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“ESTUDIO DE ESPECIES BOTÁNICAS CON ACTIVIDAD BIOCIDA SOBRE EL CICLO VITAL DE LA (Diaphorina citri kuwayama)” UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS REGIÓN POZA RICA- TUXPAN CARRERA: INGENIERIA AMBIENTAL EXPERIENCIA EDUCATIVA: EXPERIENCIA RECEPCIONAL TEMA: “ESTUDIO DE ESPECIES BOTÁNICAS CON ACTIVIDAD BIOCIDA SOBRE EL CICLO DE VITAL DE LA DIAPHORINA CITRI KUWAYAMA”. PRESENTA: BLANCA GISELA MONTES COBOS DIRACTORA DE TESIS: MTRA. MARIA DE LA LUZ ARRIAGA GAONA MAYO 2012 Agradecimientos A Dios por llenar mi vida de bendiciones. Un agradecimiento a mis padres por darme la vida por darme los mejores consejos. A mi madre Patricia Cobos Cruz que gracias a su esfuerzo, comprensión y cariño a pesar de todos sus defectos gracias por ser como eres mami. A mi padre Guillermo Montes Trejo que aunque no estés entre nosotros ya, siempre estarás en mi corazón. A mi hermano Jair Osiris Montes Cobos por su apoyo durante los momentos más difíciles por ser un buen ejemplo a seguir en esta etapa de tu vida deseo que coseches muchos éxitos. A mi hermana Nayeli Patricia Casanova Cobos por ser siempre una luz en nuestras vidas. Para el amor de mi vida un agradecimiento muy especial, que nada en mi vida me haría más felíz que su sola presencia, su apoyo incondicional, por estar ahí en los momentos más difíciles y en los más duros de mi vida por esas y puedo citar muchas más razones, por compartir conmigo su familia la cual es genial, gracias eres un ser muy especial en mi vida. ¡Maravillosa Criatura! Un agradecimiento muy especial al Comité Estatal de Sanidad Vegetal de Veracruz en especial al Ing. Agrónomo Ernesto González Valdez y a todo su equipo fitosanitario. Al dueño del predio, el productor de limón persa (Citrus latifolia Tanaka) Zósimo Hidalgo Muñoz A mi directora de tesis la Maestra María de la Luz Arriaga Gaona que sin su apoyo, su esfuerzo su conocimiento y motivación no hubiese sacado el mejor provecho de esta Tesis. CONTENIDO Tema Página INTRODUCCIÓN JUSTIFICACIÓN OBJETIVOS HIPÓTESIS CAPÍTULO I MARCO TEORICO 1.1 Producción Mundial de cítricos 1 Limón 2 Toronjas y Pomelos 3 1.1.1 Producción de Cítricos en 4 México 1.2 Antecedentes Diaphorina citri 4 1.2.1 Ficha Técnica 6 1.2.2 Biología y características 6 morfológicas Características generales 7 Características morfológicas 7 1.3 Distribución mundial Diaphorina citri 9 1.3.1 Distribución de Diaphorina citri en 10 México 1.3.2 Daños e importancia económica 11 1.4 Interacción bacteria - vector 12 1.5 Plaguicidas 13 1.5.1 Bioplaguicida o biocida 14 1.6 Características taxonómicas de las 14 plantas utilizadas 1.6.1 Guayaba (psidium guajava) 14 1.6.2 Origen y características botánicas 15 1.6.3 Composición química 16 1.6.4 Higuerilla (Ricinus communis L.) 16 1.6.5 Características 17 1.6.6 Fotoquímica 17 1.6.7 Piocha Melia azederach cv 18 1.6.8 Características 18 Glosario 32 Bibliografía y referencias electrónicas 35 Anexos ANEXO A 37 ANEXO B 53 CONTENIDO DE TABLAS Tema Página CAPITULO I I.1 Clasificación y Taxonomía de la 1 Diaphorina citri Kuwayama I.2 Producción Mundial de la Naranja 6 I.3. Producción mundial de Limón 7 I.4 Producción Mundial de Toronjas y 8 Pomelos CAPITULO III 3.1 Recuento de retoños infestados sin 26 Tratar 3.2 Número de retoños sanos después 26 de la aplicación del extracto concentrado de guayaba (quassia amara) 3.3 Número de retoños sanos después de la aplicación del extracto concentrado de 27 Higuerilla (ricinus communis) 3.4 Número de retoños con extracto concentrado 27 de hojas de piocha 3.5 Primera semana de fumigación con los 28 extractos 3.6 Segunda semana de fumigación con los 29 extractos CONTENIDO DE FIGURAS Figura Página CAPITULO I 1.1 Estado ninfal de Diaphorina citri kuwayama 3 1.2 Diaphorina Citri en sus 5 estados ninfales 4 1.3 Etapas de desarrollo de la Diaphorina citri 5 Kuwayama 1.4 Producción Mundial de Naranja 6 1.5 Producción Mundial de Limón 7 1.6 Producción Mundial de Toronjas y Pomelos 8 1.7 Producción de cítricos en México 9 1.8 Distribución mundial de Diaphorina citri 10 1.9 Distribución de la Diaphorina citri en la 11 República Mexicana 1.10 Árbol de guayabo con frutos 14 1.11 Planta de higuerilla 16 1.12 Frutos de higuerilla 16 1.13 Árbol de piocha, hojas flores y semillas 17 CAPITULO II 2.1 Ubicación del predio muestreado. 19 2.2 Diagrama de flujo 20 CAPITULO III 3.1 Método de aspergeo de los extractos 22 3.2 Retoño infectado y rociado con piocha 22 3.3 Retoños de árbol sin tratar 26 3.4 Retoños sanos después del tratamiento con 26 guayaba 3.5 Retoños sanos después del tratamiento con 27 higuerilla 3.6 Retoños sanos después del tratamiento con 27 piocha 3.7 Grafico comparativo efectividad guayaba contra higuerilla 30 Introducción “El más mínimo aleteo de una mariposa puede ocasionar una tormenta al otro lado del mundo” (proverbio chino) Vivimos en una época en que muchas de las cosas han perdido su verdadero significado, tristemente y al parecer entre más pequeñas sean las formas de vida que representen menor importancia se les da globalmente. Sin embargo y me permito comentar que viviendo en el error, gran parte de la población no aporta su atención para atender y a su vez entender esta clase de problemas, para darles el verdadero valor, pero sobre todo… para aprovecharlo, producirlo, regenerarlo y crear un ciclo de vida que nos permita como comunidad la mejora de todas y cada una de estas formas de vida. Es de esta forma como habiendo mencionado lo anterior es que realza y enfatiza la importancia de este documento científico en el análisis e investigación de esta forma particular de vida, en donde no solo se demuestra con hechos fehacientes su comportamiento y desarrollo, si no que se comparte y da relevancia a la importancia necesaria de un ser vivo de pequeñas dimensiones, que en base a su forma de vida y desarrollo muy particular puede generar un beneficio o una destrucción de inmensas proporciones en donde se asiente para reproducirse, tal es el caso de: La Diaphorina Citri Kuwayama. En el mundo la producción de cítricos representa una operación económica muy importante por ello la relevancia de mantener vivos los árboles para así garantizar el aprovechamiento de sus frutos. Los cítricos representan el 22% de la producción mundial de frutas y los países del hemisferio norte son los principales productores y consumidores, el resto se produce y se consume en el hemisferio sur (Chey H. 2008). Dentro de los mayores productores se destacan en orden decreciente: Nigeria, China, Guinea, Siria, Japón, Arabia Saudita, Kenia, India, Sierra Leona, Angola, Túnez, Irán, México, Cuba, Perú y Tanzania (FAO 2005). En la actualidad México se encuentra catalogado como el mayor productor a nivel mundial de el limón persa (Citrus latifolia Tanaka) debido a que en nuestro país abundan regiones cálidas y húmedas a lo largo y ancho del territorio nacional. Los beneficios de esta variedad de limón son un gran aporte económico a nivel mundial, además de ser considerado como uno de los alimentos con