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positiva o permaneciendo incoloro cuando es negativa. La
intensidad del color es directamente proporcional a la cantidad de Ag presente en la muestra. El formato diseñado utiliza
una solución diluyente de muestras que posee un detergente
para romper los complejos inmunes presentes en la muestra y
exponer los antígenos del HCV a los monoclonales durante el
desarrollo de la prueba, eliminando así el pretratamiento de la
muestra.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Mediante el cálculo matemático del promedio de la D.O.
del control positivo y negativo, validados por el protocolo de
la prueba y multiplicados por el factor de corrección, se obtiene el valor numérico del punto de corte. Las lecturas de la D.O.
de cada muestra cuyo valor sea igual o mayor al punto de corte
se considera inicialmente reactiva para la presencia de HCVAg,
los valores de las muestras menores al punto de corte se consideran negativas para la presencia de HCVAg.
Toda muestra cuyo resultado sea inicialmente reactivo debe
correrse nuevamente por duplicado, de persistir la reactividad
debe hacérsele la prueba de neutralización con el reactivo
Antigen Confirmatory Test, para la confirmación del resultado positivo. Si en nuevo montaje la muestra es no reactiva se
informa como negativa.
BIBLIOGRAFÍA
1. Choo Q.-L., Weiner A.J. Overby L.R., Kuo G., Houghton M.
Hepatitis C virus: the major causative agent of viral non-A, nonB hepatitis. Br. Med Bult 1990; 46: 423-31.
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whith different hepatitis C virus genotypes. Gut 1996; 39: 87680.
VAGINOSIS
Lilián Ximena
La vagina es un sistema fisiológico complejo que se mantiene en equilibrio gracias a numerosos factores. En ausencia
de estrógenos (infancia y menopausia) el epitelio vaginal es
atrófico y delgado. Los estrógenos hacen que el epitelio vaginal
se torne más grueso y se diferencie en tres capas basal intermedia y superficial. Bajo la influencia de los estrógenos se forma
en las células vaginales glicógeno que se rompe en ácido láctico por acción de enzimas y la fermentación. La ruptura del
glicógeno lo realizan los lactobacilos productores de peroxidasa. Esto hace que el pH vaginal normal sea 3.8 -4.4 creando un escudo protector que inhibe el crecimiento de
Gardnerella, Streptococos y anaerobios.
Corrales
Mantilla*
Durante la relación sexual la transudación del epitelio
vaginal produce una elevación del pH que es reforzada por el
depósito del semen alcalino.
La secreción vaginal tiene una composición compleja que
incluye moco cervical y trasudados a través de la pared vaginal.
La cantidad y composición pueden variar de acuerdo a la edad,
fase del ciclo menstrual, actividad sexual, contraceptivos, embarazo y estado emocional.
La secreción vaginal normal es:
Esta acidez vaginal se afecta adversamente por la producción en exceso de moco cervical alcalino, adenosis vaginal y la
sangre menstrual.
-
*
-
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Bacterióloga. Universidad Javeriana.
Inodora.
Clara o blanca.
Viscosa.
Homogénea o algo floculenta con elementos aglutinados.
pH ácido menor de 4.5
No resbala durante el examen del espéculo.
No tiene polimorfonucleares.
Laboratorio Actual • Año 17 • No. 33
e
Noviembre de 2000
La flora vaginal normal es:
-
-
-
-
Predominan los bacilos que producen peróxido.
Se puede encontrar Gardnerella de un 5% a un 60%.
Se puede encontrar Mycoplasma hominis de un 15% a
un 30%.
Tiene concentraciones balanceadas de organismos facultativos y anaeróbicos.
Las investigaciones muestran que el 95% de toda la descarga vaginal o infección proviene de cinco condiciones en
orden de frecuencia:
-
Vaginosis bacteriana.
Vulvovaginitis por Candida.
Cervicitis (frecuentemente ocasionada por Chlamydia
trachomatis, virus de herpes simple, o Neisseria
Gonorrhoeae).
Secreciones normales pero excesivas.
