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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
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ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y
BIOQUÍMICA
Y
BI
Informe de Tesis I
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I
A
Identificación preliminar de fitoconstituyentes presentes
RM
en las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides
FA
procedentes del Cerro Campana de la Provincia de
TE
CA
DE
Trujillo, Departamento de la Libertad
AUTORES:
BI
BL
IO
NUÑEZ ECHEVARRÍA ANNI JOHANA
VARGAS LEZAMA JAIME SAMUEL
ASESORA:
Dra. Q.F. SOTO VÁSQUEZ MARILÚ ROXANA
TRUJILLO – PERÚ
2013
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JURADO DICTAMINADOR
PRESIDENTE
Dr. Roger Antonio Rengifo Penadillos
MIEMBRO
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Dr. Segundo Guillermo Ruiz Reyes
MIEMBRO
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Dra. Marilú Roxana Soto Vásquez
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DEDICATORIA
A nuestro Padre Dios.
Por el amor y el perdón que nos regala para que juntos con él
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podamos concluir todos los proyectos de vida.
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A nuestros Padres.
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Por la confianza y el esfuerzo que cada día nos ayudaron a seguir
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adelante. Gracias por el amor pues por ustedes hoy somos personas
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con muchos valores, los amamos.
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A nuestros maestros.
Gracias por su apoyo, por su tiempo, por su paciencia, por sus palabras
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constructivas así como por los conocimientos impartidos durante el
desarrollo de nuestra Tesis I, en especial: a la Dra. Marilú Soto Vásquez
por habernos guiado durante el desarrollo de este trabajo y llegar a la
culminación del mismo, gracias por su tiempo compartido, por su apoyo
en los momentos dificultosos de este trabajo, y porque siempre nos
impulsa a perseverar en nuestra formación profesional en el área de la
investigación científica.
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ÍNDICE
ÍNDICE .......................................................................................................................... I
PRESENTACIÓN ....................................................................................................... III
RESUMEN.................................................................................................................. IV
ABSTRACT ................................................................................................................. V
A
I. - INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 1
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II.- MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................... 7
MATERIALES .................................................................................................. 7
2.
MÉTODO........................................................................................................... 9
BI
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1.
Y
III.- RESULTADOS ................................................................................................... 17
AC
I
A
CUADRO 1: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO DICLOROMETÁNICO DE LAS
RAÍCES, TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ........................................ 17
FA
RM
CUADRO 2: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DE LAS RAÍCES,
TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ................................................... 18
DE
CUADRO 3: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO ACUOSO DE LAS RAÍCES,
TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ................................................... 19
TE
CA
IV.- DISCUSIÓN ........................................................................................................ 20
BI
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IO
V.- CONCLUSIÓN ..................................................................................................... 32
VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................ 33
ANEXO I .................................................................................................................... 46
ANEXO II ................................................................................................................... 47
ANEXO III .................................................................................................................. 48
ANEXO IV ................................................................................................................. 49
ANEXO V ..................................................................................................................... 1
ANEXO VI ................................................................................................................... 2
ANEXO VII ................................................................................................................ 12
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ANEXO VIII ............................................................................................................... 14
ANEXO IX ................................................................................................................. 15
ANEXO X ................................................................................................................... 16
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ANEXO XI ................................................................................................................. 17
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PRESENTACIÓN
Señores Miembros del Jurado:
En cumplimiento con las disposiciones vigentes emanadas del reglamento de
Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad
A
Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio, la
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presente Tesis I titulada: Identificación preliminar de fitoconstituyentes presentes en
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las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides procedentes del Cerro Campaña
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de la Provincia de Trujillo, Departamento de La Libertad.
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Esperando que el jurado se sirva a calificar este trabajo según su criterio
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establecido, a pesar de la existencia de alguna deficiencia encontrada durante el
DE
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desarrollo del presente trabajo de investigación.
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Trujillo, Julio de 2013
__________________________
Núñez Echevarría Anni Johana
Autora
_________________________
Vargas Lezama Jaime Samuel
Autor
iii
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RESUMEN
El presente trabajo de investigación tiene la finalidad de identificar los
fitoconstituyentes de la planta Trixis cacalioides procedentes del Cerro Campana,
provincia de Trujillo, Región La Libertad, mediante la marcha Fitoquímica preliminar
de la Dra. Miranda Martínez M. y Cuellar A. La extracción de principios activos se
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realizó a partir de 50 g de muestra seca y molida de raíz, tallo, hojas y flores
con
UI
respectivamente. Luego se inició la separación de los fitoconstituyentes
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solventes de diferentes polaridades: diclorometánico, etanólico y acuoso. Sobre
coloración
y
precipitación.
Se
Y
de
identificaron
los
siguientes
A
reactivos
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estos, se procedió a realizar la identificación de tipo cualitativo, para lo cual se usó
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fitoconstituyentes en las raíces, tallos, hojas y flores: alcaloides, triterpenos y
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esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, antocianidinas, quinonas y azúcares
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reductores; cardenólidos y taninos en las raíces, tallos y flores; saponinas en raíces,
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tallos y hojas; y aminoácidos en hojas y flores.
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Palabras claves: Trixis cacalioides, Marcha Fitoquímica, Fitoconstituyentes.
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ABSTRACT
The present research aims to identify plant phytoconstituents Trixis cacalioides from
The Cerro Campana, Province of Trujillo, La Libertad Region, by running
preliminary Phytochemistry Dr. Miranda Martinez M. and Cuellar A. The extractions
of active ingredients are made from 50 g of dried and ground sample of root, stem,
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leaves and flowers, respectively. Then began separating the solvent phytoconstituents
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different polarities dichloromethanic, and aqueous ethanol. On these, we proceeded to
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perform qualitative identification, which was used for staining reagents and
alkaloids,
triterpenes
and
steroids,
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flowers:
phenolics,
flavonoids,
A
and
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precipitation. Phytoconstituents following were identified in the roots, stems, leaves
AC
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anthocyanidins, quinones and reducing sugars, tannins and cardenolides in the roots,
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stems and flowers; saponins in roots, stems and leaves, and amino acids in leaves and
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flowers.
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Keywords: Trixis cacalioides, phytochemical, phytoconstituents
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I. - INTRODUCCIÓN
El hombre y todos los seres vivos a lo largo de su existencia consumen
alimentos para su supervivencia y reproducción creando una perpetuación de su
especie y de sus genes. El hombre, en particular, ha creado un contacto con las
plantas, animales y derivados de estos, de los cuales depende su sobrevivencia. Es
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sobre el avance del conocimiento de las plantas que fijaremos nuestra mira; el hombre
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comenzó a emplearlo para su alimento, vestimenta, habitación, adorno del cuerpo,
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vivienda y como medicina, llegando así a tener una relación más íntima con las
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plantas 1.
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Cada zona geográfica del mundo tiene una vegetación autóctona utilizada para
RM
la cura de diversas enfermedades. Muchas de las especies vegetales fueron utilizadas
FA
por egipcios, griegos y romanos, entre otros, por sus virtudes curativas que pasaron
DE
luego a formar parte de la farmacopea medieval, que más tarde se enriqueció con los
TE
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conocimientos del nuevo mundo 2.
Se llaman plantas medicinales a los vegetales que tienen sustancias
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denominadas principios activos, las cuales ejercen una acción farmacológica,
beneficiosa o perjudicial, sobre el organismo vivo. Su principal utilidad, a veces
específica, es la de servir como droga o medicina que en algunos casos alivie la
enfermedad o restablezca la salud 3.
La existencia de las plantas medicinales no constituye una casualidad, sino
que fueron puestas en la creación para el bien del hombre y que estos medios tan
sencillos y naturales fueron usados con fe por nuestros antepasados desde hace miles
de años 4.
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Las plantas medicinales han sido por muchos años una fuente de
medicamentos, tenemos el caso de los alcaloides vinblastina y vincristina de la
vincapervinca de Madagascar (Catharanthus roseus) utilizados en tratamiento de
leucemias; el analgésico morfina obtenido de Papaver somniferum y el antipalúdico
quinina de la corteza de la quina (Cinchona officinalis). Actualmente el gran interés
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más sana, una vuelta a la frase “lo natural es más sano” 5.
A
suscitado en torno a su uso no obedece a una moda, sino que busca lograr una vida
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Las plantas medicinales y los remedios de ese entonces se siguen utilizando
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O
hasta hoy. A principios del siglo XX, el desarrollo de la química y el descubrimiento
Y
de complejos procesos de síntesis orgánica desembocaron en la puesta en marcha, por
AC
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A
parte de la industria farmacéutica, de una nueva producción de medicamentos. Para la
RM
fabricación de muchos de ellos se utilizaron los principios activos de innumerables
FA
plantas medicinales. No se debe olvidar que los remedios a base de plantas
DE
medicinales presentan una inmensa ventaja con respecto a los tratamientos químicos
TE
CA
o de otras fuentes. No obstante, a pesar de que han aumentado las investigaciones y
estudios científicos de las plantas medicinales, todavía no se conocen muchos de los
BI
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principios activos a los que se debe las extraordinarias cualidades de las especies
vegetales 2. Los metabolitos secundarios de las plantas medicinales son responsables
de algunas “propiedades curativas” que en la medicina tradicional se les atribuye, y
constituyen un gran potencial de reserva inexplorada de gran utilidad al hombre 6.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce la importancia del rol
que desempeña el uso y utilización de las plantas medicinales en la “Atención
Primaria de la Salud”, recomienda y respalda su integración en los sistemas
nacionales de salud, quienes estiman que casi el 80% de todos los habitantes de la
2
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tierra los usan para resolver sus principales problemas de salud. Para el año 2020 se
estima que la población mundial será de 7 500 millones de personas, de las cuales
75% corresponderán a países en desarrollo que consumirán sólo 15% de los
medicamentos convencionales del mercado. Estos datos permiten predecir que la
mayoría de la población dependerá de las plantas medicinales, principalmente por sus
A
escasos efectos secundarios, amplio margen terapéutico y su utilidad en la mejora de
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la calidad de vida de quienes sufren enfermedades leves o determinadas
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enfermedades crónicas 7.