mayor aportación de vitamina C entre otros nutrientes esenciales para el consumo humano, esto aunado a que gracias a los beneficios del territorio nacional que permite se produzca casi todo el año. Existe una gran variedad de enfermedades que aquejan al limón Persa, como el virus de la tristeza de los cítricos (VTC), gomosis, piojo harinoso, melanosis entre otras; el VTC había sido considerado el más importante hasta ahora, sin embargo, con la aparición de la Diaphorina citri existe un nuevo problema ya que este psílido no permite el sano desarrollo del árbol, en consecuencia no alcanza su madurez para ser cosechado y por lo que al ser el vector transmisor del Huanglongbing (HLB) al infectar un árbol este ya no tiene cura, se convierte en un foco de infección para los demás árboles, por lo que hay que incinerarlo como medida de protección. Una elección sustentable para contrarrestar el tipo de plagas que aquejan a los cítricos es buscar una alternativa como lo son los biopesticidas, los cuales al provenir de la naturaleza garantizan que los frutos no vayan a ser contaminados con agentes químicos nocivos para la salud. Uno de los principales problemas que representa la Diaphorina citri es debido a su dinámica de población, ya que puede llegar a haber hasta 120 individuos en un retoño. El presente trabajo tiene como objetivo determinar la actividad biocida de diferentes especies botánicas sobre el ciclo vital de la Diaphorina citri Kuwayama, se estructura de la siguiente manera: En el Capítulo I se presenta el origen de la Diaphorina Citri Kuwayama y la enfermedad de la que es vector el HLB (Hung–long Bing), cuando llega a México, y como se ha esparcido desde su llegada hasta la actualidad, además de las características biológicas, morfológicas del mismo. Sin embargo, se muestra a nivel mundial y nacional la producción de cítricos y lo mucho que afectaría esta plaga a este rubro. En el Capítulo II se hablará a detalle acerca de la metodología que se utilizó para la realización de este proyecto de investigación, además de la ubicación del área que se muestreó, los periodos de aplicación, preparación de las soluciones y la obtención de los extractos. En el Capítulo III se representarán gráficamente los resultados de esta investigación y conclusión donde se determinará si la hipótesis se cumplió o no y recomendaciones para futuras investigaciones relacionadas con el tema. Justificación En la actualidad existe una gran cantidad de plagas que se presentan en los huertos donde son cultivados la mayoría de los vegetales y frutos para consumo humano, el problema se presenta debido a la toxicidad de los compuestos que conforman los pesticidas o insecticidas que resultan nocivos no solo para el organismo plaga y sus depredadores sino también para la salud de los seres humanos además de causar un efecto bioacumulativo en cada uno de los eslabones de la cadena alimenticia. Es por esta razón que se buscan alternativas que no impacten la salud ni la producción de los alimentos. Este proyecto es una propuesta alternativa para combatir la Diaphorina citri kuwayama con un biocida a base de metabolitos secundarios de algunas plantas silvestres de la región, los principales beneficios de este trabajo será el control del vector, la probable baja resistencia al producto, la reducción del costo de producción y como beneficio adicional la sustentabilidad del mismo. Objetivos General Determinar la actividad biocida de diferentes especies botánicas sobre el ciclo vital de la Diaphorina citri Kuwayama. Específicos Analizar la información bibliográfica referente Seleccionar las plantas a utilizar Preparar los extractos Localizar un sembradío de cítricos que presente Diaphorina citri kuwayama en diferentes etapas ninfales y solicitarle un permiso al dueño Realizar el tratamiento con los diferentes extractos: Piocha (Melia azedarach cv) Hojas, Higuerilla (ricinus communis), Guayaba (quassia amaral), higuerilla (Ricinus communis). Hipótesis Existe actividad biocida de los extractos foliares de piocha (Melia azedarach cv.), higuerilla (Ricinus communis) y guayaba (Psidium guajava), sobre la Diaphorina citri Kuwayama y sus estados ninfales CAPÍTULO I MARCO TERICO 1.1 Producción mundial de cítricos México se encuentra entre los principales países productores de naranja en el mundo de acuerdo con estadísticas de la FAO (2007), como se observa en la en la tabla 1.1. NARANJA Tabla 1.1 Producción Mundial de la Naranja País Brasil Estados Unidos India México China España Indonesia Irán Italia Egipto Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 Producción (Toneladas métricas MT x 1000) 18685 7357 4266.9 4548.7 3172.9 2740.3 2625.8 2300 2197.3 2054.6 Valor ($ Int. 1000) 328302 1292919 685386 746669 557607 456818 461472 404202 403053 316332 Los países productores se muestran en la figura 1.1 siendo el principal productor Brasil, se observa cuales son las regiones donde existe producción y en cuales no se cultiva dicho cítrico. Figura 1.1 Producción mundial de naranja Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 1 LIMON En la tabla 1.2 se muestra la producción Mundial de limón y los países con mayor producción. Tabla 1.2 Producción mundial de Limón País India México Argentina Brasil China Estados Unidos Turquía Irán Italia España Producción (Toneladas MT x 1000) 2298.3 1936.9 1260.0 1018.7 842.2 722.0 651.7 620.0 556.4 498.8 Valor ($ Int. 1000) métricas 538257 505833 329225 266176 220049 188651 170300 160693 142816 130331 Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 En la figura1.2 se muestra la producción mundial del Limón en donde México ocupa el segundo lugar en la producción de limón. Figura 1.2 Producción mundial de limón Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 2 TORONJAS En la Tabla 1.3 se muestra la producción mundial del Toronjas o Pomelos. México ocupa el cuarto lugar en dicha producción. Tabla 1.3 Producción Mundial de Toronjas o Pomelos. País Estados Unidos China Sudáfrica México Siria Israel India Argentina Turquía Cuba Producción (TM x 1000) 1580.0 540.5 386.5 313.5 290.0 261 178 176 162.6 140 Valor ($ Int. 1000) 269437 92179 65908 53460 49453 44514 30354 30013 27731 23874 Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 En la figura1.3 se muestra la producción a nivel mundial de Toronjas o Pomelos México se encuentra en el cuarto lugar a nivel mundial. Figura 1.3 Producción mundial de toronjas o pomelos Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 3 1.1.1 Producción de cítricos en México La producción (superficie sembrada en 2009) de cítrico en México se muestra en la figura 1.4 donde el mayor productor de cítricos es el estado de Veracruz, con 226740 ha. Figura 1.4 Producción de cítricos en la República Mexicana. Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 1.2 Antecedentes Diaphorina citri En un mundo globalizado es difícil imaginar un rincón del planeta al que no haya llegado el hombre con su tecnología, como el transporte, la infraestructura entre otras cosas, sin embargo al visualizar como han sido los procesos para llegar a este cambio se puede identificar fácilmente la forma de modificar los ecosistemas, cambiando así el patrón reproductivo y la propagación de los insectos y plagas que aquejan el planeta actualmente. 