Vaginitis por Trichomonas.
La vaginosis bacteriana es una infección polimicrobiana
de la vagina con síntomas variados como aumento del flujo,
mal olor y en algunas ocasiones prurito. Se conoce como
vaginosis ya que no hay respuesta inflamatoria significativa.
En general es leve, sin embargo puede causar complicaciones
como: enfermedad pélvica inflamatoria, infecciones obstétricas, endometritis posparto, infecciones del tracto genitourinario
femenino y masculino.
Cuando por diferentes factores como el semen, actividad
sexual, contaminación con la flora rectal, antibióticos, uso de
dispositivos intrauterinos se disminuye el n ú m e r o de
Lactobacillus y se disminuye la producción de ácido láctico
creando un aumento del pH vaginal; de esta formá se produce
el desequilibrio en la flora normal y prolifera la Gardnerella
vaginalis y otros anaerobios presentándose los síntomas de la
vaginosis.
La gardnerella produce succinato que es necesario para la
proliferación de los anaerobios. Se cree que en el tracto intestinal es donde se originan los organismos encontrados en la
vagina de mujeres con vaginosis bacteriana.
Presencia de células guía que representen del 10% al
20% de las células epiteliales vaginales.
Prueba de aminas positiva.
Coloración de Gram.
La presencia de cuando menos tres de los cinco criterios
clínicos anteriores permiten hacer un diagnóstico exacto y rápido de la Vaginosis Bacteriana.
A s p e c t o del flujo
La secreción que se presenta en la vaginosis bacteriana se
caracteriza por una apariencia homogenea de baja viscosidad
y color gris que se adhiere a las paredes de la vagina. En
ocasiones puede presentar burbujas debido al gas producido
por el metabolismo de las bacterias anaeróbicas.
pH del flujo vaginal
El flujo presente en la vaginosis bacteriana tiene un pH
mayor a 4.5 debido a la disminución de los Lactobacillus sp y
por tanto la disminución del ácido láctico; otro factor que influye para que el pH se alcalinice es la presencia de aminas producto de la decarboxilación de los aminoácidos por las bacterias anaeróbicas. El pH debe tomarse de la secreción vaginal y
medirse con papel indicador, no debe medirse de la secreción
presente endocervical puesto que ésta tiene pH más alcalino.
Prueba de Aminas
La secreción vaginal de las m u j e r e s con vaginosis
bacteriana posee diferentes aminas: putrecina, cadaverina,
metilamina, isobutilamina, histamina y fenitilamina. Estas
aminas son el r e s u l t a d o de la decarboxilación de los
aminoácidos realizada por bacterias aeróbicas y anaeróbicas
que se han incrementado.
Para realizar la prueba se coloca una gota de la secreción
vaginal en un portaobjeto y se le adiciona una gota de KOH al
10%, liberándose las aminas y produciendo un fuerte olor a
pescado.
La flora vaginal anormal es:
Células Guía
-
Son células epiteliales escamosas con tantas bacterias adheridas a su superficie que enmascaran su contorno.
-
pH más alcalino mayor de 4.5.
Cantidades disminuidas de Lactobacillus que producen peróxido.
Proliferación de:
Gardnerella vaginalis.
Especies de Mobiluncus.
Bacteroides.
Mycoplasma hominis.
Para observarlas se coloca una gota de la secreción vaginal
suspendida en solución salina sobre un portaobjetos, se cubre con un cubreobjetos y se observa al microscopio con objetivos de 10X y 40X.
CRITERIOS DE DIAGNÓSTICO
Para el diagnóstico se pueden usar los siguientes criterios:
-
Aspecto del flujo.
pH vaginal mayor a 4.5.
Laboratorio Actual • Año 17 • No. 33 • Noviembre de 2000
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Tabla 1. Comparación
de las características del flujo vaginal
normal con el de la uaginosis bacteriana.
