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COMISIÓN NACIONAL DE INVESTIGACIÓN
CIENTfFICA Y TECNOLÓGICA
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GOBIERNO DECHILE
COMISION NACIONAL DE INVESTIGACION CIENCIA Y TECNOLOGIA VERSION BORRADOR
FECHA: 9/11/2009
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PROYECTO POSTDOCTORADO NO3080046
INVESTIGADOR RESPONSABLE: PABLO CESAR MUÑOZ CARVAJAL
-
FONDO NACIONAL DE DESARROLLO CIENTIFICO Y TECNOLOGICO (FONDECYT) Bernarda Morín 551, Providencia - casilla 297- y, Santiago 21
Telefono: 435 43 50 FAX 365 4435
Email: [email protected]
ti.
INFORME FINAL
PROYECTO FONDECYT POSTDOCTORADO
AÑO ETAPA: 2009
DURACIÓN: 2 años
N° PROYECTO: 3080046
TÍTULO PROYECTO: ESTADO OXIDATIVO NEURONAL REGULA LA METILACION DEL DNA EN PROMOTORES
DE GENES IMPORTANTES PARA LA PLASTICIDAD SINAPTICA, LA MEMORIA Y LA
ENFERMEDAD DE ALZHEIMER
DISCIPLINA PRINCIPAL: FISIOLOGIA BIOFISICA
GRUPO DE ESTUDIO: BIOLOGIA 2
INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE: PABLO CESAR MUÑOZ CARVAJAL
DIRECCIÓN : Gran Bretaña 1111
COMUNA: Playa Ancha
CIUDAD : Valparaíso
REGIÓN: V REGION
FONO: 032-2508186
EMAIL: [email protected]
INFORME
OBJETIVOS
Cumplimiento de los Objetivos planteados en el Proyecto. Recuerde que los objetivos del proyecto no se refieren a listar actividades
desarrolladas sino a los objetivos desarrollados
FUNDAMENTO
CUMPLIMIENTO
OBJETIVOS
No
Se encontró un efecto en la plasticidad sináptica,
TOTAL
Objetivo 1: Evaluar el efecto oxidativo en la
asociado a desferroxamina (DFO). Por otro lado,
expresión génica de BDNF y Reelin asociados a
se observó que la metilación de los genes de
desmetilación de sus promotores, en rebanadas de
BDNF y relina, disminuía en rebanadas
estimulación
sometidas
hipocampo de rata
tetanizadas, consistente con un aumento en la
tetánica.
expresión de los genes. Sin embargo, no se pudo
demostrar una relación causal entre el efecto
observado con DFO en PS y la metilación de los
genes estudiados.
Se realizaron los experimentos conductuales para
PARCIAL
2 Objetivo 2: Evaluar si cambios en el estado redox
estudiar cambios en la metilación de los genes
celular alteran la transcripción génica de BDNF y
BDNF y relina, sin embargo, no se detectaron
Reelin asociada a demetilación en sus promotores
cambios entre animales que sólo recibieron la
en hipocampo de ratas entrenadas en distintos
habituación y los que realizaron la tarea
paradigmas de aprendizaje espacial.
conductual, por lo tanto, no se intentó cambiar el
estado redox celular. Pese a lo anterior se obtuvo,
en el hipocampo de animales entrenados, una
notable correlación entre el índice de
reconocimiento y la metilación y la expresión de
estos genes.
Otro(s) aspecto(s) que Ud. considere importante(s) en la evaluación del cumplimiento de objetivos planteados en la propuesta
original o en las modificaciones autorizadas por los Consejos.
Considerando que, en la primera parte de este proyecto los resultados de electrofisiología no son concluyentes con respecto al efecto
oxidativo del DFO, extendimos este estudio usando otros antioxidantes tipo polifenoles, como son la catequina y el resveratrol. Este
trabajo que se está realizando en estos momentos y corresponde a la tesis de pregrado de las alumnas de la carrera de nutrición de la
Universidad de Valparaíso, srtas Constanza Molina y Claudia Legua, en la cual yo participo como tutor de tesis junto a Mariane
Lutz de la Facultad de farmacia de la Universiadad de Valparaíso.