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En la actualidad es el Instituto Nacional de Salud (INS) a través del Centro
A
Y
Nacional de Salud Intercultural (CENSI) que propone las políticas y normas en salud
AC
I
intercultural, promueve el desarrollo de la investigación, docencia, programas y
RM
servicios, transferencia tecnológica y la integración de la medicina tradicional,
FA
medicina alternativa y medicina complementaria con la medicina académica, para
TE
CA
DE
contribuir a mejorar el nivel de salud de la población peruana 8.
Es así que a los profesionales de la salud y más aún a los Químicos –
BI
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IO
Farmacéuticos nos toca el deber de contribuir con nuestros conocimientos científicos
y hacer extensivo las propiedades de nuestras especies que pueden abarcar el mercado
interno y el externo. La posibilidad de industrialización de nuestros recursos
naturales, terapéuticos, es una línea promisoria que tendría sustento siempre y cuando
corroboremos su eficacia, primero con la identificación de sus componentes y
posteriormente su aplicación en personas 9.
3
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El Perú es un país con una diversidad de flora única en el mundo, la misma
que está representada por más de 25,000 plantas, de las cuales cerca de 1,400 tienen
propiedades curativas 9.
Se sabe que los antiguos peruanos empleaban las plantas no sólo como
alimentos, sino que además lo empleaban para curar los males que los aquejaban.
A
Existen informaciones bibliográficas y folklóricas en la que se da a conocer el empleo
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de plantas para estos fines. Se sabe que las plantas medicinales fueron las bases para
O
.
BI
9
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muchos tratamientos, y que muchos fármacos tienen orígenes en plantas medicinales
Y
En el Perú, por sus condiciones climáticas y por la diversidad de biorregiones
AC
I
A
existe una abundante flora silvestre cuyas aplicaciones medicinales, aún no están muy
RM
difundidas. Las comunidades rurales del interior del país utilizan tradicionalmente las
FA
plantas como medio de curar sus enfermedades. Ellos han recibido de generación en
DE
generación un bagaje de conocimientos que se ha acumulado desde tiempos
TE
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inmemoriales sobre selección, manejo, conservación y usos de las diferentes especies
de plantas que crecen en nuestra patria 10.
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En el departamento de La Libertad a 15km al noroeste de la ciudad de
Trujillo, se erigen imponentes los Cerros Campana, Cabezón y Prieto. A simple vista
parecen no tener vegetación, pero mientras se asciende a ellos se empiezan a notar
formaciones propias de las lomas. En este lugar se aprecian 2 zonas distintas: una que
llega hasta los 200 msnm, de suelo arenoso y seco, con comunidades de tilandsias,
suculentas y cactáceas; y otra que alcanza los 1,000 msnm con herbáceas pegadas al
suelo y comunidades arbustivas dispersas. Investigaciones recientes indican que en
estas lomas hay alrededor de 220 especies de flora y 260 especies de fauna entre
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vertebrados e invertebrados. Es en el cerro Campana donde encontramos la Trixis
cacalioides, planta que será el objeto de nuestra investigación 11.
Trixis cacalioides es autóctona de argentina, pertenece a la familia Asteraceae,
su nombre común es “coca inca”, “inga”, “hierba linda”. 11
Presenta sinonimias tales como: Trixis paradoxa, Trixis hexantha, trixis
A
papillosa, Perdicium cacalioides. Crece en el Sur del Ecuador, Perú, Norte de Chile y
M
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en Argentina. Se desarrolla en la costa, parte baja de los valles occidentales y valles
. Esta planta se vende en los mercados de Trujillo y Chiclayo
O
11, 12, 13
BI
1500 m.s.n.m.
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interandinos de Ancash, Cajamarca, Lambayeque, La Libertad, Piura entre los 200 a
Y
con el nombre de “Añasquero Chico” 14.
AC
I
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Trixis cacalioides es un arbusto de 0.2 – 1.5m de altura, entre sus
RM
características morfológicas tenemos que posee: las brácteas del involucro más o
FA
menos del mismo tamaño, a menudo con otro verticilio de brácteas más cortas en la
DE
base. Las hojas coriáceas (gruesa y con la superficie endurecida), simples, obovadas y
TE
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elípticas hasta lanceoladas. Las flores bilabiadas, amarillas, 5 – 7 por receptáculo,
florecen de marzo a mayo. El receptáculo sin páleas (brácteas), pero con pelos. Y sus
BI
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tallos son marrones claros y ásperos, con pelos sedosos o algunas veces glandulares
15, 16, 17
.
La especie Trixis cacalioides (Kunth), es usada como: diaforético, para
inflamación de la próstata, contra la mordedura de la culebra, para curar “aire en la
cabeza” y fiebre mediante baños con el cocimiento de las hojas e incluso para el
reumatismo
18, 19, 20
.
5
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Analizando el interés por el estudio y empleo de medicina tradicional en la
asistencia médica y el reconocimiento de la importancia de las plantas medicinales
para el sistema de salud de países en desarrollo, es que a través del presente trabajo de
investigación se desea contribuir con el conocimiento y proporcionar información de
los fitoconstituyentes que presenta la especie Trixis cacalioides. Debido a que existen
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diferentes propiedades (como actividad tripanocida y otras).
A
diferentes estudios de otras especies del mismo género, la mayoría de ellos tienen
O
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Según lo expuesto anteriormente se planteó el siguiente problema: ¿Cuáles
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son los fitoconstituyentes presentes en la raíces, tallos, hojas y flores de Trixis
A
Y
cacalioides procedentes del Cerro Campana de la provincia de Trujillo, región La
RM
AC
I
Libertad?
FA
La presente investigación es de tipo descriptiva por tanto su hipótesis esta
DE
implícitamente sostenida en el enunciado del problema científico.
Determinar los fitoconstituyentes de las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis
BI
BL
IO
-
TE
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Durante la realización del presente trabajo se cumplió el siguiente objetivo:
cacalioides procedente del Cerro Campana de la provincia de Trujillo, región
La Libertad.
6
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II.- MATERIALES Y MÉTODOS
1. MATERIALES
1.1. Material biológico:
Se utilizó las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides
1.2. Materiales y equipos de laboratorio:
M
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A
1.2.1. Material de vidrio:
UI
De uso común en el laboratorio
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1.2.2. Equipos:
BI
Molino a discos CORONA
A
Y
Equipo de baño maría
AC
I
Balanza analítica OHAUS GA 200
RM
Lámpara UV 254-366nm DESAGA
FA
Cocina eléctrica Finely
DE
Refrigeradora Coldex
TE
CA
Estufa Memmert
BI
BL
IO
Balanza triple brazo OHAUS 700/800 series
1.2.3. Reactivos
Glicerina
Ácido nítrico
Subnitrato de bismuto
Yoduro de potasio
Yodo
Ácido pícrico (2, 4, 5 – trinitrofenol)
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Hidróxido de sodio
Cloruro mercúrico
Ácido sulfúrico
Anhídrido acético
Sulfato de cobre
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Tartrato de sodio y potasio
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Cloruro férrico al 10% en agua
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UI
Ninhidrina
BI
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Ácido clorhídrico
Y
Magnesio metálico
AC
I
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Ácido 3,5-dinitrobenzóico al 2% en metanol
FA
Alcohol amílico
RM
Hidróxido de potasio al 5.7% en agua
DE
1.2.4. Solventes
TE
CA
Diclorometano
BI
BL
IO
Etanol 70º
Cloroformo
Agua destilada
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2. MÉTODO
2.1. Preparación de la muestra:
2.1.1. Identificación y determinación taxonómica de la especie:
La identificación botánica del material estuvo a cargo del Dr. Eric
Rodríguez Rodríguez, encargado del Herbarium Truxillensis (HUT).
A
El ejemplar de la especie vegetal fue depositado en el Herbarium
M
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Truxillensis (HUT) con el código 53822 (Anexo 1).
Q
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2.1.2. Selección de la muestra:
BI
O
La especie de Trixis cacalioides se recolectó en el Cerro Campana
Y
ubicado a 16,7 kilómetros al norte de la ciudad de Trujillo;
AC
I
A
geográficamente está entre los 8° 00’ 18.16” LS - 79° 06´18.34” LW y
RM
los 7° 58’ 36.98” LS - 79° 06´16.18” LW. A 340 metros de altura
FA
sobre el nivel del mar. Pertenece al distrito de Huanchaco, Provincia
DE
de Trujillo, Departamento de La Libertad. La recolección de la especie
TE
CA
se realizó por el método convencional o clásico de la herborización,
seleccionando el material en el campo y verificando que esté en buenas
BI
BL
IO
condiciones.
