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Fitopatógenos de importancia hortícola: estudios dirigidos a contribuir a su
control integrado
Estudio de fitopatógenos relevantes para el sector productivo
Responsable: María Julia Pianzzola Alvarez.
Servicio: Facultad de Química.
Resumen publicable de los avances obtenidos a diciembre de 2012
Se desarrollaron métodos de multiplex-PCR aplicables a la detección de Ralstonia
solanaceaerum en muestras de suelo, los cuales permiten detectar a todas las cepas de
Rs e identificar a las cepas que pertenecen al tipo IIB1 en una misma reacción de PCR.
Estos métodos presentaron una adecuada especificidad y sensibilidad de detección por
lo que constituyen herramientas de diagnóstico útiles para el control de esta importante
enfermedad en el cultivo de papa. Se optimizó la detección del virus de cebolla YISV
tanto por PCR como por Real-Time PCR, obteniendo resultados positivos para muestras
de plantas de cebolla de semilleros nacionales, pertenecientes a las cosechas 2007 a
2011. Se identificaron diferentes sintomatologías asociadas a la enfermedad, lo cual
facilitará su identificación futura en los campos. La filogenia de secuencias del gen N de
IYSV permitió inferir el posible origen de la cepa uruguaya del virus. El método de
multiplex PCR aplicado a la colección de Xanthomonas aisladas de tomate en nuestro
país, ha permitido identificar hasta el momento a las especies X. vesicatoria y X.
gardneri. En Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis en tomate se
optimizaron los medios de cultivo para su aislamiento así como las reacciones de
amplificación con primers universales y específicos. Se optimizaron las condiciones
para la técnica de detección en semilla por BIO-QPCR. Respecto al mejoramiento
para resistencia a R. solanacearum en papa, se realizaron ensayos de evaluación y se
identificaron materiales resistentes a R. solanacearum con niveles de 20 a 38 % de
plantas enfermas a los 29 días de inoculación. Materiales seleccionados se re-ingresaron
al programa de mejoramiento para utilizarlos como padres en nuevos cruzamientos. En
la primera evaluación 2012 se obtuvieron materiales del programa de retrocruzas con
niveles muy buenos de resistencia a R. solanacearum. Varios materiales presentaron
inmunidad total en el screening (0 planta enferma), mientras el testigo susceptible cv.
Chieftain presentó 100 % de plantas enfermas. En la segunda evaluación en el año se
hizo la Introducción in vitro a partir de semilla de materiales provenientes de
cruzamientos del programa de introgresión de distinta ploidía en el laboratorio de
multiplicación in vitro de INIA y la multiplicación clonal in vitro para obtener plantas
de cada individuo para realizar el screening en el laboratorio de multiplicación in vitro
de INIA. El ensayo de tamizado se realizará durante el mes de diciembre y se evaluarán
160 individuos clonales. Para la determinación de la base genética y molecular de la
resistencia a Ralstonia en Solanum commersoni, se está trabajando en el estudio de la
segregación de los híbridos de la retrocruza 3 (BC3). Respecto al mejoramiento para
Xanthomonas en tomate se identificaron nuevas fuentes de resistencia a Xanthomonas
perforans (raza T3) mediante distintas metodologías de evaluación (en condiciones
controladas y a campo). Utilizando esta información se diseñó un programa de nuevos
cruzamientos para combinar la resistencia a Xanthomonas con la calidad comercial e
industrial del producto.