBK) Nombre científico El nombre completo de las tres especies de laurel que hay en Guatemala son los siguientes: Litsea glaucescens HBK., Litsea guatemalensis Mez., Litsea neesiana (Schauer) Hemsl. Sinonimias Litsea acuminatissima Lundell, Litsea matudau Lundell; Tetranthera glaucescens var. subsolitaria Maissn. Otros nombres populares Aguarel, laurelillo, dpac-tzé, sufricalla, zit-zuch. Descripción botánica Litsea glaucescens es un árbol de 3-12 m de alto, ramas glabras. Hojas coriáceas, peciolos 18 mm de largo, lanceoladas, peninervadas. Inflorescencia en racimos axilares, 4-9 flores unisexuales. Fruto en drupa, negro, 7-9 mm de diámetro, rodeado por una cúpula. Litsea guatemalensis es un árbol pequeño hasta 6 m de alto, ramas delgadas, cafés. Hojas coriáceas, peciolo 1.5 cm de largo, elíptico-lanceoladas, 8 cm de largo, agudas en la base, lustrosas, glabras. Flores axilares, pedúnculo simple, solitarias, 15 mm de largo, 5-11 flores; brácteas de involucro deciduo; filamentos glabros (Cáceres, 1996). Hábitat Litsea glaucescens es nativo de México a Centro América; en Guatemala se ha descrito en Alta Verapaz, Baja Verapaz, Huehuetenango, Quetzaltenango, San Marcos y Zacapa. Litsea guatemalensis es endémico de Guatemala, crece en bosques abiertos de pino y matorrales de 1500-3150 msnm; se ha descrito en Chimaltenango, Guatemala, Jalapa, Sacatepéquez y Sololá (Cáceres, 1996). Historia Género de más de 100 especies, unas 12 de América, en Guatemala se han descrito tres especies nativas que se usan indistintamente como laurel (Litsea glaucescens, Litsea neesiana y Litsea guatemalensis). Hernández en 1790 la menciona con el nombre nahuatl Ecapátlli o medicina del viento y describe alguna de sus propiedades medicinales. Las hojas de las tres especies tienen olor muy parecido al del laurel europeo (Laurus nobilis), “porque tienen componentes químicos en común entre ellos se encuentra el terpinen-4-ol” (Tucker, 1992), atribuyéndole propiedades similares. El laurel europeo se cultiva y usa medicinalmente desde los griegos y romanos; sus hojas eran las guirnaldas que se daban a los ganadores de las olimpiadas (Cáceres, 1996). Agricultura Se obtiene principalmente por recolección en los campos de crecimiento silvestre en las regiones frías y montañosas del altiplano del país. Si bien es una planta relativamente frecuente en el país, raramente se encuentra en forma abundante en una localidad determinada. Se recomienda su conservación o cuando menos su manejo en las regiones de crecimiento silvestre. Se propaga por semilla, no existen cultivos establecidos en el país. Florea de febrero a junio, las hojas y flores se colectan hacia finales de la floración y se secan a la sombra. En cuanto a Laurus nobilis, se propaga con dificultad por semillas o estacas que enraizan a las 6-9 meses. Las hojas se colectan en la mañana en cualquier época del año, se secan a la sombra durante 12-15 días con algún peso encima para que no se arruguen. Usos medicinales atribuidos Para su uso por la población se usan indistintamente las tres especies. El cocimiento de hojas por vía oral se usa para el tratamiento de afecciones respiratorias (amigdalitis, males de la garganta, tos, tos ferina) y gastrointestinales (diarrea, cólico, úlcera), carencia de leche en la madre e hinchazón; por vía tópica se usa en lavado y baños para cansancio y epilepsia. El cocimiento de la corteza se usa para tratar mordeduras de culebras y de perros. Tópicamente se usa en lavados y baños para cansancio, úlceras, piernas hinchadas y epilepsia; en sahumerios se usa para parálisis. Se le atribuye propiedad aromática, antiséptica, astringente, balsámica, carminativa, emenagoga, emoliente, estimulante, espamolítica, febrífuga y pectoral (Cáceres, 1996). Otros usos populares Las hojas aromáticas son muy empleadas como condimento en la preparación de platillos como sopas, guisos y repostería, se usa en forma similar a Laurus nobilis. De las hojas se extrae un aceite etéreo con aplicación en la industria de cerveza y salchichas. Farmacología Estudios antifúngicos demuestran que la tintura de hojas de Litsea guatemalensis tiene moderada actividad contra C. albicans que no se confirmó; el extracto presenta actividad insecticida contra hormigas. Estudios farmacológicos demuestran que la infusión de hojas de Litsea glaucescens no tienen actividad espasmolítica en dosis de 15 g/Kg en duodeno aislado de rata (Cáceres, 1996). Composición química Se encuentra muy poca información sobre la composición química de las tres especies endémicas del país. Por su olor característico similar a Laurus nobilis, se asume que tiene un aceite esencial rico en derivados terpénicos y glicéridos de los ácidos láurico, oleico, palmítico y linoléico. El tamizaje fitoquímico de Litsea guatemalensis indica: alcaloides cuaternarios y no cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, cardenólidos, bufadienólicos, quercitina, estibina y taraxon; el aceite esencial contienen limoneno y citral. El aceite esencial de Litsea glaucescens contiene 1,8-cineol (22%), sabineno (13%), terpinen-4-ol (10%), -terpineno (9%), acetato de a-terpinilo (7%), acetato de nerilo (7%), a-pineno (5%) y ß-pineno (4%). El análisis proximal de 100 g de hojas de Laurus nobilis contiene: 188 calorías, agua (45.2 g), proteínas (4.2 g), grasa (1.2 g), carbohidratos totales (47.1 g), fibra (4.6 g), ceniza (2.3 g), calcio (187 mg), fósforo (70 g), hierro (5.3 mg), carotenos (1050 µg), tiamina (0.01 mg), riboflavina (0.21 mg), niacina (1.3 mg) y ácido ascórbico (46 mg). (Cáceres, 1996) Farmacognosia La materia médica son las hojas secas, las que deben tener las características botánicas, fisicoquímicas y organolépticas que caracterizan a la especie oficial. El aceite esencial de Litsea glaucescens tiene el olor característico pero difiere en su composición química, contiene 10 compuestos más que Laurus nobilis y hay 17 compuestos comunes a ambos. La presencia de limoneno en el aceite esencial reduce la dismenorrea por inhibición de la biosíntesis de prostaglandina (Cáceres, 1996). Toxicología No se encuentran referencias sobre la toxicidad de las tres especies nativas (Cáceres, 1996). Indicaciones terapéuticas Por su similitud organoléptica con Laurus nobilis y su uso popular en alimentación y medicina, está indicado en el tratamiento de anorexia, digestión lenta, espasmo gastrointestinal, meteorismo y bronquitis crónica. Se recomienda administrar tres veces al día en dosis de 1-2 g /taza en infusión o 1-2 ml de tintura 1:8 con etanol 35%. Para uso tópico se recomienda la decocción de 5 hojas / taza en el tratamiento de estomatitis, faringitis y sinusitis, usada como colutorio, gargarismo o compresa; en alcoholato o pomada se usa como antirreumático, pediculicida y parasiticida (Cáceres, 1996). PARTE III III.1 RESULTADOS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS En el presente proyecto se realizó la obtención y caracterización de aceite esencial y oleorresina de orégano (Lippia graveolens HBK) y dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.), plantas medicinales y aromáticas cultivadas en Guatemala. Se realizó la obtención del aceite esencial a nivel laboratorio, utilizando el aparato de destilación denominado Neoclevenger, por medio del método de Hidrodestilación y a nivel piloto por medio del método de arrastre con vapor directo, a temperatura de 94 oC y un tiempo de extracción de 2 horas. La obtención de oleorresina se realizó utilizando el método de maceración dinámica, a temperatura de 23°C, tiempo de maceración de 2 horas, tanto a nivel laboratorio como planta piloto. Se varió la concentración de alcohol etílico a nivel laboratorio, utilizando concentraciones 35, 70 y 95%. A