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Nº 4/2013
SOCIEDAD CHILENA DE PARASITOLOGIA
(SOCHIPA)
PARASITOLOGIA AL DIA
Resúmenes Reuniones Científicas
COMITÉ EDITORIAL
DR. WERNER APT Profesor Titular Universidad de Chile
DR. HECTOR ALCAINO Profesor Titular Universidad de Chile
DRA. MARISA TORRES Profesor Asistente Adjunto Pontificia Universidad Católica de Chile
DRA. INES ZULANTAY Profesor Asociado Universidad de Chile
ROL DE FACTOR H EN LA RESISTENCIA DE TRIPOMASTIGOTES
DE Trypanosoma cruzi A LA RUTA ALTERNA DEL SISTEMA
DEL COMPLEMENTO
Ramírez G.1*, Molina C.1, Tapia V.1, Nieto V.1, Galdames P.1, Ferreira V.2
1
Departamento de Medicina Preventiva, Facultad de Ciencias Veterinarias
y Pecuarias, Universidad de Chile. 2 Department of Medical Microbiology
and Immunology, College of Medicine, University of Toledo, Toledo, Ohio, USA.
La enfermedad de Chagas, es la infección parasitaria transmitida por
vectores más importante de Latinoamérica, donde se estima que aproximadamente
11 millones de personas se encuentran infectadas (Coura and Dias, 2009). La
forma infectante tripomastigote, de su agente causal Trypanosoma cruzi, posee
una resistencia multifactorial a las distintas rutas de activación del sistema del
complemento (SC) (clásica, alterna y de las lectinas), importante componente
efector del sistema inmune innato. Esta resistencia difiere entre las distintas cepas
del parásito (Cestari and Ramírez, 2010), pudiendo explicar en parte, las
diferencias en el nivel de virulencia alcanzado por éstas.
Entre los factores de resistencia al SC, se describe la presencia de
proteínas de superficie que facilitan su evasión, tales como la proteína reguladora
del complemento de T. cruzi (CRP), el factor acelerador del decaimiento de la
convertasa de tripomastigotes (T-DAF), la proteína inhibidora del receptor C2 del
complemento tri-funcional (CRIT), la glicoproteína 58/68 (gp 58/68), calreticulina
de T. cruzi y la presencia de trans-sialidasas de superficie con capacidad para
capturar el ácido siálico (AS) presente en células de mamíferos (Ramírez et al.,
2012).
Esta capacidad de reclutamiento de AS constituye un mecanismo de
mimetismo con la célula hospedera. La presencia de AS en células de mamífero,
las protege de la activación de la ruta alterna (RA) del SC, a través de la unión de
una proteína reguladora negativa conocida como factor H (fH). Esta proteína fH
está constituida por 20 dominios funcionales. Los cuatro primeros dominios (H14) se unen al C3b que forma parte de la convertasa de C3, para ejercer sus
funciones reguladoras negativas de la RA, correspondientes a la aceleración del
decaimiento de la convertasa y la función co-factora de la proteína inhibidora,
1
factor I (Ferreira et al., 2006). Ambas funciones tienen como consecuencia inhibir
el SC en las superficies de las células hospederas. Por el contrario, el dominio
carboxi-terminal 19-20 (H19-20) de fH carece de las funciones antes
mencionadas, pero se une específicamente a polianiones presentes en las
membranas de las células hospederas, tales como ácido siálico (AS) (Pangburn,
2000).
Es probable que los tripomastigotes que reclutan AS en su superficie unan
fH a través del dominio H19-20 para poder ejercer su acción inhibidora del SC.