2.1.3. Transporte de la muestra:
El material recolectado fue transportado en cajas de cartón grandes al
Laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y
Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se
eliminó las sustancias extrañas presentes en el material vegetal.
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2.1.4. Lavado de la droga:
Luego de la separación de sustancias extrañas, se lavó el material
vegetal con agua potable a chorro.
2.1.5. Secado de la muestra:
Posteriormente al lavado se procedió a extender la muestra en papel
A
kraft para que seque a temperatura ambiente y luego en la estufa por 2
M
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horas. Este procedimiento se realizó solo para hojas, tallos y raíces.
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2.2. Preparación de los extractos:
BI
O
Una vez secada la muestra, se procedió a la obtención de los extractos,
Y
utilizando disolventes de diferentes polaridades: Diclorometano, etanol y
AC
I
A
agua.
RM
2.3. Tamizaje fitoquímico preliminar
FA
El Tamizaje Fitoquímico preliminar se realizó siguiendo el método de
DE
Miranda Martinez Migdalia y Cuéllar Cuellar A.
TE
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De acuerdo con este método de Miranda Martínez Migdalia y Cuéllar
Cuellar A., cada muestra se sometió a la acción extractiva de solventes de
BI
BL
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polaridad creciente: éter etílico (o Diclorometano), Etanol y Agua,
modificando el pH obteniéndose de esta manera los metabolitos secundarios
de acuerdo a su solubilidad. Luego de separar las fracciones se realizó la
identificación de los metabolitos secundarios haciendo uso de reactivos de
coloración y precipitación. 28,29
Método y procedimiento: En este se empleó un esquema general, el cual
utiliza una extracción sucesiva con solventes de polaridad creciente. De este
modo, se realizará la extracción sucesiva del material vegetal para la
10
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aplicación de técnicas de Tamizaje fitoquímico detallado en el Anexo II.
Posteriormente de acuerdo a los Anexos III, IV y V.
En cada caso, para realizar los ensayos se procedió de la siguiente forma:
Ensayo de Sudán: Permitió reconocer en el extracto la presencia de
compuestos grasos, para ello, a la alícuota de la fracción se le añadió 1 mL
A
de la solución diluida en agua del colorante Sudán III. Se calentó en baño de
M
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agua hasta evaporación del solvente. La presencia de compuestos grasos se
BI
O
seno del líquido o en las paredes del crisol.
Q
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consideró positiva si aparecen gotas o una película coloreada de rojo en el
Y
Ensayo de Dragendorff: Permitió reconocer en los extractos la presencia de
AC
I
A
alcaloides. Para ello, a las alícuotas con solventes orgánicos (extracto de
RM
diclorometano y etanol), se evaporaron en baño maría y el residuo se
FA
redisolvió en 1mL de ácido clorhídrico al 1%. En caso del extracto acuoso, a
DE
la alícuota se le añadió 1 gota de ácido clorhídrico concentrado, (se calentó
TE
CA
suavemente y se dejó enfriar). Con la solución acuosa ácida se realizó el
ensayo, añadiéndose 3 gotas del reactivo de Dragendorff, si hay precipitado
BI
BL
IO
se considera (+).
Ensayo de Mayer: Permitió reconocer en el extracto la presencia de
alcaloides. Se realizó de la forma descrita anteriormente, hasta obtener una
solución acida. Se añadió luego, 2 mg de cloruro de sodio en polvo, se agitó
y filtró. Luego se añadió II o III gotas del reactivo de Mayer, si se observa:
precipitado se considera (+).
11
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Ensayo de Wagner: Permitió reconocer en el extracto la presencia de
alcaloides. Se partió igual que en los casos anteriores de la solución acida, se
añadió II o III del reactivo y clasificó los resultados de la forma anterior.
Ensayo de Baljet: Permitió reconocer en el extracto diclorometánico y
etanólico la presencia de compuestos con agrupamientos lactónicos, en
A
particular las cumarinas, aunque en otros compuestos lactónicos pueden dar
M
IC
positivo a este ensayo. Para ello, se evaporó el solvente en baño María y se
Q
UI
redisolvió con 1 mL de alcohol. En estas condiciones se adicionó 1mL del
BI
O
reactivo. Se consideró un ensayo positivo a la aparición de coloración o
Y
precipitado rojo (+).
AC
I
A
Ensayo de Liebermann-Burchard: Permitió reconocer en el extracto la
RM
presencia de triterpenos y/o esteroides, porque ambos tipos de productos
FA
poseen un núcleo de androstano generalmente insaturado en el anillo B y en
DE
la posición 5 – 6. Como el extracto no se encuentro en cloroformo, el
TE
CA
disolvente se evaporó en baño María y el residuo se redisolvió en 1 mL de
cloroformo. Luego se adicionó 1 mL de anhídrido acético y se mezcló bien.
BI
BL
IO
Por la pared del tubo de ensayo se dejó resbalar de II a III gotas de ácido
sulfúrico concentrado sin agitar. Se consideró como ensayo positivo la
aparición de las siguientes coloraciones:
1. Rosado – azul muy rápido.
2. Verde intenso visible aunque rápido.
3. Verde oscuro negro final de la reacción.
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Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El tercer cambio
generalmente ocurre cuando del material evaluado tiene cantidades
importantes de estos compuestos.
IMPORTANTE: Para realizar esta reacción es necesario que no haya
presencia de agua en el medio de la reacción, pues ésta con el ácido sulfúrico
M
IC
A
reacciona de forma violenta y puede ocurrir un accidente.
UI
Ensayo de Catequinas: Para ello se tomó 1 gota del extracto etanólico con
O
Q
la ayuda de un capilar y se aplicó sobre papel filtro. Sobre la mancha se
BI
aplicó la solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha verde
AC
I
A
Y
carmelita a la luz UV, ha de indicar un ensayo positivo.
RM
Ensayo de Resinas: Para detectar este tipo de compuestos a 2 mL del
FA
extracto etanólico se añadió 10 mL de agua destilada. La aparición de un
DE
precipitado indica un ensayo positivo.
TE
CA
Ensayo de Fehling: Permitió reconocer en el extracto la presencia de
azúcares reductores. Para ello, a las alícuotas de extracto de etanol, se
BI
BL
IO
evaporaron en baño María y el residuo se redisolvió con 2 mL de agua
destilada. Se adicionó 2 mL de reactivo y se calentó en baño de agua de 5 a
10 minutos. El ensayo se consideró positivo si la solución se coloreaba de
rojo o aparece precipitado rojo.
Ensayo de la espuma: Permitió reconocer en el extracto etanólico y acuoso
la presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica. De
modo que si la alícuota se encontró en alcohol, esta se diluyó con cinco
veces su volumen en agua y se agitó dicha mezcla fuertemente por 5
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minutos. El ensayo se consideró positivo cuando apareció la espuma en la
superficie del líquido de más de 2mm de altura y permaneció persistente por
más de 2 min.
Ensayo de Cloruro férrico: Permitió reconocer la presencia de compuestos
fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Cuando el extracto de la planta
A
se realiza con alcohol, el ensayo determino tanto fenoles como taninos. Para
M
IC
esto, a 1mL del extracto alcohólico se le adicionaron 3 gotas de una solución
Q
UI
de tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica (cloruro de sodio al
BI
O
0.9 % en agua). En cambio cuando el extracto fue acuoso, el ensayo
Y
determino fundamentalmente taninos. Para esto, a 1mL del extracto se
AC
I
A
añadió acetato de sodio para neutralizar y tres gotas de una solución de
Se observó el desarrollo de una coloración rojo-vino, compuestos
DE
-
FA
ensayo positivo cuando:
RM
tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica. Se consideró un
-
TE
CA
fenólicos en general.
Se observó el desarrollo de una coloración verde intensa, taninos del
BI
BL
IO
tipo pirocatecólicos.
-
Se observó el desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo
pirogalotánicos.
Ensayo de Ninhidrina: Permitió reconocer en el extracto etanólico la
presencia de aminoácidos libres o de aminas en general. Para lo cual, se
tomó 1 mL del extracto etanólico, se mezcló con 2 mL de solución de
Ninhidrina en agua. La mezcla se calentó de 5 a 10 minutos en baño de agua.
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Este ensayo se consideró positivo cuando se observó el desarrollo de una
coloración azul – violáceo.
Ensayo de Borntrager: Permitió reconocer en un extracto la presencia de
quinonas. Para ello, cuando la alícuota del extracto no se encontraba en
cloroformo, este se evaporó en baño María y el residuo se redisolvió con 1
A
mL de hidróxido de sodio al 5 % en agua. Luego se agitó mezclando las
M
IC
fases y se dejó en reposo hasta su ulterior separación. Cuando la fase acuosa
Q
UI
alcalina (superior) se coloreó de rosado o rojo, el ensayo se consideró
BI
O
positivo. Coloración rosada (++), coloración roja (+++).
Y
Ensayo de Shinoda: Permitió reconocer la presencia de flavonoides en un
AC
I
A
extracto de un vegetal. Cuando la alícuota del extracto se encontró en
RM
alcohol, este se diluyó 1mL de ácido clorhídrico concentrado y un pedacito
FA
de cinta de magnesio metálico. Después de la reacción se esperó 5 minutos,
DE
se añadió 1 mL de alcohol amílico, se mezclaron las fases y se dejó reposar
TE
CA
hasta que se separen.
