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MANUAL DE PRÁCTICAS DE FISIOLOGÍA VEGETAL Lallana, Victor H. Lallana, María del C. CATEDRA DE FISIOLOGIA VEGETAL ________________________________ FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE ENTRE RIOS PARANA, ENTRE RIOS, Febrero 1999 CONTENIDO Prólogo Edición digital Agradecimientos Guía para la elaboración de informes Membranas celulares (MembcelularesED.pdf) A. Velocidad de difusión B. Factores que afectan la permeabilidad Pág. i ii ii iii 1 4 7 Fotosíntesis A. Reacción de Hill B. Extracción y separación de los pigmentos de los cloroplastos B1. Fluorescencia B2. Cromatografía en capa fina, ascendente simple (TLC) C. Métodos para indentificar plantas carbono 3 y carbono 4 C1. Exámen de la anatomía foliar C2. Determinación de clorofila a y b C3. Demostración del punto de compensación de CO2 D. Factores que afectan a la fotosíntesis D1. Temperatura D2. Luz D3. Dioxido de carbono 8 11 13 15 15 17 18 18 19 21 23 23 23 Relaciones hídricas de células y tejidos A. Plasmólisis y turgencia B. Medición del potencial hídrico C. Absorción de agua en relación con el potencial agua del medio D. Estomas y transpiración 24 25 27 30 33 Nutrición vegetal A. Análisis foliar. Evaluación de la concentración de fósforo. B. Diagnosis visual de deficiencias minerales en plantas 37 38 41 Hormonas vegetales A. Auxinas A.1. Dominancia apical A.2. Abscisión A.3. Enraizamiento de estacas 48 50 52 54 Pág. B. Giberelinas B.1. Acción del ácido giberélico sobre los vegetales B.2. Bioensayo del crecimiento del arroz enano C. Citocininas C.1. Efecto de las citocininas sobre el desarrollo y senescencia de las hojas de haba. D. Etileno D.1. Maduración de frutos Germinación A.Materiales de reserva de las semillas y su movilización A1. Cambios en la actividad de la enzima α-amilasa durante la germinación A2. Control hormonal de la síntesis de α-amilasa B. Factores ambientales que afectan la germinación B.1. Efecto de la luz sobre la germinación C. Latencia C.1. Interrupción de la latencia en yemas C.2. Inhibición de la brotación Crecimiento y Desarrollo A. Crecimiento A 1. Analisis del crecimiento en un cultivo anual. A 2. Efecto del agua sobre el crecimiento A.3. Efecto de la luz sobre el crecimiento B. Desarrollo B 1. Inducción de callos, utilizando la técnica de cultivo "in vitro" 57 58 60 61 63 64 67 68 69 71 72 74 75 79 82 85 89 Bibliografía ℵ PROLOGO Este Manual de Prácticas de Fisiología Vegetal surge como un proceso normal de actualización de conocimientos de los profesores integrantes de la cátedra, que a partir de otra guía anterior elaborada en 1992 y sus posteriores modificaciones e incorporaciones de nuevos prácticos, converge en ésta nueva edición corregida y ampliada respecto a la edición 1997 . En esta iniciativa también ha tenido mucho que ver la participación de la Cátedra de Fisiología Vegetal en el I Taller sobre la enseñanza de la Fisiología Vegetal realizado en la ciudad de La Pampa (Julio 1996) por iniciativa de la Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal y la Universidad de La Pampa, en la cual tuvimos una rica experiencia participativa y de intercambio con colegas de todo el país. El encuentro sirvió como elemento disparador, ya que en el mismo planteamos la necesidad de organizar un manual de prácticas para la enseñanza de la Fisiología Vegetal. Esta experiencia hemos tratado de volcarla en esta guía, que no pretende ser definitiva pero si el puntapié inicial de un manual que pueda ir enriqueciéndose con el tiempo. Muchos colegas reniegan de la edición de un manual de este tipo por varias razones, entre otras, por su relativa rápida desactualización, por no aportar antecedentes curriculares de relevancia -para el sistema científico argentino-, por entender que es una tarea secundaria, porque los prácticos cambian de acuerdo a