Por otro lado, en la segunda parte de este proyecto, el paradigma conductual de reconocimiento de objetos no arrojó diferencias
significativas entre animales que sólo recibieron la habituación y los animales entrenados. Nosotros creemos que puede ser que la
prueba conductual no tiene mucho reforzamiento, lo cual resulta clave en procesos de aprendizaje, razón por la cual, en colaboración
con el Dr. Alexies Dagnino, de la Universidad católica del norte, la Serena, hemos decidido ampliar este objetivo usando otro
paradima conductual con más reforzamiento, como es el condicionamiento al miedo. En este protocolo conductual se le enseña al
animal a aprender una conducta de temor ante un golpe electrico (no dañino), en un contexto determinado. Este trabajo ha dado
origen a una fuerte colaboración con el grupo del Dr. Dagnino y ha permitido la incorporación del alumno de doctorado en
neurociencias de la Universidad de Valparaíso, Sr. Ignacio Negrón, para trabajar en metilación en tareas de conducta asociado a este
paradigma conductual.
En virtud de lo anterior, el desarrollo de este proyecto ha permitido la incorporación en las distintas partes de este, a estudiantes de
pregrado y postgrado, lo cual ayuda a la formación de nuevos profesionales en áreas afines a este proyecto FONDECYT.
RESULTADOS OBTENIDOS:
Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y /0 manuscritos enviados a
publicación con los objetivos específicos. En la sección Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la
evaluación.
La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Anal o Verdana).
Considerando las sugerencias desprendidas del primer informe de avance, centramos nuestra atención
para el presente año, en los dos primeros objetivos de este proyecto, pues los evaluadores consideraron que era
mejor dedicarse a completar algunos de los resultados previamente reportados, con el fin de garantizar artículos
de publicación.
La hipótesis general del proyecto es:
ROS generadas durante actividad neurona¡ activan la transcripción de los genes BDNF, relina
necesarios para la instauración de la PS y la formación de la memoria promoviendo desmetilación oxidativa en
sus secuencias promotoras.
Los objetivos específicos y sus logros se detallan a continuación:
Objetivo 1: Evaluar el efecto oxidatívo en la expresión génica de BDNF y Reelin asociados a
desmetilación de sus promotores, en rebanadas de hipocampo de rata sometidas estimulación tetánica.
En el pasado informe reportamos que un agente desmetilante produce un fuerte efecto en la LTP, luego
de veinte de aplicado el protocolo de estimulación para inducir la LTP. Sin embargo, el efecto lo encontramos a
tiempos más tempranos que lo que esperaríamos, para un efecto netamente transcripcional. Lo cual nos llevó a
realizar el experimento aplicando el agente desmetilante dos horas después de inducida la LTP.
Sorprendentemente, el agente no tuvo el mismo efecto que a los veinte minutos (Figura 1), sugiriendo
fuertemente que los mecanismos epigenéticos poseen una ventana temporal o algo similar a un periodo crítico en
el cual son sensibles a alteraciones. Un efecto similar fue reportado para los inhibidores trancripcionales en los
cuales sólo tienen un efecto a tiempo temprano. Este resultado es de sumo interés, pues recientemente fue
reportado, en otro modelo y en otra problemática, que la metilación se realizaba de manera cíclica y transitoria.
Más aún, existía un efecto a tiempo muy cortos (dentro de los minutos) lo cual es consistente con los datos
obtenidos. Este resultado dio origen a los experimentos que se están realizando actualmente, estudiando los
cambios en la metilación a tiempos más cortos de los propuestos originalmente (dos horas). Estos experimentos
nos darán una visión más integral del papel jugado por los cambios en la metilación durante la PS.
Por otro lado se extendió el estudio de la metilación a otros tipos de PS, como es la depresión de largo término,
inducida por 900 pulsos despolarizante aplicados a un a frecuencia de 1 Hz. Encontramos que en esta forma de
PS evaluada no se observan cambios significativos en la metilación (Figura 2).
Para demostrar que DFO tiene un efecto en la PS y en la metilación se realizaron experimentos tratando
las rebanadas previamente con lmM de DFO. Fue reportado en el pasado informe que DFO producía un notable
efecto en la transmisión sináptica basa¡ y que era bloqueado por antagonista del NMDAR (figura 9, Primer
informe). Se realizaron experimentos adicionales de pulsos pareados para ver que no fuera un problema
presináptico (Figura 3). Se encontró que DFO no afecta el componente presináptico.