Si la alícuota del extracto se encontraba en agua, se procedió de igual forma, a
BI
BL
IO
partir de la adición del ácido clorhídrico concentrado.
El ensayo se consideró positivo, cuando el alcohol amílico se coloreó de
amarillo, naranja, carmelita o rojo; intensos en todos los casos.
Ensayo de Kedde: Permitió reconocer en un extracto la presencia de
glucósidos cardiotónicos. Para lo cual se mezcló 1 mL del extracto etanólico
con 1 mL del reactivo y se dejó reposar de 5 a 10 min. Se consideró un
ensayo positivo la aparición de una coloración violácea que debe persistir
durante 1 a 2 horas.
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Ensayo de Antocianinas: Permitió reconocer en los extractos vegetales la
presencia de estas estructuras de secuencia C6-C3-C6 del grupo de los
flavonoides. Se calentó 2 mL del extracto etanólico durante 10 min. con 1
mL de HCl concentrado. Se dejó enfriar y se adicionó 1 mL de agua y 2 mL
de alcohol amílico. Se agitó y se dejó separar las dos fases. Se consideró un
A
ensayo positivo la aparición de color rojo a marrón en la fase amílica.
M
IC
Ensayo de la gelatina: Permitió reconocer la presencia de taninos en el
Q
UI
extracto acuoso. Se tomó 1 ml de muestra y se añadió 1 gota de solución de
BI
O
gelatina al 1%. Se consideró positivo la presencia de un precipitado blanco.
Y
Ensayo de Mucílagos: Permitió reconocer en el extracto la presencia de una
AC
I
A
estructura tipo polisacárido, el cual formará un coloide hidrófilo de alto
RM
índice de masa que aumenta la densidad del agua donde se extrae. Para ello 2
FA
mL del extracto se enfrió en agua de 0 a 5 °C. Se consideró positivo cuando
DE
la solución presentó una consistencia gelatinosa.
TE
CA
En el estudio fitoquímico se buscaron los siguientes componentes:
Alcaloides, aminoácidos, antocianidinas, azúcares reductores, catequinas,
BI
BL
IO
compuestos grasos, cumarinas, esteroides, fenoles, flavonoides, glicósidos
cardiotónicos, hidrocarburos, lactonas, mucílagos, quinonas, resinas,
saponinas, taninos, triterpenoides 16,17.
TRATAMIENTO DE RESULTADOS
Los resultados fueron reportaron en cuadros utilizando el programa de
Microsoft Office ®, donde se indicó la ausencia (-) o presencia (+) de los
fitoconstituyentes.
16
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III.- RESULTADOS
Cuadro 1: Fitoconstituyentes en el Extracto Diclorometánico de las raíces, tallos,
hojas y flores de Trixis cacalioides
EXTRACTO DICLOROMETÁNICO
Tallos
Hojas
Flores
+
+
+
+
+
+
+
+
Wagner
Lactonas y
Cumarinas
+
Sudan
Aceites y Grasas
+
Triterpenos y
Esteroides
+
+
+
-
+
-
-
+
+
+
+
+
Y
A
AC
I
RM
Liebermann
Burchard
+
O
Baljet
+
M
IC
Alcaloides
Mayer
UI
Dragendorff
A
Raíces
Q
Fitoconstituyentes
BI
Ensayos
FA
Leyenda:
DE
Presencia
-
Ausencia
BI
BL
IO
TE
CA
+
17
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Cuadro 2: Fitoconstituyentes en el Extracto Etanólico de las raíces, tallos, hojas y
flores de Trixis cacalioides
Dragendorff
Alcaloides
Mayer
Wagner
Raíces
Tallos
Hojas
Flores
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
A
Fitoconstituyentes
M
IC
Ensayos
UI
EXTRACTO ETANÓLICO
Baljet
Lactonas
-
Liebermann
Burchard
Triterpenos y
esteroides
+
Tricloruro
Férrico
Compuesto
fenólicos
+
Shinoda
Flavonoides
Bornträger
Quinonas
Catequinas
Catequinas
Resinas
Resinas
-
-
-
-
Fehling
Azúcares
Reductores
+
+
+
+
Espuma
Saponinas
-
+
+
-
Aminoácidos
-
-
+
+
Cardenólidos
+
+
-
+
Antocianidinas
+
+
+
+
Antocianidinas
Q
O
BI
Y
A
AC
I
RM
FA
DE
BI
BL
IO
Kedde
+
TE
CA
Ninhidrina
+
Leyenda:
+
Presencia
-
Ausencia
18
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Cuadro 3: Fitoconstituyentes en el Extracto Acuoso de las raíces, tallos, hojas y
flores de Trixis cacalioides
Tallos
Hojas
Flores
+
+
+
+
+
+
+
+
Wagner
+
+
+
A
+
Tricloruro
Férrico
+
+
-
+
Q
Ensayo
Fitoconstituyentes
+
-
+
+
+
+
+
-
-
-
+
+
-
+
-
-
-
-
Dragendorff
Alcaloides
Mayer
M
IC
Raíces
AC
I
EXTRACTO ACUOSO
UI
Taninos
Azúcares
reductores
+
Espuma
Saponinas
Shinoda
Flavonoides
Mucílagos
A
FA
RM
Mucilagos
BI
Fehling
Y
O
+
Gelatina
DE
Leyenda:
Presencia
-
Ausencia
BI
BL
IO
TE
CA
+
19
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IV.- DISCUSIÓN
En el presente trabajo se realizó la identificación preliminar de los
Fitoconstituyentes de Trixis cacalioides en raíces, tallos, hojas y flores. Las plantas,
poseen un metabolismo secundario que les permite producir y acumular compuestos
de
naturaleza
química
diversa
denominados
metabolitos
secundarios
o
M
IC
A
fitoconstituyentes, los que se distribuyen diferencialmente entre grupos taxonómicos,
UI
presentan propiedades biológicas, muchos desempeñan funciones ecológicas y se
Q
caracterizan por sus diferentes usos y aplicaciones en medicina, farmacia, cosmética,
Y
BI
O
entre otros. 30
AC
I
A
Esta identificación se llevó a cabo mediante el método de Miranda Martínez
RM
M. y Cuellar Cuellar A. De acuerdo con este método para la marcha fitoquímica, cada
FA
muestra fue sometida a la acción extractiva de solventes de polaridad creciente:
DE
diclorometano, etanol y agua con el fin de obtener los metabolitos secundarios de
TE
CA
acuerdo a su polaridad. Luego de obtener los extractos se realizó la identificación de
los fitoconstituyentes haciendo uso de reactivos de coloración y precipitación. 31
BI
BL
IO
La polaridad es una propiedad muy importante pues permite describir la forma
como se comportan los electrones entre los átomos. Un enlace no polar es aquel en el
cual los electrones se comparten de igual manera entre dos átomos. Un enlace polar,
es aquel en el cual un átomo ejerce mayor atracción sobre los electrones que el otro.
La capacidad de un átomo de atraer electrones por sí mismo en un enlace químico se
conoce como electronegatividad. Esta propiedad puede definirse como la afinidad
electrónica y la energía de ionización que reflejan la tendencia de un átomo gaseoso
aislado de ganar o perder electrones. 32, 33, 34
20
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La extracción de los fitoconstituyentes sigue un orden de polaridad
ascendente; debido a que las células de donde se los ha de extraer, constituyen
sistemas hidrofílicos internos, donde se encuentran los primeros, inmersos dentro de
una vesícula, que consta de una membrana lipofílica. Cuando se pulveriza la droga, se
rompen las paredes y membranas celulares, dejando libres las vesículas que
A
almacenan a los fitoconstituyentes mencionados. En la identificación cualitativa de
M
IC
los fitoconstituyentes se usó extracciones con diferentes solventes (diclorometano,
Q
UI
etanol 70º y agua), que penetran en la materia vegetal y disuelven las sustancias,
BI
O
luego se conserva a baja temperatura.; se realiza a polaridad creciente, para facilitar la
Y
solubilidad de principios activos que contienen las drogas crudas, según la marcha de
AC
I
A
la Dra. Miranda Migdalia. 31, 35
RM
El diclorometano, al ponerse en contacto con la droga triturada, va a
FA
difundirse por la membrana vesicular, disolviéndola a su paso y extrayendo los
DE
principios activos de polaridad semejante (lipofílicos); este disolvente, no extrae
TE
CA
aquellos metabolitos secundarios unidos no covalentemente a sistemas hidrofílicos
31
BI
BL
IO
(proteínas, péptidos) en el citoplasma expuesto; sino que se repele con estos últimos.