los materiales disponibles en la vasta geografía argentina, etc.. Lo cierto es que ponerse en la tarea de escribir, corregir, leer, actualizarse, crear y probar nuevos prácticos, no es simple, lleva dedicación esfuerzo y tiempo. Con motivo del 2do. Taller de la Enseñanza de la Fisiología Vegetal (Mar del Plata, septiembre de 1998) hemos presentado este Manual (Ed. 1997) a los colegas de todo el país. Muchos quedaron comprometidos a revisarlo y a efectuar aportes de nuevos prácticos para ampliar la obra. Si de aquí a dos o tres años esto se logra habremos alcanzado el objetivo de tener un Manual de Prácticas de alcance nacional para la enseñanza de la Fisiología Vegetal. Hemos puesto especial cuidado en la diagramación y estructura del Manual para mantener la integridad de la obra y respetando en lo posible las principales unidades temáticas de un programa de grado de Fisiología Vegetal. Los trabajos experimentales se presentan agrupados por grandes unidades temáticas y dentro de ellas hemos identificado por letras y letras y números, en los casos que correspondían a partes de un mismo práctico, buscando darle organicidad al Manual. Todos los temas tienen una introducción teórica imprescindible para comprender la esencia del trabajo práctico, y en la cual hemos tratado de balancear el contenido de cada uno para no hacerlo ni muy largos, ni cortos. Luego la técnica operatoria, registro de resultados y lecturas complementarias del tema. La parte de confección del informe la hemos separado de cada experimento, incluyendo al inicio de la obra un pequeño instructivo que sirva de guía al alumno en su elaboración. Finalmente incluimos un listado bibliográfico básico y específico de guías y manuales de referencia. La idea del uso de este Manual es que el profesor pueda seleccionar de cada tema principal el o los prácticos que ofrecerá en el curso lectivo. Esto implica que no todos los prácticos que integran el Manual se dan en un curso regular. Ello facilita también el hecho de que ante la falta de algunos elementos el profesor pueda decidir reemplazar un práctico por otro dentro de una misma unidad temática, o bien que el alumno puede elegir uno u otro dentro de un conjunto de prácticos a realizar, de acuerdo a las distintas modalidades de enseñanza-aprendizaje que se fijen. OroVerde, Paraná, Febrero 1999 Ing. Agr. Víctor H. Lallana Profesor Ordinario Titular Edición digital (2003) En los tiempos que corren dominados por las tecnologías de la información digital, hemos realizado un nuevo esfuerzo editorial, con el fin de abaratar costos y poner al alcance de un mayor número de usuarios la información contenida en la segunda edición del Manual de prácticas de Fisiología Vegetal (1999). Están en preparación nuevos prácticos que se irán actualizando a través de la pagina Web de la cátedra. AGRADECIMIENTOS En la elaboración del Manual ha participado activamente todo el equipo de cátedra. La edición y corrección final estuvo a cargo del Prof. Titular y la J.T.P. Ing. Agr. Ma. del C. Lallana. Cabe aquí un especial reconocimiento a otros colegas que han colaborado con sus aportes en el diseño de nuevos prácticos, en las personas de: Cristina Billard (Desarrollo B.1. y Fotosíntesis B.2.), José H. I. Elizalde (Germinación B.1.), Rafael A. Sabattini (Crecimiento A.1.), R. Carrió (Fotosíntesis B.2.), Osvaldo Valenzuela, Claudia Gallardo y Roberta Barrera (Nutrición Vegetal A.). A los ayudantes alumnos Germán Coletti; Fabiana Princich, Lino Lui y Natalia Foti por su colaboración en la puesta a punto y prueba de cada uno de los trabajos prácticos. Por último, a los colegas de las cátedras de Fisiología Vegetal de otras Universidades Nacionales, de los que hemos tomado su experiencia de las guías por ellos elaboradas, las que hemos citado debidamente en las lecturas complementarias que acompañan cada trabajo práctico.