DE manera adicional, para mostrar que el DFO por si sólo no tenía un efecto en las respuestas sináptícas se
aplicó 1 mM en ausencia de estimulación eléctrica y se encontró que la depresión inducida por DFO no se
producía y que la línea base no era alterada (Figura 9A, Primer informe), sugiriendo que DFO para ejercer su
acción necesita de NMDAR funcionales y activos.
Bajo estas condiciones experimentales, aplicación de DFO en ausencia de estimulación (para evitar
cambios en la transmisión sináptica basal) se evaluó el efecto del DFO en la PS. Como muestra la figura 5, la LTP
fue fuertemente alterada con el tratamiento con DFO.
Al evaluar cambios en la metilación de los genes de relina y BDNF luego de un pre-tratamiento con 1 mM de
DFO, encontramos que este quelante de hierro no tiene un efecto significativo (figuras 6, 7, 8 y 9).
De igual manera se usó otra estrategia para evaluar el efecto oxidativo en la metilación de los genes
señalados. Como fue reportado en el informe de avance previo (Anexo carta enviada a los consejos),
incubaciones con peroxido de hidrógeno producen una significativa disminución en los niveles de metilación en
ambos genes (figuras 6, 7, 8 y 9). Sin embargo, no fue observado que el DFO tuviese un efecto en las variaciones
observadas con peróxido, en todas las áreas del hipocampo evaluadas, excepto para el gen de relina en la zona
CA3, en la cual DFO sí tiene un efecto y puede revertir a niveles basales los cambios inducidos por peróxido
(Figura 9).
En estos momentos se trabaja en la realización de experimentos con DFO a tiempos mayores que una
hora, para estudiar si el DFO no pueda ejercer una acción en la metilación debido a que posiblemente el efecto
esperado se logra con incubaciones más largas. Se trabaja en el modelo de cultivos organotípicos (figura 10).
Hemos podido mostrar que nuestros cultivos pueden mantenerse al menos 14 días en cultivo, presentando alto
porcentaje de neuronas viables. Como muestra la figura 10 B, cultivos controles de 14 días presentan pocas
neuronas marcadas con ioduro de propidio, utilizado como marcador de células muertas. Al contrario, cuando
cultivos son tratados con concentraciones neurotóxicas de peróxidos se logra observar gran cantidad de células
muertas.
Objetivo 2: Evaluar si cambios en el estado redox celular alteran la transcripción génica de BDNF y relina,
asociada a desmetilación en sus promotores, en hipocampo de ratas entrenadas en distintos paradigmas
de aprendizaje espacial
En esta parte del proyecto, realizamos los experimentos necesarios para intentar publicar los hallazgos
reportados en el primer informe. Considerando que no fuimos capaces de observar cambios en los niveles de
metilación entre los animales entrenados y los que sólo recibieron habituación se aumentó el número de animales
para incorporarlos en los análisis de metilación e índice de reconocimiento.
Evaluamos no sólo en la corteza perirhínal, sino que también realizamos los estudios con POR sensibles
a la metilación en regiones hipocampales de os animales que realizaron la prueba conductual de reconocimiento
de objetos. Encontramos en hipocampo, una fuerte correlación negativa entre la immunoreactividad de BDNF y el
índice de reconocimiento de objetos, medido como el tiempo de exploración del objeto nuevo menos el tiempo
explorado del objeto familiar (D2) (figura 12), mientras que en la corteza perirhinal fue posible observar una fuerte
correlación positiva entre estos dos parámetros, sugiriendo que BDNF puede tener una función diferencial en este
tipo de memoria.
De igual manera, encontramos una fuerte correlación positiva entre los niveles de metilación del gen de
BDNF y el índice de reconocimiento (D2) consistente con lo observado a nivel de expresión. Sin embargo, en la
corteza perirhinal no fue posible encontrar correlación entre los parámetros evaluados. Estos datos sugieren que
al menos en hipocampo es posible encontrar regulación de la expresión génica por mecanismos epigenéticos
asociados a metilación.
Del primer objetivo fue posible incluir algunas figuras generadas por este proyecto, y enviadas a la
revista Journal Biological Chemistry (JBC), dentro de un contexto general que estudia los mecanismos a través
del cual la desferroxamina (DFO), entendiéndose como un agente antioxidante, modifica la plasticidad sináptica.
El artículo que hoy está en vías de ser publicado, luego de realizar algunos controles solicitados por los
evaluadores y que se están realizando en la actualidad, aporta evidencia de la participación de las especies
reactivas del oxígeno generadas por hierro en la PS, por un mecanismo que depende del calcio.