4 Existen datos históricos como los relatos bíblicos en donde ya se manejaba el término de plagas a quienes devoraban el alimento de los seres humanos y los hicieron padecer distintos males. Cada plaga trae consigo una devastación de gran magnitud. Una de las que ha cobrado importancia en los últimos años es Huang-Long Bing (HLB) que es transmitida por la Diaphorina Citri Kuwayama. No se sabe con exactitud como surge ni cuales son los factores que influyen en el crecimiento exponencial de este organismo pero una vez que se conjuntan es difícil frenarlos. Esta enfermedad surge desde hace más de 100 años en China, Huang-Long Bing (HLB) significa amarillo-brotes-enfermedad, respectivamente, debido a la coloración de las ninfas de los Psílios de la Diaphorina Citri Kuwayama. Llega a México el 6 de Julio de 2006 en Tizimín, Yucatán, y después se esparció hacia Campeche, Colima, Jalisco, Nayarit, Quintana Roo, Sinaloa y Veracruz. (CONACYT-SAGARPA, 2007) 1.2.1 Ficha técnica : Diaphorina Citri Kuwayama (Hemípera: Psyllidae), Vector de la bacteria que causa el Huanglongbing (HLB – Greening) Tabla 1.4 Clasificación y Taxonomía de la Diaphorina citri Kuwayama. Nombre científico preferido Kuwayama Nombres comunes Psílido asiático, Psílido asiático de los cítricos, chicharritas Euphalerus citri Sinónimo Clasificación Taxonómica Clase Insecta Suborden Hemiptera Superfamilia Psylloidea Familia Psylliadae Fuente: Heyker Baños - Jennifer Ravelo, at. 2007. 5 1.2.2 Biología y características morfológicas Biología La duración del período embrionario varía de 3 a 9 días en un rango de 15 °C a 28 °C. Los huevos son colocados en el extremo de los brotes tiernos, sobre y entre las hojas tiernas desplegadas, apareciendo con frecuencia un gran número en una misma ramita. La ovoposición está condicionada a la presencia de brotes tiernos. La hembra alcanza a poner 800 huevos en toda su vida. Posteriormente nacen las ninfas, que son sedentarias. Estas se establecen sobre las ramitas tiernas y sobre los pecíolos, formando colonias con un número variable de individuos. Las ninfas excretan una sustancia blanca cerosa a manera de hilos que se depositan sobre las hojas. Los adultos tienen poca capacidad para sostener vuelos largos, pero pueden ser transportados a grandes distancias por las corrientes de aire. El psílido no se desarrolla a temperaturas de 10 °C. Presenta un pico poblacional al final de la primavera e inicios del verano (coincidente con el periodo de brotación de los retoños). Características generales Duración total del ciclo (de huevo a adulto): 20 a 40 días, con una longevidad de 3 a 4 meses, dependiendo de las condiciones climáticas. Fases en que adquiere la bacteria: 4° y 5° estado ninfal y adulto. No transmite la enfermedad a la descendencia (adultos la transmiten ya para los últimos días de su vida). Características morfológicas. Los huevos son de forma ovoide, alargados, con prolongación en una de las puntas. Son de color amarillo claro (cuando son recién depositados) y se tornan a brillante anaranjado. Miden aproximadamente 0.30 mm de longitud y 0.14 mm de 6 ancho. Los huevos, son colocados generalmente en el extremo de los brotes tiernos, sobre y entre las hojas desplegadas, apareciendo con frecuencia un gran número en una misma ramita, (figura 1.5). Figura 1.5 Estado ninfal de Diaphorina citri kuwayama. FUENTE: Heyker Baños - Jennifer Ravelo, at. 2007. Las ninfas son aplanadas dorsoventralmente, de color anaranjado-amarillo, sin manchas abdominales, con esbozos alares (alas pequeñas en formación) abultados, un par de ojos rojos compuestos y dos antenas de color negro; presentan filamentos a lo largo del abdomen. Los primordios de las alas son conspicuos; hilos cerosos cortos, pueden estar presentes sólo en el apéndice del abdomen. Tienen 5 estados ninfales: en el primer estado miden 0.30 mm de longitud y 0.17 mm de ancho; en el segundo estado miden 0.45 mm de alto y 0.25 de ancho; en el tercer estado miden 0.74 mm de longitud y 0.43 de ancho; en el cuarto estado miden 1.01 mm de longitud y 0.70 mm de ancho; en el quinto estado miden 1.60 mm de longitud y 1.02 mm de ancho. Las ninfas del quinto estado dan lugar al nacimiento de los adultos (machos y hembras). Las hembras son sedentarias, se establecen sobre los tallitos tiernos y sobre los pecíolos, formando colonias con un número de individuos variable desde unos pocos hasta cientos. En la (figura 1.6) se muestran los estados ninfales y al adulto desarrollado de la Diaphorina citri. 7 Figura 1.6 Diaphorina Citri en sus 5 estados ninfales. FUENTE: Heyker Baños - Jennifer Ravelo, at. 2007. El adulto presenta un cuerpo de color marrón moteado (pardo amarillento), recubierto de polvo ceroso (figura 1.7); ojos rojos; cabeza marrón claro; primer par de las alas más ancho en el extremo, con áreas color obscuro (principalmente en los bordes). Las antenas presentan el ápice negro con dos manchas marrón claro en la parte media. Los machos son levemente más pequeños que las hembras y con la punta del abdomen roma, mientras que el abdomen de la hembra termina en una punta bien marcada. El tamaño promedio de las hembras es 3.3 mm de largo y 1 mm de ancho, en tanto que el de los machos es 2.7 mm de largo y 0.8 mm de ancho. Generalmente, se encuentran en posición inclinada con la parte posterior del cuerpo hacia arriba. Los adultos tienen poca capacidad para mantener vuelos muy largos y al ser molestados saltan rápidamente. Adulto ooo Huevo Ninfal Figura 1.7 Etapas de desarrollo de la Diaphorina citri kuwayama FUENTE: Heyker Baños - Jennifer Ravelo, at. 2007. 8 1.3 Distribución mundial Diaphorina citri Se encuentra distribuido en muchos países del mundo (figura 1.8): E.U, México, Cuba, Puerto Rico, región del Caribe, Guatemala, Honduras, Belice, El Salvador, Costa Rica, Venezuela, Colombia, Brasil, Paraguay, Uruguay, Bolivia, Argentina, Asia: Arabia Saudita, Yemen, Pakistán, India, Nepal, Bhutan, Bangladesh, Myanmar, Cambodia, Laos, Tailandia, Vietnam, Filipinas, Indonesia, Malasia, Papua Nueva Guinea, China y Japón. Figura 1.8 Distribución mundial de Diaphorina citri. Fuentes: CONACYT-SAGARPA 2007 9 1.3.1 Distribución de Diaphorina citri en México La distribución de este insecto se presenta en la (figura 1.9). En general, se distribuye en los estados costeros de ambos litorales. Presentándose con mayor intensidad en Colima, Tamaulipas, Veracruz, Tabasco, Campeche, Yucatán y Quintana Roo. Figura 1.9 Distribución de la Diaphorina citri en la República Mexicana. Fuente: CONACYT-SAGARPA 2007 10 1.3.2 Daños e importancia económica El problema grave de la infestación por Diaphorina citri transmisión de una Liberibacter spp. bacteria Gram negativa, es causado por la denominada Candidatus (No cultivada en medios artificiales), produciendo así la enfermedad HUANGLONGBING (HLB-GREENIN). Esta enfermedad tiene alta incidencia en Asia y África y es considerada como un factor limitante para la producción de cítricos en esos continentes (Jagoueix et al. 1996). El daño directo es causado por ninfas y adultos debido a que extraen grandes cantidades de savia de las hojas y pecíolos e inyectan toxinas, lo cual induce al enrollamiento de las mismas, impidiendo así el crecimiento normal de la planta. Etapas afectadas de las plantas: Floración Fructificación Fase vegetativa Crecimiento Partes afectadas de las plantas: Frutas Hojas. 