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Filogenia de Tristerix (Loranthaceae) basada en morfología y secuencias de ADN Angélica Cogollo Calderón, Facultad de Ciencias, Escuela de biología, UIS INTRODUCCIÓN El género Tristerix está compuesto por 11 especies, distribuidas a lo largo de la Cordillera de los Andes, desde Colombia hasta Chile. Una clasificación anterior, dividió a Tristerix en dos subgéneros, Tristerix y Metastachys con 2 y 9 especies respectivamente (Kuijt, 1988). Se construyó la filogenia utilizando una región nuclear (ITS), dos regiones del cloroplasto (atpB –rbcL y trnL-F) y la morfología. METODOLOGÍA Se trabajó con 14 caracteres morfológicos (Tabla 1). La filogenia de Tristerix se realizó con 10 de las especies que componen el género, ya que no se pudo amplificar el ADN de ningún individuo de T. secundus, una especie endémica de la Cordillera occidental de Colombia. Dos especies de Loranthaceae (Ligaria cuneifolia y Nothanthera heterophylla) de Sudamérica fueron utilizadas como grupo externo. Estas especies son cercanas a Tristerix, siendo Ligaria la especie hermana. Los códigos de acceso en Genbank para todas las secuencias se encontraron bajo los números: DQ442916 a DQ442986. Las secuencias nucleotídicas fueron alineadas con Muscle ver. 3.6 (Edgar, 2005). Los datos morfológicos se evaluaron con el criterio de parsimonia con el programa Winclada 1.00.08 (Nixon, 1999), hallando el soporte de Bremer (Tabla 7) mediante NONA 2.0 (Goloboff, 1993). A los arboles mas parsimoniosos resultantes se les hizo consenso estricto. Se realizo un análisis de sensibilidad para determinar de acuerdo al índice de incongruencia de Farris (ILD) el set de costos óptimo, utilizando el programa POY ver 4.0.2398 beta (Weelher et al, 2007), (Tabla 2). Se determinaron los modelos evolutivos para cada gen por medio del programa R ver 2.8.0 y se hizo un análisis bajo el criterio likelihood de cada gen con soporte boopstrap en phyml30. (Tabla 3). El análisis filogenético bayesiano fue realizado usando el programa MrBayes 3.1 (Huelsenbeck & Ronquist, 2001) para los datos moleculares y ET, finalmente se realizó un árbol consenso de la mayoría sólo con aquellos árboles representados en la zona estable de la curva. (Tabla 6) RESULTADOS Y DISCUSION: Para la búsqueda heurística bajo el criterio de parsimonia utilizando los 14 caracteres morfológicos se obtuvo por consenso estricto y de la mayoría un árbol de longitud 36. (Tabla 4). El mejor costo en el análisis de sensibilidad se obtuvo con costos ts1tv2g2. El modelo de evolución elegido para los tres genes fue JC69 (Tabla 5), este se utilizo para la construcción de la filogenia para cada gen con el criterio likelihood y los nodos fueron soportados con valores altos de boostrap (tabla 6), el modelo también es utilizado en inferencia bayesiana para la construcción de la topología utilizando la información molecular (topología adicional 1) y ET, para ambos se observo altas probabilidades posteriores para cada nodo. CONCLUSIONES: El presente trabajo corrobora la monofilia del grupo, con altos valores de soporte, similar a los estudios anteriores. El género Tristerix está constituido por dos clados, a pesar de presentar altos soporte en los análisis moleculares, poseen características morfológicas que los difieren, esto posiblemente a que tienen diferente distribución, correspondiente al norte y sur del continente sudamericano.. BIBLIOGRAFIA Amico, G, Vidal,-Russell, R, Nickrent, D. 2007. Phylogenetic relationships and ecological speciation in the mistletoe Tristerix (Loranthaceae): the influence of pollinators, dispersers, and hosts. American Journal of Botany 94(4): 558–567. Edgar, Robert C. 2004. MUSCLE: multiple sequence alignment with high accuracy and high throughput, Nucleic Acids Research 32(5), 1792-97 Goloboff, p. a., 1998 : nona v.2.0, program and documentation. Huelsenbeck JP & F Ronquist. 2001. MRBAYES: Bayesian inference of phylogenetic trees. Bioinformatics 17:754-755. Kuijt, J. 1988. Revision of Tristerix (Loranthaceae). Systematic Botany Monographs 19:61 pp. Wheeler, W.; Gladstein, O., 1996. POY V.3.0. Program and documentation, available at. ftp://ftp. Amnb.org/pub/molecular/poy. Stephane Guindon and Olivier Gascuel conceived the original PhyML algorithm. “A simple, fast and accurate algorithm to estimate large phylogenies by maximum likelihood” Guindon S., Gascuel O. Systematic Biology 52(5):696-704 ANEXOS Tabla 1 Tabla 2. ts1tv2g2 ts1tv2g4 ts2tv1g2 Morfología 58 58 58 Molecular 4269 7219 4199 E. Total 4844 8366 4769 ILD 0.1067 0.1302 0.1073 ILD = Longitud Evidencia total - ∑ Longitud sets individuales Longitud Evidencia total Tabla 3 A B C Análisis ML para el gen atpB-rbcL (A) ITS (B) y trnL-F (C). Los números sobre las ramas representan el soporte Bootstrap Tabla 4 Arbol MP, Consenso estricto, L=36, soporte de bootstrap, Ci: 61, Ri: 53 Tabla 5 Modelos evolutivos para cada gen atpB trnLF ITS Gen atp Model of nucleotides substitution: Log-likelihood: JC69 -2190.94419 ITS JC69 -1969.75081 trnLF JC69 -1982.352 Tabla 6 Bayes Topología arrojada por el análisis bayesiano en la que se muestra la probabilidad para cada clado. Tabla 7 Soporte de Bremer (Morfología)