Los evaluadores encontraron que el efecto del DFO en la transmisión sináptica y en la LTP (resultados
reportados en la figura 9A del pasado informe y en la figura 4A del presente) era potencialmente interesante, sin
embargo, se hace necesario demostrar que no es un efecto en el receptor de NMDA por lo que se realizó el
experimento para evaluar las respuestas dependiente de NMDAR usando un bloqueador de los receptores de
AMPA (Figura 3). Además se está actualmente otros experimentos solicitados para confirmar que no es un efecto
presináptico.
Se cumpliría con el objetivo parcial de mostrar que DFO tiene un efecto en PS. No obstante, para
demostrar que tiene un efecto a nivel de las metilaciones se hace necesario más trabajo, pues no fuimos capaces
de mostrar un efecto claro del DFO en las metilaciones a diferencia de lo propuesto originalmente.
Por otro lado, del segundo objetivo, se aumentó el número de individuos para los estudios conductuales y
además se incluyó en el análisis de metilación y de expresión al hipocampo, zona del cerebro que también está
involucrada en la memoria de reconocimiento de objetos, sobre todo del componente contextual de este tipo de
memoria. Los hallazgos encontrados dieron origen al manuscrito enviado a la revista Learning and Memory, que
actualmente se encuentra en revisión y que estamos a la espera de los comentarios de los evaluadores.
DESTAQUE OTROS LOGROS DEL PROYECTO TALES COMO:
- Estadías de investigación.
- Actividades de difusión y/o extensión en la temática del proyecto.
- Cualquier otro logro no contemplado en los ítem anteriores y que Ud. quiera destacar.
La extensión máxima de esta sección es de 1 página (letra tamaño 10, Anal o Verdana).
• Con respecto a la difusión de la temática del proyecto, he realizado labores esporádicas
de docencia de pregrado ad honorem en la Escuela de Psicología, facultad de medicina y en la
Facultad de Ciencias. Además he participado también en docencia de postgrado, realizando
clases de Memoria, aprendizaje y plasticidad sináptica, y organizando un seminario bibliográfico
en tópicos pertinentes al proyecto, para el Programa de Doctorado en Neurociencia de la
Universidad de Valparaíso.
• He sido invitado por la Universidad Mayor de Perú a participar en un simposio de
neurociencias molecular ha desarrollarse en Enero del 2010, en el cual se presentará parte
importante de este proyecto
• El presente proyecto ha ayudado a una estadía de investigación en el laboratorio del Dr.
Alexies Danino, en la Universidad Católica del norte, la Serena, al estudiante de doctorado
Ignacio Negrón, el cual finalmente realizará una tesis de doctorado, cuyos tutores seremos yo y
el Dr. Dagnino. Su objetivo fue aprender nuevos paradigmas conductuales que permitan
extender el estudio de las metilaciones propuesto en el presente proyecto. El ha tenido
resultados muy promisorios que han dado origen a un proyecto de tesis que será defendido en
los próximos días
• La temática de este proyecto y ha despertado un gran interés de otros miembros de la
comunidad científica, de tal manera que ha permitido, la formulación y presentación a concurso
público de nuevos proyectos de investigación relacionados con el tema:
• En cuanto a regulación redox y en colaboración con el Dr. Sebastián San Martín, Facultad
de medicina, Universidad de Valparaíso, se presentó un FONDECYT regular titulado "Maternal
nutritional deficit and methylation of gene related to redox state on placenta and fetal brain.
Consequences in the brain development and neural plasticity".
• En colaboración con el Dr. Sebastián San Martín, Facultad de medicina, Universidad de
Valparaíso, se presentó un proyecto de la fundación MAPFRE titulado "Déficit nutricional materno
y su relación con daño oxidativo en el cerebro fetal y alteraciones en proteínas relacionadas con
la plasticidad neurona¡ ".
• En colaboración con investigadores de Pontificia Universidad Católica de Valparaíso y del
Centro regional de estudios en alimentación saludable (CREAS), se formuló y se presentó un
proyecto MAPFRE titulado: "Desarrollo de un proceso de extracción supercrítica de antioxidantes
en maqui berry y evaluación de sus propiedades saludables en funciones cognitivas en ratas" en
el cual se pretende estudiar el efecto antioxidante de una variedad de berries en procesos
cognitivos en ratas, utilizando las metodologías incorporadas y desarrolladas en este proyecto.