1.4 Interacción bacteria – vector En general la interacción entre el patógeno – vector está poco estudiada para la enfermedad conocida como HLB – Greening, habiendo inclusive datos contradictorios en relación a la eficiencia de transmisión y período de latencia. Probablemente esto se debe a las diferencias entre especies y razas de vectores 11 y bacterias envueltas en el patosistema HLB en distintas regiones de Asia y África. En México dada la magnitud del problema se emitió una Norma de Emergencia la NOM-EM-047-FITO-2009 (ANEXO A) el 8 de Julio de 2009 debido a la presencia de la Diaphorina citri como vector del HLB. Se ha observado que tanto ninfas (4° y 5° estado) como los adultos pueden adquirir el patógeno (bacteria) al succionar la savia de una planta enferma. El tiempo mínimo requerido para la adquisición es de 15-30 min (Capoor et al. 1974), mientras que el umbral de la inoculación es inferior a 1 h (van Vuuren & da Graca, 1977). Existe una considerable diferencia en los informes de períodos de latencia, que varía desde 24 h (Buitendag & von Broembsen, 1993), 8-12 días (da Graca, 1991), y hasta 21 días (Capoor et al.; 1974). 1.5 Plaguicidas Además de los tratamientos biológicos (depredadores naturales) existentes se cuenta actualmente con métodos químicos como medios de control. Un plaguicida es cualquier sustancia o mezcla de sustancias destinadas a prevenir, destruir o controlar cualquier plaga, incluyendo los vectores de enfermedades humanas o de los animales, las especies de plantas o animales indeseables que causan perjuicio o que interfieren de cualquier otra forma en la producción, elaboración, almacenamiento, transporte o comercialización de alimentos, productos agrícolas, madera y productos de madera o alimentos para animales, o que pueden administrarse a los animales para combatir insectos, arácnidos u otras plagas en o sobre sus cuerpos. El término incluye las sustancias destinadas a utilizarse como reguladoras del crecimiento de las plantas, defoliantes, desecantes, agentes para reducir la densidad de fruta o agentes para evitar la caída prematura de la fruta, y las sustancias aplicadas a los cultivos antes o después de la cosecha para proteger el producto contra la deterioración durante el almacenamiento y transporte. (ANEXO B). 12 De acuerdo con la Agencia de Protección Ambiental (Environmental Protection Agency), actualmente existen más de 865 plaguicidas registrados. Sin embargo se está pagando un costo ambiental muy alto por su uso (Karr CJ, Solomon GM and Brock-Utne, 2007). 1.5.1 Bioplaguicida o biocida Un bioplaguicida es un insecticida que proviene de origen natural y que su uso no impacta en la salud de los seres vivos ya que es completamente degradable. Los biocidas pueden ser sustancias químicas sintéticas o de origen natural o microrganismos que están destinados a destruir, contrarrestar, neutralizar, impedir la acción o ejercer un control de otro tipo sobre cualquier organismo considerado nocivo para el hombre. Las plantas a utilizar en función de su actividad biosida o insecticida son: la Guayaba (Psidium guajava), Piocha (Melia azedarach cv), Higuerilla (ricinus communis). 1.6 Características taxonómicas de las plantas utilizadas 1.6.1 Guayaba (Psidium guajava) Es una fruta tropical que pertenece a la familia de las Mirtáceas la cual incluye a más de 3.000 especies de árboles y arbustos de los cinco continentes. Las guayabas (figura 1.10) son producidas por árboles del género Psidium que crecen en regiones tropicales de América, Asia y Oceanía. En otros países también se la conoce como guayabo, guara, arrayana y luma. Los componentes del fruto es el agua (78%), contiene calorías, proteínas, calcio, fósforo, hierro, grasa, azúcares, vitaminas A y C, tiamina, riboflavina, niacina y otros nutrimentos más. 13 Figura 1.10 Árbol de Guayabo con frutos. 1.6.2 Origen y características botánicas Etimología:Deriva del griego «psidion», granada, por la aparente semejaza entre los frutos. Árbol pequeño o arbusto No suele superar los 5 m de altura. Tronco con corteza escamosa de color marrón grisáceo. Tiene ramillas cuadrangulares. Hojas coriáceas, opuestas, de oblongoelípticas a ovadas-enteras, de 7-15 cm de longitud. Flores blancas, axilares, solitarias o en pequeños grupos, de unos 2,5 cm de diámetro, sobre pedúnculos delgados. Fruto esférico, ovoide o piriforme de 3-10 cm de diámetro. Su cáscara es cerosa; en algunas variedades de piel lisa, otras rugosa y de un color, de verde a amarillento según la especie y su grado de maduración, bajo la cáscara se encuentra una primera capa de pulpa, consistente y firme, la capa interior es más blanda, jugosa y cremosa albergando un gran número de semillas de constitución leñosa y dura. 1.6.3 Composición química Toda la planta es rica en taninos elágicos. La hoja contiene, además, un aceite esencial rico en cariofileno, nerolidiol, b-bisaboleno, aromadendreno, p-selineno, 1,8-cineol y a-pineno y flavonoides derivados de quercetina como guayaverina y avicularina (Cáceres, 1996). Otros compuestos 14 tales como b-sitosterol, triterpenoides: ácido oleánico, ursólico, catecólico y guayavólico, ácido maslínico y elágico están presentes en esta parte de la planta. El fruto es rico en vitamina C (Tramil, 1998), B1 y B2 (Gupta, 1995). 1.6.4 Higuerilla (Ricinus communis L.) La higuerilla o ricino (figura 1.11), corresponde a Ricinus communis L., familia de las Euphorbiaceae. Planta originaria de África tropical (Abisinia) y posiblemente de la india; y se ha extendido en los climas cálidos de todo el mundo, es de la familia Euforbiaceae, que según sus variedades se presenta como árbol, arbusto o hierba. La planta procede de África pero se ha hecho silvestre en muchas regiones cálidas de nuestro país, incluido el estado de Morelos. Figura 1.11 Planta de higuerilla Figura 1.12 Frutos de higuerilla. 1.6.5 Características Planta herbáceo alta a veces algo arbustivo. De color verde claro a azul grisáceo, en ocasiones rojiza. Mide hasta 6 metros de alto. Su tallo es engrosado y ramificado. 15 Glándulas entre la lámina y el pecíolo y sus flores rojas son masculinas con un perianto de 6 a 12 mm de largo, el de las flores femeninas de 4 a 8 milímetros de largo. Ovario densamente cubierto por largos tubérculos blandos, que parecen pelos gruesos, frutos y semillas en una cápsula subglobosa (figura 1.12), de 1.5 a 2.5 cm de largo, con espinas cortas y gruesas; semillas elipsoides, algo aplanadas, de 10 a 17 mm de largo, lisas brillantes, frecuentemente jaspeadas de café y gris carunculadas. 