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GPT (ALT)
Ref: 4001755L
4001778L
4 x 50 mL
2 x 50 mL
CE
SIGNIFICADO CLÍNICO
Componentes del kit
CONTROL DE CALIDAD- CALIBRACIÓN
Las aminotransferasas (las transaminasas) constituyen un grupo de
Solo para diagnóstico in vitro
Se sugiere la realización de un control de calidad interno.
enzimas que catalizan la interconversión de los aminoácidos y los –
Revise la conformidad de la información obtenida con aquellos
oxo- ácidos mediante la transferencia de un grupo amino. Las
Reactivo (líquido):
R1
R2
previstos para validar los resultados.
transaminasas están ampliamente distribuidas en el tejido animal.
4 x 40 mL
1 x 40 mL
DESEMPEÑO DEL ANÁLISIS
Tanto la AST y como la ALT están normalmente presente en el
1 x 40 mL
1 x 20 mL
Linealidad
plasma humano, la bilis, el líquido cefalorraquídeo y la saliva, pero
El método es linear hasta 440 U/L
no se encuentran en la orina a menos que exista una lesión en el
COMPOSICIÓN EN EL ANÁLISIS:
Si se excede un ∆Abs/min de 0,200, esto sugiere la dilución de la
riñón. En la hepatitis viral y en otras formas de enfermedades del
Tris búfer 100 nM pH 7,15, L-alanina 500mM, 2-oxoglutarato
muestra 1 + 9 con solución salina y repetir el análisis,
hígado asociadas con la necrosis hepática, los niveles séricos de la
15 mM, NADH 0,18 mM., LDH ≤ 1700U/I
multiplicando el resultado por 10.
AST y de la ALT están elevados aún antes de que los signos clínicos
PREPARACIÓN DEL REACTIVO Y ESTABILIDAD
y los síntomas de la enfermedad aparezcan. Los niveles para ambas
Sensibilidad
enzimas pueden alcanzar valores tan altos como 100 veces el límite
Muestra de inicio (Procedimiento mono reactivo)
El límite de detección es de 0,.169 U/L
superior de referencia, aunque las que más frecuentemente se
Añada 10 mL del reactivo R2 al envase del reactivo R1.
encuentra son las elevaciones de 20 a 50 veces. La hepatitis
Interferencias
alcohólica tiene elevaciones más modestas. En infecciones
Estabilidad de la solución de trabajo:
No se observa ninguna interferencia bajo la presencia de:
hepáticas y en otras condiciones inflamatorias que afectan al
30 días a 28°C, lejos de fuentes de luz.
Hemoglobina ≤ 500mg/dL
hígado, la ALT es característicamente tan alta o mayor que la AST y
Reactivo al inicio (Procedimiento bi reactivo):
Bilirrubina
≤ 45mg/dL
la proporción ALT/AST la cual normalmente y en otras condiciones
Uso separado de reactivos listo para usar.
Lípidos
≤ 450mg/dL
es menor que 1 es mayor que la unidad. El cuadro en la hepatitis
Estabilidad: hasta la fecha de vencimiento etiquetada a 2-8°C;
tóxica es similar que la de la hepatitis infecciosa, con la actividad de
Estabilidad desde la apertura del vial:
Precisión
la ALT y la AST muy alta, la cual se observa en casos severos. Las
Úselo preferiblemente dentro de los 60 días a 2-8°C.
Intra ensayos (n=10) promedio (U/I) DE(U/I) CV%
elevaciones de hasta 20 veces el límite superior de referencia se
Muestra 1
49,29
0,35
0,71
pueden encontrar en mononucleosis infecciosa con el hígado
Los componentes del kit son estables hasta la fecha de
Muestra 2
132,15
0,57
0,43
comprometido y algunas veces valores más bajos en colestasis
vencimiento si se almacena en las condiciones indicadas,
Inter ensayo(n=20) promedio (U/I) DE (U/I) CV%
intrahepática. Se puede también observar los niveles altos en la
protegido de fuentes de luz directa y si no se contamina
Muestra 1
49,31
1,66
3,37
colestasis extrahepática, con los niveles tendiendo a ser mayores
durante el manipuleo. Almacene los reactivos sin mezclar y la
Muestra 2
132,85
4,28
3,22
en cuanto más crónica sea la obstrucción. Los niveles de las
solución de trabajo, desde su apertura, bien cerrados.
