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Manual Toma de Muestras Human PCR Kit Email: [email protected] - Headquarters: Salas 350. Concepción. Chile. - Branch office: Bulnes 107 of 57. Santiago. Chile. VIH Muestras VIH Análisis Genéticos Humanos Contenido Contenido ........................................................ 1 1. Introducción ............................................ 1 a) Sangre obtenida a través de punción periférica ...................................................... 1 2. Bibliografía ............................................. 2 1. Introducción El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) se presenta en dos serotipos con múltiples variantes: VIH-1, de distribución mundial, y el VIH-2 que se encuentra principalmente en África occidental. El virus tiene tropismo por los linfocitos T y los macrófagos que expresan CD4. La inmunosupresión producida por el VIH provoca una reducción del número de linfocitos T CD4 lo que merma la función inmunitaria, permitiendo la aparición de muchas infecciones intracelulares oportunistas características del sida (síndrome de inmunodeficiencia adquirida). Su largo periodo de infección asintomático y la presencia del virus en la sangre, semen y secreciones vaginales han ayudado a la diseminación de la enfermedad. a) Sangre obtenida a través de punción periférica CUIDADOS Y RECOMENDACIONES • Realizar lavado de manos quirúrgico. • Mantener técnica aséptica durante todo el procedimiento. • Utilizar campo estéril para evitar tener contacto con áreas circundantes que ofrezca el riesgo de contaminación. • Colocar mascarilla al paciente. • Realizar antisepsia de la zona a puncionar; no palpe la vena sin guantes estériles una vez preparada la piel. • Utilizar otros guantes estériles para cada punción. • POR ÉSTE MÉTODO NO PUEDEN SER PROCESADAS MUESTRAS CON HEPARINA. • En pacientes heparinizados, la toma de muestra debe realizarse en el momento más alejado de la administración del medicamento. TÉCNICA DE RECOLECCIÓN • La toma deberá hacerse en un lugar perfectamente iluminado y con el paciente cómodamente sentado. • Localizar una vena adecuada en la cara anterior del codo y colocar el torniquete en la parte media del brazo. • Desinfectar el área con un algodón humedecido con alcohol al 70% e introducir la aguja con el bisel hacia arriba. Si la sangre no fluye espontáneamente y se está utilizando una jeringa, jalar el émbolo y aspirar con suavidad; si se está empleando equipo al vacío presionar el tubo de ensaye hacia arriba. Email: [email protected] - Headquarters: Salas 350. Concepción. Chile. - Branch office: Bulnes 107 of 57. Santiago. Chile. VIH Muestras VIH • Al empezar a fluir la sangre retirar el torniquete. • Una vez que se haya obtenido entre 5-8 ml de sangre, retirar la aguja y colocar una tórula con alcohol sobre el sitio de punción ejerciendo presión para detener la hemorragia. • En recién nacidos y lactantes, donde no es fácil obtener tanta cantidad de muestra, debe enviarse como mínimo ml de sangre completa. • Si la toma se hizo con jeringa, retirar la aguja y verter la sangre a un tubo estéril, dejándola resbalar lentamente por la pared para evitar hemólisis. • Tapar el tubo cuidadosamente. Si la muestra necesaria es sangre total utilizar un tubo de hematología con EDTA (venoject ó vacutainer TAPA MORADA). EQUIPO Bata y campos estériles. Gorro y mascarilla con protección ocular. Guantes estériles. Equipo de asepsia (antiséptico, gasas y guantes estériles). • Tubo de hematología con EDTA. • Jeringas estériles. • • • • TRANSPORTE La muestra debe ser analizada dentro de las 24 hrs. siguientes, en caso contrario puede mantenerse refrigerada a 4ºC hasta una semana. Se recomienda no congelar. Análisis Genéticos Humanos 2. Bibliografía • Carlberg, D. Cleanroom microbiology for the non microbiologist. Interpharm Press. INC. Buffalo Grove, Illinois. 1995. • CercenadoE, Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. SEIMC. España, 2007. • Collins CH, Lyne PM, Grange JM. Microbiological methods. 7ma edition. Oxford 1995. • Forman MS, Valsamakis A, Specimen collection, transport, and processing: Virology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. • Guerrero Gómez C; Sánchez Carrillo C. Procedimientos en microbiología clínica. Recogida, transporte y procesamientos general de las muestras en el laboratorio de microbiología, 2003. • Miller JM, Holmes HT. General principles in specimen collection, transport and storage. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. • Organización Mundial de la Salud. Guía para transporte seguro de sustancias infecciosas y especímenes. Ginebra (Suiza): WHO/EMC/97.3; 1997. Email: [email protected] - Headquarters: Salas 350. Concepción. Chile. - Branch office: Bulnes 107 of 57. Santiago. Chile. VIH Muestras VIH Análisis Genéticos Humanos • Thomson BR (JR.), and Miller M. Specimen collection, transport, and processing: Bacteriology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. Email: [email protected] - Headquarters: Salas 350. Concepción. Chile. - Branch office: Bulnes 107 of 57. Santiago. Chile.