1.6.6 Fitoquímica Sus semillas contienen aceite fijo (oleum ricini) en porcentajes del 35 al 55 % principalmente constituido por los glicéridos de los ácidos ricinoleico, isorecinoleico también ricina y ricinina, la primera es una fitotoxina sumamente venenosa, por vía endovenosa y menor por vía oral, aunque esta última vía puede ocasionar la muerte; su actividad desaparece por acción del calor moderado; el segundo es un alcaloide de fórmula C8H8N2O2. En las semillas contiene grasas hasta un 70%, de los cuales el 68% es tricinoleína, un glicérido del ácido ricinoleico; proteínas hasta un 20%, ricina, se trata de una albúmina muy tóxica que tan solo a dosis de 0,03 gr es letal (unos 25 gr de semillas); enzimas, con presencia de lipasa; vitaminas, alfa-tocoferol (vitamina E). 1.6.7 Piocha Melia azedarach cv Es un árbol mediano (figura 1.13), de hoja caduca, de la familia de las meliáceas. Nativo del sudeste asiático, se difundió a mediados del siglo XIX como ornamental en Sudáfrica y América, donde se naturalizó con rapidez, convirtiéndose en una especie invasora que desplazó otras autóctonas. 16 Se cultiva aún para decoración y sombra, sobre todo por su ancha y frondosa copa, a la que debe su nombre común. Figura 1.13 Árbol de piocha, hojas flores y semillas. 1.6.8 Características M. azedarach es un árbol mediano, de 8 a 15 m de altura, con el fuste recto; la copa alcanza los 4 a 8 m de diámetro, de forma globosa. Las hojas son caducas, alternas, compuestas, con pecíolos largos de 25 a 80 cm de longitud. Los folíolos son ovales, acuminados, de 2 a 5 cm de largo, de color verde oscuro por el haz y más claro en el envés, con el margen aserrado; amarillean y caen a comienzos del otoño. Hacia fines de primavera florece, dando flores pentámeras de color púrpura o lila en panículas terminales de hasta 20 cm de largo, muy fragantes. El fruto es una drupa de 1 cm de diámetro y forma globosa, de color amarillo pálido, que se aclara aún más con el paso del tiempo. Contienen muchas semillas en su interior con forma de gota de 1mm de largo x 0,3mm de ancho. 1.6.9 Fitoquímica En su corteza existen los alcaloides azaradina y margosina. Los frutos poseen triterpenos como melianona, melianol y melantriol; contienen además compuestos amargos tales como bakayanina. Están presentes también algunas saponinas. 17 CAPITULO II METODOLOGÍA 2.1 Ubicación del predio En la figura II.1 se muestra la ubicación en el que se llevó a cabo parte del estudio. Figura 2.1 Ubicación del predio muestreado. La parcela seleccionada para esta investigación se encuentra ubicada en la comunidad La Colmena, municipio de Papantla. Coordenadas: 20°19’50.37’’ N 97°17’39.11’’ O Altitud: 29 m El uso del suelo en esta región es para el cultivo de distintos frutos o vegetales, principalmente limón, naranja, plátano, jícamas, melón, etcétera. EL clima que predomina en esta región principalmente es el cálido húmedo, existe mucha vegetación en la zona donde se llevó a cabo el estudio pero principalmente actividades agrícolas. Las temperaturas que en esta región predominan va de los 30 °C hasta 45 °C éste es un factor a favor de la reproducción de dicha especie de psílido. La herramienta utilizada para el aspergeo fue un atomizador de 200 mL para la realización de tratamiento. 18 2.2 Diagrama de operación del proyecto INICIO LOCALIZACIÓN DEL PREDIO AUTORIZACIÓN PARA USAR EL PREDIO OBSERVACIÓN ASPERCIÓN EN CADA SURCO CON UNA ESPECIE DIFERENTE OBTENCIÓN DE LOS EXTRACTOS PREPARACIÓN DE LAS DILUCIONES REGISTRO DE DATOS ESTADÍSTICA NO DISMINUYE S I % DE DIISMINUCIÓN FIN DE PROYECTO Figura 2.2 Diagrama de flujo. 2.3 Procedimiento de obtención de los extractos La obtención de los extractos se realizó a partir de las hojas previamente deshidratadas y trituradas, aproximadamente 1 kg. Este material se colocó en un 19 reactor con alcohol con agitación constante durante 15 a 20 días, después se filtró y se eliminó el alcohol. Concentración de los extractos utilizados de manera individual y si se realizaron mezclas 2.5 Periodos de aspersión y revisión de resultados El periodo de aplicación de los extractos concentrados de las diferentes especies (Guayaba, Piocha, Higuerilla) y detergente se dividió en 2 etapas principales las cuales comprendieron en un periodo de 3 semanas, obteniéndose los siguientes resultados: 2.5.1 Primera etapa en el Predio. Semana 0 (12 de Abril de 2011) En compañía del Comité Estatal de Sanidad Vegetal de Veracruz se presentó en el predio del señor Zósimo Hidalgo Muñoz para observar el terreno de 1 hectárea en donde se trabajaría, y donde después de una ardua inspección se notó el grado de infestación que presentaban los surcos de Limón Persa y que mostraba un 90% de infestación en todo el terreno, fue así como se observó a la Diaphorina Citri de cerca y sus estados ninfales por primera vez. Con lo anterior mencionado se recabó la información necesaria de cuantos litros de solución se ocuparía en la siguiente visita, así como el número de personas necesarias para realizar el aspergeo en los arboles señalados, el numero de surcos a tratar y el marcaje de los arboles. Semana 1 (16 de Abril de 2011) En la segunda visita al predio contando ya con el material necesario para iniciar el tratamiento con detergente (Blanco) a 0.6% y los concentrados de guayaba (Psidium guajava), piocha (Melia azedarach cv) e higuerilla (ricinus 20 communis), dando inicio al riego alrededor de las 9 de la mañana en los surcos marcados previamente. Se contabilizaron 17 surcos de 66 arboles cada uno, separados con una distancia de 2 metros entre si, ocupándose una muestra de 10 arboles por surco para llevar el registro y regando la totalidad de los mismos. Semana 2 (23 de Abril de 2011) Se observó y comparó la diferencia entre la semana 0 y la actual, notándose una disminución de los estados ninfales de las Diaphorina Citri en los arboles marcados y se registró en bitácora. Realizando la cuantificación de los retoños que estaban sanos en un mismo árbol así como el de los retoños infestados y sus cambios como disminución o crecimiento y la pérdida de algunos retoños a causa del tratamiento. Una característica importante fue el notar la cristalización de las heces de la Diaphorina tras el tratamiento y el daño ocasionado en algunas hojas causando su deterioro. Debido a la distancia y los recursos necesarios para continuar con la investigación en el predio se modificó la investigación reduciendo el número de individuos a tratar a solo uno en un lugar más cercano con equipo a menor escala. Fue así como comenzó el estudio a un solo árbol en la propiedad de Sra. Patricia Cobos Cruz en el domicilio de Canarios 29 A Inf. Gaviotas, en el Municipio de Poza Rica, Veracruz. 