Para demostrar el rol de fH en la resistencia a la RA, determinamos el
nivel de resistencia de tripomastigotes provenientes de 3 cepas de T. cruzi (MF, Y
y Brenner) a través de un ensayo de lisis mediada por SC. Los tripomastigotes de
todas las cepas utilizadas mostraron una resistencia similar a la RA del SC. Luego,
medimos la unión de fH purificado y proveniente de un suero normal humano
(SNH) a la superficie de tripomastigotes por citometría de flujo, demostrando que
esta forma parasitaria une fH en su superficie a diferencia de los epimastigotes,
formas no infectantes y altamente susceptibles a la RA. Finalmente, utilizando un
60% de SNH como fuente de SC en tripomastigotes de la cepa MF, realizamos un
ensayo de competencia, en presencia de distintas concentraciones molares del
dominio recombinante H19-20 (rH19-20) y otros dominios de fH. El rH19-20
demostró competir de manera concentración dependiente con fH molécula
completa, haciendo susceptible a los tripomastigotes de T. cruzi, en
aproximadamente un 30%, al SC. Este efecto no es producido por los otros
dominios de fH.
Estos resultados demuestran que los tripomastigotes de T. cruzi unen fH en
su superficie. Esta unión se produce a través de su dominio H19-20, sitio
específico de unión a AS. A su vez, la unión de fH molécula completa y su
función reguladora negativa de la RA del SC en tripomastigotes es susceptible de
ser inhibida, al menos en parte, utilizando el dominio rH19-20, mecanismo que
podría ser utilizado como posible blanco terapéutico en futuros estudios.
Financiamiento
Proyecto FONDECYT de Iniciación Nº11110251 y FIV Nº121017019102028
2
Referencias
Coura J.R., and J.C. Dias. 2009. Epidemiology, control and surveillance of
Chagas disease: 100 years after its discovery. Mem Inst Oswaldo Cruz 104 Suppl
1:31-40.
Cestari I. and Ramirez M. 2010. Inefficient complement system clearence of
Trypanosoma cruzi metacyclic trypomastigotes enables resistant strains to invade
eukaryotic cells. PLoS One 5(3):9721.
Tapia V., Galdames P., Ramírez G. 2012. Mecanismos de evasión del sistema del
complemento utilizados por Trypanosoma cruzi. Avances en Ciencias
Veterinarias 27(2):10-19.
Ferreira V., Herbwrt A., Hocking, H., Barlow P., Pangburn, M. 2006. Critical role
of the C-terminal domains of factor H in regulating complement activation at cell
surfaces. J Immunol 177(9): 6308-6316.
Pangburn, M. 2000. Host recognition and target differentiation by factor H, a
regulator of the alternative pathway of complement. Inmunopharmacology 49 (12):149-157.
3
REPORTE DE LUTZOMYIA (DIPTERA: PSYCHODIDAE) EN CHILE
Christian R. González
Sección Parasitología, Laboratorio Entomología Médica
Instituto de Salud Pública de Chile
La familia Psychodidae tiene una amplia distribución en las distintas
regiones biogeográficas del planeta, con varias especies hematófagas y no
hematófagas. Se subdivide en 6 subfamilias, con solo 2 de ellas con especies de
interés médico y veterinario (Mullen & Durden 2002). El género Lutzomyia se
encuentra representado en el neotrópico por más de 430 especies que se
distribuyen desde México hasta Argentina; al menos 33 especies del género han
sido reconocidas por su importancia médica (Young & Duncan 1994). Para Chile
se encuentran citadas 15 especies de Psychodidae, las que se agrupan en 4
géneros, dentro de los cuales podemos mencionar a Nemoneura (2 especies),
Pericoma (9 especies) y Psychoda (3 especies) como los más diversificados
(Duckhouse 1973). Frecuentemente la literatura especializada menciona que las
especies del género Lutzomyia, no se distribuyen en Chile. Sin embargo, Leger &
Ferte (1996) describen por primera vez para el país a Lutzomyia isospi, una nueva
especie para el género, descrita a partir de ejemplares capturados en la zona de
Valparaíso (La Vietacha) en 1982. No se han estudiado parámetros biológicos de
esta especie y se desconoce, por ejemplo, si es hematófaga. La captura de 3
ejemplares de una especie no identificada de Lutzomyia en la localidad de Putre
(XV Región de Arica y Parinacota), realizada por el Servicio Agrícola y Ganadero
(SAG) con una sticky trap o trampa pegajosa, constituye la segunda oportunidad
en donde se colectan ejemplares de este taxón en el país.