El etanol, como solvente de polaridad intermedia, ofrece la capacidad de
formar enlaces de hidrogeno y de ceder pares de electrones debido al grupo que esté
presente; así también, como el agua, pero además también poseen un extremo lipófílo
que puede ayudar a la solvatación de sustratos orgánicos. Debido a esta combinación
de propiedades, los disolventes como el alcohol etílico pueden considerarse como lo
mejor bajo todos los conceptos. 36
21
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El agua tiene el dipolo más elevado, por poseer un número grande de enlaces
de hidrógeno, surgiendo la interacción dipolo-dipolo. 32, 36
Debido a la capacidad del agua de poder formar enlaces de hidrógeno con
diferentes iones, del mismo en que puede formarlo con otra molécula de agua; es un
disolvente especial, ya que puede solvatar diferentes especies (aniónicas o
A
catiónicas). El agua no solo tiene dos átomos de hidrógeno enlazados al oxígeno y
M
IC
capaces de dar enlaces de hidrógeno, sino que además posee dos pares de electrones
O
BI
solvatación de especies acidas según Lewis. 32, 36
Q
UI
en el átomo de oxígeno, que son básicos y pueden actuar como dadores en la
Y
En el Cuadro N° 1, se reflejan los resultados obtenidos de los
AC
I
A
fitoconstituyentes en los extractos diclorometánico de los cuatro órganos (raíces,
RM
tallos, hojas y flores) de Trixis cacalioides. Notándose que los alcaloides, triterpenos
FA
y esteroides se encuentran en las raíces, tallos, hojas y flores. Mientras que las
DE
lactonas y cumarinas sólo se encontraron en las raíces, tallos y flores. Asimismo se
TE
CA
evidenció la presencia de aceites y grasas sólo en las raíces y flores.
BI
BL
IO
En el Cuadro N° 2, se puede observar los resultados de los fitoconstituyentes
en los extractos etanólicos de los cuatro órganos (raíz, tallo, hoja y flor). Según se
refleja, la raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides presentan: alcaloides,
triterpenos y esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, quinonas, antocianidinas
y azúcares reductores. Mientras que las lactonas sólo se encontraron en las hojas.
Respecto a los cardenólidos se encontraron sólo en las raíces, tallos y flores. Los
aminoácidos sólo fueron encontrados en las hojas y flores. En relación a las saponinas
22
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estas se encontraron sólo en los tallos y hojas. Asimismo en las raíces, tallos, hojas y
flores no se evidencio la presencia de catequinas y resinas.
En el Cuadro Nº 3, se reflejan los resultados obtenidos de los
fitoconstituyentes en los extractos acuosos de los cuatro órganos (raíces, tallos, hojas
y flores) de Trixis cacalioides. Notándose que los alcaloides y los azúcares reductores
M
IC
A
se encontraron en las raíces, tallos, hojas y flores. Mientras que los flavonoides y
UI
azúcares reductores se encuentran en las raíces y tallos. Asimismo los taninos sólo se
O
Q
encuentran en las raíces, tallos y flores. Respecto a las saponinas sólo se encuentran
Y
BI
en las raíces.
AC
I
A
Según los resultados obtenidos en los cuadros 1, 2 y 3 se tiene que los
RM
alcaloides se encuentran en los extractos Diclorometánico, Etanólico y Acuoso de
FA
raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. La mayoría de los alcaloides son
DE
insolubles o muy poco solubles en agua, pero se disuelven bien en alcohol, éter,
TE
CA
cloroformo u otros solventes orgánicos, cuando se presentan en forma de bases, lo
cual sería la explicación para la obtención de alcaloides en los solventes
BI
BL
IO
Diclorometánico y Etanólico y debido a la existencia de alcaloides en forma de sales,
las cuales son solubles en agua, es por lo que las pruebas dieron positivo para este
tipo de solvente. 43, 44
Las técnicas de reconocimiento de alcaloides son basadas en la capacidad que
tienen los alcaloides en estado de sal (extractos ácidos), de combinarse con el yodo y
metales pesados como bismuto, mercurio, tugsteno formando precipitados. 38
23
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En la práctica se utiliza los reactivos generales para detectar alcaloides como:
la solución de yodo-yoduro de potasio (Reactivo de Wagner), mercurio tetrayoduro
de potasio (reactivo de Mayer), tetrayodo bismuto de potasio (reactivo de
Dragendorff). 38
La reacción de Dragendorff, fue positiva en todos los extractos luego del
M
IC
A
análisis correspondiente. En esta reacción el ácido nítrico extrae los protones H+ del
UI
alcaloide y éste va a formar una sal con el anión BiI4, producto de la disolución del
O
Q
complejo KBiI4, Complejo coordinado Ioduro de potasio bismuto (III), que va a
BI
precipitar. 34 El bismuto presenta una geometría octaédrica, con una carga formal de –
A
Y
2, en su esfera de coordinación (anión voluminoso) para interactuar con dos
AC
I
moléculas de alcaloide protonada, evidenciándose por una coloración anaranjada.
FA
RM
40
39,
DE
La reacción de Mayer, fue positiva en todos los extractos al realizar el análisis
TE
CA
fitoquímico, lo cual demostró que esta reacción presenta como metal de coordinación
al mercurio (Hg2+), el cual forma una coordinación tetraédrica con una carga formal,
BI
BL
IO
en su esfera de – 2, interactuando de manera semejante al reactivo anterior y
evidenciándose por una coloración blanco cremosa. 39, 40
En la reacción de Wagner también fue positiva para todos los extractos
obtenidos. En esta reacción se forma un complejo de triyoduro en algunos casos se
puede formar pentayoduro y/o heptayoduro, esto depende de la concentración de I2,
se comporta como un ácido de Lewis frente al Yoduro (I-), el anión triyoduro es el
que atrae de manera electrostática al alcaloide protonado. 41, 42
24
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Las cumarinas están relacionadas con la defensa química de la planta ya que
presenta efectos antibacterianos, sedantes y analgésicos. 45 La prueba de Baljet es útil
para reconocer la presencia de compuestos con agrupamiento lactónico. 46 La reacción
se basa en la formación de un complejo formado entre el ácido pícrico y la lactona,
β y γ insaturada, dicho complejo presenta coloración rojo claro a oscuro. 47
M
IC
A
La presencia de este fitoconstituyente se observa en la raíces, tallos y flores
UI
del extracto diclorometánico y solo se observa su presencia en el Extracto Etanólico
BI
O
Q
de hojas, como se observa en el Cuadro N° 1 y 2.
Y
El Sudan III es un método utilizado fundamentalmente para demostrar
AC
I
A
triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos selectivamente de color rojo –
RM
anaranjado. 48
FA
El fundamento para esta prueba es que los colorantes para grasas son más
DE
solubles en las propias grasas que en el medio en el que van disueltos. Así, al bañar la
TE
CA
grasa con la solución del colorante, éste tiende a disolverse en la grasa que se va
cargando del colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solución
BI
BL
IO
alcohólica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua. 49
Las grasas las identificamos en los extractos diclorometánicos de raíces y
flores como se observa en el Cuadro N ° 1.
La prueba de Lieberman – Burchard es utilizada en una prueba colorimétrica
para detectar colesterol.
50
Esta reacción se realiza en medio ácido fuerte. El
colesterol sufre una reacción gradual, formándose en cada etapa una molécula de
colestapolieno que posee un doble enlace adicional con respecto al compuesto del
25
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cual deriva. En la etapa inicial de esta reacción, y a la cual se debe la coloración,
consiste en al protonación del grupo OH del colesterol, con la consiguiente pérdida de
agua obteniéndose el ion carbonio 3,5 – colestadieno que constituye el primer paso de
la reacción de color. 51
Este fitoconstituyente fue encontrado, y se observa en los resultados, en los
M
IC
A
extractos diclorometánico y etanólico en las raíces, tallos, hojas y flores. Según
UI
algunos reportes, de un trabajo realizado por Kotowicz. Hernadez y co.l en el año
O
Q
2001, en otra especie de la familia Asteraceae, Trixis pallida, se encontraron 7 tipos
BI
de trixanolides en las partes aéreas de la planta, lo que confirmaría la presencia de
AC
I
A
Y
este constituyente en Trixis cacalioides. 52
RM
Bohlmann, Suwita y col. analizaron dos especies nuevas de Trixis, las cuales
FA
dieron como resultado cinco sesquiterpenos nuevos relacionados con trixikingolide,
DE
seis nuevos derivados germacreno y un sesquiterpeno derivado de rotundene.
TE
CA
Algunos compuestos adicionales conocidos se aislaron también, que en parte puede
BI
BL
IO
ser de importancia taxonómica. 53
Riscala, Catalan, Sosa y col. en Trixis praestans se obtuvieron como
resultados nuevos sesquiterpenos de tipo trixano. 54
El ensayo de Kedde permite reconocer en un extracto la presencia de
cardenólidos. Esta prueba dio positivo para hojas en el extracto alcohólico.
Con esta prueba detectamos la presencia de cardenólidos en los Extractos
Etanólicos de raíces, tallos y flores, como se observa en el Cuadro N° 2.
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En la prueba del tricloruro férrico, el Fe se une al grupo fenóxido. Estos son
más reactivos hacia la sustitución aromática electrofílica, ya que tienen una carga
negativa reaccionan con electrófilos (en este caso Fe) para formar complejos. 55
Los compuestos con grupos fenoles fueron encontrados en los extractos
etanólico y acuoso, excepto en el extracto acuoso de hojas. (Ver Cuadro N° 2 y 3 de
M
IC
A
los Resultados)
UI
Los flavonoides se les atribuye diversas propiedades en las plantas, entre ellos
BI
O
Q
podemos citar antioxidantes, antiinflamatorio, antialérgico, entre otros como la
Y
protección a los vegetales contra la incidencia de insectos, hongos virus y bacterias.