• Finalmente, junto otros miembros del centro de neurociencias de Valparaíso (John Ewer
(Director), Kathleen Whitlock, Adrian Palacios, Oliver Schmachtenberg, Ana María Cárdenas) se
formuló y presentó un proyecto anillos titulado: Mecanismos de Adaptación e Integración en el
Sistema Nervioso" en el cual se incorporó la temática de la regulación epigenética de la
plasticidad sináptica.
Finalmente coon la ayuda de este proyecto se han finalizado exitosamente las sgutes tesis:
Paola Paredes y Laura Sanchez, estudiantes de tecnología médica, facultad de medicina de la
Universidad de Valparaíso. Título de la tesis: "Evaluación del efecto oxidativo en la expresión
génica del Factor Neurotrófico derivado de Cerebro (BNDF) y Relina (RLN) por cambios en el
estado de metilación en sus promotores, en rebanadas de hipocampo de ratas".
Pablo Lizana, estudiante de magíster en neurociencias, facultad de ciencias, Universidad de
Valparaíso. (colaboración con el Dr. Palacios). Título de la tesis: "Cambios en el estado de
metilación en el gen de relina en plasticidad sináptica."
Maurico Aspé y Sebastián Contreras, estudiantes de Psicología, facultad de medicina,
Universidad de Valparaíso. (colaboración con el Dr. Palacios). Título de la tesis: "Cambios en el
estado de metilación en el promotor del exón 1 del gen de BDNF y en la expresión de BDNF
asociados a la Tarea de Reconocimiento Espontáneo de Objetos en corteza perirrinal de ratas
Sprague dawley ".
RESUMEN:
Describa en forma precisa y breve el tópico general del proyecto, sus metas y objetivos y los
resultados alcanzados. Utilice un lenguaje apropiado para la comprensión del público no
especialista en el tema. Esta información podrá ser difundida. La extensión máxima de esta
sección es de 1 página (letra tamaño 10, Anal o Verdana).
La memoria de largo plazo (MLP) a diferencia de la de corto plazo, involucra nuevos ARN mensajeros y
síntesis proteica de genes como BDNF y relina. La plasticidad sináptica (PS), definida como los cambios
funcionales y estructurales que ocurren en la sinapsis en respuesta a determinada actividad neurona¡, es
ampliamente aceptado ser el sustrato celular y molecular de la memoria y el aprendizaje. Las especies
reactivas del oxígeno juegan un importante papel modulando cascadas de señalización que conllevan a
activación de factores de transcripción (FT) claves para PS y memoria. Aunque la esencialidad de los FT,
coactivadores y el calcio en la adquisición y manutención de los patrones de expresión génica ha sido
mostrada, los mecanismos de regulación epigenética asociada a metilaciones en el ADN, interfiere con la
capacidad de los FT de unirse a elementos regulatorios, resultando en una regulación negativa de la
transcripción. Consistente con esta idea se ha mostrado que los niveles de metilación son regulados en el
hipocampo de un animal sometido a condicionamiento contextual al miedo. En este proyecto, estudiamos la
participación de mecanismos oxidativos en la metilación y activación de genes involucrados en memoria y
aprendizaje. A través de técnicas moleculares, electrofisiológicas y conductuales se trabajó en la siguiente
hipótesis:
ROS generadas durante actividad neurona! activan la transcripción de los genes BDNF, re!ina necesarios para
la instauración de la PS y la formación de la memoria promoviendo desmefilacíón oxidafiva en secuencias
promotoras.
Se analizaron los siguientes objetivos:
Objetivo 1: Evaluar el efecto oxidativo en la expresión génica de BDNF y Reelin asociados a desmetilación de
sus promotores, en rebanadas de hipocampo de rata sometidas a estimulación tetánica.
Objetivo 2: Evaluar si cambios en el estado redox celular alteran la transcripción génica de BDNF y relina
asociada a desmetilación en sus promotores en hipocampo de ratas entrenadas en distintos paradigmas de
aprendizaje.
Se estandarizó el modelo de rebanadas de hipocampo estimuladas eléctricamente en la región de
CA3, induciendo potenciación de largo término (LTP) en la sinapsis de la región de CAl. Este aumento es
ampliamente aceptado (y en algunos casos demostrado) que ocurre en animales que desarrollan tareas
conductuales dependientes del hipocampo. Se dispone de un excelente modelo para estudiar cambios
asociados a memoria y aprendizaje.