nivel Planta Piloto se utilizó como solvente alcohol etílico con una concentración de 95%. Como resultado de los tratamientos establecidos en el diseño experimental se obtuvo una serie de resultados que se presentan y discuten a continuación. El análisis de varianza se realizó con un nivel de significancia de 5%. Tabla No. 3 Porcentaje de rendimiento de Aceite Esencial en función de la especie utilizada a nivel Laboratorio. Especie Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Laurel (Litsea glaucescens HBK) Orégano (Lippia graveolens HBK) Fuente: FODECYT 111-2006 Porcentaje de Rendimiento (%) 0.85 0.87 3.99 Figura No. 15 Rendimiento porcentual promedio de aceite esencial a nivel laboratorio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 15, se observa el rendimiento obtenido de aceite esencial a nivel laboratorio. Se observa que el valor más alto obtenido es para la especie Lippia graveolens HBK, para el que se obtuvo un valor medio de 3.99%, comparado con el obtenido para Litsea glaucescens HBK de 0.87% y para Litsea guatemalensis Mez. de 0.85%. Se observa en las gráficas respecto a la diferencia en rendimiento de aceite esencial entre las especies es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el Anexo A, en donde se determina que sí hay diferencia significativa (P=0.001) en el porcentaje de rendimiento de aceite esencial obtenido a nivel laboratorio en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento del aceite esencial para las dos especies de laurel, porque ambas se encuentran en el mismo subconjunto y sí hay diferencia significativa de éstas con el orégano. Según Cáceres (1996), el valor teórico reportado para Lippia graveolens HBK es 1.8%, mientras que el valor obtenido en el presente estudio es 3.99% a nivel laboratorio y 4.29% a nivel planta piloto; lo que implica que la Lippia graveolens HBK es una planta promisoria para industrialización en la obtención de aceite esencial. Según Ortiz (2005), el rendimiento porcentual del aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. es de 0.85%, a nivel laboratorio, utilizando materia prima proveniente de 3 regiones de Guatemala, este valor coincide con el obtenido en el presente estudio, de 0.85%. Según los datos reportados por Ortiz, el rendimiento porcentual del aceite esencial de Litsea glaucescens HBK sí presenta diferencia significativa según la región de procedencia; para la región R1, San Bartolomé Milpas Altas, Sacatepéquez, obtuvo un valor medio de 1.3222%, para la región R2, San Lucas Sacatepéquez, obtuvo un valor de 0.7561% y para la región 3, Matanzas San Jerónimo, Baja Verapaz, obtuvo un valor de 1.845 %. El rendimiento obtenido en el presente estudio, con materia prima proveniente de San Miguel Dueñas, Sacatepéquez fue de 0.8733%, que coincide con el valor reportado por Ortiz para la materia prima obtenida en la región R2, San Lucas Sacatepéquez. Tabla No. 4 Porcentaje de Rendimiento de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. Especie Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Laurel (Litsea glaucescens HBK) Orégano (Lippia graveolens HBK) Porcentaje de Rendimiento (%) Tamaño de Lote (lb) 10 20 30 0.35 0.52 0.54 0.35 0.59 0.48 4.20 4.88 3.81 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 16 Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de aceite esencial a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 6.0000 Especie GRÁFICA DE CAJAS Y ALAMBRES L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g 5.0000 3.0000 P RendPP 4.0000 2.0000 1.0000 0.0000 10 20 30 Lote (lb) Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 16, se observa que el rendimiento más alto obtenido de aceite esencial a nivel planta piloto en función del tamaño de lote, es de 4.88% es para la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) para un tamaño de lote de 20 lb. Al comparar las tres especies y los tres diferentes tamaños de lote, el rendimiento más alto es para la especie de orégano (Lippia graveolens HBK), y se obtuvo un valor medio de 4.29%, comparado con el obtenido para Litsea glaucescens HBK de 0.475% y para Litsea guatemalensis Mez. de 0.470%. Se observa en las gráficas respecto a la diferencia en rendimiento de aceite esencial entre las especies es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el apéndice A, en donde se determina que sí hay diferencia significativa (P=0.000) en el porcentaje de rendimiento de aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento del aceite esencial para las dos especies de laurel, porque ambas se encuentran en el mismo subconjunto y sí hay diferencia significativa de éstas con el orégano. De acuerdo al análisis de varianza no hay diferencia significativa (P=0.059) en el rendimiento de aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función del tamaño de lote y se estableció también que no hay diferencia significativa (P=0.124) en la interacción especie-lote. Se observa que el rendimiento de aceite esencial de laurel (Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK) obtenido a nivel planta piloto es aproximadamente la mitad del valor del rendimiento obtenido a nivel laboratorio; mientras que el rendimiento de aceite esencial de Lippia graveolens HBK obtenido a nivel piloto, 4.29% es similar al obtenido a nivel laboratorio, 3.99%. Tabla No. 5 Índice de refracción de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. Especie Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Laurel (Litsea glaucescens HBK) Orégano (Lippia graveolens HBK) Índice de refracción Tamaño de Lote (lb) 10 20 30 1.4813 1.4767 1.4743 1.4768 1.4742 1.4712 1.5081 1.5082 1.5084 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 17 Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de índice de refracción promedio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 1.5100 Especie GRÁFICA ALAMBRES gg GRÁFICADE DE CAJAS CAJAS YYALAMBRES L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g 1.4900 Refracción Índice de Refracción 1.5000 1.4800 1.4700 10 20 30 Lote (lb) Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 17, se observa el índice de refracción del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto, en función del tamaño de lote. Se observa que el valor más alto obtenido es para la especie Lippia graveolens HBK y para los tres diferentes tamaños de lote, y se obtuvo un valor medio de 1.508, comparado con el obtenido para Litsea glaucescens HBK de 1.474 y para Litsea guatemalensis Mez. de 1.477. Se observa en las gráficas respecto a la diferencia en los valores de índice de refracción entre las especies es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el apéndice A, en donde se determina que sí hay diferencia significativa (P=0.000) en el índice de refracción del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que sí hay diferencia significativa en el índice de refracción, ya que cada especie está en diferente subconjunto. De acuerdo al análisis de varianza sí hay diferencia significativa (P=0.001) en el índice de refracción del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función del tamaño de lote y se estableció también que no hay diferencia significativa (P=0.124) en la interacción especie-lote. Según Ortiz (2005), el valor del índice de refracción para el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. es 1.5742, a nivel laboratorio, el valor obtenido en el presente estudio es de 1.477 y el valor de índice de refracción para el aceite esencia de Litsea glaucescens HBK reportado por Ortiz es 1.5739 y el valor obtenido en el presente estudio es 1.474, que coincide con el reportado por Ortiz. Según Cáceres (1996), el valor del índice de refracción para el aceite esencial de Lippia