AC
I
A
Estos son metabolitos secundarios de una gran distribución en el reino vegetal y
RM
pueden estar presentes en todas las partes de las plantas. En éstas se encuentran
FA
fundamentalmente en forma de glucósidos, esto les infiere una alta solubilidad en
TE
CA
estructuras. 56, 31
DE
agua y disolventes polares, lo cual se incrementa por la alta polaridad de sus
BI
BL
IO
La variación estructural de los flavonoides es inmensa, tanto por la naturaleza
del azúcar como para la posición del enlace glucósido. Los glucósidos flavonoides se
extraen de forma eficiente con alcoholes de baja masa molecular, en particular
metanol y etanol, cuando el material es seco, ofrece ventajas emplear una serie de
extracciones con tres o cuatro disolventes, incrementando la polaridad. Esto
explicaría como es que los flavonoides fueron encontrados en todos los extractos
etanólicos y solo en los extractos acuosos de raíces y tallos. 56
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En la reacción de Shinoda, el magnesio metálico es oxidado por el HCl
concentrado, dando como productos al H2, que es eliminado en forma de gas y el
MgCl2, que es el que forma complejos con los flavonoides dando coloraciones
características. El magnesio divalente intensifica la coloración por estar doblemente
coordinado. 31
M
IC
A
Ribeiro, Piló y col determinaron flavonoides en Trixis vauthieri con actividad
UI
tripanocida. Y esto justificaría la presencia de flavonoides en la familia Asteraceae y
BI
O
Q
sobre todo en Trixis cacalioides. 57
Y
En el análisis químico que se realizó a partes aéreas de Trixis divaricata que
AC
I
A
encontró, en el extracto etanólico, flavonoides y taninos con actividad antiulcerosa. 58
RM
En el ensayo de Bornträger se obtuvo una gran intensidad de coloración en el
FA
extracto Etanólico. Esto indica que las quinonas presentes en Trixis cacalioides, son
DE
de naturaleza de mediana polaridad, considerando a las antraquinonas y
TE
CA
naftoquinonas, como constituyentes principales. Al estado libre, los derivados
BI
BL
IO
quinónicos son prácticamente insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos.
La presencia de quinonas puede estar puesta de manifiesto mediante el empleo de
reacciones coloreadas, entre las que destaca la reacción de Bornträger. Esta diferencia
pudiera explicarse, principalmente por la desigualdad de polaridad del etanol 70º
respecto al agua; debido a que el etanol 70º tiene mayor selectividad extractiva que el
agua o a que en este extracto acuoso, las concentraciones presentes de dichos
metabolitos no fueron suficientes para ser identificarlas. 31, 35
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La principal reacción de identificación de quinonas es la de Bornträger, Esta
reacción consiste en agregar un reactivo alcalino como amoníaco, solución de
hidróxido de sodio o de potasio directamente a la droga en polvo o a un extracto y se
basa en la coloración roja que dan los derivados antraquinónicos en medio alcalino; la
aparición de una coloración anaranjada o roja indicará la presencia de agliconas libres
A
oxidadas y la intensidad del color será proporcional a la concentración de principios
UI
M
IC
activos. 59
O
Q
La reacción de Bornträger, produce una coloración roja cuando el Hidróxido
BI
de sodio reacciona con uno de los grupos hidroxilo, tanto de las antraquinonas como
A
Y
de las naftoquinonas ya que la coloración depende de la cantidad de electrones
RM
AC
I
deslocalizados en movimiento. 35
FA
Los procedimientos para el aislamiento de estas sustancias dependen del tipo
DE
de núcleo de interés. Por su color amarillo a violeta, contribuyen a la pigmentación de
TE
CA
numerosos vegetales inferiores como algas, líquenes, y plantas superiores. Las plantas
que contienen estos compuestos son especies vegetales que pueden utilizarse como
BI
BL
IO
laxantes o como purgantes según las dosis administradas. 60
Para la identificación de los aminoácidos, se empleó el ensayo de Ninhidrina.
La ninhidrina es un poderoso agente reactivo, reacciona con todos los aminoácidos
alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8; y esta ninhidrina reducida formada reacciona
con una molécula de ninhidrina no reducida y con el amoniaco resultante de la
desaminación para formar un compuesto complejo, dando una coloración que varía
de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se
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estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente
de la coloración original del aminoácido. El átomo de carbono de un carbonilo tiene
una carga positiva parcial, por lo que el C central de un 1, 2, 3 – tricarbonilo es menos
estable y más electrofílico que una cetona simple. 61, 62
En la experiencia se encontró que los extractos etanólicos de hojas y flores
M
IC
A
resultaron positivos para el ensayo de identificación de aminoácidos con la
UI
ninhidrina. Los aminoácidos libres constituyen el grupo de los aminoácidos no
O
Q
proteicos. Éstos se caracterizan por ser de mediana a elevada polaridad; debido a que
BI
poseen los grupos – amino y carboxílico; los cuales le confieren una polaridad
AC
I
A
Y
relativa; lo que explicaría su presencia en este extracto. 35
RM
Las saponinas poseen propiedades tensoactivas, que constituyen un amplio
FA
grupo de heterósidos muy frecuentes en los vegetales, se disuelven en agua formando
DE
disoluciones espumosas. En plantas se encuentran en forma de mezclas complejas,
TE
CA
poseen fuerte polaridad, relativa fragilidad y muy pequeñas diferencias estructurales
de masa molecular elevada, difícil de obtener en forma pura, difícilmente cristalizan,
BI
BL
IO
son higroscópicas y raramente se obtienen puntos de fusión neta y sin
descomposición. Son solubles en agua y por lo tanto se pueden extraer generalmente
a ebullición, sin embargo se prefiere extraerlos en medio alcohólico (metanol o
etanol), seguido de una partición con n-butanol y precipitarlos posteriormente con
extracciones de éter dietílico. La prueba de la espuma fue empleada y se hallaron
saponinas en los extractos etanólicos de tallos y hojas y en el extracto acuoso de
raíces. 47
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El ensayo para identificar los azúcares reductores resultó positiva para el
extracto etanólico y acuoso (en las partes: raíces, tallos, hojas y flores). Esta situación
está más que justificada porque dichos azúcares se caracterizan por ser de naturaleza
altamente polar, debido al marcado número de grupos funcionales hidroxilo (– OH)
que poseen. Éstos, según su estructura de Fisher (forma abierta) poseen un grupo
A
carbonilo en el primer o segundo carbono o según la cíclica, un Carbono anomérico,
UI
M
IC
el cual es altamente reactivo. 32, 35
O
Q
En el ensayo se emplearon reactivos diferentes, el llamado Fehling A, que es
BI
una solución acuosa de sulfato de cobre (II) y el Fehling B, que contiene hidróxido de
A
Y
sodio y tartrato de sodio y potasio; la función de este último es formar un quelato con
AC
I
el Cu2+ y evitar que este ion sea precipitado por los iones hidróxido. Al mezclarlos, se
RM
genera el tartrato de cobre (II), éste va a reaccionar con la forma abierta del azúcar
FA
reductor, específicamente con el grupo aldehído (que en las 2-hidroxicetonas, puede
DE
producirse por una tautomería). Como productos se va a llevar a la oxidación del
TE
CA
grupo aldehído, hacia el carboxílico correspondiente y un metal con su mínimo estado
BI
BL
IO
positivo de oxidación (Cu1+). Esta peculiar forma del metal se caracteriza por
presentar un color rojo ladrillo, característico de una reacción positiva para dicho
ensayo. 32, 35
De estos resultados podemos mencionar que en todos los órganos estudiados
existen, casi por igual, los mismos fitoconstituyentes. Por lo que habría que realizar
un estudio más profundo; es decir, cuantificar los fitoconstituyentes de cada órgano
para determinar con exactitud las diferencias reales existentes.
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V.- CONCLUSIÓN
-
La especie de Trixis cacalioides procedente del Cerro Campana de la
provincia
de
Trujillo,
región
La
libertad
presenta
los
siguientes
fitoconstituyentes en las raíces, tallos, hojas y flores: alcaloides, triterpenos y
M
IC
A
esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, antocianidinas, quinonas y
azúcares reductores; cardenólidos y taninos en las raíces, tallos y flores;
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
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Y
BI
O
Q
UI
saponinas en raíces, tallos y hojas; y aminoácidos en hojas y flores.
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http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/rmv/v04n2/pdf/a04v4n2.pdf
BI
BL
IO
32. STEPHEN, H. General, Organic and Biological Chemistry. 5ta edición. EE.UU:
Brooks/cole CENGAGE Learning. 2010. p.121-130.
33. DEWICK, P. Essentials of Organic Chemistry. 1era edición. EE.UU: Jhon Wiley
& Sons. 2006. p. 170
34. CHANG, R. Química. 10ma edición. México: Mc Graw Hill. 2010. p.377-379
35. ENRÍQUEZ A, PRIETO E, DE LOS RÍOS E, RUÍZ S. Estudio farmacognóstico
y fitoquímico del rizoma de Zingiber officinale Roscoe “Jengibre” de la ciudad de
Chanchamayo - Región Junín. Perú. Rev. Med. Vallejiana. Vol. 5 Nº 1. 2012 [En
39
Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú.
Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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internet].
[Acceso
17
de
Marzo
de
2013].Disponible
en:
http://revistas.concytec.gob.pe/pdf/rmv/v5n1/a07v5n1.pdf
36. UNIVERSIDAD DE LIMA. Centro de Investigación de la Producción Industrial
Catálogo de plantas medicinales. Industria farmaceútica. Facultad de Ingeniería
Industrial (CIPI) Perú. 1994. p: 272
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37. SOTO, M. Introducción a los Alcaloides. (Consultado el 30 de enero, 2013).