2.5.2 Segunda etapa en la propiedad Día 0 (25 de Mayo de 2011) Antes de iniciar los tratamiento de guayaba (Psidium guajava) y de higuerilla (ricinus communis) se revisó el árbol minuciosamente, este presentaba un nivel de infestación de casi el 100% de su totalidad el cual no le permitía florecer ni la generación de nuevos retoños. Cabe señalar que las hojas presentaban rastros 21 de heces ninfales y enroscamiento de las mismas, así como deformaciones en las hojas en forma de oreja de conejo presente en casos de árboles con esta plaga. Para comenzar el tratamiento se dividió el árbol en dos zonas, la parte inferior en la cual solo hubo 5 retoños al inicio y en la parte superior (hasta la copa) 7 retoños en todo el árbol, tanto los de la parte inferior como los de la superior presentaban infestación, el aspergeo se realizó diariamente durante 12 días, la concentración utilizada de ambos extractos fue 1:100 y la herramienta a utilizar para el tratamiento fue un atomizador de 200 mL. Día 1 (26 de Mayo de 2011) Inicia la primera aplicación del tratamiento, en la parte superior con el extracto higuerilla (ricinus communis) directamente en los retoños infectados y en la parte inferior con el extracto de guayaba (Psidium guajava) alrededor de las 11:30 am. Día 2 (27 de Mayo de 2011) En este día se hizo la observación y se detectó que en los retoños rociados con higuerilla (ricinus communis) no murió la Diaphorina citri en sus estados ninfales, mientras que en la parte inferior donde se trató con guayaba se encontró un adulto poniendo más huevos. Día 3 (28 de Mayo de 2011) En este día se comenzó a la 9:56 am y se fumigó a ambos extremos del árbol, en donde se registró como fueron hallados los retoños que se rociaron, fue así como en dos retoños las ninfas se encontraron muertas. En la parte inferior se observó la cristalización de las heces y en dos retoños de 5 se encontraron con ninfas muertas. Día 4 (29 de Mayo de 2011) Lo primero que se notó a simple vista fue el incremento en el número de retoños, inicialmente en la parte superior había 5 retoños y en este día se encontraron 7 retoños entre los cuales en dos de los siete no se encontraron Diaphorinas. 22 En lo concerniente a la parte inferior hubo incremento de 7 a 9 el número de retoños, además en 4 retoños ya no se encontró Diaphorina. Día 5 (30 de Mayo de 2011) En este día se rocío a las 10:02 am con los distintos extractos en su respectiva zona (Higuerilla en el área superior y Guayaba en la inferior). De lo observado este día se encontraron en la parte alta tres retoños sin Diaphorina, y en la parte inferior se encontraron 4 de 9 retoños sin plaga. Día 6 (1 de Junio de 2011) Se observó la caída de un retoño debido al tratamiento de higuerilla () 3 retoños sin infestación, y en cuanto a la guayaba () se encontraron 5 retoños sanos de 9. Día 7 (2 de Junio de 2011) Pasando una semana del comienzo con el tratamiento de higuerilla se observó un incremento exponencial de la cantidad de retoños de 5 a 14 de los cuales hubo 5 sanos. En este día se aspergeó a las 5:20 pm. En cuanto a lo observado en la zona tratada con guayaba se limpió por completo. Día 8 (3 de Junio de 2011) En este día al hacer la revisión de rutina se observó un total de casi 7 retoños sin ninfas de Diaphorina pero en dos de ellos se encontraron adultos que estaban poniendo huevos. En cuanto a la guayaba se encontraron 2 adultos y huevecillos recién puestos en otro retoño. Día 9 (4 de Junio de 2011) Se continuó con los tratamientos de rigor con el comienzo del mismo alrededor de las 9:55 am otra vez hubo un incremento de 3 retoños más elevando el número a 17 retoños de los cuales solo 5 aproximadamente se encontraron sanos, esto en la parte superior. En la inferior se eliminó la plaga por completo en los retoños. Día 10 (6 de Junio de 2011) 23 En la observación realizada durante el día se incrementaron nuevamente el número de retoños, en la zona tratada con higuerilla de 17 a 21 respectivamente de este número final 11 estaban sanos. En cuanto al extracto de guayaba se encontró limpios 8 de 9, un retoño se encontró con huevecillos. Día 11 (7 de Junio de 2011) Se inicio el tratamiento a las 11:00 am y de los observado en la parte superior siguió con 11 retoños sanos y el resto con Diaphorina en diferentes estados ninfales. En cuanto a lo observado en la parte inferior solo dos retoños presentaron huevos de Diaphorina citri. Día 12 (9 de Junio de 2011) De la observación realizada durante la mañana solo 8 de 21 retoños estuvieron sin Diaphorina con la higuerilla, y con la guayaba 7 retoños se encontraron sanos y 2 con huevecillos. Día 13 (11 de Junio de 2011) En la parte superior se rocío con higuerilla y la inferior con guayaba. De lo observado en el extremo superior 8 de 22 retoños se encontraron sanos y los retoños de la parte inferior 7 de 9 se encontraron sin presencia de Diaphorina citri. Todos los días estuvieron soleados a un temperatura de entre 36 °C–38 °C y el aspergeo se realizó cada tercer día. 24 CAPITULO III RESULTADOS 3.1 Periodos de aplicación En cuanto a los periodos de aplicación se realizaron mostrando evidencias fotográficas que se tomaron en cada una de las aplicaciones hechas. El predio infestado y a tratar estaba estructurado por 17 surcos con 66 árboles de limón persa (Citrus latifolia Tanaka) de 2.5 años de edad, por lo que la muestra escogida fue de 10 árboles por surco escogidos al azar, debido a esto el equipo de trabajo fue de entre 4 y 5 personas para cada aspergeo del extracto en campo. Para determinar el grado de infestación se contaron los retoños de cada árbol seleccionado revisando los retoños infestados, tomándose como referencia el número de retoños infestados de cada árbol antes del tratamiento, como se observa en la tabla 3.1 Tabla 3.1 Recuento de retoños infestados sin tratar. Número de Retoños N° Árbol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Promedio Sanos 2 3 4 1 2 2 3 4 0 0 21 2.1 Infestados Totales 10 17 12 4 7 6 2 1 4 4 67 6.7 12 20 16 5 9 8 5 5 4 4 88 8.8 25 % de % de Sanos Infestación 16.67 83.33 15.00 85.00 25.00 75.00 20.00 80.00 22.22 77.78 25.00 75.00 60.00 40.00 80.00 20.00 0 100 0 100 23.86 76.14 En la (fig. 3.1) se presenta el blanco, en el que se puede apreciar el grado de infestación. Figura 3.1 Retoños de árbol sin tratar. Como se muestra en la tabla 3.1 la infestación en la muestra es en promedio del 76.14% lo que significa una altísima cantidad de huevecillos en estado larvario variado y en virtud de la temperatura ambiental (aproximadamente 37 y 38 °C), el desarrollo de estos está entre 4 o 5 días, lo que implica una mayor infestación. Los periodos de aplicación se realizaron durante 2 semanas de Abril de 2011, efectuando la observación directa a la par, el objetivo era determinar la acción inmediata de los extractos concentrados y la eficiencia de estos sobre los huevecillos y el adulto en el lapso de la semana. Se tomó como blanco el primer surco por lo que no se le adicionó nada, al surco número 2 se le asperjó con extracto de hojas de guayaba (Psidium guajava), al 3 con Piocha (Melia azedarach cv), al 4° con Higuerilla (ricinus communis) y al 5 con una solución de detergente al 0.6%. En la (figura 3.2) se muestra observación de los resultados. . 