4
INTERACCIONES ENTRE LA ARAÑA DEL RINCÓN
Y LA ARAÑA TIGRE: EL MICROAMBIENTE, LA DEPREDACIÓN
Y EL EFECTO POBLACIONAL. RESULTADOS PRELIMINARES
Canals M 1,3, Alfaro C 1, Veloso C 1, Torres-Contreras H 1 & Solís R 2
Departamento de Ciencias Ecológicas, Facultad de Ciencias, Universidad de
Chile. 2 Departamento de Ciencias Biológicas Animales, Facultad de Ciencias
Veterinarias y Pecuarias, Universidad de Chile. 3 Departamento de Medicina,
Facultad de Medicina, Universidad de Chile. E-mail: [email protected]
1
Para que una araña pueda regular la población de otra no basta sólo que una
deprede sobre la otra en un encuentro programado sino que i) deben compartir el
micro-hábitat, aumentando la probabilidad de encuentro, ii) predar habitualmente
sobre esta e iii) afectar la mortalidad o fecundidad de la presa. En este estudio se
reportan resultados preliminares referentes a estos tres puntos en la interacción
entre Loxosceles laeta y su posible control biológico Scytodes globula.
Microambientes preferentes:
Se ha propuesto que las temperaturas críticas, tolerancia a la desecación y la
pérdida de agua tienen estricta relación con el micro-hábitat de las arañas. Este
artículo explora las temperaturas preferenciales, las temperaturas críticas y la
tolerancia a la desecación y pérdida de agua en L. laeta, una araña causante de
gran proporción del aracnoidismo necrótico en Sudamérica y un potencial
depredador, la araña tigre S. globula, en la búsqueda del nicho térmico de
encuentro entre estas especies. Especímenes de ambas especies fueron
introducidas en gradientes térmicos y cámaras con humedad relativa menor a un
3% y se registró el cambio diario en la masa corporal, debida a pérdida de agua.
Las temperaturas preferidas fueron similares, más altas en el crepúsculo. La
amplitud del nicho realizado fue similar: B = 23.2 y 26.1, y Ba = 0.62 y 0.61 para
S. globula y L. laeta. La sobreposición del nicho fue: Ojk = 0.852. Las
temperaturas críticas inferiores en las dos especies fueron menores a -3º C y las
superiores de más de 45 ° C. La pérdida de agua en L. laeta y S. globula, fue
28.7% y 29.2% de la masa corporal respectivamente. El tiempo hasta el cese de la
actividad locomotora fue 23.4 y 22.5 días para L. laeta y S. globula
respectivamente. La tasa de pérdida de agua fue mayor en L. laeta (0.082 mg/h)
5
que en S. globula (0.035 mg/h), pero la tasa de pérdida de agua masa-específica
fue similar: 0.00081 mg H2O/mgh y 0.00069 mg H2O/mgh para S. globula y L.
laeta respectivamente. La pérdida de agua fue mayor en invierno que en verano.
Estas características implican que sus micro-hábitat escogidos son muy similares,
indicando una alta posibilidad de encuentro y depredación.
Interacción directa
Se han realizado encuentros ente L. laeta y S. globula en horas de actividad de
estas especies. Hasta ahora se han realizado 16 encuentros determinando:
Probabilidad de combate: 8/16 = 0.5, IC 0.95= (0.255-0.745). Probabilidad de
Victoria Sg: 6/8 = 0.75 IC 0.95= (0.450-1.000).
Efecto poblacional
Se han mantenido tres cohortes de L. laeta desde su nacimiento en cajas plásticas
a temperatura y humedad relativas ambiente, sin presencia de S. globula y otras
tres en el mismo ambiente, pero con presencia constante de S. globula. Hasta
ahora los resultados muestran un aumento significativo de S. globula sobre la tasa
de mortalidad de L. laeta, siendo ésta prácticamente el doble cuando se encuentra
el depredador.