M
IC
Disponible en: http://www.scribd.com/doc/2902281/INTRODUCCION-A-LOS-
Q
UI
ALCALOIDES
[Revisado
el
31
de
enero
del
2013]
Disponible
en:
Y
Antioquia,
BI
O
38. ARANGO, G. Alcaloides y Compuestos Nitrogenados. 2008. Universidad de
AC
I
A
http://farmacia.udea.edu.co/~ff/alcaloides.pdf
RM
39. CASTILLO, E; CASTILLO, S; REYES, C. Estudio fitoquímico de Plukenetia
FA
volubilis L. y su efecto antioxidante en la lipoperoxidación inducida por
DE
Fe3+/ascorbato en hígado de Rattus rattus var. albinus. [En línea, actualizado en
TE
CA
junio del 2010, revisado el 19 de agosto del 2012] Disponible en:
http://revistas.concytec.gob.pe/pdf/scientia/v2n1/a02v2n1.pdf
BI
BL
IO
40. ENRÍQUEZ A, PRIETO E, DE LOS RÍOS E, RUÍZ S. Estudio farmacognóstico
y fitoquímico del rizoma de Zingiber officinale Roscoe “Jengibre” de la ciudad de
Chanchamayo - Región Junín. Perú. Rev. Med. Vallejiana. [en línea] [accesado el
26
de
julio
del
2011];
5(1).
Disponible
en:
http://revistas.concytec.gob.pe/pdf/rmv/v5n1/a07v5n1.pdf
41. CALLATA, M. CARRILLO, V, SIFUENTES, L. Evaluación del efecto
antidiarreico del extracto de las hojas de Caesalpina spinosa kuntza (Tara) en
40
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Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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ratas de laboratorio. [En línea, actualizado el 2011, revisado el 19 de agosto del
2012] Disponible en: http://es.scribd.com/doc/56465454/TRABAJO-D
42. GUTIERREZ, M. LIMACHI, G. GONZALES, E. et al. Control de Calidad del
Xanthium spinosum, planta medicinal expendida en la ciudad de La Paz, Bolivia.
BIOFARBO, jun. 2011, vol.19, no.1, p.15-21. ISSN 1813-5363.
A
43. COMUNIDADES DE DIVULGACIÓN CIENTÍFICO TÉCNICA. Propiedades
2013]
Disponible
UI
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en:
Q
marzo
M
IC
de los Alcaloides. Plantas Medicinales y Fitoterapia. [En línea] [Revisado el 18 de
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O
http://www.elergonomista.com/fitoterapia/alcaloidespropiedades.htm
Y
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I
A
Disponible en: http://es.scribd.com/doc/8972707/Alcaloides
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45. CARVAJAL, LYNDON. HATA, YOSHIE. Análisis Fitoquímico preliminar de
FA
hojas, tallos y semillas de Cupatá (Strychnos schultesiana krukoff). Revista
DE
Colombia Forestal Vol. 12: 161-170 / Diciembre 2009.[acceso 4 de Abril del
TE
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2013] Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/cofo/v12n1/v12n1a11.pdf
46. BUCAY MOROCHO, L. Estudio Farmacognostico y Actividad Antimicrobiana
BI
BL
IO
de la Violetilla (Hybanthus parviflorus) 2009. [Revisado el 31 de enero del 2013]
Disponible
en:
http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/123456789/207/1/56T00179.pdf
47. ORANTE, E. “Tamizaje fitoquímico de la especie vegetal guatemalteca
Quararibea yunckeri Standley Subsp. izabalensis W.S. Alverson ex Véliz
(Bombacaceae)” [En línea, actualizado en agosto del 2008 y revisado el 19 de
agosto del 2012] Disponible en: http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_2698.pdf
41
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48. BARBARE, J. Identificación de principios inmediatos: lípidos y prótidos. [En
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revisado
el
19
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agosto
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2012]
Disponible
en:
http://es.scribd.com/doc/25900878/Identificacion-Lipidos-y-Protidos
49. PEREIRA, S. VEGA, D. ALMEIDA, M. MORALES, G. Tamizaje fitoquímico
de los extractos alcohólico, etéreo y acuoso de las hojas de la Trichilia hirta L.
2013].
Disponible
M
IC
del
A
Química Viva, vol. 8, núm. 3, diciembre, 2009, pp. 192-199. [Acceso 5 de abril
en:
Q
UI
http://www.redalyc.org/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=86320633005
de
2001.
[Acceso
5
de
abril
del
2013].
Disponible
en:
Y
Junio
BI
O
50. MARTÍNEZ, A Saponinas Esteroides. Universidad De Antioquia. Medellín,
AC
I
A
http://farmacia.udea.edu.co/~ff/saponinas2001.pdf
RM
51. CLAVO, L. RAMÍREZ, S. Composición química de órganos de cobayos de
FA
altura. Parte experimental [En línea, revisado el 21 de agosto del 2012]
en:
DE
Disponible
TE
CA
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/tesis/salud/ramirez_v_s/cap2.pdf
52. KOTOWICZ, C. HERNÁNDEZ, L. CERDA-GARCÍA-ROJAS, C. VILLECCO,
BI
BL
IO
M. Absolute Configuration of Trixanolides from Trixis pallida. [En línea] J. Nat.
Prod, 2001, 64 (10), p 1326–1331. [Actualizado el 6 de Octubre del 2001,
Revisado
el
16
de
marzo
de
2013]
Disponible
en:
http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/np010191z
53. BOHLMANN, F. SUWITA, A. JAKUPOVIC, J. KING, M. ROBINSON, H.
Trixikingolides and germacrene derivatives from Trixis species. Institute for
Organic Chemistry, Technical University of Berlin, D-1000 Berlin 12, West
42
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Germany. Volume 20 [En línea] [Acceso 16 de marzo del 2013] Disponible en:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0031942200985492
54. RISCALA, E. CATALAN, C. SOSA, S. GUTIÉRREZ, A. HERZ, W. Trixane
derivatives from Trixis praestans. [En línea] Instituto de Química Orgánica,
Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia Universidad Nacional de Tucumán,
Disponible
M
IC
2013]
A
Ayacucho 491, 4000 S.M. de Tucumán, Argentina. [Revisado el 16 de marzo de
en:
Q
UI
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0031942288801572
BI
O
55. PEÑALOZA, D. MILLARES, J. Test de Reconocimientos de Fenoles
Y
Laboratorio de Química Orgánica III. [Revisado el 28 de febrero del 2013]
https://docs.google.com/document/preview?hgd=1&id=12e-
A
en:
AC
I
Disponible
RM
gcU0zthW86VjRx7zMGOLDv447Sy-twlpQ8L5Yn9A&pli=1
FA
56. RUÍZ, S. VENEGAS, E. CHÁVEZ, M. EUSTAQUIO, C. Identificación
DE
preliminar de los metabolitos secundarios de los extractos acuosos y etanólicos
TE
CA
del fruto y hojas de
Morinda citrifolia L. “noni” y cuantificación
espectrofotométrica de los flavonoides totales. UCV - Scientia 2(2) ,2010.
BI
BL
IO
[Acceso
17
marzo
2013].
Disponible
en:
http://revistas.concytec.gob.pe/pdf/scientia/v2n2/a02v2n2.pdf
57. RIBEIRO, A. PILÓ-VELOSO, D. ROMANHA, A. ZANI, C. Trypanocidal
Flavonoids from Trixis vauthieri. J. Nat. Prod., 1997, 60 (8), pp 836–838. [En
línea, Actualizado el 22 de Agosto de 1997, revisado el 16 de marzo de 2013]
Disponible en: http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/np970196p
58. PEREIRA, F. GUIMARÃES, L. CERUTTI, S. RODRIGUES, R. ARAUJO, C.
Preliminary Anti-ulcerogenic and Chemical Analysis of the Aerial Parts of Trixis
43
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divaricata Sprengel [En línea] Acta Farm. Bonaerense 24 (1): 80-4 (2005).
[Actualizado el 27 de noviembre del 2004, revisado el 16 de marzo de 2013]
Disponible
en:
http://www.latamjpharm.org/trabajos/24/1/LAJOP_24_1_2_2_1AP30TSUVH.pdf
59. SANDOVAL, M. Identificación y caracterización de alcoholes y fenoles.
5
Abril
2013].
Disponible
en:
M
IC
[Acceso
A
Química Orgánica II (1413). Universidad Nacional Autónoma de México.
Q
UI
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/practicas8a10QOII(1413)Coordinado
BI
O
raDraSandoval_21476.pdf
Y
60. GONZÁLEZ, J. Curso de Biomoléculas. Curso orientado a estudiantes de
[Acceso
11
marzo
2013].
Disponible
en:
RM
ANTRAQUINÓNICOS.
AC
I
A
Bioquímica y Biología Molecular. Universidad del País Vasco. GLICÓSIDOS
FA
http://www.ehu.es/biomoleculas/index.htm
DE
61. GARRIDO, A. TEIJÓN, J. BLANCO, D. VILLAVERDE, C. MEDOZA, C
revisado
TE
CA
Fundamento De Bioquímica Estructural. Editorial: Tébar. Pag: 67 [En línea,
el
21
de
agosto
del
2012]
Disponible
en:
BI
BL
IO
http://books.google.com.pe/books?id=avt8LFmp8q4C&pg=PA67&lpg=PA67&d
q=fundamento+de+la+reaccion+de+ninhidrina&source=bl&ots=Y3gUrkFgxC&si
g=RStFCiL1MrSx8xfoYatc6aeAxU&sa=X&ei=XRczUOCHF4SS9gTetIH4Aw&ved=0CCYQ6AEw
Aw#v=onepage&q=fundamento%20de%20la%20reaccion%20de%20ninhidrina
&f=false
62. NIGAM, A. AYYAGARI, A. Lab Manual in Biochemistry, Immunology and
biotechnology.