Los hallazgos encontrados nos permiten decir que los mecanismos epigenéticos asociados a
metilación de ADN, juegan un papel importante en la PS. Más aún ciertos experimentos nos parecen sugerir
que estos cambios tienen una ventana temporal.
Veinte minutos después de inducir la LTP, la aplicación de un agente que altera la metilación del ADN,
produce un fuerte impacto en la persitencia de la LTP, cayendo a los niveles basales luego de una hora de
aplicada la droga. Sin embargo, al aplicar la droga dos horas después de inducida la LTP, no se observó la
caída observada anteriormente, lo cual está sugiriendo que la programación epigenética es sensible sólo en
una ventana temporal.
Consistente con lo anterior, usando PCR sensible a la metilación, observamos que microdisecciones
de la región tetanizada presentan una menor metilación en los genes de BDNF y RLN comparado con
rebanadas que no fueron estimuladas, dos horas después de inducida la LTP.
Para estudiar si existe un componente oxidativo, se utilizó desferroxamina (DFO), un quelante de
hierro que previene la generación de radicales libres, evaluando su efecto en PS. Encontramos que DFO no
afecta la facilitación por pulsos pareados, pero sí tiene un efecto fuerte impacto en la LTP. No obstante, al
evaluar cambios en la metilación de los genes de relina y BDNF luego de un pre-tratamiento con DFO,
encontramos que este quelante de hierro no tiene un efecto significativo.
Usando otra estrategia para evaluar el efecto oxidativo en la metilación de los genes señalados, se
incubaron rebanadas con peroxido de hidrógeno, encontrando una significativa disminución en los niveles de
metilación en ambos genes. Sin embargo, no fue observado que el DFO tuviese un efecto en las variaciones
observadas con peróxido, en todas las áreas del hipocampo evaluadas, excepto para el gen de relina en la zona
CA3, en la cual DFO SÍ tiene un efecto y puede revertir a niveles basales los cambios inducidos por peróxido.
Al someter a animales a una prueba de memoria de reconocimiento de objetos, encontramos en
hipocampo, una fuerte correlación positiva entre los niveles de metilación del gen de BDNF y el índice de
reconocimiento (D2) consistente con lo observado a nivel de expresión. Sin embargo, en la corteza perirhinal no
fue posible encontrar correlación entre los parámetros evaluados.
En resumen, los datos de este proyecto sugieren que al menos en hipocampo es posible encontrar
regulación de la expresión génica por mecanismos epigenéticos asociados a metilación, sin embargo la
dependencia de estado redox neurona¡ es menos clara y necesita trabajo adicional.
INFORME DE EVALUACION DEL (DE LA) INVESTIGADOR(A) PATROCINANTE
NOMBRE: Dr. Adrián Palacios
El presente informe de segundo año presenta un importante avance respecto a lo originalmente planificado por
el Dr; munoz. Se pudo evaluar el efecto de la metilación de genes reguladores de la capacidad de memoria en
rata, si bien los efectos no son tan prominentes como los esperados se está implementando diversas
soluciones conductuales que puedan mejor cuantificar los efectos, algunos resúmenes y un articulo
actualmente en revisión dan cuenta de este progreso. Al mismo tiempo Pablo logro consolidar una serie de
colaboraciones sobre su línea de mecanismos de la plasticidad neurona¡, logro motivar a nuevos estudiantes a
incorporarse a esta línea y un hito importante es que Pablo gano un concursor como investigador de planta en
un centro de investigación regional CREAS que está incorporando las lineas de investigación de Pablo a sus
aplicaciones en cuanto a los efectos y beneficios de alimentos naturales (ver lista de proyectos presentados).
Pablo también ha sido asociado al Centro de Neurociencia de Valparaíso como investigador joven y una serie
de proyectos se han presentados para financiamiento. Mi opinión es que las metas del proyecto se han
cumplido en gran parte y que el resultado de las evaluaciones de los artículos en revisión y en preparación nos
diran el nivel de maduración alcanzado por la línea de investigación que liderada por Pablo
Firma Investigador(a) Patrocinante
cc3)
Fecha: 6 de Noviembre, 2009
PRODUCTOS
ARTÍCULOS
Para trabajos en Prensa/ Aceptados/Enviados adjunte copia de carta de aceptación o de recepción.