Así S. globula cumple con las tres premisas estudiadas: comparte el
microambiente, depreda a L. laeta y produce un efecto poblacional en ella siendo
una especie elegible para el control biológico de L. laeta.
Financiamiento
Proyecto FONDECYT 1110058
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EPIDEMIOLOGIA EVOLUTIVA DE LA INFECCIÓN CHAGÁSICA
EN CHILE
Ricardo Andrés Campos S.
Facultad de Ciencias, Instituto de Biología,
Pontificia Universidad Católica de Valparaíso.
La enfermedad de Chagas producida por el protozoo Trypanosoma cruzi es
principalmente transmitida por hemípteros hematófagos de la subfamilia
Triatominae que integra un grupo muy diverso, con una gran variedad de formas,
conductas y distribución. Los vectores más ancestrales y silvestres son los que han
tenido un mayor tiempo de coevolución con el parásito y sus reservorios,
manteniendo una circulación dinámica y permanente de la infección chagásica,
siendo un posible foco de transmisión al ciclo doméstico (Campos et al., 2007;
Rosas et al., 2007; Toledo et al., 2007) . Con las herramientas de la epidemiologia
molecular se puede calcular la infección de estos vectores así como los genotipos
de T. cruzi que transmiten. Por otra parte las herramientas filogeográficas nos
permiten inferir los procesos históricos de dispersión que dan cuenta de la
estructura actual de las poblaciones de vectores. De esta manera integrando
distintas disciplinas se puede comprender la epidemiología evolutiva de la
infección chagásica a distintas escalas biogeográficas.
Los vectores de T. cruzi en Chile son T. infestans y Mepraia sp (M. gajardoi, M.
parapatrica y M. spinolai) sin embargo estos Triatominos no están muy
emparentados siendo T. eratyrusiformis de Argentina la especie hermana de
Mepraia. El origen de Mepraia y T. eratyrusiformis plantea que habrían surgido
de una población ancestral que se habría dividido por el surgimiento de la
cordillera de los Andes durante el Mioceno hace unos 20 a 25 millones de años
(Ma) (Frias, 2010; Campos et al., 2013). La colonización de T. infestans hacia
Chile habría ocurrido por la zona norte (regiones de Arica y Tarapacá) desde Perú
y Bolivia (variante andina), y la zona norte-centro (regiones de Antofagasta,
Atacama, Coquimbo y Metropolitana) desde Argentina y Uruguay (variante no
andina) (Torres-Pérez et al., 2011). Con secuencias del ADN mitocondrial se pudo
datar la ancestralidad de los linajes de los vectores T. infestans y Mepraia sp. La
divergencia entre el linaje andino y el no-andino en T. infestans fueron estimados
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hace unos 0.388-0.588 Ma (Torres-Pérez et al., 2011), en tanto que la divergencia
entre los linajes de Mepraia ha sido calculado alrededor de los 2.8-4.5 Ma
(Campos et al., en prensa). Los análisis del ancestro común en T. infestans fueron
estimado hace unos 0.89 Ma, (Torres Perez et al., 2011) mientras que en Mepraia
hace 3.6 Ma, es decir, Mepraia habría estado presente en territorio Chileno mucho
antes que el vector T. infestans. En base a lo anterior, se postuló que la dispersión
de T. infestans hacia Chile habría ocurrido de forma silvestre y no mediada por el
hombre (al menos en sus orígenes), dado que son tiempos muy anteriores a la
colonización humana en América y de los primeros movimientos indígenas
(Dixon, 2001; Torres-Pérez et al., 2011). Sin embargo, con el surgimiento de la
domesticación de algunos roedores como fuente de alimento, es posible que T.
infestans se haya adaptado al ambiente doméstico en la que las migraciones de las
poblaciones humanas hayan ido adquiriendo un rol importante en la dispersión
pasiva de esta especie, por ejemplo, en las primeras tribus andinas hace 5000 años
A.C. y posteriormente con las culturas precolombinas (Solari, 2001; Cortez et al.,
2010). Los datos anteriores permiten postular que la presencia de ambas especies
de vinchucas en Chile habría ocurrido principalmente de forma silvestre, aunque
en períodos muy divergentes.