1era
edición.
Delhi:
McGraw-Hill.
2008.
p:
21.
44
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BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
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BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
ANEXO I
BOUCHER DEL EJEMPLAR DE HERBARIO DE LA ESPECIE DE Trixis
cacalioides
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ANEXO II
Extracción sucesiva del material vegetal para la aplicación de técnicas de
Tamizaje Fitoquímico.
30 - 50 g MATERIAL VEGETAL
EXTRAER CON 90 - 150 mL DE DICLOROMETANO POR
M
IC
A
MACERACIÓN DURANTE 48 HORAS A TEMPERATURA AMBIENTE
Q
UI
FILTRAR
EXTRACTO DE DICLOROMETANO
Medir el volumen y calcular la concentracción
A
Y
BI
O
RESIDUO SOLIDO
Secar y pesar
AC
I
EXTRAER CON 3 VECES EL PESO DEL RESIDUO EN
FILTRAR
DE
FA
RM
VOLUMEN CON ETANOL POR MACERACIÓN POR 48 HORAS
EXTRACTO ETANÓLICO
Medir el volumen y calcular la concentración
TE
CA
RESIDUO SÓLIDO
Secar y pesar
BI
BL
IO
EXTRAER CON 3 VECES EL PESO DEL RESIDUO EN
VOLUMEN CON ETANOL POR MACERACIÓN POR 48
HORAS
FILTRAR
RESIDUO SÓLIDO
Secar, pesar y desechar
EXTRACTO ACUOSO
Medir el volumen y calcular la concentrción
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Anexo III
UI
M
IC
A
ESQUEMA DE LAS REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO DICLOROMETANO
AC
IA
Y
BI
O
Q
EXTRACTO DE
DICLOROMETANO
FA
R
M
DIVIDIR EN FRACCIONES
15 mL (dividir en tres porciones)
ENSAYO DE SUDÁN
ENSAYO DE DRAGENDORFF, MAYER
CA
DE
5 mL
5 mL
5 mL
ENSAYO DE BALJET
ENSAYO DE LIEBERMAN-BUCHARD
(LACTONAS Y CUMARINAS)
(TRITERPENOIDES Y ESTEROIDES)
Y WAGNER
IO
TE
(ACEITES Y GRASAS)
BI
BL
(ALCALOIDES)
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Anexo IV
ESQUEMA DE LAS REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ETANÓLICO
EXTRACTO ALCOHÓLICO
CATEQUINAS
2 mL
ENSAYO DE
ENSAYO DE
RESINAS
FELHING
Q
2 mL
ENSAYO DE
2 mL
2 mL
ENSAYO DE
ENSAYO DE
ESPUMA
NINHIDRINA
(SAPONINAS)
(AMINOACIDOS)
O
ENSAYO DE
2 mL
BALJET
BI
1 mL
UI
M
IC
A
DIVIDIR EN FRACCIONES
(A. reductores)
ENSAYO DE
KEDDE
(CARDENÓLIDOS)
AC
IA
Y
(LACTONAS)
2 mL
DE
FA
R
M
EXTRACTO ALCOHÓLICO
2 mL
ENSAYO DE LIEBERMAN-
ENSAYO DE FeCl3
ESTEROIDES)
2 mL
ENSAYO DE
ENSAYO DE
ENSAYO DE
(FENOLES Y
BORNTRAGER
SHINODA
ANTOCIANINAS
TANINOS)
(QUINONAS)
(FLAVONOIDES)
BL
(TRITERPENOIDES Y
2 mL
2 mL
BI
BUCHARD
IO
TE
2 mL
CA
DIVIDIR EN FRACCIONES
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6 mL en 3 porciones
ENSAYO DE DRAGENDOF,
MAYER Y WAGNER
(ALCALOIDES)
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Anexo V
ESQUEMA DE LAS REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ACUOSO
EXTRACTO ACUOSO
M
IC
A
DIVIDIR EN FRACCIONES
2 mL
ENSAYO DE CLORURO FÉRRICO
(TANINOS)
Y
BI
O
Q
UI
6 mL en 3 porciones
ENSAYO DE DRAGENDORFF, MAYER Y
WAGNER
(ALCALOIDES)
2 mL
ENSAYO DE FEHLING
(A. REDUCTORES)
10 mL
ENSAYO DE MUCÍLAGOS
TE
CA
DE
2 mL
ENSAYO DE ESPUMA
(SAPONINAS)
FA
RM
AC
I
A
2 mL
ENSAYO DE SHINODA
(FLAVONOIDES)
BI
BL
IO
1 O 2 GOTAS
ENSAYO DE PRINCIPIOS
AMARGOS
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ANEXO VI
Fotografías de la investigación realizada en Extracto
Diclorometánico
RM
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Diclorometánico de raíz de Trixis cacalioides.
FA
Leyenda:
DE
1A = Dragendorff
2 = Baljet
BI
BL
IO
TE
CA
1B = Mayer
1C = Wagner
Liebermann Burchard
Sudán
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RM
AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Diclorometánico de tallos de Trixis cacalioides.
FA
Leyenda:
DE
1A = Dragendorff
2 = Baljet
BI
BL
IO
TE
CA
1B = Mayer
1C = Wagner
Liebermann Burchard
Sudán
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AC
I
A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Diclorometánico de hojas de Trixis cacalioides.
RM
Leyenda:
1C = Wagner
2 = Baljet
BI
BL
IO
TE
CA
DE
1B = Mayer
FA
1A = Dragendorff
Liebermann Burchard
Sudán
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A
Y
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Diclorometánico de flores de Trixis cacalioides.
AC
I
Leyenda:
1C = Wagner
RM
1A = Dragendorff
2 = Baljet
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
1B = Mayer
Liebermann Burchard
Sudán
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Fotografías de la investigación realizada en Extracto Etanólico
BI
O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Etanólico de raíz de Trixis cacalioides.
A
Y
Leyenda:
3 = Lactonas
4 = Borntrager
5 = Shinoda
6 = Resina
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Cloruro Férrico
Leyenda:
7 = Kedde
8 = Ninhidrina
9 = Antocianidinas
10 = Saponinas
11 = Fehling
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O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Etanólico de tallos de Trixis cacalioides.
BI
Leyenda:
3 = Lactonas
4 = Borntrager
5 = Shinoda
6 = Resina
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
A
Y
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Cloruro férrico
Leyenda:
7 = Kedde
8 = Ninhidrina
9 = Antocianidinas
10 = Saponinas
11 = Fehling
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Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Etanólico de hojas de Trixis cacalioides.
BI
O
Leyenda:
3 = Lactonas
4 = Borntrager
5 = Shinoda
6 = Resina
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
A
Y
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Cloruro férrico
Leyenda:
7 = Kedde
8 = Ninhidrina
9 = Antocianidinas
10 = Saponinas
11 = Fehling
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O
Q
UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Etanólico de flores de Trixis cacalioides.
BI
Leyenda:
3 = Lactonas
4 = Borntrager
5 = Shinoda
6 = Resina
BI
BL
IO
TE
CA
DE
FA
RM
AC
I
A
Y
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Cloruro férrico
Leyenda:
7 = Kedde
8 = Ninhidrina
9 = Antocianidinas
10 = Saponinas
11 = Fehling
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UI
M
IC
A
Reacciones químicas del Extracto Acuoso de raíz de Trixis cacalioides.
O
Q
Leyenda:
3 = Tricloruro férrico
4 = Fehling
5 = Saponina
6 = Shinoda
RM
AC
I
A
Y
BI
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Gelatina
BI
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DE
FA
Reacciones químicas del Extracto Acuoso de tallos de Trixis cacalioides.
Leyenda:
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Gelatina
3 = Tricloruro férrico
4 = Fehling
5 = Saponina
6 = Shinoda
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Q
UI
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A
Reacciones químicas del Extracto Acuoso de hojas de Trixis cacalioides.
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Leyenda:
3 = Tricloruro férrico
4 = Fehling
5 = Saponina
6 = Shinoda
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1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Gelatina
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DE
FA
Reacciones químicas del Extracto Acuoso de flores de Trixis cacalioides.
Leyenda:
1A = Dragendorff
1B = Mayer
1C = Wagner
2 = Gelatina
3 = Tricloruro férrico
4 = Fehling
5 = Saponina
6 = Shinoda
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ANEXO VII
REACCION DEL TRICLORURO FÉRRICO (para identificar fenoles y taninos)
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ANEXO VIII
REACCIÓN DE SHINODA (para identificar flavonoides)
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ANEXO IX
REACCIÓN DE LIEBERMAN - BURCHARD (para identificar esteroides)
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ANEXO X
REACCIÓN DE BORNTRÄGER (para identificar quinonas)
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ANEXO XI
REACCIÓN DE DRAGENDORFF (para identificar alcaloides)
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REACCIÓN DE MAYER (para identificar alcaloides)
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REACCIÓN DE WAGNER (para identificar alcaloides)
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