26 Figura 3.2 Observación de los resultados después de aplicado el tratamiento. En la (figura 3.2) se presenta uno de los retoños infestados con huevecillos de Diaphorina citri y sus excretas cerosas. Figura 3.3 Retoño infectado y rociado con Piocha Después de realizado el aspergeo de los extractos se revisaron nuevamente los retoños en los árboles previamente marcados. 27 Como resultado de esta aplicación se observó que los huevecillos de Diaphorina citri con el extracto de guayaba quedaban sin movimiento pero las hojas del retoño también se vieron afectadas por el extracto, por lo que se decidió hacer diluciones ya que además resulta muy costoso utilizarlo concentrado. Tanto el extracto de higuerilla como el detergente presentaron cierta acción sobre los huevecillos y no atacaron las hojas del limón, mientras que con el extracto de hojas de piocha no se observó ningún cambio. En la Tabla 3.2 se muestra la reducción en el número de retoños infestados con el extracto de guayaba (Psidium guajava) a la semana de rociado, pero las hojas atacadas estaban casi a punto de secarse. Tabla 3.2 Número de retoños sanos después de la aplicación del extracto concentrado de guayaba (Psidium guajava). Número de Retoños N° Árbol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Promedio Sanos 8 17 14 3 5 5 4 5 3 4 68 6.8 Infestados Totales 4 3 2 2 2 1 1 0 1 0 16 1.6 12 20 16 5 9 8 5 5 4 4 88 8.8 % de % de Sanos Infestación 66.67 33.33 85.00 15.00 87.50 12.50 60.00 40.00 55.56 22.22 62.50 12.50 80.00 20.00 100.00 0.00 75.00 25.00 100.00 0.00 77.27 22.73 Como se puede ver en la tabla 3.2 el extracto de guayaba es eficiente para matar los huevecillos de la Diaphorina citri, ya que el porcentaje de retoños sanos se incrementa casi al 300%, pero se debe buscar la dilución idónea para que no ataque las hojas de la planta de limón y que además sea rentable su uso. 28 En la (figura 3.4) se aprecia el incremento en retoños sanos después del aspergeo del extracto concentrado de guayaba (Psidium guajava) Figura 3.4 Retoños sanos después del tratamiento con guayaba. En la tabla 3.3 se presentan los resultados de la acción del extracto de higuerilla (ricinus communis) sobre los retoños infestados. Tabla 3.3 Número de retoños sanos después de la aplicación del extracto concentrado de higuerilla (ricinus communis) Número de Retoños N° Árbol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Promedio Sanos 6 11 7 3 5 5 4 5 2 3 51 5.1 Infestados Totales 6 9 9 2 4 3 1 0 2 1 37 3.7 12 20 16 5 9 8 5 5 4 4 88 8.8 29 % de Sanos 50.00 55.00 43.75 60.00 55.56 62.50 80.00 100.00 50.00 75.00 57.95 % de Infestación 50.00 45.00 56.25 40.00 44.44 37.50 20.00 0.00 50.00 25.00 42.05 Como se puede observar en la tabla 3.3 a la semana el número de retoños infestados disminuyó más de 50% por lo que se decidirá si se sigue utilizando. Después de tratados los árboles con higuerilla (ricinus communis) se obtuvo esta representación en la (figura 3.5). Donde se observa que el número de retoños sanos fue 50%. Figura 3.5 Retoños de sanos después del tratamiento con higuerilla. Tabla 3.4 Número de retoños con extracto concentrado de hojas de piocha (Melia azedaracha cv) N° Árbol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Promedio Sanos 2 1 1 0 1 0 0 1 0 1 7 0.7 Infestados Totales Número de Retoños 10 12 19 20 15 16 5 5 8 9 8 8 5 5 4 5 4 4 3 4 81 88 8.1 8.8 30 % de Sanos 16.67 5.00 6.24 0.00 11.11 0.00 0.00 20.00 0.00 25.00 7.95 % de Infestación 83.33 95.00 93.75 100.00 88.89 100.00 100.00 80.00 100.00 75.00 92.05 Como se puede observar más del 90% de los retoños permanecieron con un alto grado de infestación, pese a la aplicación del extracto concentrado de piocha (Melia azedarach cv) aunque también a causa del aspergeo se produjo un enroscamiento de las hojas sanas y algunos de los retoños se secaron. Por esta razón se decidió utilizar solamente la guayaba (Psidium guajava) y la higuerilla (ricinus communis) para probar si se podía tener una mejor eficiencia de estos. En esta (figura 3.6) se pueden observar de forma gráfica el comportamiento en el número de retoños sanos después del tratamiento con hojas de piocha. Figura 3.6 Retoños sanos después del tratamiento con hojas de piocha. Debido a la distancia en que se encontraba el predio y lo que implicaba llegar ahí con un equipo de trabajo, y la preparación de los extracto a escalas mayores para tratar todo el predio, se evalúo la situación y se tomó la decisión de continuar con la investigación en el domicilio particular en donde se detectó otro árbol de limón persa (Citrus latifolia Tanaka) con la plaga en sus retoños al que se le dio el tratamiento en diferentes concentraciones. Antes de iniciar los tratamiento de guayaba (Psidium guajava) y de higuerilla (ricinus communis) se revisó el árbol minuciosamente, este presentaba un nivel de infestación de casi el 100% de sus retoños el cual no le permitía florecer ni la generación de nuevos retoños. Además de que las hojas presentaban rastros de 31 heces ninfales y enroscamiento de las mismas, también presentaba deformaciones en las hojas en forma de oreja de conejo presente en casos de árboles con esta plaga. Para iniciar el tratamiento se dividió el árbol en dos zonas, la parte inferior en la cual solo hubo 5 retoños al inicio y en la parte superior (hasta la copa) 7 retoños en todo el árbol, tanto los de la parte inferior como los de la superior presentaban algún grado de infestación, el aspergeo se realizó diariamente durante 12 días, la concentración utilizada de ambos extractos fue 1:100. (Tabla 3.5) Tabla 3.5 Primera semana de fumigación con los extractos HIGUERILLA GUAYABA RETOÑOS RATOÑOS DIAS Sanos Infest. Tota % sanos % les Sanos Infest. Total Infest. % sanos es % Infest. 0 0 7 7 0.00 100.00 0 5 5 0.00 100.00 1 0 7 7 0.00 100.00 0 5 5 0.00 100.00 2 0 7 7 0.00 100.00 5 0 5 100.00 0.00 3 0 7 7 0.00 100.00 7 2 9 77.78 22.22 4 3 4 7 42.86 57.14 7 2 9 77.78 22.22 5 3 4 7 42.86 57.14 9 0 9 100.00 0.00 6 2 12 14 14.29 85.71 8 1 9 88.89 11.11 1 7 8 14.29 85.71 5 2 7 70.59 29.41 Como se puede observar en la tabla 3.5 la respuesta al extracto de Guayaba (Psidium guajava) fue muy significativa a esta concentración, cediendo la infestación e incrementándose el número de retoños, en tanto que para la higuerilla la respuesta fue mucho menor aunque se incrementó el número de retoños nuevos. 32 Para la segunda semana el aspergeo fue similar, notándose que el número de retoños de la parte superior del árbol se incrementó con mayor rapidez, como se observa en la tabla 3.6. Tabla 3.6 Segunda semana de fumigación con los extractos. HIGUERILLA GUAYABA RETOÑOS DIAS RATOÑOS Sanos Infest. Totales % % Sanos Infest. Totales % sanos Infest. % sanos Infest. 