aminotransferasas observados en la cirrosis varían según el estado
MÉTODOS DE COMPARACIÓN
del proceso de la cirrosis, del rango de normal superior a algunas
PRECAUSIONES DE SEGURIDAD
Una comparación entre Hospitex y un producto comercialmente
cuatro a cinco veces de lo normal, con el nivel de actividad de la
Los reactivos pueden contener algunos componentes no
disponible da los siguientes resultados:
AST mayor que la actividad de la ALT. Las elevaciones de 5 a 10
reactivos y preservativos. Se sugiere manipularlos
GGT Hospitex = x
veces de ambas enzimas ocurren en pacientes con carcinoma
cuidadosamente, evitando el contacto con la piel.
GGT competidor= y
primario o metástasis del hígado, con la AST siendo usualmente
Realice el análisis de acuerdo con las guías generales de la
N= 126
mayor que la ALT, pero los niveles son frecuentemente normales
“Buenas Prácticas de Laboratorio” (GPL)
en los estadios tempranos de la infiltración maligna del hígado. Las
Regresión linear: y= 0,992x – 0,299 U/I
elevaciones leves o moderadas de ambas actividades de la AST y de
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Y MANIPULEO
Coeficiente de correlación r2 = 0,999
la ALT se puede observar después de la ingesta de alcohol, en
ELIMINACIÓN DE RESIDUOS
delirium tremens y después de la administración de varias drogas
Suero, plasma
tales como opio, salicilatos y ampicilina. También los niveles de
Extraiga la muestra con un mínimo de estasis venosas. La GPT
Este producto está hecho para ser usado en laboratorios
suero de amabas AST y ALT están elevadas cuando los procesos de
es estable hasta 4 días a 2-8°C o un mes a -20°C.
profesionales. Por favor consulte las regulaciones locales para
enfermedades afecta la integridad de la células del hígado, la ALT
una correcta eliminación de los desechos.
es la enzima más específica del hígado. Las elevaciones séricas de la
PROCEDIMIENTO DEL ANÁLISIS
S56: Eelimínese esta sustancia y su recipiente en un punto de
actividad de la ALT se observan raramente en otras condiciones
Muestra al inicio
recogida de residuos especiales o peligrosos.
que la enfermedad parenquimal hepática. Por otra parte, las
S57: use recipientes apropiados para evitar la contaminación
elevaciones de la actividad de la ALT persisten durante más tiempo
Longitud de onda : 340 nm
ambiental.
que la actividad de la AST. La medición de tanto la AST y la ALT
Paso óptico: 1cm
S61: evite la liberación en el medio ambiente. Refiérase a las
tiene algún valor en la distinción de la hepatitis de otras lesiones
Temperatura: 37°C
instrucciones especiales y las páginas de información de
paranquimales. Después de infarto al miocardio, aparece en el
Dispensación en cubeta de la solución de
1mL
seguridad
suero el aumento de la actividad de la AST, como se podría esperar
trabajo
REFERENCIAS
de la concentración relativamente alta de la AST en el músculo del
Pre incubación a 37°C por 5 minutos
corazón. Los niveles anormales de la AST se observan en más del
Muestra añadida
100µL
J.Clin. Chem. Clin. Biochem 8 (1970) 658; 10 (1972) 182 Tietz
97% de los casos de infarto al miocardio cuando se analizan
Mezcle ejecutando una lectura de absorbancia después de
Texbook of Clinical Chemistry, second Edition, Burtis-Aswood
muestras de sangre correctamente programadas. Los valores picos
90 segundos, incube a 37°C. Realice otras tres lecturas con
(1994)
de la actividad de la AST se alcanzan después de las 18 a 24 horas y
60 segundos de intervalo. Calcule el ∆Abs/Min.