N°:
Autor (a)(es/as):
Nombre Completo de la Revista :
Título (Idioma original):
1
Muñoz, P., Humeres, A., Kirkwood, A., Hidalgo, C., and Núñez, M.T.
The Journal of Biological Chmistry
IRON MEDIATES NMDA RECEPTOR-DEPENDENT STIMULATION OF THE
CALCIUM RESPONSIVE ERKI/2 PATHWAY AND HIPPOCAMPAL SYNAPTIC
PLASTICITY
ISI
Indexación:
ISSN:
Año:
Vol.:
N°:
Páginas
Estado de la publicación a la fecha: Enviada
Otras Fuentes de financiamiento, si las hay:
Millennium Scientific Initiative (ICM-P05-001-F, to MTN), from Fondo de Centros de Excelencia en Investigación (FONDAP
1501006, to CH)
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Archivo Asociado al articulo:
si
Manuscrito_l.pdf
http:/,'evalcyl.conicyt.d!ínforrne_academico/iridex.php/iflvestigadOr/f4_artiCUIOS/deSCargali 2027384/3080046/20094820
N°:
Autor (a)(es/as) :
Nombre Completo de la Revista:
Título (Idioma original):
2
Muñoz, P., Aspe, M., Contreras, L.S., and Palacios, A.G.
Learning and Memory
ROLE OF DNA METHYLATION DURING RECOGNITION MEMORY IN
HIPPOCAMPUS AND PERIRHINAL CORTEX IN RATS.
ISI
Indexación :
ISSN:
Año:
Vol.:
N°:
Páginas:
Estado de la publicación a la fecha: Enviada
Otras Fuentes de financiamiento, si las hay:
Envía documento en papel:
Archivo Asociado al artículo:
si
Manuscrito_2.pdf
http:Jlevalcyt.conicytcl!informc_academico/index.php/iflVeStigadOr/f4_artiCUlOS/deScargall 2027384/3080046/2009/4821
OTRAS PUBLICACIONES
Sin información ingresada.
CONGRESOS
N°:
Autor (a)(es/as)
Muñoz, P., Paredes, P., Sanchez. L., and Palacios, A.
Título (Idioma original):
Reactive Oxygen species induce hypermethylation of genes involved in synaptic plasticity.
Nombre del Congreso
VI Meeting of Society for free radical biology and medicine, South American Group
Santiago.
País
CHILE
Ciudad:
Santiago
Fecha Inicio
27/09/2009
Fecha Término
30/09/2009
Nombre Publicación
Año:
Vol.:
NO:
Páginas
Envía documento en papel : si
Archivo Asociado:
Congreso_1.pdf
hup://cvalcyt.conicyt.cl/iriformcacademico/indcx.php/investigador/f4. coflgreSoS/deScarga/t 2027384/3080046/2009/7025
Autor (a)(es/as) :
2
Muñoz, P., Lizana, P., Aspé, M., Contreras, S., Negrón, 1., Paredes, P., Sanchez. L., and
Palacios, A.
Título (Idioma original) :
Cambios dinámicos en la metilación de genes relacionados con plasticidad sináptica y la
memoria (Dynamic changes in DNA methylation of genes involved in synaptic plasticity and memory)
SOCIEDAD DE BIOLOGIA CELULAR DE CHILE XXIII REUNION ANUAL
Nombre del Congreso:
País:
Ciudad:
CHILE
Santiago
Fecha Inicio :
01/11/2009
Fecha Término:
05/11/2009
Nombre Publicación
Año:
Vol.:
N°:
Páginas:
Envía documento en papel:
si
Archivo Asociado :
Congreso_2.pdf
ANEXOS
N°:
1
Archivo Asociado:
ANEXO_l_FIGURAS_.pdf
http://evalcyt.conicyt.cl/informe_academi col¡ ndex.php/investigador/f5_anexOs/desCargall 202734/3080O462009i(SI 7
N°:
Archivo Asociado :
2
JBC_2009_068593_--Manuscript_Decision.pdf
http;//evalcyt.conicyt,cl/informe_academico/indcx.php!investigador/Í5_anexos/descargall 2027384/3080046!2009168 19
N°:
Archivo Asociado:
3
MS_ID_LEARNMEM_2009_0 16758 .pdf
A continuación se detallan los anexos fisicos/papel que no se incluyen en el informe en formato PDF.