graveolens HBK se encuentra en el rango de 1.479-1.498; el valor obtenido en el presente estudio es de 1.508 que coincide con el reportado por Cáceres. Tabla No.6 Densidad de Aceite Esencial en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. Especie Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Laurel (Litsea glaucescens HBK) Orégano (Lippia graveolens HBK) Densidad (g/mL) Tamaño de Lote (lb) 10 20 30 0.9398 0.9016 0.9016 0.8929 0.8884 0.8888 0.9352 0.9176 0.9455 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 18 Diagrama de barras y gráfica de cajas y alambres de densidad promedio (g/mL) de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 0.9600 Especie GRÁFICA DE CAJAS Y ALAMBRES L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g Densidad 0.9400 0.9200 0.9000 0.8800 0.8600 10 20 30 Lote (lb) Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 18, se observa la densidad del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto, en función del tamaño de lote. Se observa que el valor más alto obtenido es para la especie Lippia graveolens HBK y para los tres diferentes tamaños de lote, y se obtuvo un valor medio de 0.9328 g/mL, comparado con el obtenido para Litsea glaucescens HBK de 0.8900 g/mL y para Litsea guatemalensis Mez. de 0.9143 g/mL. Se observa en las gráficas respecto a la diferencia en los valores de densidad entre las especies es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el apéndice A, en donde se determina que sí hay diferencia significativa (P=0.000) en la densidad del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que sí hay diferencia significativa en la densidad de las tres especies estudiadas, porque cada especie está en diferente subconjunto. De acuerdo al análisis de varianza sí hay diferencia significativa (P=0.001) en el valor de la densidad del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función del tamaño de lote y se estableció también que sí hay diferencia significativa (P=0.002) en la interacción especie-lote. Según Ortiz (2005), el valor medio de la densidad del aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. es de 0.8226 g/mL y no hay diferencia significativa en función de la región de Guatemala de donde proviene la materia prima. El valor obtenido en el presente estudio para Litsea guatemalensis Mez. de la región de Tecpán Guatemala es 0.9143 g/mL. Según Ortiz (2005), el valor medio de la densidad del aceite esencial de Litsea glaucescens HBK es de 0.8747 g/mL, proveniente de la región R1, San Bartolomé Milpas Altas, el valor medio de la densidad para la región R2, San Lucas Sacatepéquez es 0.8077 g/mL y el valor medio obtenido para la densidad del aceite esencial de la región R3, Matanzas, San Jerónimo, Baja Verapaz es de 0.8245 g/mL y sí hay diferencia significativa en función de la región de Guatemala de donde proviene la materia prima. El valor obtenido en el presente estudio, con materia prima proveniente de San Bartolomé Milpas Altas es 0.8900 g/mL, que coincide con el dato reportado por Ortiz para la misma región. Según Cáceres (1996), el valor de la densidad para el aceite esencial de Lippia graveolens HBK se encuentra en el rango de 0.890-0.922 g/mL, el valor medio obtenido en el presente estudio es 0.9328 g/mL, que se encuentra en el límite superior del rango reportado por Cáceres. Tabla No.7 Porcentaje de rendimiento de Oleorresina en función de la concentración de alcohol etílico utilizado a nivel Laboratorio. Especie Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) Laurel (Litsea glaucescens HBK) Orégano (Lippia graveolens HBK) Concentración de etanol 35% 70% 95% 14.11 14.24 18.85 9.57 15.14 18.25 9.06 27.10 39.65 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 19 Rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel laboratorio de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función de la concentración de alcohol etílico utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 19, se observa el rendimiento obtenido de oleorresina a nivel laboratorio. Se observa que el valor más alto obtenido es para la especie Lippia graveolens HBK, utilizando alcohol etílico al 95% para la que se obtuvo un valor medio de 25.27%, comparado con el obtenido para Litsea glaucescens HBK de 15.43% y para Litsea guatemalensis Mez. de 14.32%, independiente del tamaño de lote utilizado que se observa en las gráficas respecto a la diferencia en rendimiento de la oleorresina obtenida a nivel laboratorio entre las especies es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el apéndice A, en donde se determina que sí hay diferencia significativa (P=0.002) en el porcentaje de rendimiento de oleorresina obtenida a nivel laboratorio en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento de oleorresina para las dos especies de laurel, porque ambas se encuentran en el mismo subconjunto y sí hay diferencia significativa de éstas con el orégano. Se determinó también, que sí hay diferencia significativa (P=0.000) en el porcentaje de rendimiento de oleorresina obtenida a nivel laboratorio, en función de la concentración del alcohol etílico utilizado. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se determinó que no hay diferencia significativa en el rendimiento de oleorresina obtenida a nivel laboratorio, utilizando alcohol etílico al 70% y alcohol etílico al 95%, para todas las especies y sí hay diferencia significativa utilizando alcohol etílico al 35%, para todas las especies. Se determina que es no hay diferencia significativa en utilizar alcohol etílico al 70% ó al 95%; siendo recomendable para obtener oleorresina tanto a nivel laboratorio como en planta piloto utilizar alcohol etílico al 70%. Tabla No. 8 Porcentaje de rendimiento de Oleorresina de materia prima exhausta y no exhausta en función del tamaño de lote a nivel Planta Piloto. Porcentaje de Rendimiento (%) Tamaño de Lote (lb) Especie EXHAUSTA NO EXHAUSTA 10 20 30 10 20 30 Laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 5.35 6.66 3.26 4.88 4.76 4.83 Laurel (Litsea glaucescens HBK) 13.66 3.50 3.19 4.74 5.43 3.71 Orégano (Lippia graveolens HBK) 6.71 5.06 6.20 4.41 7.22 7.02 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 20 Rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Fuente: FODECYT 111-2006 En la Figura 20, se observa el rendimiento obtenido de oleorresina a nivel planta piloto. Se observa que los valores obtenidos son muy similares a excepción del valor alto obtenido para la especie Litsea glaucescens HBK. Sin embargo, al realizar las medias, se obtienen valores también similares, siguientes: para la especie Lippia graveolens HBK se obtuvo un valor medio de 6.31%, para Litsea glaucescens HBK 5.71% y para la Litsea guatemalensis Mez. 4.96%. Se observa en las gráficas al respecto que no hay diferencia en rendimiento de oleorresina obtenida a planta piloto entre las especies y es confirmado por el análisis de varianza que se muestra en el apéndice A, en donde se determina que no hay diferencia significativa (P=0.470) en el porcentaje de rendimiento de oleorresina obtenida a nivel laboratorio en función de la especie. De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento de oleorresina para las tres especies, porque todas se encuentran en el mismo subconjunto. Se determinó también, que no hay diferencia significativa (P=0.279) en el porcentaje de rendimiento de oleorresina obtenida a nivel planta piloto, en función de la materia prima utilizada: exhausta y no exhausta; y se determinó que no hay diferencia significativa (P=0.165), en función del tamaño de lote. Figura No. 21 Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. Especie 20.00 L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g