HU Bermeyer-Methods of enzymatic analysis (1987)
los valores de la actividad caen dentro del rango normal al cuarto o
CCLM 2002; 40 (7);725-733, Shumann et al.-IFCC reference
quinto día, siempre y cuando no haya ocurrido un nuevo infarto.
Reactivos al inicio
procedure for aspartate aminotransferase
Los valores picos de la actividad de la AST están aproximadamente
Longitud de onda : 340 nm
proporcional a la extensión del daño cardíaco. Los incrementos
Paso óptico: 1cm
promedio son del orden de cuatro a cinco veces el límite superior
Temperatura: 37°C
FABRICANTE
de lo normal. Los niveles de la ALT están dentro de los límites
R1
1mL
normales o están solo ligeramente aumentados en el infarto al
Muestra añadida
125µL
Hospitex Diagnostic S.r.L.
miocardio sin complicaciones, debido a que la concentración de la
Pre incubación a 37°C por 5 minutos
actividad de la ALT en el musculo del corazón es solo una fracción
R2
250µL
LEYENDA DE LOS SÍMBOLOS
de la actividad de la AST. Los niveles de la actividad de la AST
Mezcle ejecutando una lectura de absorbancia después de
(ocasionalmente de la ALT) están aumentados en distrofia
90
segundos,
incube
a
37°C.
Realice
otras
tres
lecturas
con
muscular progresiva y dermatomiositis; que suelen estar normal en
solo para diagnostico in vitro
60 segundos de intervalo. Calcule el ∆Abs/min.
otros tipos de enfermedades musculares especialmente en
lote de fabricación
aquellos de origen neurogénico. La embolia pulmonar puede elevar
código
CÁLCULO
los niveles de la AST de dos a tres veces lo normal, y las elevaciones
almacenaje a intervalo de temperatura
de leves a moderadas se observan en pancreatitis aguda, lesiones
fecha de vencimiento
Realice el cálculo en unidades por litro, multiplicando el
de músculos comprimidos, gangrena y enfermedades hemolíticas.
precaución, lea las instrucciones adjuntas
∆Abs/min o el factor como se indica.
No es posible monitorear directamente las reacciones de las
lea las instrucciones
transaminasas, pero la ventaja del monitoreo continúo de los
La actividad de la GPT en U/L =∆Abs/min x 1746
análisis se pueden obtener por unión de la reacciones de las
transaminasa con la reacciones de la deshidrogenasa. Los ácidos –
Factor de conversión
oxo formados en la reacción de las transaminasas son medidas
La actividad de la GGT (U/L) x 0,0167 = la actividad de la GGT
Indirectamente por reducción de la enzima al correspondiente
(µkat/L)
ácido hidróxido, el cambio respectivo en la concentración del NADH
se vigila espectrofotométricamente.
VALORES ESPERADOS
PRINCIPIO DEL MÉTODO: Cinético-IFCC
GPT_01 REV00.21/11/2011
La enzima alanina aminotransferasas (EC 2.6.1.2; L-Alanina: 2Hombres: <45U/L
(<0,74 µkat/L)
oxoglutarato aminotransferasas, ALT o A1aAT; Glutamato piruvato
Mujeres:
<34U/L
(<0,56
µkat/L)
transaminasa, GPT) cataliza la reacción de la transaminasa entre la
Cada laboratorio debe establecer el rango de referencia para
L-alanina y la 2-oxoglutarato. La piruvato formada, se reduce a
su propia población de pacientes.
lactato en la presencia de la LDH. Según el proceso de las
reacciones, el NADH se oxida a NAD. La desaparición de la NADH
por unidad de tiempo se sigue por medición de la disminución en la
absorbancia a 340nm. El presente método se ha realizado de
acuerdo con el IFCC (2002)
Hospitex Diagnostics S.r.l. – Via Arno 23/25, 50019 OSMANNORO, SESTO FIORENTINI (FI) – www.hospitex.it. email:[email protected]