Características
Normal
Vaginosis
bacteriana
Presencia en el introito
Color
Viscosidad
Consistencia
Presencia en vagina
pH
Aminas
Células guía
No
Blanco
Elevada
Flocular
En declive
<4,5
Negativa
No
SiGris
Baja
Homogénea
En paredes
>4,5
Positiva
Sí
VAG1NITIS ESPECÍFICAS
Tricomomtlasis
Los microorganismos que causan la tricomoniasis son
protozoarios flagelados parásitos conocidos como Trichomona vaginalis. El método habitual de infección es durante la
relación sexual.
En los hombres la tricomoniasis en general no presenta
síntomas y es muy difícil de diagnosticar. En la mujer causa
inflamación vaginal produciendo una secreción vaginal abundante que causa prurito y de olor desagradable. El flujo es de
aspecto acuoso pero puede ser un tanto espumoso, usualmente es de color blanco-grisáceo opaco con un pH entre 5
y 7.
El epitelio vaginal y cervical toma apariencia de fresa debido a la multitud de áreas hiperemicas sub-epiteliales.
En la preparación en fresco se observa los parásitos rodeados de gran cantidad de leucocitos.
Candidiasis
En la vagina habitualmente se pueden encontrar pequeñas cantidades de levaduras, pero los lactobacilos inhiben su
crecimiento; sin embargo existen entidades predisponentes
comunes como son: un período menstrual reciente, el embarazo y las exposiciones a antibióticos.
La vaginitis por Candida se caracteriza por prurito severo,
el flujo generalmente es blanco o amarillo-requeson. El examen con espéculo puede mostrar paredes vaginales intensamente rojas con zonas de aftas con aspecto de queso adheridas a la mucosa. Con frecuencia la única evidencia clínica de
candidiasis es el rubor de los labios menores.
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En la preparación en fresco y en la coloración de Gram
podemos observar levaduras. La Candida crece fácilmente en
medios de cultivo comunes desarrollando colonias pastosas y
lisas. Al realizar la Prueba de Filamentación en la cual tomamos 0.5 mi de suero y le agregamos unas cuantas colonias de
la levadura incubando después por 2 horas a 37°, posteriormente tomamos una gota de esta suspensión y la colocamos
en un portaobjetos cubriéndola con una laminilla y miramos
al microscopio con aumento de 40X podemos observar las
levaduras que han desarrollado el tubo germinal confirmándonos que es una Candida albicans.
Vaginitis por Neisseria gonorrhoeae
Una razón importante para su incidencia es que la enfermedad a menudo no produce síntomas. Sólo se la puede
detectar con cultivos de rutina y se la puede pasar por alto
cuando se hacen tinciones de Gram de la secreción cervical.
Los lugares de infección preferidos son aquellas membranas
mucosas que tienen un pH alcalino, o sea el endocérvix y la
uretra.
La vulvitis y la vaginitis son signos transitorios porque el
epitelio escamoso estratificado de la vagina tiende a ser altamente resistente a la invasión por gonococo. El período de
incubación de la enfermedad es de dos a siete días y el primer
síntoma en aparecer es la disuria debida a la uretritis asociada.
El flujo vaginal cuando lo hay es amarillo y purulento,
aunque el cervix está casi siempre afectado no hay una conformación cervical que sea típica de esta enfermedad.
Al mirar los extendidos de la muestra con coloración de
Gram podemos observar a la bacteria dentro de los leucocitos
polimorfonucleares. La Neisseria es un diplococo no móvil
Gram (-) cuyos lados adyacentes están aplastados.
Crece en Agar Chocolate y en Agar Tayer Martin incubándolos bajo C 0 2 (5 al 10%) a 36°, durante 48 horas. La presencia de colonias típicas debe confirmarse mediante la prueba de
oxidasa, tinción de Gram y pruebas de fermentación de azúcares.
Ácido
a partir de:
Glucosa
Maltosa
Fructosa
Sacarosa
Almidón
N.
gonorrhoeae
N.
meningitidis
+
-
+
+
-
-
-
-
-
-
N.
sicca
N.
mucosa
Laboratorio Actual • Año 17 • No. 33 ® Noviembre de 2000