RenOleoPP 15.00 10.00 5.00 0.00 10 20 30 Lote (lb) Fuente: FODECYT 111-2006 La Figura 21 se muestra la distribución de los valores del rendimiento porcentual promedio de oleorresina obtenida a nivel planta piloto, en función del tamaño de lote utilizado y para cada una de las especies estudiadas. Se logra observar lo establecido en el análisis de varianza de que no existe diferencia significativa del rendimiento de oleorresina a nivel planta piloto en función del tamaño de lote y en función de la especie. Figura No. 22 Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta utilizando el valor de la media de las tres especies: dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK) en función del tamaño de lote utilizado. MateriaPrima 20.00 EXAUSTA NO EXAU NO EXAUS RenOleoPP 15.00 10.00 5.00 0.00 10 20 30. Lote (lb) Fuente: FODECYT 111-2006 La Figura 22 muestra la distribución de los valores del rendimiento porcentual promedio de oleorresina obtenida a nivel planta piloto, utilizando materia prima exhausta y no exhausta, graficando los valores de las medias de las tres especies y en función del tamaño de lote utilizado. Se logra observar lo establecido en el análisis de varianza de que no existe diferencia significativa del rendimiento de oleorresina a nivel planta piloto en función del tamaño de lote. Figura No. 23 Gráfica de cajas y alambres de rendimiento porcentual promedio de oleorresina a nivel planta piloto de materia prima exhausta y no exhausta en función de la especie de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK). MateriaPrima 20.00 EXAUSTA NO EXAU NO EXAUS 15.00 RenOleoPP 7 10.00 5.00 0.00 L glauce L guatem Lippia g Especie Fuente: FODECYT 111-2006 La Figura 23 muestra la distribución de los valores del rendimiento porcentual promedio de oleorresina obtenida a nivel planta piloto, utilizando materia prima exhausta y no exhausta, graficando los valores de las medias de las tres especies y en función de la especie. Se logra observar lo establecido en el análisis de varianza de que no existe diferencia significativa del rendimiento de oleorresina a nivel planta piloto en función del tamaño de la especie. Tabla No. 9 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) y (Litsea glaucescens HBK). ESPECIE (Litsea glaucescens HBK) (Litsea guatemalensis Mez.) PROMEDIO PROMEDIO % Área % Área 1,8-cineol 39.95 - 2 (E) nerolidol 16.90 - 3 linalol 11.18 4.98 4 trans-cariofileno 3.71 3.45 5 α-terpineno 1.66 1.41 6 α-pineno 3.09 - 7 4-terpineol 2.28 3.70 8 cis-α-bisaboleno 1.21 1.89 9 trans-dihidrocarvona 0.84 26.95 10 β-eudesmol 1.84 2.13 11 γ-terpineno 2.68 3.16 12 carvona 4.19 - 13 cis-dihidrocarvona 2.85 19.31 14 nerolidol - 14.44 15 limoneno - 15.34 16 dihidro-carveol - 1.91 - 1.80 No. Componentes 1 17 acetato de dihidrocarvilo Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 24 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) y (Litsea glaucescens HBK). 45 40 35 30 25 20 15 Litsea glaucescens PROMEDIO 10 Litsea guatemalensis PROMEDIO 5 Componentes 1,8-cineol (E) nerolidol linalol trans-cariofileno α-terpineno α-pineno 4-terpineol cis-α-bisaboleno trans-dihidrocarvona β-eudesmol γ-terpineno carvona cis-dihidrocarvona nerolidol limoneno dihidro-carveol acetato de dihidrocarvilo 0 No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Fuente: FODECYT 111-2006 Se observa en la Tabla No. 9 y Figura 7, los valores del porcentaje promedio de área de los componentes presentes en el aceite esencial obtenido a nivel planta piloto del aceite esencial de las especies de laurel, Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK al analizar el aceite esencial con cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (CG-EM) para la especie de Litsea guatemalensis Mez. se identificaron los siguientes compuestos: linalol (4.98%), limoneno (15.34%), trans-dihidrocarvona (26.95%), cis-dihidrocarvona (19.31%), nerolidol (14.44%), trans-cariofileno (3.45%), αterpineno (1.41%), 4-terpienol (3.70%), cis-α-bisaboleno (1.89%), β-eudesmol (2.13%), γ-terpineno (3.16%), dihidro-carveol (1.91%), acetato de dihidrocarvilo (1.80%). Para la especie Litsea glaucescens HBK se identificaron los siguientes compuestos: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%), linalol (11.18%), trans-cariofileno (3.71%), carvona (4%), α-terpineno (1.66%), α-pineno (3.09%), 4-terpineol (2.28%), cisα-bisaboleno (1.21%), trans-dihidrocarvona (0.845%), β-eudesmol (1.84%), γ-terpineno (2.68%), cis-dihidrocarvona (2.85%). Se observa que los compuestos mayoritarios presentes en el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. son: trans-dihidrocarvona (26.95%), cis-dihidrocarvona (19.31%), nerolidol (14.44%) y limoneno (15.34%). Según Ortiz (2005), los componentes mayoritarios para el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. son: 1,8-cineol (53.24%), linalol (14.97%) y nerolidol (7.70%) para la región R1, Parramos, Chimaltenango; linalol (18.16%), nerolidol (21.61%) y limoneno (19.16%), para la región R2, San Lucas Sacatepéquez; linalol (16.72%), limoneno (14.74%) y carvona (17.73%) para la región R3, San Antonio Aguas Calientes. Los datos obtenidos en el presente estudio de los componentes mayoritarios en el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. son linalol, limoneno y nerolidol, con materia prima proveniente de Tecpan, Guatemala, coinciden con los valores reportados por Ortiz para materia prima proveniente de la Región 2, San Lucas Sacatepéquez, a excepción de la trans-dihidrocarvona (26.95%) y cis-dihidrocarvona (19.31%) presentes en alto porcentaje en el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. en el presente estudio; Ortiz, reporta en el aceite esencial de materia prima proveniente de la Región 1, Parramos, Chimaltenango como componente mayoritario el 1,8-cineol (53.24%), que no está presente en el aceite esencial obtenido de materia prima de Tecpan, Guatemala. Valverdú (2003) reporta la composición del aceite esencial de las hojas de Litsea guatemalensis, indicando que los componentes mayoritarios son: 1,8-cineol (26.8%), αterpineol (14.5%), linalol (10.8%) y terpinen-4-ol (6.8%), estudio realizado en México con materia prima de la región. Se observa que la composición química del aceite esencial de Litsea guatemalensis depende de la región de procedencia de la materia prima. Según Ortiz (2005), los componentes mayoritarios para el aceite esencial de Litsea glaucescens HBK son: 1,8-cineol (62.60%), linalol (8.23%), nerolidol (5.92%), terpinen 4-ol (5.30%) y limoneno (4.62%) para la región R1, Parramos, Chimaltenango; linalol (17.95%), nerolidol (19.52%) y limoneno (39.88%) para la Región R2, San Lucas Sacatepéquez y 1,8-cineol (44.76%), linalol (29.77%), acetato de α-terpinilo (11.44%) para la región R3, Matanzas, San Jerónimo, Baja Verapaz. Tucker (1992), reporta la composición química del aceite esencial de las hojas de Litsea glaucescens Humb., indicando que los componentes mayoritarias presentes son: 1,8-cineol (22.36%), sabineno (13.03%), terpinen 4-ol (10.09%), γ-terpineno (9.05%), acetato de α-terpinilo (7.07%), acetato de nerilo (7.03%), con materia prima proveniente de México. Cáceres (1996), reporta para el aceite esencial de Litsea glaucescens: 1,8-cineol (22%), sabineno (13%), terpinen-4-ol (10%), terpineno (9%), acetato de α-terpinilo (7%), acetato de nerilo (7%), α-pineno (5%) y β-pineno (5%), no indica la región de procedencia de materia prima, pero es un estudio realizado en Guatemala. Los valores de los compuestos mayoritarios obtenidos en el presente estudio para la especie Litsea glaucescens HBK, con materia prima obtenida en San Bartolomé Milpas Altas Sacatepéquez: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%), linalol (11.18%), coinciden con los datos reportados por Ortiz con materia prima obtenida de la región R1, Parramos, Chimaltenango, reportando el 1,8-cineol está presente en un 62.60%, linalol en un 8.23% y nerolidol 5.92%. Ortiz reporta para la región R2, San Lucas Sacatepéquez, dos componentes mayoritarios que coinciden con el presente estudio que son linalol (17.95%) y nerolidol (19.52%), pero reporta un porcentaje mayoritario para limoneno, que está presente en un 39.88%, mientras que en aceite obtenido en el presente estudio no se encontró presente el limoneno, además el componte 1,8-cineol que está presente en la mayoría de estudios reportados aparece aquí con un valor muy bajo de 1.13% Finalmente, para la región R3, Matanzas San Jerónimo, Baja Verapaz, Ortiz reporta que los compuestos mayoritarios del aceite esencial son 1,8-cineol (44.76%) y linalol (29.77%), estos valores coinciden con los obtenidos en el presente estudio para el 1,8cineol y linalol, no así para el nerolidol que está presente en un porcentaje bajo de 2.09%, en contraposición al valor obtenido en el presente estudio de 16.9%. Comparando los resultados con los obtenidos por Tucker (1992), coincide únicamente con el componente de 1,8-cineol; aparece en este reporte el componente sabineno en un porcentaje de 13%, que también es reportado por Cáceres (1996) en un 13%. Comparando los resultados con los reportados por Cáceres, se coincide únicamente con el compuesto 1,8-cineol que Cáceres reporta con 22% y el obtenido en el presente estudio de 39.95%. Obteniéndose entonces que la composición química del aceite esencial de Litsea glaucescens HBK depende de la región de proveniencia de la materia prima. Los componentes mayoritarios del aceite esencial de Litsea glaucescens HBK que coinciden en la mayoría de estudios realizados son: 1,8-cineol, linalol y nerolidol. Dos estudios reportan el componente sabineno que no está presente en el aceite esencial del presente estudio. Tabla No. 10 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK). Especie No. 1 3 4 5 6 Fuente: FODECYT 111-2006 (Lippia graveolens HBK) PROMEDIO Componentes % Área timol 87.33 trans-cariofileno 1.82 p-cimeno 7.90 γ-terpineno 2.81 carvacrol 3.14 Figura No. 25 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en aceite esencial obtenidos a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK). 100 90 80 70 60 50 Lippia graveolens PROMEDIO 40 30 20 10 0 Componentes timol trans-cariofileno p-cimeno γ-terpineno carvacrol No. 1 2 3 4 5 Fuente: FODECYT 111-2006 Se observa en la Tabla No.10 y Figura 25, los valores del porcentaje promedio de área de los componentes presentes en el aceite esencial obtenido a nivel planta piloto de la especie Lippia graveolens HBK, al analizar dicho aceite con cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (CG-EM) para la especie se identificaron los siguientes componentes: timol (87.33%), trans-cariofileno (1.82%), p-cimeno (7.90%), γ-terpineno (2.81%), carvacrol (3.14%). Cáceres (1996), reporta la composición química del aceite esencial de Lippia graveolens HBK: timol (40-60%), p-cimeno (7.7-9.2%), 1,8-cineol (4.5-4.8%), carvacrol (3.1-21%), γ-terpineol (3.1-3.9%), linalol (0.7-1.3%). Los componentes mayoritarios en el aceite esencial de Lippia graveolens HBK obtenidos en el presente estudio son: timol (87.33%), p-cimeno (7.90%), γ-terpineno (2.81%), carvacrol (3.14%). Los componentes mayoritarios obtenidos: timol, p-cimeno y carvacrol coinciden con los reportados por Cáceres, observándose que el valor obtenido para el componente timol, 87.33%, está muy por encima del reportado por Cáceres que se encuentra en un rango de 40% a 60%; indicando que el orégano (Lippia graveolens HBK) que crece de una manera silvestre en el bosque monte espinoso del municipio de Río Hondo, Zacapa es una materia prima que contiene aceite esencial muy rico en timol. Tabla No.11 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) con materia prima exhausta y no exhausta. ESPECIE No. Componentes (Litsea guatemalensis Mez.) NO EXHAUSTA PROMEDIO PROMEDIO % Área % Área EXHAUSTA 1 nerolidol 21.12 7.22 2 ácido hexadecanoico, etil éster 8.97 - 3 etil palmitato 8.41 10.73 4 β-eudesmol 7.97 4.92 5 1,6,10-dodecatrien-3-ol 7.97 - 6 ácido 9-octadenoico, etil éster 5.72 6.82 7 etil oleato 4.63 8.54 8 trans-cariofileno 2.25 1.32 9 cis-α-bisaboleno 1.59 1.69 0.55 5.087 10 etil estearato Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 26 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) con materia prima exhausta y no exhausta. 25 20 15 NO EXHAUSTA PROMEDIO 10 EXHAUSTA PROMEDIO 5 0 Componentes No. ácido hexadecanoico, etil ácido 9-octadenoico, etil éster ester 1 2 β-eudesmol 1,6,10-dodecatrien-3-ol nerolidol cis-α-bisaboleno etil palmitato etil oleato trans-cariofileno etil estearato 3 4 5 6 7 8 9 10 Fuente: FODECYT 111-2006 En la Tabla 11 y Figura 26, se observa el porcentaje promedio de área de los componentes presentes en la oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) con materia prima exhausta de aceite esencial, los componentes principales obtenidos son: ácido hexadecanoico, etil éster (8.97%), ácido 9octadenoico, etil éster (5.72%), β-eudesmol (7.97%), 1,6,10-dodecatrien-3-ol (7.97%), nerolidol (21.12%), cis-α-bisaboleno (1.59%), etil palmitato (8.41%), etil oleato (4.63%), trans-cariofileno (2.25%), etil estearato (0.55%). En la oleorresina obtenida de materia prima no exhausta de aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez., los componentes principales obtenidos son: ácido 9octadenoico, etil éster (6.82%), β-eudesmol (4.92%), nerolidol (7.22%), cis-αbisaboleno (1.69%), etil palmitato (10.73%), etil oleato (8.54%), trans-cariofileno (1.32%), etil estearato (5.087%). De los componentes mayoritarios presentes en el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez. son: trans-dihidrocarvona (26.95%), cis-dihidrocarvona (19.31%), nerolidol (14.44%) y limoneno (15.34%), se observa que únicamente está presente en la oleorresina, el nerolidol en un 21.12% en materia prima no exhausta y en un 7.22% en materia prima exhausta. Los compuestos que están presentes sólo en las oleorresinas son: ácido 9-octadenoico, etil ester (5.72%, no exhausta; 6.82% exhausta); β-eudesmol (7.92% no exhausta, 4.92% exhausta), etil palmitato (8.41% no exhausta, 10.73% exhausta) y etil oleato (4.63% no exhausta, 8.54% exhausta). El compuesto ácido hexadecanoico, etil ester está presente en un 8.97% sólo en la materia prima no exhausta y el etil estearato está presente en un 5.1% sólo en materia prima exhausta. El compuesto β-eudesmol, también está presente en el aceite esencial de Litsea guatemalensis Mez., en un porcentaje bajo de 2.13% y aparece en un 7.92% en la oleorresina de materia prima no exhausta. Tabla No.12 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. ESPECIE No. Componentes (Litsea glaucescens HBK) NO EXHAUSTA PROMEDIO PROMEDIO % Área % Área EXHAUSTA 1 ácido hexadecanoico, etil éster 24.39 - 2 9-ácido octadecenoico, etil éster 11.6 - 3 β-eudesmol 3.51 8.82 4 nerolidol 6.05 38.42 5 cis-α-bisaboleno 1.42 1.61 6 etil palmitato 5.05 2.38 7 etil oleato 3.28 - 8 timol, α-cimofenol 3.08 0.89 9 ácido octadecanoico, etil éster 3.54 6.68 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 27 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. 