Financiamiento
Proyecto Postdoctorado VRIEA 2013 PUCV
Referencias
Campos, R., Acuña-Retamar, M., Botto-Mahan, C., Ortiz, S., Cattan, P., Solari,
A., 2007. Susceptibility of Mepraia spinolai and Triatoma infestans to different
Trypanosoma cruzi strains from naturally infected rodent hosts. Acta Tropica 104:
25-29.
Campos, R., Botto-Mahan, C., Coronado, X., Catala, S.S., Solari, A., 2013.
Phylogenetic relationships of the Spinolai complex and other Triatomini based on
mitochondrial DNA sequences (Hemiptera: Reduviidae). Vector Borne Zoonotic
Dis 13, 73-76.
8
Campos, R., Torres-Pérez, F., Botto-Mahan, C., Coronado, X., Solar,i A. 2013.
High phylogeographic structure in sylvatic vectors of Chagas disease from the
Mepraia genus (Hemiptera: Reduviidae) Infect Genet Evol (en prensa).
Cortez, M.R., Monteiro, F.A., Noireau, F., 2010. New insights on the spread of
Triatoma infestans from Bolivia-Implications for Chagas disease emergence in
the Southern Cone. Infect Genet Evol 10, 350-353.
Dixon, E.J., 2001. Human colonization of the Americas: timing, technology and
process. Q Sci Rev 20, 277–299.
Frías, D., 2010. A new species and karyotype variation in the bordering
distribution of Mepraia spinolai (Porter) and Mepraia gajardoi Frías et al.
(Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) in Chile and its parapatric model of
speciation. Neotrop Entomol 39, 572-583.
Rozas, M., Botto-Mahan, C., Coronado, X., Ortiz, S., Cattan, P., Solari, A., 2007.
Coexistence of Trypanosoma cruzi genotypes in wild and periodomestic
mammals in Chile. Am J Trop Med Hyg 77, 647–653.
Solari, A., 2011. Past and present of Chagas disease in northern Chile. Chungara
43, 315-322.
Toledo, A., Vergara, F., Campos, R., Botto-Mahan, C., Ortiz, S., Coronado, X.,
Solari, A., 2013. Trypanosoma cruzi genotypes in Mepraia gajardoi from sylvatic
and peridomestic ecotopes of Northern Chile. Am J Trop Med Hyg 88, 285-288.
Torres-Pérez, F., Acuna-Retamar, M., Cook, J.A., Bacigalupo, A., Garcia, A.,
Cattan, P.E., 2011. Statistical phylogeography of Chagas disease vector Triatoma
infestans: testing biogeographic hypotheses of dispersal. Infect Genet Evol 11,
167-174.
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REUNIÓN CIENTÍFICA
SOCIEDAD CHILENA DE PARASITOLOGÍA (SOCHIPA)
13 de Septiembre 2013
Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias
Universidad de Chile
Rol del factor H resistencia de tripomastigotes de Trypanosoma cruzi
a la ruta alterna del sistema del complemento
1
Ramírez G.1*, Molina C.1, Tapia V.1, Nieto V.1, Galdames P.1, Ferreira V.2
Departamento de Medicina Preventiva, Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias,
Universidad de Chile. 2 Department of Medical Microbiology and Immunology,
College of Medicine, University of Toledo, Toledo, Ohio, USA.
Reporte de Lutzomyia en Chile
Christian González
Instituto de Salud Pública
Interacciones entre la araña del rincón y la araña tigre: el microambiente,
la depredación y el efecto poblacional. Resultados preliminares
Mauricio Canals
Facultad de Medicina y Facultad de Ciencias. Universidad de Chile.
Epidemiología evolutiva de la infección chagásica en Chile
Ricardo Campos S.
Médico Veterinario, Universidad de Chile Postdoctorado, Instituto de Biología
Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso
Disponible en: www.sociedadchilenaparasitologia.cl