22.22 0 4 10 14 28.57 71.43 7 2 9 77.78 1 2 15 17 11.76 88.24 9 0 9 100.00 0.00 2 11 12 23 47.83 52.17 8 1 9 88.89 11.11 3 11 12 23 47.83 52.17 7 2 9 77.78 22.22 4 4 18 22 18.18 81.82 7 2 9 77.78 22.22 5 6 16 22 27.27 72.73 8 1 9 88.89 11.11 6 6 16 22 27.27 72.73 9 0 9 100.00 0.00 6 14 20 30.77 69.23 8 1 9 87.30 Se observa claramente las diferencias entre la primera semana y la segunda semana nótese que se mantuvo por encima del 80% el número de retoños sanos con el extracto de guayaba (Psidium guajava), mientras que con extracto de higuerilla (ricinus communis) se obtuvo un 30.77%, lográndose una mejor respuesta con la guayaba (Psidium guajava). Sin embargo con la higuerilla (ricinus communis) siguió incrementándose el número de retoños con el paso de los días lo que permitió que el árbol creciera y se desarrollara, ya que esto no ocurría debido a la plaga. En las siguientes gráficas se puede observar y comparar en cual se obtuvo un mejor resultado en el estudio realizado con ambas especies botánicas. 33 12.70 En (figura 3.7) se observa un gráfico comparativo de bloques en cuanto a la eficiencia de los diferentes tratamientos. 14 12 RESULTADOS 10 8 6 4 2 0 Mean Mean±SE Mean±SD Outliers Extremes -2 Blanco Guayaba Higuerilla TRATAMIENTOS Figura 3.7 Gráfico comparativo efectividad guayaba contra higuerilla. A partir del gráfico se observa que el promedio de retoños infestados de Diaphorina citri Kuwayama es diferente para los 2 tratamientos que se realizaron en un solo árbol se observó que el tratamiento que proporciona mayor numero de retoños sanos es la esencia de Guayaba (Psidium guajava), además este mismo tratamiento es el más homogéneo y simétrico como se aprecia en el grafico comparativo entre ambos extractos. Además al asperjar diariamente los retoños infestados se logro eliminar las ninfas con aunque no se eliminaron los adultos. 34 una efectividad del 100% 3.2 Conclusiones Dado que la Diaphorina citri es una de las plagas más complejas debido a su rápida explosión demográfica y su calidad de vector, además de la amplia tolerancia a climas tan calientes como los que predominan en estas regiones. Los resultados obtenidos son muy alentadores, aunque es difícil en un periodo tan corto encontrar la combinación correcta para obtener un porcentaje de cero infestación, pero se puede seguir realizando ensayos para descubrir las dosificaciones adecuadas para obtener el 100% o al menos el control del vector. Tanto el objetivo como la hipótesis se cumplieron, ya que hubo una actividad preliminar obteniéndose un 77.27% de retoños sanos con el extracto concentrado y con la dilución 1.100 se obtuvo un porcentaje de 87.07% de actividad insecticida en el extracto de guayaba (Psidium guajava). Sin embargo la efectividad de estos extractos depende de cuan seguido se fumigue. En cuanto al extracto de higuerilla (ricinus communis) se observó un 34.79% actividad biocida pero no fue tan efectiva eliminando a la Diaphorina citri en sus diferentes estados ninfales. Como recomendación para futuras investigaciones en el tema de actividad biocida en extractos que combatan la Diaphorina citri se sugiere la realización de combinaciones con diferentes extractos para acentuar sus propiedades al combinarlas con otras plantas con características opuestas pero que les sirvan como complemento para eliminar al psílido en estado adulto.. 35 Bibliografía 1. Martínez, M. (1979) Catálogo de nombres vulgares y científicos de plantas mexicanas. Fondo de Cultura Económica, México. 2. Otero L.A. (2001), Plantas alucinógenas, ed. Paidotribo, pp. 217. 3. Regnault-Roger, Philogene, Vincente, (2003) Biopesticidas de Origen vegeta, Ed. Aedos, pp. 315. 4. Rzedowski, GC, Rzedowski J. y colaboradores. 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Biocida.- Los biocidas pueden ser sustancias químicas sintéticas o de origen natural o microrganismos que están destinados a destruir, contrarrestar, neutralizar, impedir la acción o ejercer un control de otro tipo sobre cualquier organismo considerado nocivo para el hombre. Bioacumulativo.- En toxicología, la bioconcentración o bioacumulación es el proceso de acumulación de sustancias químicas en organismos vivos de forma que estos alcanzan concentraciones más elevadas que las concentraciones en el medio ambiente o en los alimentos. Las sustancias propensas a la bioacumulación alcanzan concentraciones crecientes a medida que se avanza en el nivel trófico en la cadena alimenticia. En función de cada sustancia, esta acumulación puede producirse a partir de fuentes abióticas (suelo, aire, agua), o bióticas (otros organismos vivos). Las principales vías de introducción de una sustancia química en un organismo vivo son la respiratoria, la digestiva y la integumentaria FAO.- Organización para la Alimentación y la Agricultura. Fotoquímica.- Disciplina científica que tiene como objeto el aislamiento, análisis, purificación, elucidación de la estructura y caracterización de la actividad biológica de diversas sustancias producidas por los vegetales. Gamosépalo.- Se aplica a la flor que tiene los sépalos unidos lateralmente, en mayor o menor extensión, formando un cáliz de una sola pieza. Infestación.- Se denomina infestación a la invasión de un organismo vivo por agentes parásitos externos o internos. La diferencia fundamental con el término infección es que este último, se aplica exclusivamente a microorganismos que 38 tienen como objetivo su reproducción en el organismo infectado, causando en muchas ocasiones la muerte del mismo Macromoléculas.- Las macromoléculas son moléculas que tienen una masa molecular elevada, formadas por un gran número de átomos. Generalmente se pueden describir como la repetición de una o unas pocas unidades mínimas o monómeros, formando los polímeros. Mirtáceas.- Las mirtáceas son una familia de plantas dicotiledóneas del orden de las mirtales, leñosas, con hojas esparcidas u opuestas, sin estípulas, con bolsas secretoras de esencia, flores por lo común con muchos estambres y los carpelos encerrados en el receptáculo. Ovoposición.- Acto de poner o depositar huevos por el miembro femenino de los animales ovíparos Patógeno.- Que produce enfermedad En este sentido, la salud y la enfermedad tiene múltiples concepciones Patosistema.- Referente al sistema del organismo que infecta. Pedúnculo.- En Botánica se llama pedúnculo a la ramita o rabillo que sostiene una inflorescencia o un fruto tras su fecundación. Posee la estructura de un tallo y es responsable de la sustentación y conducción de savia a las flores. Se conecta con el raquis de la inflorescencia en la base y es el cáliz del ápice. Raramente presenta ramificaciones o estructuras de origen foliar. En su ausencia, las flores son sésiles. Una compresión o cambios en la consistencia del pedicelo pueden influir en las características reproductivas de las flores Perianto.- estructura floral que corresponde a la envoltura que rodea a los órganos sexuales; constituye la parte no reproductiva de la flor. Psílido.- Familia de insectos hemípteros del suborden Sternorrhyncha 39 Dorsoventralmente.- Referente a la forma aplanada de su vientre. Primordios.- es el estado rudimentario en que se encuentra un órgano en formación, usualmente protegido en el interior de una yema. Reniforme.- En forma de Riñón. Taninos.- Los taninos son compuestos polifenólicos de estructura química diversa que tienen la propiedad de ser astringentes, es decir precipitan las proteínas y su capacidad de curtir la piel. 40