45 40 35 30 25 20 Litsea glaucescens NO EXHAUSTA PROMEDIO Litsea glaucescens EXHAUSTA PROMEDIO 15 10 5 0 Componentes ácido hexadecanoico, etil éster 9-ácido octadecenoico, etil éster β-eudesmol nerolidol cis-α-bisaboleno etil palmitato etil oleato timol, α-cimofenol ácido octadecanoico, etil éster No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Fuente: FODECYT 111-2006 En la Tabla 12 y Figura 27, se observa el porcentaje promedio de área de los componentes presentes en la oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK) con materia prima exhausta de aceite esencial, los componentes principales obtenidos son: ácido hexadecanoico, etil éster (24.39%), ácido 9-octadenoico, etil éster (11.60%), β-eudesmol (3.51%), nerolidol (6.05%), cis-αbisaboleno (1.42%), etil palmitato (5.05%), etil oleato (3.28%), timol (3.08%), ácido octadecanoico, etil éster (3.54%). En la oleorresina obtenida de materia prima no exhausta de aceite esencial, los componentes principales obtenidos son: β-eudesmol (8.82%), nerolidol (38.42%), cis-α-bisaboleno (1.61%), etil palmitato (2.38%), timol (0.89%), ácido octadecanoico, etil éster (6.68%). De los compuestos mayoritarios presentes en el aceite esencial, para la especie Litsea glaucescens HBK son: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%) y linalol (11.18%), sólo el nerolidol está presente en la oleorresina obtenida, en un 6.05% con materia prima no exhausta de aceite esencial y en un 38.42% en materia prima exhausta de aceite esencial. El β-eudesmol también está presente en el aceite esencial, en porcentaje mínimo con 1.84%, mientras que en la oleorresina está presente en un 3.51% en materia prima no exhausta y en un 8.82% en materia prima exhausta. Se observa que el porcentaje de nerolidol presente en la materia prima exhausta de aceite esencial, 38.42%, es alto comparado con el presente en el aceite esencial, 16.9%. Comparando la composición química de las oleorresinas tanto de materia prima no exhausta como exhausta para la especie Litsea glaucescens HBK, se observa que los compuestos acido hexadecanoico, etil ester (24.39%) y 9-ácido octadecenoico, etil ester (11.6%) sólo están presentes en la oleorresina de materia prima no exhausta. Tabla No.13 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. ESPECIE No. Componentes (Lippia graveolens HBK) NO EXHAUSTA EXHAUSTA PROMEDIO PROMEDIO % Área % Área 1 4(5)-acetil-2-(2,2-dimetilpropil) 15.9 - 2 2,4-dihidroxi-3-metilacetofenona 12.04 22.26 4 timol 8.37 - 5 metil palmitato 1.73 - 6 etil palmitato 6.27 - 9 xicaina 11.13 16.56 17 β-bisaboleno 4.12 3.90 Fuente: FODECYT 111-2006 Figura No. 28 Porcentaje promedio de área de los componentes presentes en oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie de orégano (Lippia graveolens HBK) con materia prima exhausta y no exhausta. 25 20 15 10 5 Lippia graveolens NO EXHAUSTA PROMEDIO Lippia graveolens EXHAUSTA PROMEDIO etil palmitato xicaina β-bisaboleno 2 metil palmitato 1 timol 2,4-dihidroxi-3-metilacetofen No. 4(5)-acetil-2-(2,2-dimetilpropil) Componentes 0 4 5 6 9 17 Fuente: FODECYT 111-2006 En la Tabla 13 y Figura 28, se observa el porcentaje promedio de área de los componentes presentes en la oleorresina extraída a nivel planta piloto de la especie orégano (Lippia graveolens HBK) con materia prima exhausta de aceite esencial, los componentes principales obtenidos son: 4(5)-acetil-2-(2,2-dimetilpropil (15.9%), 2,4dihidroxi-3-metilacetofenona (12.04%), timol (8.37%), metil palmitato (1.73%), etil palmitato (6.27%), xicaina (11.13%), β-bisaboleno (4.12%). En la oleorresina obtenida de materia prima no exhausta de aceite esencial, los componentes principales obtenidos son: 2,4-dihidroxi-3-metilacetofen (22.26%), xicaina (16.56%), β-bisaboleno (3.9%). De los componentes mayoritarios presentes en el aceite esencial de Lippia graveolens HBK: timol (87.33%), p-cimeno (7.90%), γ-terpineno (2.81%), carvacrol (3.14%), únicamente el timol está presente en la oleorresina de materia prima no exhausta de aceite esencial, en un 8.37%. Los compuestos comunes a ambas oleorresinas son: 2,4dihidroxi-3-metilacetofenona (12.04%) en la materia prima no exhausta, 22.26% materia prima exhausta; xicaina (11.13%) materia prima exhausta, 16.56% materia prima no exhausta); β-bisaboleno (4.12%) materia prima no exhausta, 3.9% materia prima exhausta). Los compuestos: 4(5)-acetil-2-(2,2-dimetilpropil) (15.9%), timol (8.37%), metil palmitato (1.73%), etil palmitato (6.27%), solo están presentes en la oleorresina de materia prima no exhausta de aceite esencial. PARTE IV IV.1 CONCLUSIONES IV.1.1 El rendimiento del aceite esencial de laurel de las dos especies (Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK) son similares 0.85 y 0.87% respectivamente a nivel laboratorio, que coincide con los valores reportados por Ortiz (2005) 0.85 y 0.8733% respectivamente (Ver Resultados, Tabla No.3). IV.1.2 El rendimiento del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) es 3.99% a nivel laboratorio, el valor reportado en la literatura es 1.8%, el doble del valor reportado en la literatura haciendo del orégano una especie vegetal promisoria para industrialización de su aceite esencial (Ver Resultados, Tabla No.3). IV.1.3 De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento del aceite esencial obtenido a nivel laboratorio para las dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK) y si hay diferencia significativa al comparar los rendimientos de éstos con el rendimiento del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK). IV.1.4 El rendimiento del aceite esencial de laurel obtenido a nivel planta piloto es de 0.475% para la especie Litsea guatemalensis Mez. y de 0.470% para la especie Litsea glaucescens HBK y se observa que éstos valores son la mitad que los reportados a nivel laboratorio; mientras que el rendimiento de aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) obtenido a nivel piloto es de 4.29% y es similar al obtenido a nivel laboratorio de 3.99%. IV.1.5 De acuerdo al análisis de varianza no hay diferencia significativa en el rendimiento de aceite esencial obtenido a nivel planta piloto en función del tamaño de lote y se estableció también que no hay diferencia significativa en la interacción especie-lote. IV.1.6 De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento del aceite esencial obtenido a nivel planta piloto para las dos especies de laurel, porque ambas se encuentran en el mismo subconjunto (Litsea guatemalensis Mez. y Litsea glaucescens HBK) y sí hay diferencia significativa al comparar los rendimientos de éstos con el rendimiento del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK). IV.1.7 El valor del índice de refracción para el aceite esencial de las especies de laurel son similares a los valores reportados en la literatura; según Ortiz (2005) para la especie Litsea guatemalensis Mez. es de 1.5742 y para Litsea glaucescens HBK es de 1.5739 y el valor obtenido en el presente estudio es de 1.477 y 1.474 respectivamente. IV.1.8 El valor del índice de refracción para el aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) en el presente estudio es de 1.508 que coincide con los valores reportados por Cáceres (1996) en el rango de 1.479-1.498. IV.1.8 De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que sí hay diferencia significativa en el índice de refracción y en la densidad de los aceites de las tres especies estudiadas, a nivel planta piloto, porque cada especie está en diferente subconjunto. IV.1.9 Los compenentes mayoritarios presentes en el aceite esencial de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) son: trans-dihidrocarvona (26.95%), cis-dihidrocarvona (19.31%), nerolidol (14.44%) y limoneno (15.34%). No se identificó el componente 1,8-cineol, reportado por Ortiz (2005) en un 53.24% con materia prima proveniente de otra región (Ver Resultados, Tabla No.9 y Figura No.24). IV.1.10 Los valores de los componentes mayoritarios obtenidos para el aceite esencial de de laurel (Litsea glaucescens HBK) son: 1,8 cineol (39.95%), E-nerolidol (16.9%), linalol (11.18%), (Ver Resultados, Tabla No.9 y Figura No.24). Dos estudios reportan el componente sabineno en un 13% (Tucker, 1992 y Cáceres 1996) que no está presente en el aceite esencial del presente estudio. IV.1.11 Los componentes mayoritarios en el aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK) son: timol (87.33%), p-cimeno (7.90%), γ-terpineno (2.81%), carvacrol (3.14%), el valor obtenido para timol, está muy por encima del reportado que se encuentra en un rango de 40% a 60%; indicando que el orégano es una materia prima que contiene aceite esencial muy rico en timol (Ver Resultados, Tabla No.10 y Figura No.25). IV.1.12 De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se determinó que no hay diferencia significativa en el rendimiento de oleorresina obtenida a nivel laboratorio, utilizando alcohol etílico al 70% y alcohol etílico al 95%, para todas las especies y sí hay diferencia significativa utilizando alcohol etílico al 35%, para todas las especies. IV.1.13 De acuerdo a la prueba de medias de Tukey, se establece que no hay diferencia significativa en el porcentaje de rendimiento de oleorresina a nivel planta piloto para las tres especies, porque todas se encuentran en el mismo subconjunto. IV.1.14 De los componentes mayoritarios del aceite esencial del laurel (Litsea guatemalensis Mez.), únicamente está presente en la oleorresina, el nerolidol en un 21.12% en materia prima no exhausta de aceite esencial y en un 7.22% en materia prima exhausta de aceite esencial (Ver Resultados, Tabla No.11 y Figura No.26). IV.1.15 De los compuestos mayoritarios del aceite esencial para la especie de laurel (Litsea glaucescens HBK), sólo el nerolidol está presente en la oleorresina obtenida, en un 6.05% en oleorresina de materia prima no exhausta de aceite esencial y en un 38.42% en materia prima exhausta de aceite esencial (Ver Resultados, Tabla No.12 y Figura No.27). IV.1.16 De los componentes mayoritarios del aceite esencial de orégano (Lippia graveolens HBK), únicamente el timol está presente en la oleorresina de materia prima no exhausta de aceite esencial, en un 8.37% (Ver Resultados, Tabla No.13 y Figura No.28). IV.2 RECOMENDACIONES IV.2.1 Propiciar la industrialización del orégano (Lippia graveolens HBK), una planta promisoria porque se determinó que contiene el doble del porcentaje de aceite esencial reportado por la literatura; además se determinó que su aceite esencial es muy rico en timol, teniendo un 87.33 de este componente, también un valor muy alto comparado con el reportado. IV.2.2 Propiciar la domesticación de estas especies, porque éstas tres especies crecen en Guatemala de una manera silvestre, a excepción del laurel (Litsea glaucescens HBK) que ya ha sido domesticada y existe una plantación en la Finca El Hato, San Bartolomé Milpas Altas, Sacatepéquez: manifestando los personeros de dicha finca que es la especie más apetecida en la industria alimenticia por ser más aromática. IV.2.3 Ejecutar un plan educativo en las comunidades donde crece de una manera silvestre el orégano (Lippia graveolens HBK), para que las personas utilicen esta planta medicinal y aromática con todo el potencial que posee; las personas desconocen todas las propiedades de la mencionada planta y no la aprovechan al máximo. IV.2.4 Realizar estudios sobre los productos que pueden obtenerse de plantas medicinales y aromáticas de Guatemala, y como se ha indicado que se cuenta con una gran biodiversidad, la cual se tiene que caracterizar y evaluar sus posibilidades de domesticación e industrialización. IV.2.5 Realizar la aplicación de los aceites esenciales y oleorresinas obtenidos, en productos cosméticos, fitofarmacéuticos y alimenticios, para determinar la calidad de los mismos, propiciando así la industrialización de estos extractos. IV.3 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Arteche García, Alejandro. 1998. Fitoterapia. Editorial Masson, S.A. Tercera edición. España. pp. 23-40. 2. Bandoni, Arnoldo. 2003. Los Recursos Vegetales Aromáticos en Latinoamérica: su aprovechamiento industrial para la producción de aromas y sabores. CYTED Ciencia y Tecnología para el Desarrollo. Segunda edición. Argentina. pp. 19-21, 27-31, 136-138, 141-144, 181-191, 209. 3. Boloix, Igor. 1998. 100 Plantas Medicinales, Aromáticas y Culinarias. Editorial Servilibro. España. pp. 9-19, 183-184. 4. Cáceres, Armando. 1996. Plantas de uso medicinal en Guatemala. Editorial Universitaria. Primera edición. Guatemala. pp. 226-227. 5. Centro de Comercio Internacional CCI. 1986. Aceites esenciales y oleorresinas. “Estudio de distintos productores y mercados importantes”. Suiza. pp. 34, 220. 6. De Silva, Tuley. 1993. A Manual on the essential oil industry. United Nations. Industrial Development Organization Vienna. pp. 155-163. 7. Finnemore, Horace. 1926. The Essential Oils. Editorial D. Van Nostrand Co. Estados Unidos, 1926. pp. 17-19, 28-30, 279-281. 8. Furia, Thomas E. y Bellanca Nicoló. 1975. Fenaroli´s Handbook of Flavor Ingredients. Volumen I. Segunda edición. Boca Ratón. CRC Press. pp. 384. 9. Guenther, Ernest. 1996. The Essentials Oils. Editorial Van Nostrand. Estados Unidos. Vol. IV Pp. 207. Vol V. pp. 54. 10. Hamilton, Leicester F. 1981. Cálculos de Química Analítica. Editorial McGraw-Hill. Séptima edición. México. pp.384-388. 11. Kirk, Raymond E. 1961. Enciclopedia de Tecnología Química. Tomo I. Editorial Hispano-Americana. Primera edición. México. pp.61-81. 12. Kukinski, Claudia. 2000. Farmacognosia. Editorial OMEGA. Primera edición. España. pp.311. 13. Kurth Baver, Dorothea: Garbe, Horst Surburg. 1990. Common Fragance and Flavors materials. Preparation, Properties and uses. Segunda edición. Alemania. pp. 4243, 59, 112, 141, 154, 170, 173. 14. Lawless, Julia. 1992. The Encyiclopedia of Essential Oils. Editorial Element. Inglaterra. pp.123. 15. López, Jo: Barillas, W: Gómez-Laurito: Lin, Fu. 1995. Flavonoids of Litsea glaucescens. Plantas Medicinales 61. Universidad de Costa Rica. pp.198. 16. Martínez M., Alejandro. 2001. Aceites esenciales. Universidad de Antioquia. Facultad Química Farmacéutica. Colombia, mayo. [email protected] 17. Ortiz Q., Cinthya. 2005. 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Vienna. 173 pp. IV. 4 ANEXOS IV.4 ANEXOS ANEXO A ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS Variable dependiente: RendAceiteLab Fuente Especie Error Total corregida Suma de cuadrados tipo III 19.553 2.226 Gl 2 6 21.779 8 Media cuadrática 9.776 .371 F 26.347 Subconjuntos homogéneos RendAceiteLab Duncan N Especie L. guate L. glauc Lippia g Significación 1 3 3 3 Subconjunto 2 .8533 .8733 .969 L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g n 1.5000 IndiceRefraccion 3.9900 1.000 Especie 1.5100 1.4900 1 1.4800 1.4700 10.0 20.0 Lote 30.0 Significación .001 Variable dependiente: IndiceRefraccion Suma de cuadrados tipo III .006 Fuente Especie Lote Especie * Lote Error Total corregida 2 Media cuadrática .003 F 918.490 Significación .000 7.55E-005 2 3.77E-005 10.860 .001 4.63E-005 6.25E-005 .007 4 18 26 1.16E-005 3.47E-006 3.333 .033 Gl IndiceRefraccion DHS de Tukey N Especie L glaucescens L guatemalensis 1 9 9 Lippia graveolens Significación 9 Subconjunto 2 1.474100 3 1 1.477433 1.000 1.508256 1.000 1.000 IndiceRefraccion DHS de Tukey N Lote 30.0 20.0 10.0 Significación 1 9 9 9 Subconjunto 2 1.484667 1.486378 .154 1 1.488744 1.000 Especie 0.9600 L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g 0.9400 Densidad 0.9200 0.9000 0.8800 0.8600 10.0 20.0 Lote 30.0 Variable dependiente: Densidad Suma de cuadrados tipo III .008 .002 Fuente Especie Lote Especie * Lote Error Total corregida Gl 2 2 Media cuadrática .004 .001 F 46.186 10.164 Significación .000 .001 6.486 .002 .002 4 .001 .002 .014 18 26 8.96E-005 Densidad DHS de Tukey N Especie L glaucescens 1 9 L guatemalensis Lippia graveolens 9 Subconjunto 2 .890033 3 1 .914311 9 Significación 1.000 .932800 1.000 1.000 Densidad DHS de Tukey N Lote 7.5 10.0 5.0 Significación Subconjunto 1 9 9 9 2 .902533 .911967 .115 1 .911967 .922644 .068 Especie 6.0000 L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g 5.0000 3.0000 P RendPP 4.0000 2.0000 1.0000 0.0000 10.0 20.0 30.0 Lote Variable dependiente: RendOleoresinaLab Fuente Especie Solvente Especie * Solvente Error Total corregida Suma de cuadrados tipo III 871.738 1241.918 841.273 gl 2 2 4 1503.249 4458.178 Media cuadrática 435.869 620.959 210.318 27 35 F 7.829 11.153 3.778 55.676 RendOleoresinaLab DHS de Tukey N Especie L guatemalensis L glaucescens Lippia graveolens 1 12 12 Subconjunto 2 14.3200 15.4275 12 1 25.2683 Significación .930 1.000 DHS de Tukey N Solvente 35 70 95 Significación 1 12 12 12 Subconjunto 2 10.9150 1 18.8233 25.2775 1.000 .105 Significación .002 .000 .014 Medias marginales estimadas de RendOleoresinaLab Especie 40.00 Medias marginales estimadas L glaucescens L guatemalensis Lippia graveolens 30.00 20.00 10.00 0.00 35 70 95 Solvente Variable dependiente: RendPP Fuente Especie Lote Especie * Lote Error Total corregida Suma de cuadrados tipo III Media cuadrática gl F Significación 87.671 .850 2 2 43.836 .425 343.567 3.331 .000 .059 1.070 2.297 91.888 4 18 26 .267 .128 2.096 .124 RendPP DHS de Tukey N Especie L guatemalensis Subconjunto 1 9 L glaucescens 9 9 Lippia graveolens Significación 2 .470400 1 .475467 1.000 4.295478 1.000 RendPP DHS de Tukey Lote 30.0 20.0 10.0 Significación N Subconjunto 1 9 1 1.608989 9 1.634756 9 1.997600 .080 Medias marginales estimadas de RendPP Especie L glaucescens L guatemalensis Lippia graveolens 4.0000 3.0000 2.0000 estimadas Medias marginales estimadas 5.0000 1.0000 0.0000 10.0 20.0 30.0 Lote Especie 20.00 L glauceL guatemLipp L guatemLippia g Lippia g 10.00 P RenOleoPP 15.00 5.00 0.00 10.0 20.0 Lote 30.0 MateriaPrima 20.00 EXAUSTA NO EXAU NO EXAUS 10.00 P RenOleoPP 15.00 5.00 0.00 10.0 20.0 30.0 Lote MateriaPrima 20.00 EXAUSTA NO EXAU NO EXAUS 15.00 RenOleoPP 7 10.00 5.00 0.00 L glauce L guatem Especie Lippia g Variable dependiente: RenOleoPP Fuente Especie MateriaPrima Lote Suma de cuadrados tipo III 8.736 6.920 22.186 2 6.918 61.093 2 4 40.090 .789 1.250 Significación .470 .279 11.093 2.004 .165 3.459 15.273 .625 2.760 .547 .062 2 20.045 3.622 .049 40.377 3 13.459 2.432 .101 94.081 17 5.534 285.212 33 Especie * MateriaPrima Especie * Lote MateriaPrima * Lote Especie * MateriaPrima * Lote Error Total corregida 2 1 Media cuadrática 4.368 6.920 gl RenOleoPP DHS de Tukey Especie N Subconjunto 1 1 4.9558 L guatemalensis 12 L glaucescens Lippia graveolens Significación 12 10 5.7050 6.3110 .380 RenOleoPP DHS de Tukey Lote N Subconjunto 30.0 20.0 1 12 10 1 4.7008 5.5150 10.0 Significación 12 6.6233 .158 F Medias marginales estimadas de RenOleoPP en MateriaPrima = EXAUSTA Especie Medias marginales estimadas 8.00 L glaucescens L guatemalensis Lippia graveolens 7.00 5.00 estimadas 6.00 4.00 3.00 10.0 20.0 30.0 Lote Medias marginales estimadas de RenOleoPP Especie L glaucescens L guatemalensis Lippia graveolens 12.50 10.00 7.50 5.00 estimadas Medias marginales estimadas en MateriaPrima = NO EXAUSTA 2.50 10.0 20.0 10.0 Lote Las medias no estimables no se representan ANEXO B FOTOGRAFÍAS DE LA EJECUCIÓN DEL PROYECTO METODOLOGÍA EXPERIMENTAL Figura No. 29 Materia prima de dos especies de laurel (Litsea guatemalensis Mez.), (Litsea glaucescens HBK) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK), es colocada en el secador solar de la Facultad de Agronomía y en el secador eléctrico de flujo transversal del Laboratorio de Investigación de Extractos Vegetales –LIEXVE-, Sección Química Industrial del Centro de Investigaciones de Ingeniería. La materia prima contiene un porcentaje de humedad del 59.3% es colocada en bandejas, controlando su humedad hasta llegar a un porcentaje de menor del 12%. Figura No. 30 Proceso de preparación de materia prima de laurel y orégano, separando las hojas de los tallos, para obtener un mejor rendimiento en las extracciones de aceite esencial y oleorresina, a nivel de laboratorio y a nivel planta piloto. Figura No. 31 Proceso de extracción a nivel laboratorio de oleorresina de las especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y de orégano (Lippia graveolens HBK). Figura No.32 Extracción de oleorresina de la especie de orégano a nivel laboratorio, y concentración de los extractos de oleorresina a nivel planta piloto por medio del proceso de rotaevaporación de la especie de laurel (Litsea guatemalensis Mez.). Figura No. 33 Extracciones de oleorresina de dos especies de laurel (Litsea glaucescens HBK), (Litsea guatemalensis Mez.) y una especie de orégano (Lippia graveolens HBK), a nivel planta piloto, por medio del método de maceración dinámica con alcohol etílico al 95%, y realización de las concentraciones a través de rotaevaporación. Figura No.34 Extracción de aceite esencial a nivel planta piloto. Figura No.35 Obtención de Aceite Esencial a nivel laboratorio (Neoclevenger). Figura No.36 Aceite esencial obtenido. Figura No. 37 Medición de la densidad del aceite esencial obtenido. Figura No.38 Medición del índice de refracción con el Refractómetro Fisher Scientific PARTE V V.1 INFORME FINANCIERO FORMULARIO DE PRESUPUESTO GENERAL DE GASTOS EJECUTADOS NOMBRE DEL PROYECTO Determinacion de la calidad del aceite esencial y oleorresina obtenidos de 3 especies vegetales obtenidos de 3 especiees vegetales nativas a nivel planta piloto No. del Proyecto: 111-2006 DESCRIPCION DEL PRESUPUESTO SUB DESCRIPCION GRUPO GRUPO RENGLON 1 MONTO MONTO DE MONTO EJECUTADO CONTRAPARTIDA TOTAL SERVICIOS NO PERSONALES 12 PUBLICIDAD, IMPRESIÓN Y ENCUADERNACION 181 Servicios Profesionales 121 Publicacion de resultados 122 Impresión, encuadernación y reproducción 13 Q99,999.84 Q100,000.00 Q199,999.84 Q2,500.00 Q2,500.00 Q1,950.00 Q3,500.00 Q6,680.00 Q4,000.00 Q4,000.00 Q4,000.00 Q21,392.00 Q8,000.00 Q8,000.00 Q1,950.00 VIATICOS Y GASTOS CONEXOS 131 Viáticos en el exterior 133 Viáticos para adquisicion de materia prima 15 Q3,180.00 ARRENDAMIENTO Y DERECHOS 155 16 Arrendamiento de medios de transporte MANTENIMIENTO Y REPARACION DE MAQUINARIA Y EQUIPO 163 17 Mantenimiento y reparación de maquinaria y equipo Q17,392.00 MANTENIMIENTO Y REPARACION DE OBRAS E INSTALACIONES 174 Mantenimiento y reparación de instalaciones 176 Mantenimiento y reparación de otras obras e instalaciones 18 SERVICIOS TECNICOS Y PROFESIONALES 189 2 Analisis de laboratorio cromatografía gasesosa y liquida de alta presión MATERIALES Y SUMINISTROS 21 ALIMENTOS Y PRODUCTOS AGROPECUARIOS 219 23 Laurel, romero y oregano Q24,289.40 Q24,289.40 Q150.00 Q150.00 Q51.75 Q51.75 Textiles y vestuario 231 25 Suministros para filtracion en el filtro prensa (lona, manta y gasa) PRODUCTOS DE CUERO Y CAUCHO 254 26 Artículos de caucho PRODUCTOS QUIMICOS Y CONEXOS 261 Elementos y compuestos químicos Q24,840.00 Q24,840.00 262 Alcohol Etilico (grado industrial) Q6,745.00 Q6,745.00 268 Productos plásticos, nylon, vinil y pvc Q2,280.29 Q2,280.29 Q1,441.12 Q1,441.12 27 PRODUCTOS DE MINERALES NO METALICOS 272 Neoclevenger 273 Productos de loza y porcelana Q825.00 SUBTOTAL 3 Q183,144.40 Q825.00 Q122,000.00 Q305,144.40 PROPIEDAD, PLANTA, EQUIPO E INTANGIBLES 32 MAQUINARIA Y EQUIPO 323 Equipo médico-sanitario y de laboratorio 329 Otras maquinarias y equipos Q39,037.25 SUBTOTAL 9 Q222,181.65 Q39,037.25 Q90,000.00 Q90,000.00 Q212,000 Q434,181.65 ASIGNACIONES GLOBALES 91 GASTOS IMPREVISTOS Gastos de Administración 10% TOTAL Q26,460.00 Q11,000.00 Q37,460.00 Q248,641.65 Q223,000.00 Q471,641.65